全 文 ：广 西 植 物 Guihaia 21(3)：233— 235 2001年 8月
蘑菇属九个种担孢子的电镜观察
李荣春 ，R．Noble
(1．云南农业大学食用茵研究所 ．云南昆明 550201；2．英国国际园艺研究中心 英国茯里克郡 CV35 9EF)
摘 要：蘑菇属(Agaricus I ．)的分类中，担孢子形态和大小是区分种的一个重要指标。虽然现在世界许多研究
所都在运用分子生物学技术和相互亲和性来重新评价该属的分类，但担孢子的大小仍然是种划分的重要指标。
介绍了一种新的供扫描电镜观察担孢子的简易的样品制作技术，并对野蘑菇(^．arvemis)，大紫蘑菇< ．augus-
)，双孢蘑菇( ．bisporus)，A．essetei，短柄蘑菇(A nmleolens)，白杵蘑菇( ．niwescen$)，双环林地蘑菇( ．
placomyces)，亚绒毛蘑菇(．4．sub~occosus)和 白林蘑菇(以．sylvicola)共 9个种的担孢子进行观察测量，发现：(1)
用扫描电镜测量的结果与用光镜测量的结果具有较一致的线性相关关系(R =0．985 7){(2)在种间或者种内菌
株间的孢子形态和大小存在着较大的差异，可以作为分类的一个重要指标t(3)在精确的孢子测量方面扫描电镜
是一种快速、方便的方法。
关键词：蘑菇属}担孢子观察i扫描电镜
中图分类号 ：Q944．2 文献标识码：A 文章编号 ：1000—3142(2001)03—0233—03
Observation of spores of 9 species in Agaricus
under scanning el ectron microscope
LI Rong—chun ，R。Noble
(1．1nglt~e of Edible Fungi r Yum~an Agriculture University，Kunming 650201t China
2 Horticulture Research lnternatmnat．Warwick CV35 9EF．UK )
Abstract：Of the morphological characteristics used in the taxonomic classification of the genus AgaHcus，spore di-
mensions are used as an objective measurement in differentiating species．Work at HRI and elsewhere is now re—
examining the taxonomy of the genus，using molecular techniques and inter—fertility tests．However，spore mea~
surements remain an impo rtant criterion in the identification of isolates．A simple preparation technique for spore
measurements using scanning electron microscope(SEM )is described．Spore measurements of either wild collec—
tlons or compost cultivated sporophores ofthefolowingAgaricus specieswereⅡ1ade：A．aroensi*，A．augustus，A．
bisporus，A．essettei．A maleolem，A．nivescens，A．placomycest A．subJ?occosus and A．sylvicola．Measurements
using a SEM were closely and[]nearly correlated (r2= 0-97)with measurements using fight microscope．There
were significant differences in spore size and shape r both between species and within a spe cies．The SEM offers a
rapid and easy alternative to light microscopy for accurate spo re measurement．
Key words{Agaricus；spores observation；scanning electron microscope
蘑菇属(Agaricus)的分类主要是依据宏观和微观
形态学特征 以及化学颜色反应、气味等特征。 ，其
中重要的是微观特征，特别是担孢子的大小。最近许
多学者利用分子生物学技术和相互亲和性测试对蘑
收藕 日期 2000—12—2l
作者简介。李荣鲁(1959．)，男，云南玉撰人 副教授，植物学专业t主要从事食用茵分子育种和栽培研究。
基金项 目；英国 MAFF资助(MS0)
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234 广 西 植 物 21卷
菇属的分类重新进行分析“ ’，但不管怎样，精确地对
担孢子进行测量，在科及科以下等级单位的鉴定仍是
具有重要价值的关键指标 ，它在对新的分类技术，方
法分析中可起到相互映证的重要作用。
在分类中描述的担孢子的大小以前都是依据光
镜下的观察。但现在最新的普通光学显微镜的最大分
辨率也仅为0．2 m 。而蘑菇属一些种担孢子的宽
少于3 vm，所 要在光学显微镜下精确地测量担孢
子就成为一个问题 再加上不同的人测量可能带来不
同的误差，例如孢子样品的含水量和制样方式，以及
制片时用水封片还是用氢氧化钾溶液封片等 。”，虽
然 Singer 指出从孢子印上取样是获得较高成熟率
孢子的一种方法，但孢子成熟度的变化可能是孢子测
量误差的另一原因。
并被广泛地应用在观察孢子壁上的修饰“ ” 。『临介
点干燥技术成功地应用于真菌孢子的制备。”，但是
此方法复杂且可能在处理时对不同孢子特别是细胞
壁产生不同的反应。而空气干燥法的结果是无法和临
介点干燥法的结果相比的 。在我们的实验室，从孢
子印取样后不经过干燥处理，直接用于扫描电镜的观
察和测量是切实可行的 ，因为它们是自然干燥的，任
何处理都可能导致孢子的形态，大小的人为改变。
标准的扫描电镜的分辩率可高达 4 nwx(0．004
vm) ”，并可在不同的放大倍率下观察蘑菇属孢子的
形态并测量，因此可以消除光镜下观察测量的误差
本项研究的主要目的是：(1)观察测量蘑菇属中
9个种的担孢子的大小范围；(2)比较同一种内不同
菌株之间的孢子大小变异；(3)比较在扫描电镜下测
扫描电镜在蘑菇属孢子研究上应用早被介绍。 ， 量的孢子大小与光镜下孢子大小的关系。
表 1 簟菇属的 9个种的24个菌株的来源
Table 1 Sources of 24 strains of Agamcus spp．
1 材料与方法
1．1样品材料
蘑菇属的 9个种的24个菌株的来源见表 l。孢
子采自成熟子实体收集的孢子印上。
1．2制样观察
用粘有导电且具粘性的炭膜的样品台直接在孢
子印上托印粘上孢子，然后喷上一薄层导电金，就置
于剑桥 $2000型扫描电镜下测量照像。工作电压为
10 Kb ，工作距离约为 lO mm。
1．3每个菌株的 40个孢子的长(L)和宽(w)在扫描
电镜下被测量
按照Calae“”的方法同样数量的孢子的长和宽
也被在光学显微镜下测量。
2 结果和讨论
9个种的24个菌株的孢子的平均大小见表2。野
蘑菇和 A．esetei的孢子明显的大于其它种，而双环
林地蘑菇的孢子明显的小于其它种(表 2，图版 I)。
野蘑菇和A．essetei的孢子有最大的长宽比(长 ：宽
一1．45)，而短柄蘑菇比较圆(长 ：宽=1．16)。这 9个
种的孢子的形态和大小与Capeli“”的观察一致。在电
镜下孢子样品 干燥状态测量到的孢子大小大约是
在水环境中光镜下测得的 95．4 。光镜下测得的孢
子大小与电镜下测得的孢子大小具有线性相关关系
(图 1)。
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3期 李荣春等：蘑菇属九个种担孢子的电镜观察 235
表 2 蘑菇属 9个种的 24个首株的担孢子的平均长和宽
Table 2 The average length and width of the spore of 24 strains in Agarictz~
{S 9
i 7
吾6
翼s
摆
蓦
3
3 4 5 6 7 8 9
光镜测 景伉 LM measurement／it m
图 1 电镜和光镜下担孢子测量的相互关系图
Fig．1 Relationship between spore measurements from
light and SCanning electron microscopes
除白杵蘑菇外，同种不同菌株间的担孢子的大小
没有较大差异。白秆蘑菇的MV3菌株与94—33菌株
的担孢子的宽以及 94—2z和 AR1菌株的担孢子的长
表现出较大差异，但是通过核的rRNA的ITS区域
的测序分析认为它们属于同一 ITS组。
本研究所采用的双孢蘑菇(A．bosporus)菌株都
是 90 产生 2个孢子的菌株，测量时遇到特别大或
特9M,的孢子时，由于考虑到它们可能是分别来 自单
孢担子和 3、4孢担子，所以没有把它们列人计算平均
值的 4O个担孢子内。Callao“”发现两孢亚种 (^．bls-
m f．&~parus)的担孢子明显地 比四孢亚种 (以．
bosporus var．burneti)的担孢子长和宽。
3 结 论
我们发现了一种简便的在扫描电镜下精确测量
蘑菇属不同种担孢子大小的方法。在扫描电镜下担孢
子大小与光镜下担孢子大小表现出较好的线性相关
关系。担孢子的干燥状态在电镜下测量的大小稍微小
于在光镜水封片状态下测量的大小，其相关关系式为
y=1．003 3 w-0．112 5，R s0．985 7(图版 I)。蘑菇
属不同种担孢子形态和大小具有较大差异，可以作为
分种的重要参考指标。种内不同菌株间的差异除了白
杵蘑菇的菌株之外，则表现出较大的一致性。
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(下转第 238页 Continue on page 238)
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韦发南 ，等 ：中国樟科润楠属植物一些种类修订
WEI Fa—nan， t＆f．：A taxonotlic revision on some species of M athiLus Nees(I auraceae)from China
图版
Plate
M4 池 船“ Kanehira与 M．Polyneura H．T．Chang
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比较图
1．K eh|ra认定的趟花 』If． Kaneh (据H H．Chung 2897 福建延 ；2-典型的 - y H_T·c 吣
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