全 文 ：广 西 植 物 Guihaia 22(4)：368— 369 2002年 7月
二苯胺棉酚中棉酚的含量测定
黄永林，阮 俊，杨雄辉，黄贤靖
( 毳广西植物研究所，广西桂林541006)
摘 要 ：用紫外分光光度法测定二苯胺棉酚中棉酚的含量。方 法 回收率平均达 93．6％以上 ，变异系数(CV)为
1．2 。该方法准确 ，重现性好 ，可作 为二苯胺棉酚质量监控方法 。
关键词 ：棉酚 ；二苯胺棉酚；紫外分光光度法
中图分类号：Q946．33 文献标识码 ：A 文章编号：1000—3142(2002)04—0368—02
Determination 0f the content 0f gossypol in
the diphenyl amine gossypol
HUANG Yong-lin，RUAN Jun，YANG Xiong—hui，HUANG Xian-qing
(Guangxi Institute of Botany，Guangxi Zhuangzu Autcmomous Region and The Chinese
Academy of Sciences．Guilin 541006．China)
Abstract：An ultraviolet spectrophotometry method was used to determine the content of gossypol in the dipheny—
lamine gossypo1．The results showed that the recovery was over 93．6 and CV was 1．2 ．The method is proved
to be reliable and reproducible．It can be used for the quality control of dipheny1amine gossypo1．
Key words：gossypol；diphenylamine gossypol；ultraviolet spectrophotometry
二苯胺棉酚是棉籽脱毒处理过程中产生的副
产物，同时也是下一步精制棉酚的原料，为了能够
保证产品的质量，很有必要对二苯胺棉酚中的棉酚
含量进行监测。据查新资料显示，棉酚的检测方法
有红外光谱法、高效液相色谱法、紫外分光光度法、
苯胺 比色法等方法“ ，但对二苯胺棉酚中棉酚的
检测方法还未见报道。二苯胺棉酚本身作为一种黄
色物质，不能直接用 比色法来检测，为了保证检测
的准确性，我们采用将二苯胺棉酚溶解，转变为醋
酸棉 酚、棉酚、加 0．5 对氨基 苯磺 酸显 色来 测
定 。方法回收率高，重现性好，适用性强。
1 仪器 与试剂
日本岛津 210A型紫外光谱仪；梅特勒 AT200
电子天平；恒温水浴锅；常规玻璃仪器；棉酚对照品
购 自 Sigma公 司；所用试剂均为分析纯 。
2 样 品处理
(1)精确称取二 苯胺棉酚 0．050 g，用硫 酸 ：丙
酮 ：水(4：100：2，V／V／V)混合溶剂 0．5 ml 溶
解，加冰醋酸 0．2 ml 反应，放置冰箱中过夜 。
(2)将上步反应液中加入 15 mL蒸馏水稀释，
转入分液漏斗，加入 乙醚萃取振摇 4次 (每次 20
ml )，合并乙醚萃取液于分液漏斗中，用蒸馏水洗涤
至近中性，水洗液各用乙醚萃取 1次，合并乙醚液。
(3)取上述 乙醚用 30 m1 0．4 NaHSO。水溶液
反复振摇、静置分层后，取乙醚液层用蒸馏水洗涤
数次，直至乙醚液呈近中性，将乙醚液转至 100 mL
收稿 日期 ：2001—05—24
作者简介：黄永林(1974一)，男 ，广西桂林人 ，助理工程师 ，从事植物化学研究工作 。
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4期 黄永林等：二苯胺棉酚中棉酚的含量测定 369
容量瓶中，加乙醚稀释至刻度 。
(4)精取上步乙醚液 10 ml ，回收乙醚至尽 ，残
留物用 50 mL75 乙醇 和 25 mL石油醚提取振摇
30 min，使其完全溶解，转入分液漏斗，待分层清晰
后，将乙醇层放人 50 mI 容量瓶中，加 75 乙醇稀
释至刻度制成供试液。
3 方法与结果
3．1线性关系考察
精密称取棉酚对照品 0．050 g，加少量 95 乙
醇使其溶解，移人 50 ml 容量瓶中，加 95 乙醇稀
释至刻度 (此溶液相当于 100~g／mI 棉 酚)。分别精
取 0．0、0．20、0．40、0．60、0．80、1．00 mI 棉 酚对照
品溶液至编号为 1～6号的 25 mI 容量瓶中，各加
入 95 乙醇至 4．0 mI ，0．5 对氨基苯磺酸溶液
2．0 mI ，摇匀 ，置 70。C水浴 中加热 15 min，取 出冷
却至室温 ，加 75 乙醇至刻度 ，摇匀 ，放 置 30 rain，
以“1”号液作 调零 液 ，分 别 于 448 nm 处测 吸光 度
值 ，用吸光度值对浓度进行 回归计算 ，回归方程为 ：Y
一0．42x一6．48X10 (r一0．999 8)，线性 良好。
3．2回收 率考 察 ：分别 准 确称 取 棉 酚对照 品 1．00
mg，加苯胺 反应过夜 (产物为二苯胺棉 酚)，然后按
样 品处理方法处理 ，显色 ，检测吸光度 A值 ，计算游
离棉酚含量 。其 中：回收率( )一X ／w X 100 ；X ：
测出棉酚量 ；W ：加入棉 酚对照品量 ，结果见表 1。
表 1 棉酚的回收率
Table 1 Recovery rate of gossypol
加入量
Added
(mg)
得量 回收率 平均回收率 CV
o u
g
n
)
d Recov％er Average re％co
)
-
rate( very rate( (％) (m ) ％ ⋯
1．00
1．OO
1．OO
1．00
1．OO
0．94
0．93
0．94
0．92
0．95
3．3样品测定：精确称取二苯胺棉酚 0．050 g，按样
品处理方法制成供试液 ，取 1 mI 按线性方程方法
操作，测定吸光度值，计算含量，结果见表 2。
4 讨 论
(1)处理棉籽所获得的中间体(主要是二苯胺
棉酚)是一种不溶于一般溶剂的物质，我们采用硫
酸、丙酮、水按一定体积配比的混合溶剂溶解，结果
溶解性能良好 。
(2)在样品的转 溶、净化过程 中，我们采用对棉
酚溶解 性好 的极性 较小的 乙醚 和难 溶性水液 系统
来进行分配操作，尽可能避免 了被测定成分的损
失 。
表 2 二苯 胺棉酚中棉酚含量
Table 2 Content of gossypol in diphenylamine gossypol
编 号 棉酚含量( )
No． Content of gossypol( )
O01O11
O01O12
OO1O13
001O14
001015
45．35
44．88
30．15
32．52
38．23
(3)这一检测操作过程较复杂 ，时间较长 ，但检
测结果准确 ，回收率 高 ，重 现性好 ，相对偏 差较小 。
在未找 到检测准确便捷 的方法之前 ，用该 方法来检
N-苯胺棉酚中棉酚的含量是可取的。
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