全 文 ：广 西 植物 G u i五a ia 4( 3 ) : 2 57一2 60 . 19 8魂 2 57
罗汉果疙叶丛枝病的病原及其在
某些寄主上的症状反应 .
林 国 光 周 广 泉
( 广西植物研究所 )
摘要 葫芦科的罗汉果 ( S ia rit ia g ro sven o ri( S二 in g l e) J ef f rey ) 感染一种系统性的黄化型病害.
通过两次超薄切片的电镜观察: 在病茎和病叶脉的韧皮组织中的薄壁细胞和伴胞中 . 发现有类菌质 体
( ML O)
, 同叶在重复的电镜观察中, 在上述组织的薄壁细胞内. 还发现风轮状的病毒 (V i f us )内含体 。 在
健株的上述组织中 , 没有发现M L O 和风轮状内含体。
在用三种不同接种方法 ( 媒介昆虫 、 叶擦和汁液重创摩擦 ) 进行的生物学测定的结果表明 : 罗汉 果 疤
叶丛枝病有广泛的寄生范围 , 其症状特点 : 在常用的鉴定病毒的常规寄主上 , 最终均呈现黄 化症 状 , 没有
系统性或局部性的斑点反应 。 其中在葫芦科的某些植物上的症状 , 基本上与罗汉果的症状相近 似 : 初期 明
脉或脉间褪绿 . 继之出现疙状斑驳叶 ,叶片扭卷畸形 , 后期黄化 . 在茄科的供试植物上 , 症状特点 : 初期多为
脉间褪绿 . 随之株形矮化 , 叶片变小 . 豆科上的症状 : 既有明脉 , 也有脉间褪绿 , 叶片呈现细长 扭 曲 , 变
小并丛生 . 十字花科的症状特点是褪绿斑驳叶 , 株形矮化 . 叶片变小。
柯克氏证病律 ( K oc h ’ 5 p os t ul at e )是植物病理工作者进行病原鉴定时 , 广泛 运 用 的 一
个原则 , 可是在植物的黄化型病害的病原鉴定中 , 由于病原 , 特别是 M L O 病原 , 到目前为
止 , 还不能进行人工培养 [ ’ 节“ , 名 ] , 所以只能借助超薄切片 的电镜观察或对 四环素 的 敏 感 性
为测试手段 , 间接的进行病原鉴定 [ “ , “ 1 , 但对四环素敏感性测试的准确性 , 特别是 与 类 立
克次氏体 ( R L B o r R L O )的区分 , 我们感到还不是那么确切 , 为了生产上的需要 , 也为了观
察 M L O 在某些寄主上的症状反应特点 , 为今后探索其规律和应用价值 , 积累资料 「` 1。 我们
除 先 后两次进行电镜观察和对四环素的敏感性测试外 〔 2 ] , 还多次地观察了各种不同寄主上
的症状反应 。 现将结果报告如下 。
供 试 材 料 与 方 法
( 一 ) 电镜观察的制片
分别取自病 、 健株的茎 、 叶柄和一叶脉等部位 , 在 4 %戍二醛溶液中取样 , 立 即 先 后 用
4 %戍二醛和 1 %饿酸进行双固定 , 两次固定后 , 均用中性磷酸僻冲液各冲洗六次 , 随即用
系列乙醇脱水 , 环氧丙烷替换 , 6 1 8 . 包埋 。
( 二 ) 生物学测定 :
1
. 供试毒源 : 采 自试验地的典型病株 。
2
。 供试寄主植物 : 一部分采用鉴定葫芦科植物常见病毒的鉴定寄主 , 另一部分采用与罗
汉果可能伴种或伴生的植物 , 均用种子在防虫温室中或铁 网罩下播种 , 出苗后 , 取其健康无
病植株为供试植物 。 每盆 5 一 8 株 , 4 一 5 叶期进行接种 。 一般重复 2 一 3 次 。
3
。 接种方法 : 采用媒介昆虫 , 叶擦和汁液重创摩擦等三种或其中两种方法 接 种 。 相互
25 8 厂一 西 植 物 4卷
对照 。
媒介昆虫 :采自虹豆植株上并经证明为无毒的无翅蚜 , 经词毒艇小时 , 进行接虫 , 24 小
时后用乐果杀死 。
叶擦法 : 取典型病叶 , 卷成筒状 , 用刀片切成新的断面 , 礁以 p H 6 · 9的磷 酸 缓 冲液 ,
立即在涂有 3 5 0* 金刚砂的供试植物叶片上 , 摩擦接种 。
汁液重创擦摩 : 即常规的汁液机械摩擦接种 , 不同的是用力摩擦 , 使叶面显有明显的创
伤 。
接种后的供试植物 , 置于防虫温室中或罩以铁纱笼放在荫棚下 , 观察反应 。 气温一般在
2 8 ℃一 3 ℃之间 。
试 验 尘
( 一 ) 罗汉果疤叶丛枝病的病原
在病叶脉和病茎的维管束组织及其薄壁细胞 , 伴胞中都发现有类菌 质 体 ( M y 。 。 Pl as m -
li k e or g a ni s m s (M L O ) 有些处于二均分裂和芽生状态 , 多为圆形或卵圆球形 ( 版 矶图 1 、
图 2 、 图 3 、 图 4 ) , 在健株上述部位中 , 没有发现 M L O 。
需要提出的是 , 在重复的电镜观察中 , 在病叶脉维管束组织的薄壁细胞中 , 同时还发现
风轮状的病毒内含体 ( 图版班图 6 ) 。 说明可能有病毒质粒与 M L O 同时存在 。 至于二者的
关系 : 属复合感染 ? 还是复合存在 I ` ?i 不过从罗汉果疤叶丛枝病的症状说 : 叶片黄化 , 侧芽
早发 , 形成丛枝 , 叶片畸形并症状多样 t ” 忍 ’ 连 ’ ” ’ 6 1 , 都是 M L O 导致的典型症状 , 可是有 时
斑驳中略显花叶 , 是否与此有关 , 有待进一步研究 。
( 二 ) 罗汉果疤叶丛枝病原在几个具有代表性寄主上的症状反应 :
在供试的八个科二十七种植物上 , 除黎科的览色草 ( C h e n o p o di u m o p . ) 波菜 ( S p ni ac ai
ol e r ac
e a ) 接种后症状不明显外 , 其它症状不明显的还有葫芦科的冬瓜 、 葫芦瓜和瓢瓜以及
豆科的蚕豆 、 十字花科的甘蓝 、 油菜和白菜 。 剩余七个科十九种植物 , 都有明显的症状 。
1
。 葫芦科 : 在有症状的葫芦科植物上 , 症状特点是极相似主寄主— 罗汉果的 疤 叶丛枝病的主要症状 。
供试植物黄瓜 ( C u e u m i s s a t i v u s L . ) 甜瓜 ( C , m e l o L . ) 丝瓜 ( L u f f a a e u t a n g u l a
R o x b
.
) 南瓜 ( C u e o r b i t a m o s e h a t a D u e h . ) 苦瓜 ( M o m o r d i e a e h a r a n t i a L . ) 和 西 瓜
( C it r ul hi s v ul g a r si S c h r a d
.
) 用媒介昆虫接种的初期症状是 明脉或脉间褪绿 , 随之 叶 片
呈现斑驳并起疤 , 而叶擦或汁液重创接种者 , 可能由于初侵染时 , 菌原多 , 开始的症状就是
斑驳疤状叶 , 随后病叶均呈现扭曲畸形并变小 , 顶叶丛簇 , 最后叶片黄化 。 值得一提的是甜
瓜叶片黄化 , 常从主脉基部开始 , 逐渐向叶缘扩展 , 呈现中心黄症状 。 潜育期一般20一 30 天 。
2
. 茄科的心叶烟 ( N ci ot i a n a g lut ni os a ) 较难接种 , 但侵染后 , 常呈现脉间褪绿 、 斑驳 。
除此 , 对普通烟草 、 蔓陀罗 、 番茄和辣椒 , 都有明显的系统性症状 。 潜育期在 20 天以上 。
( 1 ) 普通烟草 ( N . t a b a c u m ) : 初期呈现脉间褪绿 , 继之新抽出的心叶变细 长 , 有锯
齿缺刻 , 叶形变小 , 植株矮化 。
( 2 ) 蔓陀罗 ( D a t u r a s t r a m o n i u m ) : 脉间褪绿 , 心叶呈现疤状小叶 , 叶有斑驳 , 早
3期 林国光 、 周广泉 :罗汉果疙叶丛枝病的病原及其在某些寄主上的症状反应 29 5
期枯死 。
( 3 )番茄 (L y o ep e rs i u em es u el en t um ) :接种后初期症状为脉间褪绿 , 继之 顶 叶丛
簇 , 叶片变小起疙 , 植株矮化 , 40 一 50 天后 , 叶片黄化 。
( 4 ) 辣椒 ( C a p s i c u m a n n u u m ) : 汁液摩擦接种的初期症状为新抽叶片变小 , 并反卷
扭曲成筒状 , 丛簇 , 后期顶尖坏死 。 而虫传者初期症状为褪绿斑驳叶 , 随之叶片变小 。
3
. 豆科 : 除蚕豆 ( V ci ai f a b a L . ) 的症状不明显外 ; 供试的虹豆 、 四季豆 , 后期症状
黄化明显 。 潜育期一般是 18 一23 天左右 。
( 1 ) 可豆 ( V i g n a s i n e n s i s ( L . ) S a v i e x H a s s k ) 初期脉间褪绿 , 新生叶叶 缘 下卷
变小 , 叶片黄化 。
( 2 ) 四季豆 ( P h as e ol us v ul g ar si L . ) 叶脉褪色 , 逐步成放射状白脉 , 后期黄化并萎
凋而死 。
4
. 十字花科的甘蓝 ( B r a s s i e a e a u l o r a p a P a s q . ) 和白菜 ( B . P e k i n e n s i s ) 症状不明
显 , 而萝 卜 ( R a p h a n u s s a t i v u s L . ) 虽有症状 , 也只是褪绿斑驳叶 , 而油菜 ( B . e h i n e n s i s
L
.
v a r
·
o l e i f e r a M a k
.
) 则叶片纵卷成细长筒状 。
5
. 玄参科的苦玄参 ( P i e r i a f e l一 t e r r a e I J o u r . ) ( 苦草 ) , 症状是小 叶 丛 簇 , 并早期
枯死 , 休眠侧芽早发 , 仍呈小叶丛簇症状 。
6
. 览科的千 日红 ( G o m p h r e n a g l o b o s a L . ) 叶片扭曲, 疙状斑驳 叶 。 潜 育 期 2 0天以
上 。
7
. 菊科的胜红蓟 ( A g e r a t u m e o n y z o id e s L . ) 和苍耳 ( X a n t h i u m s ib i r i e u m P a t r . )
二者症状相似 , 均为斑驳叶 , 前者疙状明显 。
综上所述 , 归纳各寄主上的症状特点 , 主要有三点 :
1
。 供试的各寄主 , 没有发现系统性和局部性侵染的斑点反应 , 均属系统性侵染的症状 。
2
。 各寄主的后期症状 , 均属黄化型 , 且均出现程度不 同的休眠侧芽早发 , 形成丛生 。
3
。 与主寄主一一罗汉果在分类上相近的植物 , 其上所出现的症状是否也 近 似 ? ! 在我
们的有限试验中是近似的 , 值得进一步研究 。
杨娟同志参加部分工作 , 电镜观察系华南农学院 电镜室提供 , 特此谢忱 。
主 要 参 考 文 献
〔幻 朱木明 , 19 81 : 植物类菌原质体病害 . 上海科技出版社。
〔2〕 林国光等 , 19 82 : 罗汉果危叶丛枝病的病原鉴定 。 广西植物 , 2 ( 4 ) : 约 1一 19 30
〔 s〕 R . F . W h i t e o m b a n d J . G . T u l l v , 29 7 9 : T 五e M y e o p l a s m a s , 3 : 2 2。一 3 0 7 ( p l a n t a n d I n s e e t
M y e o p l a s m
a s )
.
〔4〕 K . M a r a 二 o r o s e h . 5 . P . R a y e h a n d h u k i , 19 8 1 : M y e ` p l a s m a s d i s e a s e s o f t r e e s a n d s h r u b s .
A e a d e m i e P r e s s
.
拓 ) 杉浦已代治 , 19 7 : 植物 7 才 习 了 于 父 ? 样微生物 (M L O ) 尾 : 关寸 乙研究 O 现状 之问题点植物防
疫 , 3 1 ( 2 ) : 4 7一 5 2 .
( 6〕土居养二 , 19 7 2 : 植物病原 7 才 口 犷 于 义 7 研究 O 问题点。 植物防疫 , 2 6 ( 5) : 17 一 17 9 .
6 2 0广 西 植 物
P T H AO G S N ED T N AH A E E RC T O S O F N !C ET RI ANHO S T
4卷
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