全 文 ：广 西 植 物 Guihaia 26(6)：687— 689 2006年 11月
罗汉果种仁中角鲨烯的提取及其结构表征
陈全斌1，程忠泉2，杨建香2，义祥辉2，董朝敏1
(广西师范大学 资源与环境学系，广西 桂林 541004；桂林师范专科学校 ，广西 桂林 541001)
摘 要 ：以石油醚为溶剂采用索氏提取法提取罗汉果种仁油脂，采用 HPLC检测 ，初 步确定 罗汉果种仁 中含
有角鲨烯 ，含量为 12．5 。经柱层析、HPLC制备后 得纯度为 98．5 的化合物单体 ，经 IR、 H—NMR、¨ C—
NMR、MS检测，确认罗汉果种仁油 中含有角鲨烯。
关键词 ：罗汉果；角鲨烯 ；分离 ；鉴定
中图分类号：Q946 文献标识码 ：A 文章编号：1000—3142(2006)06—0687—03
Extraction and structure identlt lCatl0n 0t 一 · ·· · · · · 』●n● J● ■●
一 ● ● ● ● ● l
Z JP．aitia rosve 0JP．ZZ SqUalene
CHEN Quan—bin1，CHENG Zhong—quan ，YANG Jian—xiang ，
YI Xiang—hui2．DONG Chao—min1
(1．Department of Natural Resources and Environment，Guangxi Normal University，
Guilin 541004，China；2．Guilin Normal College，Guilin 541001，China)
Abstract：The seed oil of Siraitia grosvenorii was extracted by Soxhlets extractor with petrolether，squalene
was qualified by HPLC at the first step and purified by silica gel column．The content was 12．5 ．The purity
was more than 98．5 by HPLC preparation．Squalene is identified by IR， H—NMR， 。C—NMR，MS in the S．
grosvenorii seed oil．
Key words：Siraitia grosvenorii；squalene；separation；identification
罗汉果为广西桂北地区的传统特产，属葫芦科
罗汉果属植物[Siraitia grosvenorii(Swingle)C．
Jeffery-]果实，其中所含的甜度极高的甜味物质是一
种低卡路里的理想天然甜味剂，广泛用于医药、饮料
和调味品中(李典鹏等 ，2000)。前人已对 罗汉果果
实中的甜甙(陈全斌等，2005，余丽娟等，2003)、多糖
(陈全斌等，2003a)、黄酮(陈全斌等，2003b)，块根中
淀粉(陈全斌等，2002)及其药用成分(陈全斌等，
2003c)、罗汉果叶的黄酮(陈全斌等，2005)等进行了
较多的研究，还有人对罗汉果的种仁油进行了提取，
对其性质进行了初步的研究(陈全斌等，2004)，通过
GC—MS检测，发现罗汉果种仁油含有角鲨烯。角鲨
烯最初是从鲨鱼的肝油中发现的，1914年被命名为
Squalene，其化学名称为 2，6，10，15，19，23一六甲基一
2，6，10，14，18，22--十四碳六烯。角鲨烯属开链三
萜，又称鱼肝油萜，是鲨鱼肝脏中的重要化学活性物
质。其结构如下：
角鲨烯具有增强体质和抗疲劳的功效，可用于
肝病治疗并具有一定的抗癌 、防癌及保湿养颜作用。
目前，在陆地仅仅发现几种植物含有角鲨烯(阮栋梁
等，2003)，但含量低而元开发价值。为了证实罗汉
果种仁是否含有角鲨烯，我们对罗汉果种仁油脂进
行了提取、分离、提纯，并对其进行了结构表征。
收稿 日期：2005—07—08 修回日期：2005—12—11
基金项 目：广西教育厅科研项 目(桂教科ti~[2004320号)；广西师范大学重点项 目(师政 2005第 1号)[-Supported by Scientific Re—
search Foundation of Education Department of Guangxi(2OO4No．20)；Key Program of Guangxi Normal University(2OO5No．1)]
作者简介：陈全斌(1957一)，男 ，广西北流人，高级工程师，从事天然产品开发与研究。
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688 广 西 植 物 26卷
H3
1 实验部分
OH3
1．1材料与试剂
罗汉果：2004年秋采于广西永福县。氯仿(A．
R)、乙醚 (A．R)、甲醇 (HPLC纯)、乙腈 (HPLC
纯)。角鲨烯标准品(美 国 Adlrich chemical compa~
ny Inc．，97．0 9／5)。
仪器：RE一52A型旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪
器厂)；WS210S型电子天平(北京塞多利斯仪器系
统有限公司)；高压液相色谱仪(P200 lI型大连依利
特分析仪器有限公司)；UV200 lI紫外可变波长检
测器；色谱柱：Turner YwG Cl8(5 m，4．6 mm×
250 mm)，Echrom98色谱工作站；Hi-Tech半制备
高效液相色谱仪(美国)。5-DX红外光谱仪(美 国
Nicolet公司)；BrukerAV500MHZ／DRX500超导核
磁共振仪(瑞士 Bruker公司)；Finnigan Trace DSQ
四极杆质谱仪(电离方式：EI ，电子能量：70eV，扫
描范围：50～1 000 Da)。
1．2罗汉果种仁油的提取
采用索氏提取法对罗汉果种仁油脂进行提取：
称取 3O g罗汉果种仁置于研钵中研碎，用滤纸包裹
装入索氏提取器内，同时控制水浴温度恒定为 65
℃，加入 200 mL石油醚 回流加热 2 h。石油醚层用
旋转蒸发器旋转蒸发去除，先使温度为 30～40℃，
再缓慢慢加热至80℃最后辅以真空泵抽真空，至溶
剂全部除去，得 14．5 g淡黄色罗汉果种仁油。
罗汉果种仁油的 PHLC分析：色谱柱：Turner
YWG C,s(5 m，4．6 mm× 250 mm)；流 动 相 ：
CH。CN ：CH3OH一6O：40(V／V)；流速：2．0 mL／
min；波长：210 nm；灵敏度：0．64；柱温：40℃。
分别配制一定浓度的罗汉果种仁油和角鲨烯对
照品的氯仿溶液分别进样，色谱图见图 1、2。样品
中2号峰的保 留时间与角鲨烯对照品相同，t 一
16．52 min，根据保留时间定性原理，说明罗汉果种
仁油中含有角鲨烯 ，用外标法定量，结果表明罗汉果
种仁油中含角鲨烯 12．5 。
1．3罗汉果种仁角鲨烯的分离提纯
1．3．1柱层析的分离 称取硅胶 300 g，加入氯仿
500 mL，不断搅拌待空气泡除去，混和均匀。将上
述吸附着氯仿的硅胶湿法装柱(40 mm×600 mm)，
不断轻敲管壁，使硅胶压紧，采用加压的方法，使柱
内硅胶均匀、紧密。
取罗汉果种仁油 10 mL，加样 。先以石油醚洗
脱，体积约为柱体积的两倍，之后以石油醚、石油醚／
乙醚一20／1～1／1，进行梯度洗脱，后以氯仿／甲醇体
积比由高到低洗净柱体。以 50 mL为单位收集柱
流液，并用 HPLC进行检测；收集合并 12～17号柱
流液，加热除去溶剂，得浅黄色液体。取上述样品进
行 HPLC分析(条件同 1．2)，以外标法定量，结果样
品中含角鲨烯 91．3 9／6。
图 1 罗汉果种仁油色谱图
Fig．1 Chromatogram of Siraitia grosvenorii seed oil
>
E
图 2 角鲨烯标准品色谱图
Fig．2 Chromatogram of squalene standard sample
1．3．2制备 色谱的提纯 制备采用 Hi—Tech半制备
高效液相色谱仪(美国)，柱(9 mm×400 mm，自填，
柱材料 ODS-A，2O m，美国 YMC CO．LTD)仪器
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6期 陈全斌等：罗汉果种子中角鲨烯的提取及其结构表征 689
条件 同 1．2，进样量 500 L。多次收集 48～53 min
柱流液，合并、加热除去溶剂，得无色液体。取上述
样品进行 HPLC定量分析，结果样品中含角鲨烯
98．53 。
1．4样品的结构鉴定
取自制样品、角鲨烯标准品进行 IR、NMR、MS
分析，结果如下。
1．4．1 IR分析(KBr压片涂抹法) 标准品(kcm- )：
3 045，2 962．5，2 924．6，2 851．1，1 665．8，1 442．5，
1 377．2，983．9，835．2。样品(kcm- )：3 040，2 962．5，
2 924．6，2 855．1，1 667．8，1 449．5，1 381．2，983．9，
835．0。样品的波数与标准品一致 ，并检索样 品红外
图谱与机检图库 (The Aldrich Library of FT—IR
spectra)中角鲨烯 (Squalene，97 )的相对 匹配度 ，
相对匹配度为 93．97 。
1．4．2 NMR 分析 (1) H—NMR分 析 ：标准 品：
5．11～ 5．18(m ，6H)，1．89～ 2．13(m ，20H )，1．71
(s，6H)，1．63(s，18H)。样品：5．12～5．17，1．98～
2．11，1．71，1．62。样品的谱图中氢分为四组，6个
不饱和的双键上的氢 峰(85．12～5．17，6H)，10个
亚甲基峰(31．98～2．11，20H)，2个端 甲基(81．71，
6H)和 6个取代甲基(81．62，18H)。满足角鲨烯的
结构特点，同质谱给出的信号吻合，与文献(阮栋梁
等，2003)吻合 。
(2) C—NMR分析 ：标准 品：135．09，134．89，
131．22，124．43，124．33，124．29，26．68，26．79，
28．3O，39．763，39．781，25．713，17．689，16．05，
16．01，15．30。样品：135．08，143．9，131．3，124．45，
124．33，124．4，26．70，26．79，28．30，39．76，39．78，
25．72，17．689，16．01，15．31。
角鲨烯的 C¨—NMR谱图给出了 15个碳信号，
说明了角鲨烯的结构是对称的；与 H—NMR谱图相
似， C—NMR谱图给出的信号，结合 DEPT一90，角
鲨烯的碳可分为三组：双键的碳信号出现在 3124~
135(6×2—12)，826～39(5×2—10)为亚甲基 的碳
信号和 出现在 816～ 25(4×2—8)处 的 甲基 的碳
信号。
1．4．3 MS分析 标准品 ：411(M+11 )，410(M+
4 )，395(M—CH。2 )，341(10 )，231(6 )，177
(8 )，149(30 )，137 (40 )，121(42 )，81
(100 )，69(92 )；样 品：411(M+12 )，410(M+
6 )，395(M—CH3 2 )，341(7 )，231(6 )，177
(5 )，149(30 )，137(40 )，121(40 )，81
(90 )，69(100 )；经 EI标准图库检索，样品与角
鲨烯(图库)相对匹配度为 91．8 。
2 结论
实验结果证实罗汉果种仁油中含有角鲨烯；采
用 HPLC外标法定量 ，结果表明罗汉果 种仁油中含
角鲨烯 12．5 。实验结果为从陆地寻找角鲨烯、拓
宽罗汉果的应用提供了依据。
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