全 文 ：广 西 植 物 Guihaia 26(6)：626— 627 2006年 11月
逆转录一聚合酶链式反应技术检测
“歇马杏李矮缩病毒
侯义龙1．2，于亚军2，张立娟2，赵 洋2，于大永2
(1．大连大学 生命科学多功能工作室，辽宁 大连 116622；2．大连大学 生物工程学院，辽宁 大连 116622)
摘 要；为选择不携带主要病毒的植株 ，利用作者已建立的 PDV RT-PCR检测体系对辽宁省大连市地方特
产“歇马杏”田间植株携带 PDV的情况进行了调查 ，结果表明，被检植株 PDV的感染率达 9O ，但程度不同。
关键词：逆转录一聚合酶链式反应；PDV；检测
中图分类号 ：Q939．46 文献标识码：A 文章编号 ：1000—3142(2006)06—0626—02
The detection of PDV in Xiema
Apricot by RT—PCR
HOU Yi—long 2，YU Ya-jun2，ZHANG Li—juan2，
ZHAO Yang2．YU Da—yong
(1．Lab of Life Science，Dalian University，Dalian 116622，China；2．Bioengineering
College，Dalian University，Dalian 1 1 6622，China)
Abstract：To select the plants without main viruses，the RT-PCR detection systems for PDV was used to in—
vestigate whether Xiema Apricot in orchards was infected by PDV or not．The result showed that 90 of the
detected trees were infected by PDV ，but the infected degree was different．
Key words：RT—PCR；PDV；detection
辽宁省大连市地方特产“歇马杏”原产于庄河市
太平岭乡歇马村，属于自然产生的芽变杏树品种(侯
义龙等，2OO4)。“歇马杏”是一个优良的鲜食和加工
兼用品种，为庄河市十大名牌农产品之一，多次在省
市农产品博览会上获得好 评 ，并 以“个大、色艳、味
美、仁甜”等特点被中国农业科学院、沈阳农业大学
和辽宁省果树研究所等权威部门和专家评价为“杏
中珍品”。歇马杏不同程度地受到病毒危害，导致其
产量和品质降低，嫁接亲合力也有所下降，影响苗木
繁育。PCR技术是目前较为先进的病毒检测技术，
该技术灵敏性、特异性均较强，且简单快速(Can—
dresse等，2000；Saade等，2000)。
本试验结合歇马杏组织培养脱毒快繁的研究，
采用已建立的PDV RT-PCR检测体系对田间栽植的
歇马杏植株携带杏树主要病毒之一的李矮缩病毒
(Prune dwarf virus，PDV)的情况进行了调查 ，以期为
歇马杏脱毒苗的繁育服务。现将研究结果报道如下。
1 材料和方法
本研究的试验材料包括健康的以及携带 PDV
的指示植物 GF ，取 自田间的歇马杏叶片。RNA
收稿日期 ：2005—07—12 修回日期 ：2005—12—12
基金项目：辽宁省教育厅高等学校科研项 目(2004D202)；辽宁省博士启动基金(20021052)；大连市科技计划项 目(0103053)
[Supported by Scientific Research Foundation for High School，Education Department of Liaoning Province(2004D202)；Initial
Foundation for Ph
．D of Liaoning Province(20021052)；Dalian Municipal Project for Science and Technology(O1O3O53)]
作者简介：侯义龙(1963一)，男 ，辽宁盖州市人 ，博士 ，教授 ，生物工程专业 ，研究方向为果树病 毒检测与无病毒栽培 。
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6期 侯义龙等：逆转录一壤合酶链式反应技术检测“歇马杏”李矮缩病毒 627
的提取见文献(侯 义龙等 ，2002) PDV R r—PCR检
测方 法见文 献(候义龙 等，2005) 检测结果 重复 3
次 PCR产物在 】．7 琼脂糖凝胶中电泳，演化乙
锭 染色，紫外灯下观察 电泳 结果并 照像 记录
2 结果与分 柢
利用 作者 已建立 的 PDV RT PCR检 测体系 ，
对从大连市 太平峙 乡歇 马村杏 树 圄中随 机抽取 的
3O株成年歇马杏携带 PDV 情况进行 了调查 (表 1，
圈 L) 从表 L可 看出，PCR检测 的结果 表 明有
g0 的被检植 株携 带 PDV，但带 毒的程 度不同 ，有
的村 体带毒程 度重 ，有的带毒轻 ，这一点从扩增谱带
深浅即可看出。带毒很轻的植株将作为今后进一步
脱毒的材料。
表 l 歇马杏植株 PDV RT-PCR检测结果
TE h1e 1 Resl／】1s )f RT—pCR detectloft
of PDV in Xiema Apricol
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 1213 14 15 16 17 18 19
172bp
加 21 23 24 25 26
—●■■囊_
27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37
250bp
100bp
图 l 歇马杏 PDV RT PCR检测结果电泳图
Fig．I The~g&rose eleetrophores[s。f RT-PCR products of PDV in Xiema Apricot
6、14、21 34、37：DNA标准 DL2000；35、36：分别为带赤的和不一’ 毒 GF805l 5 I1、31；阴性默马杏1、体．其采为默马卉 性个体。
Lane 6·14，2】 34·37：DN A rnolecu~zr n1 rkers：1．ane 35t in[ected GF305 and Lane i s heakhy GF30 5
LRI,~5．I1，31 are negatlve mdividuaI plams，o Lhers afe posilire
参考文献
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