全 文 ：7种龙胆科蒙药药材中龙胆苦苷的含量测定
丁文雅 ,张婷婷 ,王　强
(中国药科大学中药分析实验室 , 南京 210038)
摘　要　目的:建立测定 7 种龙胆科药材中龙胆苦苷的含量反相高效液相色谱法。方法:采用色谱柱:Lichrospher C18
(150 mm×4.6 mm , 5μm);流动相为乙腈-水(0.1%磷酸), 线性梯度洗脱:0～ 7 min ,乙腈-水比例由 19∶81至 25∶75 , 7～ 12 min ,
乙腈-水比例由 25∶75 至 30∶70;流速为0.5 mL min;检测波长为 254 nm;柱温为 28 ℃。结果:7 种药材中龙胆苦苷的色谱峰
与共存组分完全达到基线分离 ,线性范围 0.26～ 26.12 μg(r=0.999 7)。结论:所建立的方法测定快速 , 结果准确可靠。
关键词　龙胆科;龙胆苦苷;反相高效液相色谱
中图分类号　R917　　文献标识码　A　　文章编号　1000-5048(2008)01-0052-03
Determination of gentiopicroside in seven gentianaceae herbs
DING Wen-ya ,ZHANG Ting-ting ,WANG Qiang
Department of Chinese Materia Medica Analysis , China Pharmaceutical University , Nanjing 210038 , China
Abstract　Aim:To establish a RP-HPLC method for the determination of gentiopicroside in seven gentianaceae
herbs.Methods:The samples were separated on a Lichrospher C18 column(150 mm×4.6 mm ,5μm)with the mobile
phase consisting of acetonitrile and water(containing 0.1%phosphoric acid)at a flow rate of 0.5mL min.The oper-
ation was conducted in the gradient mode in which the ratio of acetonitrile to water varied from 19∶81 to 25∶75 in 7
min and then from 25∶75 to 30∶70 in 7 ～ 12 min.The elution was monitored at the wavelength of 254 nm , and the col-
umn was kept at 28°C.Results:Chromatographic separation of gentiopicroside and the co-existed compounds achieved
baseline resolution.The calibration was linear in the range of 0.26 ～ 26.12 μg (r=0.999 7).Conclusion:The
method is rapid and precise.
Key words　gentianaceae;gentiopicroside;RP-HPLC
　　蒙药中龙胆科植物较为常用 ,其主要活性成分
为龙胆苦苷(gentiopicrin)[ 1] 。龙胆苦苷为环烯醚萜
类化合物 ,现代药理学研究表明其具有保肝 、利胆 、
健胃 、抗炎 、抗菌等活性[ 2] ,是评价某些龙胆科药材
质量标准的指标成分 。
笔者收集了蒙药龙胆科的 7种药材 ,并对这 7
种药材中的龙胆苦苷进行了含量测定。这 7种药
材为:三花龙胆 、粗茎秦艽 、小秦艽 、蓝玉簪龙胆 、肋
柱花 、小秦艽花和秦艽花。它们的功效分别为:三
花龙胆为三花龙胆(Gentiana triflora Pall.)的干燥
根及根茎 ,具有清热燥湿 、泻肝胆火的功效[ 3] 64;粗
茎秦艽为粗茎秦艽(G.crassicaulis Duthie ex Burk.)
的干燥根 , 具有祛风湿 、清湿热 、止痹痛的功
效[ 3] 190;小秦艽为达乌里龙胆(G.dahurica Fisch.)
的干燥根 ,具有祛风湿 、退虚热 、止痛的功效[ 3] 191;
蓝玉簪龙胆为蓝玉簪龙胆(G.veitchiorum Hemsl.)
的干燥全草 , 具有清热解毒 、止咳 、利咽喉的功
效[ 4] 386;小秦 艽花为达乌 里龙胆 (G.dahurica
Fisch.)的干燥花 ,具有清热解毒 、止咳祛痰的功
效[ 4] 95;秦艽花为大叶龙胆(G.macrophylla Pall.)的
干燥花 ,具有清热消肿的功效[ 4] 313;肋柱花为肋柱
花[ Lomatogonium rotatum(L.)Fries ex Nym.]的干
燥全草 ,具有清热 、疗伤 、健胃的功效[ 4] 195 。
1　材　料
1.1　对照品与试剂
龙胆苦苷(含量大于 99.5%)购自中国药品生物
制品检定所 ,批号:110770。7种药材均购自呼和浩
52
收稿日期　2007-10-21　　 通讯作者　Tel:025-85391253　E-mail:qwang49@sohu.com
学 报
Journal of China Pharmaceutical University　2008 , 39(1):52-54
特 ,经本文作者王强教授 、内蒙古医学院乔俊缠教授
鉴定。甲醇 、乙腈(色谱纯 ,江苏淮阴汉邦公司)。
1.2　仪　器
Agilent 1100高效液相色谱仪 ,配置:自动进样
器 、高压二元梯度泵 、柱温箱 、DAD检测器 、Agilent
1100色谱工作站;H66025T 型超声波仪(无锡超声
电子仪器设备厂);BS110S 型电子天平(北京赛多
利斯天平有限公司)。
2　方法和结果
2.1　色谱条件
色谱柱:Lichrospher C18(4.6 mm ×150 mm , 5
μm);流动相:乙腈-水(0.1%磷酸)的比例在 0 ～ 7
min内由 19∶81线性变化到 25∶75 ,在 7 ～ 12 min内
由25∶75线性变化到 30∶70;流速:0.5mL min;检测
波长:254 nm;柱温:28 ℃;进样量:20μL。
2.2　对照品溶液的制备
精密称取龙胆苦苷对照品 13.06 mg ,加甲醇10
mL 定容 ,制成 1.306 mg mL的对照品溶液备用。
2.3　供试品溶液的制备
将7种药材粉碎成细粉 。精密称取三花龙胆 、
粗茎秦艽 、小秦艽 、蓝玉簪龙胆各 0.2 g ,分别加甲
醇10 mL ,超声 30 min ,10 mL 定容 ,过滤取续滤液 ,
即得;精称肋柱花 、小秦艽花 、秦艽花各 0.5 g ,分别
加甲醇 25 mL ,超声 30 min , 过滤 ,浓缩 , 10 mL 定
容 ,过滤取续滤液 ,即得。
2.4　线性关系和检测限
精密量取 1.306 mg mL 对照品溶液 0.1 , 0.5 ,
1 ,2 ,4 mL ,分别置 10 mL 量瓶中 ,加甲醇稀释至刻
度。摇匀后进样 20 μL ,按上述色谱条件 ,测定计
算 ,以进样量(x , μg)为横坐标 ,峰面积(y)为纵坐
标绘制标准曲线 ,得线性回归方程为 y =2 124.8 x
-360.13 , r=0.999 9(n=6)。结果表明在进样量
为0.26 ～ 26.12μg 时有良好的线性关系。
以3 倍信噪比计算方法的检测限 , 结果为
0.026 mg L。
2.5　精密度
取对照品溶液 ,按上述色谱条件重复进样 6
次 ,测定供试品中龙胆苦苷峰面积积分值 ,RSD为
0.52%(n=5)。试验表明精密度良好。
2.6　稳定性
取同一批样品溶液 ,分别在不同时间测定 。结
果表明 ,样品溶液在 10 h 内具有很好的稳定性 ,其
峰面积的 RSD为 2.32%(n=6)。
2.7　重复性
精密称取同一批样品 5份 ,同法制备样品溶
液 ,依法测定 。结果表明 ,本方法的重复性较好 ,峰
面积的 RSD为 1.57%。
2.8　加样回收率
精密称取已知含量的样品 0.2 g 共 3份 ,分别
加入样品中所含的龙胆苦苷量的 80%, 100%,
120%的对照品 ,照“2.3”项下方法提取 、制备 ,同法
测定 ,结果见表1。
Table 1　Results of recovery test(n=5)
Original
(mg)
Added
(mg)
Found
(mg)
Average recovery
(%)
RSD
(%)
0.31 0.25 0.553 6 97.43 2.42
0.31 0.31 0.634 4 104.65 2.40
0.31 0.37 0.691 9 103.21 2.48
2.9　样品含量测定
取7种药材的细粉 ,精密称定后 ,按含量测定方
法制备供试品溶液 ,分别进样 20μL ,测定并计算各
药材中龙胆苦苷的含量 ,结果见表 2和图 1。
Table 2　Results of sample analysi s
Sample Gentiopicroside(%)
Gentiana triflora Pall. 1.12
G.crassicaulis Duthie ex Burk. 1.10
G.dahurica Fisch. 2.96
G.veitchiorum Hemsl. 1.07
Lomatogonium rotatum(L.)Fries ex Nym. 0.45
G.dahurica Fisch. 0.14
G.macrophylla Pall. 0.18
3　讨　论
3.1　7种药材的比较
由图 1可看出 ,三花龙胆 、粗茎秦艽 、小秦艽这
3种根类药材的图谱较为相似 ,且龙胆苦苷的含量
较大;小秦艽花 、秦艽花这两种花类药材和蓝玉簪
龙胆的图谱较为相似 ,但花类中龙胆苦苷的含量很
低;肋柱花的图谱与其他 6种药材的图谱差距较
大 ,且含量较低 ,这可能是由于其为肋柱花属植物 ,
而其他 6种药材为龙胆属植物 。
53第 1期 丁文雅等:7 种龙胆科蒙药药材中龙胆苦苷的含量测定
Figure 1　Chromatograms of gentiopicropicroside at 254 nm
A:Standard;B:Gentiana triflora Pall.;C:G.crassicaulis Duthie ex Burk;
D:G.dahurica Fisch.;E:G.veitchiorum Hemsl.;F:G.dahurica Fisch.;
G:G.macrophylla Pall.;H:Lomatogonium rotatum(L.)Fries ex Nym.
1:Gentiopicroside
3.2　不同提取方法的比较
比较了 3种提取法:甲醇加热回流 30 min(中国
药典规定的秦艽提取方法);甲醇浸泡12 h(中国药
典规定的龙胆提取方法)和甲醇超声。结果表明:三
花龙胆和肋柱花的浸泡法和超声法的提取率相似且
均大于加热回流法;其他 5种药材的超声法和加热
回流法的提取率相似且均大于浸泡法。由于浸泡12
h耗时较长 ,加热回流法与超声法相比较为繁琐 ,因
此最终采用超声法对 7种药材进行提取制样。
3.3　检测波长的确定
药典规定 ,龙胆中龙胆苦苷含量测定的检测波
长为 270 nm ,而秦艽的检测波长为 254 nm ,笔者分别
用这两个波长对各药材进行检测 ,发现各药材在 254
nm下能较好分离 ,因此确定254 nm为检测波长。
参 考 文 献
[ 1] 　肖崇厚(Xiao CH).中药化学[ M] .上海:上海科学技术出版
社 , 1996:306.
[ 2] 　徐国钧(Xu GJ),徐珞珊(Xu LS).中国药材学(上册)[M] .北
京:中国医药科技出版社 ,1996:365.
[ 3] 　国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[M] .北京:化
学工业出版社 , 2005:64, 190 , 191.
[ 4] 　国家中医药管理局.中华本草(蒙药卷)[M] .上海:上海科学
技术出版社 , 2004:95, 195 , 313 , 386.
·本刊讯·
《中国药科大学学报》召开编委会
1月 6日 , 《中国药科大学学报》编辑部在先声药业股份有限公司召开全体在宁编委会议 。编委
会专家 、编辑部全体成员约 50人参加了会议 。
会议由《中国药科大学学报》副主编王明时教授主持 ,主编彭司勋院士做了重要讲话 ,他指出:
《中国药科大学学报》在过去的一年中取得了辉煌的成绩 ,影响因子和被引频次等评价指标在全国药
学学术期刊中处于领先的地位 ,2007年又获得“江苏省优秀期刊”称号 ,面对新的形势 ,如何进一步
提高《中国药科大学学报》的学术质量 ,吸引更多的优秀稿源 ,将《中国药科大学学报》越办越好 ,希望
编委献计献策。《中国药科大学学报》副主编 、王广基副校长就过去一年《中国药科大学学报》的工作
给予了充分的肯定 ,就如何进一步办好《中国药科大学学报》做了重要讲话;《中国药科大学学报》编
辑部主任邹栩编审对 2007年《中国药科大学学报》编辑部的工作进行了总结 ,向编委汇报了编辑部
所取得的成绩和目前所面临的问题 ,希望广大编委继续关心和支持《中国药科大学学报》 。本次会议
明确了2008年编委会和编辑部的工作目标和工作重点 ,会议取得圆满成功。
(本刊编辑部)
54 学 报 　 Journal of China Pharmaceutical University 第 39卷