全 文 ：广 西 植 物 Guihaia 21(4)：371— 373 2001年 11月
棉籽中游离棉酚的含量测定
黄永林 ，阮 俊，杨雄辉，黄贤清
(； 广西植物研究所，广西挂林541006)
摘 要：用紫外分光光度法测定棉籽中游离棉酚的含量。脱除棉 酚的棉籽乙醚提取物经石油醚和 75 己酵
分离和纯化后，用 0．5 对氨基苯磺酸显色来检测棉籽中游离棉酚的音量 ，结果表明，该方法具有简便、重现
性好、回收率高达 97 以上等优点，可作为棉籽中游离棉酚质量控制方法
关键词：棉籽；棉酚；游离棉酚{紫外分光光度法
中国分类号 ：Q946—33 文献标识码 ：A 文章编号：i000—3142(2001)04—0371-03
Determination of the content of free
gossypol in the cottonseeds
HU ANG Yong—lin，RUAN Jun，YANG Xiong—hui，HUANG Xian—qing
(Guangxi Ir~titute of Botany，Gu~ngxi Zhuangzu Atg~ mous Reg~bn and The Chbzese
Academy of Sclencet．Gui[ia 541006，China)
Abstract：An ultraviolet spectrophotometry method had been developed for the determination of free gossypoI in
the cottonseeds．After the diethyl ether extract of degossypoI cottonseeds was isolated and purified by peterdeum
ether and 75 ethyl alcohol t it cal be used to the determination of the content of free gossypoI the cotton—
seeds by revealing colour with 0．5 sulfanilic acid Tt is a simple，good reproducibility and high recovery rate
(over 97 )method for the quality control of free gossypoI in the cottonseeds．
Key words：cottot~sed；gossypol；free gossypol；ultraviolet speetrophotometry
游离棉酚是棉籽中的一种有毒化学物质，它能
够影响人的生育功能，急性中毒常出现皮肤和胃灼
烧、恶心、呕吐堋 泻、头痛，危急时下肢麻痹、昏迷、
抽搐、便血，乃至因呼吸、循环系统衰竭而死亡“：。因
此，在棉籽的探加工前及深加工过程中需要严格控
制棉籽中游离棉酚的含量，在生产过程中很有必要
探索出一种快速、准确、简便的方法来检测棉籽中
的游离棉酚，以便能及时、准确、有效地监控原料以
及产品的质量。关于棉酚的检测方法，据我们对棉
籽、棉酚、游离棉酚查新资料显示以往有红外光谱
法、高效液相法、气相色谱法、紫外分光光度法等方
法” ，而关于棉籽中游离棉酚的检测未见报道。在
棉籽加工的大生产中．我们考虑到仪器、溶剂、试剂
及操作条件等因素，选择了紫外分光光度法进行棉
籽中棉酚的含量测定。本研究通过选取提取溶剂、
减少预处理步骤、系统转溶等方法来减少被测成份
收稿 日期 ：200l一02—2O
作者筒舟 ：黄永林(1 974一) 男，广西垒州^ ．药学专业 ，助理工程师 从事植物化学研究工作
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372 广 西 植 物 21卷
的损失，选用稳定性好、显色效果佳、无颜色干扰的
对氨基苯磺酸作显色剂。该方法简便、准确、回收率
高、适用性强 。
1 仪器和试剂
1．1仪器
日本岛津 210A型紫外光谱仪，梅特勒 AT200
电子天平，恒温水浴锅，常规玻璃仪器
1 2试剂与样品
i 2．1棉酚标准品 购自Sigma公司，石油醚(60～
g0。c)、乙醚、对氨基苯磺酸、95 乙醇均为分析纯，
75 乙醇(自制，用 95 乙醇加蒸馏水稀释而成)。
1．2．2 0．5 对氨基苯磺酸水溶液的配制 称取无
水对氨基苯磺酸结晶 0．5 g(0．001)溶于约 0 mI
蒸馏水中，置 60～70℃ 水浴中加热使之溶解，冷却
后移人 100 m1 容量瓶 中加水稀释至刻度置于冰箱
中备用 。
1．2 3棉酚标准液的配制 准确称取 0．005 0 g棉
酚标准品，加入少量 95 乙醇，使其溶解，移人 0
n I 容量瓶中，加 95 乙醇稀释至刻度 ，此溶液相当
干 1 00 gg／mI 棉酚，置于冰箱备用。
2 样品处理
精确称取用甲醇脱除棉酚后不同批号的棉籽 5
g于索氏提取器中，用 乙醚 回流提取 6 h，回收乙醚
至尽，残留物加入 75 乙醇与石油醚各 25 mI ，振
摇提取 3O rain，使其完全溶解，转入分液漏斗，静置
分层，取乙醇液置 25 m1 容量瓶中，加 75 乙醇稀
释至刻度待用 。
性良好。
3．2回收率考察
在数份已知棉酚含量的棉籽样品中，分别精确
加入棉酚标准品 1．00 mg，然后按样品处理方法进
行处理，显色，检测吸光度 A值，计算游离棉酚总
量。其中：回收率( )一 ×1oo ；x ：测出棉
酚量；五 ：试样棉籽中棉酚量； ：试样棉籽中加入
棉酚量 ，结果见表 1。
表 I 棉酚的回收率
Table l Recoveries of gossypol
3．3样品测定
取不同批次脱除棉酚后的棉籽，按样品处理方
法进行处理，制成待测液，取待测液 1 mI 置于 25
mI 容量瓶中，按标准曲线方法显色测吸光度 A值，
代人回归方程计算棉酚含量，结果见表 2。
表 2 不同棉籽样品中棉酚含量分析结果
Table 2 Con~ent of gossypol in different cottonseeds
3 方法与结果 4 讨 论
3 1标准曲线的制备
精密吸取 0．0、0．2O、0．40、0．60、0．80、L O0 mI
(相当于 0、20．0、40．0、60．0、8O．0、lO0．0 棉酚)
棉酚标准液于编号为 O～5号 25 mI 容量瓶中，各
加入 95 乙醇至 4．0 ml一0 5 对氨基苯磺酸 2．0
mI ，置 7O。c水浴中加热 15 m[n，取 出冷却至室温 ，
加 75 乙醇稀释至刻度 ，摇匀，放置 30 m[n，用 l cm
比色皿，以“O”号液调零，在 448 nrfl处测定吸光度A
值 ，吸光度 A值对标准液浓度进行回归计算，得回
归方程 ： 一0．42 z一6．48×10 (r一0．999 8)。线
根据有关资料显示，用 0．5 对氨基苯磺酸显
色来测定棉油中的游离棉酚，具有省时、稳定性好、
干扰少、回收率高(98．O ～99．2 )、误差少等优
点 。因此，参照此方法测定棉籽中棉酚含量可行
但棉籽与棉油不同，棉籽中具有的杂质较多，游离
棉酚提取困难，故我们选用极性小、沸点低、棉酚溶
解性好的乙醚作为提取溶剂，采用索氏提取器为提
取器具，这样提取出来的游离棉酚杂质较少，然后
再通过极性较大的 75 乙醇水溶液与石油醚混合
溶剂系统转溶，以至达到尽可能除尽杂质的目的。
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4期 黄永林等：棉籽中游离棉酚的含量测定 373
实验检测数据表明，用乙醚为提取溶剂，0．5 对氨
基苯磺酸为显示剂，紫外分光光度法检测棉籽中的
棉酚含量的方法具有稳定性好、简便、回收率高(平
均 97．8 )等优点，可适用于中小型企业在棉籽深
加工 中作为棉籽中棉酚含量的监测方法 。
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