全 文 ：广 西 植 物 Guihaia 25(3)：274—277 2005年 5月
不同生长周期的罗汉果鲜果中甜甙 V
和总黄酮含量变化规律研究
陈全斌，义祥辉，余丽娟，杨瑞云，杨建香
(广西师范大学资源与环境学系，广西桂林 54l004)
摘 要：通过使用 HPLC法对不同生长周期的罗汉果鲜果中罗汉果甜甙V和总黄酮的含量进行测定，总结出
罗汉果中罗汉果甜甙 V和总黄酮含量的变化规律，并对二者进行比较研究，结果表明坐果 5O d后，罗汉果甜甙
V的增加比较快，8O d后，罗汉果甜甙V的含量趋于稳定；随着生长周期的增加，罗汉果总黄酮的含量增加，4O～
5O d中增长最快，坐果约 50 d后达到最高值，从 60 d开始总黄酮的含量迅速下降到2O d水平，然后趋于稳定。
关键词：罗汉果；HPLC；罗汉果甜甙 V；黄酮；含量变化
中图分类号：Q946．83 文献标识码：A 文章编号：iooo．3142(2005)03—0274—04
Study 0n the variation 0f mogroside V and
nl l ■ ● n● ⋯ ●● tayOne Rycoside ln Zrattta ros enorll
fresh_·fruits in different growth periods
CHEN Quan—bin，YI Xiang—hui，YU Li—juan，
YANG Rui—yun，YANG Jian—xiang
(Department of Resources and Enviromentology，Guangxi Normal University．Guilin 54 1 004·China)
Abstract：The content of mogroside V and flavone glycoside in Siraitia grosvenorii with different growth peri—
ods by was analyaed HPLC，and the law of the variation in the contents of mogroslde V and flavone glycoside
was summariaed．Comparative study of them was also taken．The result shows that the content of mogroside
V increases rapidly after 5O days and gets stability after 8O days．The content of flavone glycoside increase rap—
idly from the 40th day to the 50th day，and reaches the highest after about 5O days．It declines to the level as
the 20th day after 6O days and then gets stability．
Key words：Siraitia grosvenorii；HPLC；mogroside V；flavone glycoside；variation
罗汉果(Siraitia grosvenori(Swingle)C．Jeff—
rey)，植物学名为“光果木鳖”，是葫芦科(Cucurbita—
ceae)罗汉果属植物的成熟果实，为我国特有的经
济、药用植物，主要分布在两广、贵州、江西、湖南南
部等地区(路安民等，1984)。罗汉果营养价值高，含
有丰富的果糖、蛋白质、氨基酸和多种维生素，其性
凉味甘，无毒，有润肺止咳、凉血、润肠通便的功效，
特别是用作祛痰剂，在治疗百日咳、慢性气管炎、咽
喉炎、胃肠疾病方面疗效显著(中华人民共和国卫生
部药典委员会，1977；广西壮族 自治区卫生厅，
1983)，广泛应用于医药、饮料和调味品当中。其中
所含甜度极高的甜味物质是一种低卡路里的理想天
然甜味剂。
研究表明，罗汉果的甜味物质即罗汉果甜甙是
收稿 日期：2004—04-05 修订 日期：2004—07-20
基金项目：广西科学研究与技术开发计划项目(桂科能0443001—12)
作者简介：陈全斌(1957一)，男．广西北流人，高级工程师．从事天然产品开发与研究。
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3期 陈全斌等：不同生长周期的罗汉果鲜果中甜甙V和总黄酮含量变化规律研究 275
葫芦烷三萜甙类化合物，其中甜甙V为罗汉果果实
中含量和甜度(为蔗糖甜度的 256～344倍)均较高
的成分(成桂仁，1987)。目前为止，报道较多的就是
罗汉果甙V的提取、精制工艺的研究，尚无人对鲜罗
汉果中罗汉果甙V的变化规律进行深人讨论。近二
十年来，黄酮类化合物 日益引起人们的重视。国内
外已经发现的黄酮类化合物有数千种，大多数具有
显著生理药理活性(张德权等，l999)，在医药上已经
广泛应用，在功能食品开发方面越来越受到重视。
斯建勇等(1994)在对鲜罗汉果的成分研究中，首次
分离得到 2个黄酮甙，即山奈酚一3一O—a—L一鼠李糖一7一
O-(口一D-葡萄糖基一(1-2)一a-L-鼠李糖甙)和山奈酚一3，
7-a—L_二鼠李糖甙；有人进行了罗汉果中黄酮甙元
的反相高效液相色谱测定研究(陈全斌等，2003)。
本实验的研究是通过采集不同生长周期的罗汉果，
用 HPLC法对其中的罗汉果甙 V及黄酮的含量进
行测定，找出罗汉果甙V和黄酮的含量变化规律。
1 实验部分
1．1仪器与材料
1．1．1仪器 P200Ⅱ型高效液相色谱仪(大连依利
特)，包括 P200Ⅱ型高压恒流输液泵 、UV2OOⅡ型紫
外可见可变波长检测器、Rheodyne 7725i高压进样
阀、EChrom 98色谱工作站。
1．1．2药品与试剂 罗汉果甙 V标准品(桂林思特
公司提供)；乙腈(色谱纯)；二次重蒸水；甲醇(重
蒸)；槲皮素标准品、山奈酚标准品(中国药品生物制
品检定所)。
1．1．3样 品 不 同生长周期的罗汉果鲜果样 品
(2003年采于广西桂林永福县)。
1．2实验方法
1．2．1罗汉果甙 V含量的测定 标准溶液配制：准
确称取罗汉果甙V样品(纯度 98．5 )7．26 mg，置
人lO mL容量瓶中，用 7O 甲醇溶解，定容至刻度，
摇匀备用，所含罗汉果甙 V浓度为 0．715 mg／mL。
样品制备：分别取不同生长周期的罗汉果鲜果
各 lO个，破碎，置于圆底烧瓶中，按固液比1：8加
入蒸馏水，加热至沸，回流提取 l h／次，共 3次。水
提液过滤后，经大孑L吸附树脂吸附，然后用蒸馏水冲
洗至流出液无色。以8O 乙醇溶液洗脱，收集洗脱
液，旋转蒸发，得到罗汉果总甙提取物。分别准确称
取不同生长周期的罗汉果总甙各 50 mg，分别放人
5O mL容量瓶中，用 7O 9／5甲醇溶解，定容至刻度，摇
匀备用。
色谱条件为色谱柱：Shodex Asahipak NH2柱
(4．6 mm IDx 250 mm，5 m)；流动相：乙腈一水溶
液(体积比为 78：22)；流速：1．0 mL／min；检测波
长：210 nm；检测灵敏度：0．08；柱温：室温；进样量 ：
2O L。
样品中罗汉果甙V含量的测定：精确吸取标准
溶液和不同生长周期罗汉果鲜果样品测试液 20~uL，
进样，按照上述色谱条件进行含量测定，测定罗汉果
甙 V的色谱峰面积积分值。外标法计算不同生长
周期的罗汉果鲜果中罗汉果甙 V的含量。
1．2．2总黄酮含量的测定 标准溶液的配制：精密称
取槲皮素、山奈酚标准品 10．6 mg、l1．0 mg，分别以
甲醇溶解并定容至 50 mL。准确吸取槲皮素标准溶
液 0．2 mL，山奈酚标准溶液 l mL，放人 lO mL容量
瓶中，用甲醇定容至刻度，摇匀，得槲皮素、山奈酚的
混合标准溶液，浓度分别为 4．24／~g／mL，22／~g／mL。
罗汉果鲜果测试液的制备：将鲜果破碎，用甲醇
加热回流提取 3次(1 h／次)，提取液旋转蒸发至干，
得罗汉果鲜果粗提物。粗提物经盐酸一甲醇液水
解，得鲜果测试液。
色谱条件为色谱柱：Turner YwG Cl8(4．6 ITln
ID×250 FflITI，5 lum)；流动相：V(甲醇)：V(水)t V
(磷酸)：60：40：0．3；流速：1．0 mL／min；检测波长：
360 nm；灵敏度：0．08；柱温：室温；进样量：2O L。
样品中黄酮甙元含量的测定：分别精确吸取槲
皮素、山奈酚的混合标准溶液和不同生长周期罗汉
果鲜果样品测试液2O L，进样，按照上述色谱条件
进行含量测定，测定槲皮素、山奈酚的色谱峰面积积
分值。外标法计算不同生长周期的罗汉果鲜果中槲
皮素、山奈酚的含量。
2 实验结果
2．1不同生长周期的罗汉果鲜果中罗汉果甙 V含量
2．1．1色谱分离效果 在上述色谱条件下，标准液
和经过制备后的样品液得到了充分的洗脱和良好的
分离。罗汉 果甙 V在柱上 的保 留时间为 l2．83
min，理论塔板数 (N)为 8 443．53(n=3，RSD—
1．2O )；与邻近小峰间的分离度(Rs)为 1．42，拖尾
因子(T)为 1．1O。标准及样品色谱图见图 l、2。
2．1．2样品的测定 外标法计算不同生长周期的罗
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汉果中罗汉果甙＼ 的含量，结果见表 l。
图 1 罗汉果甙V标准图谱
Fig．1 Standard spectrum of Siraitia
grosvenorii mogroside V
‘R= 1 2．83 rain
图 2 样品图谱
Fig．2 Sample spectrum
tK= 12．80 rain
表 1 不同生长周期的罗汉果中罗汉果甙 V的质量
Table l Mogroside V mass of Siraitia
， (~SVCIIUI ii in different growth period
生k周期(d) 罗汉果甙V(mg／个)
Growth period Siraitia grosvenori mogroside V
9．67
13．25
25．19
29．68
34．53
49．70
91．70
113．15
117．83
2。2不同生长周期的罗汉果鲜果中总黄酮含量的测定
2．2．1色谱分离效果 在上述色谱条件下，标准液
和经过制备后的样品液得到了充分的洗脱和良好的
分离。槲皮素在柱上的保留时间为 6．75 rain，山奈
酚在柱上的保留时问为 1O．44 rain。理论塔板数
( )按槲皮素计算为 12 852(n一3，RSD一0．88 )；
与邻近小峰间的分离度(Rs)为 1．67，拖尾因子(T)
图 3 标准图谱
Fig．3 Standard spectrum
tRl一6．75 rain；JR2—10．44 rain；1一Quercetin(槲皮素)
(Minutes)
图 4 样品图谱
Fig．4 Sample spectrum
tRl=6．72 rain；tR2=10．41 rain；2=Kaempferol(山奈酚)。
为 0．84。标准及样品色谱图见图3、4。
2．2．2样品的测定 将不同生长周期的罗汉果鲜果
测试液进样2O L进行分析，外标法计算不同生长周
期的罗汉果鲜果中槲皮素和山奈酚的质量(表2)。
表 2 不同生长周期的罗汉果鲜果中
槲皮素和山奈酚的质量
Tabl e 2 Quercetin and kaempfero[mass of Siraitia
grosvenorii fresh fruit in different growth period
2．2．3总黄酮含量的换算 参照《中华人民共和国
药典>2000年版，银杏叶提取物中总黄酮醇甙含量
的计算方法(中华人民共和国卫生部药典委员会，
∞ ∞ 的 ∞ 加 ∞ ∞
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3期 陈全斌等：不同生长周期的罗汉果鲜果中甜甙V和总黄酮含量变化规律研究 277
l997)，以槲皮素和山奈酚的含量换算成罗汉果中总
黄酮的含量，即罗汉果中总黄酮含量一(槲皮素含量
+山奈酚含量)×2．51，得到结果见表 3。
2．3罗汉果甙 V与总黄酮含量变化规律比较
将不同生长周期的罗汉果鲜果中罗汉果甙 V
与总黄酮的含量变化规律进行比较(图 5)，发现 以
坐果 50 d作为转折点，鲜果中的甙 V含量急剧上
升，而总黄酮的含量下降。我们在生产实际中也发
现，在坐果约 50 d以前，均以苦味为主。随着生长
周期的增加，罗汉果的味道逐渐由苦变甜。
3 结果与讨论
(1)罗汉果中甜甙V随生长周期增加，其含量也
逐渐增加。坐果 50 d以后 ，罗汉果甜甙V的含量增
加比较快，80 d达到最高值，而后趋于稳定。
罗汉果开花授粉后果实体积不断增大，纵径在
l～3 d生长最快，以后逐渐减慢；横径以9～l5 d生
长最快，30 d果实体积停止增大(董泽宏等，l998)。
有人认为罗汉果在授粉 50～60 d后开始采收(李荫
昆等，l980)，但我们通过实验发现，第 50天后，罗汉
果甙V的含量增加速度比较快。作为罗汉果中的主
要甜味物质，甙V含量的多少直接影响到罗汉果品
质的好坏。因此，我们认为在罗汉果体积停止增长
后 ，尚有很长的甜甙积累期，其中的甜味物质在进入
成熟期后才迅速增加。如果过早采收，则严重影响
到罗汉果的质量。所以，罗汉果的采摘应在其完全
成熟后再进行，一般90 d即可。
(2)随着生长周期的增加，罗汉果中总黄酮的含
量增加，40～50 d中增长最快，坐果约 50 d后达到
最高值，从 60 d开始总黄酮的含量迅速下降到20 d
水平，然后趋于稳定。罗汉果若以黄酮含量作为品
质指标，坐果 50 d时应迅速采集。
表 3 不同生长周期的罗汉果鲜果中总黄酮含量
Table 3 Flavone mass of Siraitia grosvenori fresh fruit in different growth period
生长周期Growth period(d) 10 2O 3O 40 50 60 70 8O 90
总黄酮含最Contcnl of flavone(mg／个) 6，17 9．67 9．51 10．31 15。36 7。74 6．58 6．10 5
． 98
芒
∞
8
0 20 40 60 80 10o
Growth per iod／d
图 5 罗汉果甙V与总黄酮含量变化规率比较
Fig．5 Compa rison of changing regulation between
glucoside V and flavonids in Siraitla grosvenorii fruit
(3)在罗汉果中同时存在甜甙和黄酮两种物质，
一 个味甜，一个味苦。从图 5看出，50 d时，当黄酮
含量达到最高，而甜甙V的形成还处于平缓期，此时
以苦味为主；而到 80 d后，甜甙 V的含量达到最高
值，而黄酮的含量下降到最低值，此时以甜味为主，
此结果与实际相符。
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