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节节麦的酯酶同工酶分析



全 文 :广 西 植 物 Guihah 21(1):77— 8O 2@01年 2月
节节麦的酯酶同工酶分析
兰秀锦 ,刘登才,魏育明,颜泽红,郑有 良
‘四『『l农业大学小麦研究所,四川都江堰 6ii830)
摘 要:对 30份不同来源的节节麦进行 4个时期的酯酶同工酶分析。结果表明:不同来源节节麦的酯酶同
工酶存在较大差异.共分成 15种基本类型。我国黄河流域的 10份节节麦教划分为 2个基本类型,但二者
关系极为相近 ;新疆节节麦与之有一定差异,但在相似系数≤0.820时可视为一类 所有材料在 4个时期之
间投有出现一个完全相同的酶带类型.说明酯酶同工酶随发育时期而不断变化
关键词:节节麦;酯酶;同工酶;聚类分析
中豳分类号:Q945.6 5 文赫标识码:A 文章编号:1000—3142(2001)01—0077—04
Diversity of esterase
tauschii
isozyme in Aegilops
Cosson
LAN Xiu—jin,LIU Deng—cai,WEI Yu—ming,
YAN Ze—hong,ZHENG You—liang
(Tritieeae Research Institute,S&huan Agrkulturat Uni~ sity,Sichuan Duiangyan 611830,China)
Al~tract:The esterase isozyme of 3O accessions of Aegilops tauschi were studied by mearls of polyarylamide gel
eleetrophoresis The results showed significant difference of esterase in al of the four stages i e.seedingt
Shooting,[1ag leaf and young ear,which patterns can be divided into 15 types.Ten accessions from middle
reaches of the Yelow River belonged tO tWO paterns with a similarity coefficient 0.984.Two accessions of
X iang belonged tO one pattern and was different from that of middle reaches of Yelow River No IkYtme e
terase isozyme has been found in the four stages.It showed that esterase isozyme related to growing and deve~
oprnent of plants.
Key words:Aeg~ops ta~.schii Co*son;esterase;isozyme;cluster an alysis
节节麦 (Aegilops tauschi Cosson)作为普通
小麦D染色体组的供体种,存在着较普通小麦D
染色体组更太的遗传多样性,利用这些野生资源
所具有的丰富遗传变异进行优 良基因的筛选,并
将其转移到栽培品种中是育种工作者共同的愿
望。在利用这些野生资源的同时.对其进行相关
的基础研究十分必要。目前普遍认为中东地区是
小麦的起源中心,那里天然地分布着大量的小麦
野生类型,如节节麦。此外,节节麦在前苏联及中
国等地也有分布。本文试图通过对不同来源节节
麦的多个时期酯酶同工酶分析,以期对这个种的
酯酶同工酶特征有一个较全面的认识,并对这个
种的种内遗传多样性进行比较,为传统分类提供
补充依据。
收藕日期 :1999—09一O§
作者i膏介:兰秀锦(1963-)t男,副研究员,小麦遗传育种专业
基盒项目:国家自然科学基金资助项目(39870547) 省教委重点科研项 目的部伢内容
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78 广 西 植 物 21卷
1 材料和方法 2 结 果
1.1材料
所有 30份节节麦均由四川农业大学小麦研
究所保存和提供。其中新疆、陕西和河南节节麦
为该单位采集。而中国农科院 伊朗、 色列等节
节麦为该所征集而来(表 1),表上“来源”一栏不
能完全代表材料的原生长地 。
裹 1 节节麦的编号爱来源
Table 1 The numbers and SOLICe$of 30
acces5ions of Aegilops tauschi
1.2方法
所有材料于 l998年 l1月播种于小麦所试验
地,分别于分蘖期和拔节期各取幼嫩叶片,孕穗
期取剑叶与幼穗若干,各样本洗净、晾干后各称
取 500 mg,剪碎后加入蒸馏水 15 mL,研磨成匀
浆,离心(4 000 rps/min)2O rain,采用垂直平板聚
丙烯酰胺凝胶电泳法“ 。每槽点样 5O L,样品上
覆 盖一 层 40 的蔗 糖 溶 液。分 离 胶 浓 度 为
7.2 ,浓缩胶浓度为 3.1 ,用溴酚蓝作前沿指
示剂。酯酶采用醋酸萘酯一坚牢蓝染色法,室温
下染色
Rf=酶带迁移距离/溴酚蓝迁移距离
1.3数据处理
聚类分析按方开泰方法进行。:
酶谱相似系数= 墨篓
2.1酯酶同工酶与生长发育阶段的关系
从表 2可以看到,所有节节麦在 4个时期均
表现出不同的带型,表明同一材料的酯酶同工酶
随生长阶段不断变化。就被测材料而言,苗期共
形成 9条酶带,8种类型;拔节期 14条酶带,9种
类型;剑叶 8条酶带,6种类型;幼穗 l4条酶带,8
种类型。其中,拔节期各带型间无共同酶带;而苗
期 Rf一0.25、0.28,剑叶 Rf:0.28和幼穗 Rf一
0.56、0.59为所有居群的共有酶带。从活性较强
的酶带分布来看 ,苗期的Rf= 0.25和0.28,拔节
期的 Rf一0.26、0.31、0.34和 O.37,剑叶 Rf一
0.24、0.28、0.32和 0.35分布较为集 中,即主要
分布在Rf≤0.37的慢移动区域。而幼穗则分布较
宽,Rf≥0.5 6区域明显多于各时期叶片。
2.2节节麦的酯酶同工酶类型
将 4个时期酯酶同工酶带型相同的节节麦居
群归在一起,得到 15个基本类型(表 3)。第 1类
有 6份节节麦,第 2类为 7份,第 6类为 3份,第 8
和第 14类为各 2份,其余各类均只有 l份。其
中,中国黄河流域(河南、陕西)的 10份节节麦全
部集中于第 l、第 2这 2个基本类型中。2份新疆
节节麦为另一种类型(第 8类)。说明中国节节麦
的酯酶同工酶类型较少。而引进的节节麦由于份
数所限,没有包含上述 15种类型的全部(如第 8
类)。
2.3·节节麦荫酶同工酶聚类分析
聚类分析是用数学的方法将一批样品(变
量),按照它们性质的亲疏程度进行分类的科
学 。相似系数越接近于 l,则它们之间的关系越
近,相似系数越接近于 0,则它们之间的差异越
大。将每一基本类型 4个时期的酯酶同工酶带型
并列后进行聚类,结果见图 l。从图 l可知,包含
了我国黄河流域的第 l和第 2类之间,相似系数
为 0.984,是最为接近的 2个类型,说明二者之间
酯酶同工酶差异极小,几乎可为一类 2份新疆节
节麦在相关系数>0.820时,则它们与黄河流域
的节节麦各为一类,在相关系数≤0.820时,则视
为 1个类型。所有节节麦在相关系数≤0.551时,
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1期 兰秀锦等:节节麦的酯酶同工酶分析 79
则视为 1个类。总之 ,整个 l 5个基本类型的相似
程度在图 1上一 目了然。
3 讨 论
璩 被测材料而言,其酯酶同工酶可以划分为
l 5个基本类型.我国黄河流域的节节麦属于 2个
基本类型.说明它们在酯酶同工酶方面存在一定
的遗传差异,但差异极小,其相似系数为 0.984;2
份新疆节节麦与前者差异较大,在相似系数≤
0.820时可视为一类 由于试验材料数量所限,中
东地区材料较少。从张学勇“ 对节节麦醇溶蛋白
分析中已经表明.我国中原地区节节麦为一个类
型,新疆为另一类,而中东地区具有更多的类型。
表 2 各时期酯酶同工酶类型
Table 2 Esterase isozyme patterns in four stages
Seeding
拔 节
Shooting
一 +
一 +
上 +

+
+ +
+ +
+ +
+ +
+ +
+ +

+
+ +
+ +
+ 一
+

+

0 53 0.6 rj
—— 1
一 +
一 j
+
+
+ + +
上 ——
— — — —
+

+
注:+一 为强带;+ 为中带 ;一 为弱带 Note:++ .Active;+ Mcdium;一 Weak
按照瓦维洛夫的作物起源中心学说的观点,在起
源中心和次生起源中心 ,该作物拥有最为丰富的
遗传变异类型。 ,从而进一步证明中东地区为小
麦及山羊草的起源中心 ,因而节节麦的遗传变异
非常丰富。而中国的节节麦可能是通过丝绸之路
传人。由于节节麦主要分布于中东、前苏联及我
国,所以本研究中其它节节麦的“来源”并非代表
其原产地。从酯酶同工酶分析看.我国中原地区
节节麦仅存在微小差异,基本上可视为 1种类型,
新疆为另一类。这一结果与张学勇对节节麦醇溶
蛋白的分析结论基本一致“ 。但由于不同地域生
长的节节麦在长期的不同环境条件下演化.某些
一 一 一
一 一 一
R 十十 +
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十十二 ¨
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1 2 3 4 5 6 卜’ 8 l 2 3 4 5 6 7 B 9
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80 广 西 植 物 2l卷
表 3 节节麦的酯酶同工酶带型分布
Table 3 The distributions of esterase isozyme patterns
0f 30 accessions of Aegilops tauschit
.。 ∞ ¨
D 0
0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
.。 ∞ ∞ 0 .。 ∞ ∞ ∞ .。 .。
0 叫 ∞ b o ∞
∞ 0 0 0 .。 0
0
8

0
8

0
8
0
8
0


图 l 节节麦的酯酶同工酶聚类分析
Fig.1 Cluster analysis of esterase isozyme of 30
accessions ot Aegilops tauschi
方面已经形成 自己的遗传特异性,单从醇溶蛋白
或同工酶带型的一致而将其视为所有遗传基因
都相同的一个材料,笔者认为有欠妥当,这在我
们对节节麦的体眠特性研究中已经证明 。
Yen chi ’、余光泽。‘ 等曾进行过节节麦的酯
酶同工酶分析,其目的是希望能为我国一些特有
的半野生小麦的起源提供一些信息。但他们的着
重点均放在我国节节麦的个别材料上,或加上一
些半野生小麦 的比较,因而较难得出肯定的结
果 笔者认为,如果将半野生小麦看作双二倍体,
四倍体小麦和节节麦作为双亲,那么该双二倍体
应该属于其双亲的互补型 。 ,因而结合三者进
行大量的同工酶测试、并作出相似性判断可能更
为全面。
最后,本文关于节节麦的聚类分析是将 4个
时期并列进行。因为从渊试结果得知,不同节节
麦酯酶同工酶带型在一个时期相同.而在另一时
期则可能不同,说明二者存在一定的遗传差异。
这些节节麦是否具有不同的酶转化方式或转化
速度有待进一步研究。
参考文献:
(13胡能书.万国贤.同工酶技术及其应用[M].长沙:湖
南科学技术出版社.1985
[2)方开泰.聚类分析[M].北京 :地质出版社.1981
[3)董玉琛.作物品种资源[A3.蔡旭主编.植物遗传育
种学[M].北京 科学出版社.1985
[4)张学勇,扬欣明,董玉琛.醇溶蛋白电泳在小麦种质
遗传中的应用『J].中国农业科学.1995,28(4):25
~ 32
:j]Liu D C.Lan X J,Wang Z R. a1 Evaluation of
Aegilops tauschii Cosson for preharvest sprouting tob
eranee[J].Genetic Resources and Crop Evolution.
1998,45:495~ 498
[6).Yen C,Yang J I .Liu X D,Li I R The distribution
of Aegilops tauschf Cosson in China and wheat refer—
enee tO the origin of the Chinese common wheat[A~.
Proe.6th.Int.wheat Genet.Syrup.Kyoto.Japan.
1983:55~ 58
[7]余光泽.中国地方小麦品种及其近缘野生植物同工
酶的分析[A] 中国科学院遗传研究所.研究工作年
报[c].1981,1 50~151
(8]兰秀锦,喻春莲.刘登才等.矮兰麦和节节麦及其双
二 倍 体 的酯酶 同工酶分 析[J]_西南农 业学 报,
1998.11(2):U 5~ ll8
E93滕晓月.石 屹.普通小麦 簇毛麦及其双二倍体的
酯酶同工酶分析_J .作物学报 .1995,21(3):377~
379
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