全 文 ：广 西 植 物 G u ih a ia 16 ( 2 ): 1 6 8一 1 7 19 9 86
砂仁不同品种同工酶的研究
何振兴 冯世鑫
(广西药用植物园, 南宁 ” 0 0 23)
同工酶是近代研究植物起源 、 分类 、 遗传变异和杂种优势的一种新科学方法 。 近年来已广泛
应用于农作物 、 蔬菜和果树的遗传育种工作 。 本研究试图探讨砂仁不同品种同工酶 的酶谱带特
点 , 通过酶谱差异与砂仁品种生物特性相联系 , 为今后鉴定砂仁品种 , 确定品种优势提供一个生
化指标 , 并为新选育的品种预先测定优劣提供理论依据 。
1 材料和方法
供试材料有广东新推广品种绿壳砂仁 〔 A m o m u m v ilo su m L o u r
.
v a r
.
x a n r h i o i滋 : (w a l l . e x
B a k ) T
.
L
.
W u & S
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e n 〕 ( 以下简称为 1号种 ) 、 广西药用植物园从阳春砂仁品种中选育出来的
丰收型阳春砂仁 (以下简称 2 号种 ) 和目前生产当家品种阳春砂仁 ( A m 口m u m vi lo su m L o ur . )
( 以 下简称 3 号种 ) 共 3 种 。 3 个 品种生物特性不同 , 1 号种和 2 号种不但产量 比 3 号种高
70 %
,
· 而且抗逆性强 , 尤以 1号种产量较高 , 果实以 2 号种较大 。
取以上不同品种砂仁 3 年龄植株顶叶鲜重 19 , 放在研钵中加人 p H S . 3 , T isr 一甘氨酸缓冲液
6 m l
, 磨成匀浆 , 冷冻离心 ( 8 0 0 0 r / m i n , 15 m i n ) , 取上清液进行电泳 。
采用聚丙烯酞胺凝胶垂直板电泳法 , 分离胶的浓度 7% , 浓缩胶浓度 2 . 5% , 样品量 50 川 ,
电压 3 0 V , 冰箱低温电泳分离 3 h , 取出显带 。 过氧化物酶是用改良的醋酸苯胺法进行显带
( 2 0 0 m g 联苯胺加 6 m l 醋酸溶解后 , 加水至 15 0 m l , 并加维生素 C 10 0 m g , 3 0% H夕 : 0 . 5 m l
为显色液 ) . 酷酶是 以 3 m l l% 乙酸一 : 蔡醋丙酮液 , 3 m l Z% 乙酸一卜蔡醋丙酮酸液 , 逐滴加人
溶有 20 m g 坚牢兰 R R 盐的 .0 2 M pH 6 磷酸缓冲液中 , 过滤为显色液 。 电泳后凝胶先在 p H 6
磷酸缓冲液中 37 ℃ 下保温 30 m in , 倾去缓冲液 , 再加人上述染色液在 37 ℃下保温 30 一 60 m in,
直至显色 , 用蒸馏水冲洗退去底色 , 保存于 7% 醋酸溶液中 , 然后绘制模式图。
2 结 果
2
.
1 砂仁不同品种醋酶同工酶
本试验 3 种 (品种 ) 砂仁醋酶同工酶共出现 4 条酶带 , 迁移率相同 , 其中 D 带活性最强 ,
A 带较弱 , B 、 C 带最弱 , 显带不明显 , 3 种砂仁醋酶的酶谱显色无差异 (图 1 ) 。
2
.
2 砂仁不同品种过氧化物酶同工酶
本试验 3 种 (品种 ) 砂仁过氧化物酶同工酶的酶带共有 6 条 , 迁移率相同 , 酶谱中 E 、 F 两
19 95刁 2一23 收稿
第一作者简介 : 何振兴 , 男 , 19 37 年出生 , 主任中药师 , 从事中草药研究工作 。
2期 何振兴等 :砂仁不同品种同工酶的研究 1 87
条活性最强 , 但 2 号种缺乏 A 酶带 , l 号种 A 酶带稍弱 , 2 号种 D 酶带比 1 .号种和 3 号种显色
稍强 (图 2 )
3 小 结
砂仁不同品种醋酶同工酶的酶带共有 4 条 , 酶谱显色无差异 ; 过氧化物酶的酶谱有 6 条 , 而
酶谱有差异 , 即 1号种 A 带显色较弱 , 2 号种 A 带缺乏 。 从图 l 和图 2 可看出主要酶带基本相
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图 1 三种(品种 )砂仁的醋酶同工酶 图 2 三种 (品种 )砂仁过氧化物酶同工酶
l 绿壳砂仁 ; 2 丰收型 阳春砂仁 ; 3 阳春砂仁
同 , 说明它们之间亲缘关系是相同的; 图 2 中过氧化物酶的酶带中的差别 , 其生理意义可能在于
砂仁植物体生活力强弱 , 在田间我们也确实观察到 1号种和 2 号种的叶片比 3 号种的枯死晚 , 比
3 号种的叶片生长旺盛、 植株较高大 , 这样有利于光合作用增强和产量的提高 。
致谢 : 砂仁同工酶的测定承广西农业大学林炎冲教授协助 , 以及文章修改 。 特表感谢 !