全 文 ：广 西 植 物 Guihaia 26(2)：217— 220 2006年 3月
罗汉果叶中黄酮甙元的研究
陈全斌，杨建香，义祥辉，程忠泉
(广西师范大学 资源与环境学系，广西 桂林 541004)
摘 要 ：以罗汉果叶为原料提取出黄酮，黄酮经水解 、溶剂萃取、柱层析等手段，得到高纯度甙元；经 TLC、液
相色谱、红外光谱、核磁共振法等分析手段进行结构鉴定，证实甙元分别为山奈酚、槲皮素。
关键词 ：罗汉果叶；分离提纯 ；山奈酚 ；槲皮素；鉴定
中图分类号 ：Q946．83 文献标识码：A 文章编号 ：1000—3142(2006)02-0217—04
^ -● ●n● ● 1 1 J ‘ J● beparation，puritlCatl0n ancIeleterm inatl0n
of flavone aglycones from M omordica
gros venori leaf
CHEN Quan—bin，YANG Jian—xiang，
YI Xiang—hui，CHENG Zhong—quan
(Department of Natura Resources and Environmen，Guangxi Nowina Universty，Guilin 541004。China)
Abstract：Flavone is extracted from M omordica grosvenori leaf．Flavone aglycones is abtained from hydrolyza—
tion and purified by solvent extraction，column chromato—gramphy．Then the flavone aglycones is identified by
M olting-Point，TLC，HPLC，UV and M S，the results show that the flavone aglycones is kaempferol and quer—
citin．
Key words：M omordica grosvenori leaf；purify；kaempferol；quercitin；identify
罗汉 果 [Momordica grosvenori(Swingle)C．
Jeffrey]，植物学名为“光果木鳖”，是葫芦科(Cucur—
bitaceae)罗汉果属植物的成熟果实，俗名汉果、长寿
果 ，为我国特产。罗汉果营养价值高 ，含有丰富的果
糖、蛋白质、氨基酸和多种维生素，其性凉味甘，无
毒 ，有润肺止咳、凉血、润肠通便的功效，特别是用作
祛痰剂，在治疗百日咳、慢性气管炎、咽喉炎、胃肠疾
病方面疗效显著(广西壮族 自治区卫生厅，1983)。
前人对罗汉果的研究针对果实中 的甜甙(Tsurtem—
atsu等，1983；刘钟栋，1999)、黄酮(斯建勇等，1994；
陈全斌等 ，2003a)、块根药用成分的药理 (陈全斌等 ，
2003b)及块根淀粉 (陈全斌 等，2002)等进行 了系统
的研究，但至今 尚未有人对罗汉果叶进行研究。为
此 ，罗汉果叶的研究 ，对罗汉果 植株的化学成分分
析 、开发罗汉果 系列产品具有重大 的意义。我们 以
罗汉果叶为原料进行提取、水解、萃取、柱层析、重结
晶等手段，得到高纯度的黄酮甙元；用熔点、TLC、液
相色谱 、红外光谱 、核磁共振法等分析手段进行了结
构鉴定。
1 试验部分
1．1原料与试剂
罗汉 果 叶：2003年 采 于 广 西 临 桂 茶 洞 乡。
收稿 日期：2004—08-21 修回日期 ：2005—02—20
基金项 目：广西科学研究与开发项 目(桂科能 0443012)资助[-Supported by Foundation of Scientific Research and Development of
Guangxi(O443O12)]。
作者简介：陈全斌(1957一)，广西北流人 ，高级工程师，从事天然产品开发与研究
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218 广 西 植 物 26卷
LSA一10大孔吸附树脂 (西 安蓝深交换 吸附材料有
限责任公司)，95 乙醇(食用级)，薄层层析用硅胶
GF，乙酸乙酯 (A．R)，甲醇 (A．R)，甲苯 (A．R)，氯
仿(A．R)，丙酮(A．R)。槲皮素及山奈酚对照品(中
国药品生物制品检定所)。
1．2仪器与装置
RE一52A型旋 转蒸 发仪 (上海亚生化 仪器厂)，
WS210S型电子天平 (北京塞多利斯仪器系统有限
公司)，P200Ⅱ型高压液相色谱仪(大连依利特分析
仪器有限公 司)，红外光谱仪(5-DX美国尼高利)，超
导核磁共振仪 (Bruker AV4O0MHZ／DRX5O0瑞士
Bruker公 司 )。
硅胶层析柱 ：4．0 cm×40 cm 称取一定量硅胶 ，
加入乙酸乙酯中，不断搅拌待空气泡除去，混合均
匀。将上述吸附着 乙酸 乙酯的硅胶湿法装柱 ，不断
轻敲管壁 ，使硅胶压紧 ，保持浸泡状态 ，备用 。
1．3罗汉果黄酮的提取
提取按下列工艺进行 ：罗汉果 叶一煮 沸(3次)
一 过滤一合并滤液一柱层析一水洗至无色一75 乙
醇洗脱一洗脱液干燥一粗黄酮一无水乙醇溶解一过
滤一千燥一精制黄酮。
称取破碎罗汉果叶 100 g，置人 1 000 mL圆底
烧瓶 ，再加 500 mL蒸馏水 ，煮沸 20 min，冷却过滤 ，
重复 3次，合并滤液。将滤液 以 10 mL／min的速度
过大孔吸附树脂柱 (4．0 cm×60 cm)。吸附完毕后 ，
首先用蒸馏水洗柱 ，至流出液无色 ，然后用 75 的
乙醇洗脱。洗脱液用旋转蒸发仪旋干 ，得到粗黄酮
6．0 g，颜色为灰黄。粗黄酮再经无水乙醇溶解、过
滤(重复 3次)，弃残渣，将滤液干燥得浅黄色精制黄
酮 2．85 g。
1．4罗汉果黄酮的水解及黄酮甙元的分离
黄酮甙一水解一浓缩成浸膏状一 甲醇溶解一过
硅胶柱一收集洗脱液一 甲醇溶水析一过滤一 甲醇重
结晶一浅黄绿色结晶 A和浅黄色结晶 B。
称取精制黄酮 8．0 g，加入 甲醇 200 mL，盐酸
(1：1)100 mL，加热 回流水解 2 h，然后浓缩成浸膏
状 ，用甲醇溶解 。将制备好样 品的甲醇溶液加于硅
胶柱顶 ，以氯仿 ：甲醇 (15：1～1：5)进行 洗脱(2
mL／min)，每 25 mL收集一份 。将收集的溶液分别
用液相色谱检 验，分 别合并仅 有保 留时 间为 8．57
min、15．05 min单一峰的洗脱液，浓缩成膏状 ，将浸
膏状物加入甲醇溶解，再加入一定量的水，析出浅黄
色物质，过滤。重复上述过程 ，重结晶，最后得到 72
mg浅黄色结晶 A、41 mg结晶 B。
2 样 品分析
2．1熔点的测定
取少量结晶 A样 品，采用齐 氏熔点管熔点测定
仪进行熔点测定 ，5次测定结 果 mp：277．5℃与山
奈酚熔点相符(滑艳等，2003)。同理，结晶 B样品
测定结果 mp：316．5℃与槲皮素熔点相符(战旗等，
2000)。
2．2薄层层析分析
(1)甙元薄层层析：分别将上述两晶体及槲皮
素 、山奈酚对照品进行薄层层析分析 ，所用的展开剂
为：甲苯／氯仿／丙酮一40／25／35，实验结果证实结晶
A Rf值与山奈酚一致 ，Rf值 一0．736；结晶 B Rf值
与槲皮素一致 ，Rf值一0．520。
(2)糖的薄层层析分 析 ：取 1．3中所得精制黄
酮，水解后点样鉴定黄酮甙中的糖。展开剂：正丁醇
／乙酸／乙醚／显 色剂 =：=9／6／3／1。显 色剂 ：4 g二苯
胺 、4 mL苯胺 和 20 mL磷 酸 ，用丙酮 稀释 至 200
mL(于棕色瓶 中保存)。可明显鉴定有葡萄糖和 鼠
李糖 ，其 Rf值分别为 ：Rf(葡萄糖)一0．55，Rf(鼠李
糖)一0．75。
【Minutes】
图 1 结晶 A色谱图
Fig．1 Crystal A (tR一 15．05 min)
2．3 HPLC分 析
将 1．4所得两晶体及槲皮素、山奈酚对照品溶
于甲醇进行 HPLC分析 ，采用保留时间定性 。
色谱条件：色谱柱：Turner YWG Cl8(5 m，
4．6 mm×250 mm)；流动相 ：V(甲醇)：V(水)：V
(磷酸)一60：40：0．3；流速 ：1．0 mL／min；检测波
长：360 nm；灵敏度：0．08；柱温 ：室温 。
结晶 A色谱图见图 1，结晶 B色谱图见图 2。
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2期 陈全斌等 ：罗汉果叶中黄酮甙元的研究 219
结果表明结晶 A与标样山萘酚的出峰时间一
致，结晶B与标样槲皮素的出峰时间一致。
图 2 结晶 B色谱图
Fig．2 Crystal B (tR一 8．57 min)
2．4红外光谱分析
采用 KBr压片法 ，在波数为 5 000~400 cm 范
围分别对结晶 A和山奈酚对照品进行扫描，其图谱
见图3、图4，对结晶B和槲皮素对照品进行扫描，其
图谱见图 5、图 6。
结晶 A与山奈酚对 照品的红外谱 图在指纹 区
各峰的波数一致，结晶B与槲皮素对照品的红外谱
图在指纹区各峰的波数一致 。
2．5 NMR分析
(1)结晶 A C¨—NMR图谱分析 ：¨ C-NMR(500
M Hz，DM SO) ：l76．2(S，C-4)，l63．9(S，C-7)，
l6O．98(S，C一5)，l59．46(S，C-4 )，157．04(S，C_9)，
145．9l(S，C_2)，l35．6(S，C-3)，l29．5l(d，C一2 ，6 )，
4(RN)．I) 36OO 320O 2XO0 24(X) 2000 l Ht)I) I 600
cm‘’
图 3 结晶 A红外光谱
Fig．3 IR Spectrum of Crystal A
IRv／cm (KBr)：3398，2926，1659，1610，1560，1510，1454，1376，1306，1251，1220，1173，1125，1088，1008，977，882，832，820，797。
／一
＼／
7W
，_jt／2_ ll
4000．0 3600 3200 2800 24oo 2000 l800 l600 l400 l200 1000 800 600 450
．0
cm’l
图 4 山奈酚对照品红外光谱图
Fig．4 IR Spectrum of Sample Kaempferol
IRv／cm。(KBr)：3317，2813，1660，1614，1568，1505，1440，1374，1315，1257，1236，1169，1126，1089，1008，977，884，832，819，797。
122．52(S，C—l )，115．86(d，C一5 3 )，101．79(S，C_
l0)，99．83(d，C一6)，94．43(d，C一8)。
(2)结晶B C-NMR图谱分析：”C-NMR(500
M Hz，DMS0) ：176．29(S，C一4)，164．34(S，C_7)，
l61．18(S，C-5)，156．60(S，C一9)，148．16(S，C一4 )，
147．28(s，C一2)，145．52(S，C-3 )，136．18(S，C_3)，
122．42(S，C—l )，120．45(S，C一6 )，l16．06(S，C-5 )，
115．52(S，C一2 )，103．47(S，C-10)，98．64(S，C-6)，
93．82(S，C-8)。
结晶 A、结晶 B样 品的 C¨—NMR图谱显示各化
” 钙 铊∞弘 加
5
船 铊∞ ¨ 弱
4 L ：
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220 广 西 植 物 26卷
61．6
6O
56
52
48
44
E--
4O
36
32
28
24．O
3700．0 3200 2800 2400 2000 l 800 l600 l400 l200 l000 800 600 400．0
cm ’l
图 5 结晶 B的红外图谱
Fig．5 IR Spectrum of Crystal B
IRv／cm。 (KBr)：3411，2851，1658，1611，1560，1520，1449，1382，1319，1262，1200，1169。
41．2
40
36
32
28
24
20
l6
l2
8．0
40oo 0 3600 3200 2800 2400 2000 l800 l600 l400 l200 l000 800 600 400 0
cm 。I
图 6 槲皮素对照品红外 图谱
Fig．6 IR Spectrum of Sample Quercitln
IR~／cm-(KBr)：3409，2845，1662，1613．1562，1521，1449，1383，1319，1263，1199，1168。
学位移数值分别与山奈酚、槲皮素相同(肖宗厚，
2002)。
3 结论
实验结果表明罗汉果叶中含有黄酮甙，其甙元
为山奈酚和槲皮素，这与果实含有甙元(陈全斌等，
2003)一致。
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