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桑寄生及其夹竹桃科寄主植物强心苷含量相关性研究



全 文 :发油。采用薄层色谱法进行辛夷 、白芷的定性鉴别简便易行 , 采
用高效液相色谱法测定辛芷气雾剂中辛夷木兰脂素含量 , 该方法
准确 、灵敏 、重复性好。定性鉴别和含量测定为辛芷气雾剂提供
了较好的质量控制方法。气雾剂的喷射速率和喷出总量与药物
的疗效密切相关 ,经检验辛芷气雾剂此两项指标符合要求。
参考文献:
[ 1 ]  谷志平 ,宋晓宇 ,孙 仁 ,等.辛芷通窍颗粒治疗鼻窦炎 300例临床
观察[ J] .辽宁中医杂志 , 2007, 34(6):785.
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2005.
收稿日期:2009-04-13; 修订日期:2010-03-13
基金项目:广西科学研究与技术开发计划项目(No.0630002-3;
No.0718002-2)
作者简介:李永华(1964-),男(汉族), 广西岑溪人 ,现为华中科技大学同
济医学院药学院在读博士研究生 ,硕士学位 ,主要从事天然药物开发研究
工作.
*通讯作者简介:阮金兰(1952-),男(汉族),湖北当阳人 ,现任华中科技
大学同济医学院药学院教授 ,博士研究生导师 ,主要从事天然药物化学研
究工作.
桑寄生及其夹竹桃科寄主植物强心苷含量相关性研究
李永华 1, 2 , 卢 栋1, 2 , 朱开昕 2 , 裴河欢2 , 赵明惠 2 , 阮金兰 1*
(1.华中科技大学同济医学院药学院 ,湖北 武汉 430030;
2.广西省钦州市中医药研究所 535000)
摘要:目的 考察桑寄生及其寄主植物夹竹桃 、黄花夹竹桃强心苷含量的关系。方法 采用比色法测定寄生在夹竹桃 、黄
花夹竹桃寄主植物上的桑寄生与其寄主夹竹桃 、黄花夹竹桃强心苷含量。结果 夹竹桃寄主的桑寄生枝的强心苷含量为
0.33mg/g, 叶的强心苷含量为 0.98mg/g,分别是寄主枝 、叶强心苷含量的 4.3%和 15.6%;黄花夹竹桃寄主的桑寄生枝的
强心苷含量为 0.27mg/g,叶的强心苷含量为 0.84mg/g,分别是寄主枝 、叶强心苷含量的 11.5%和 84.0%。结论 寄生植
物会以不同量的形式累积其寄主植物的特征性成分。
关键词:桑寄生; 寄主; 强心苷
中图分类号:R284.2  文献标识码:B  文章编号:1008-0805(2010)06-1397-02
  桑寄生是中国传统常用中药材 , 具有补肝肾 、强筋骨 、祛风
湿 、安胎元等功效 , 用于治疗风湿痹痛 , 腰膝酸软 ,筋骨无力 , 崩漏
经多 ,妊娠漏血 , 胎动不安 , 高血压等症 [ 1] 。桑寄生属半寄生性
植物 ,具有广寄性特点 ,其寄主植物广泛 , 涉及多科多属多种 , 在
野生状态下十分复杂 [ 2] 。由于寄主植物的不同 , 造成寄生药材
的成分与功能差异 , 在国外已见研究报道 [ 3, 4] 。 在国内 , 伍朝筼
等 [ 5]对寄生在马桑树上的马桑寄生成分分析发现马桑寄生含有
马桑树特征性马桑内酯 , 周芳等 [ 6]对以夹竹桃为寄主的桑寄生
与红花寄生强心作用实验研究发现红花寄生对离体蛙心具有夹
竹桃样的强心作用而桑寄生则无强心作用。 《中国药典 》对桑寄
生药材质量规范要求为不得检出强心苷。本文通过对以夹竹桃 、
黄花夹竹桃寄主植物上的桑寄生强心苷含量进行检测分析 , 一方
面考察桑寄生及其夹竹桃 、黄花夹竹桃寄主植物强心苷含量的关
系 ,另一方面为桑寄生药材的安全使用提供科学依据。
1 材料
1.1 仪器与试剂 岛津 UV- 2550型紫外可见分光光度计;KQ
-400KDE型高功率数控超声波清洗仪(江苏昆山超声仪器有限
公司);地高辛对照品(中国药品生物制品检定所 , 供含量测定
用 ,批号为 100080- 200306);所用试剂均为分析纯 , 水为超纯
水。
1.2 材料 实验材料于 2007-11分别采自广西南宁 、钦州等地 ,
经广西中医学院邓家刚教授鉴定寄生植物为广寄生 Taxilus
chinensis(DC.)Danser, 寄主植物分别为夹竹桃 Neriumindicum
Mill和黄花夹竹桃 Thevetiaperuviana, 将采集样品材料清洗干燥 ,
枝叶分开粉碎(60目)后备用。
2 方法与结果
2.1 标准曲线的制备 采用比色法进行测定 [ 7] 。 精密称取
105℃干燥至恒重的地高辛对照品 10 mg, 置 25 ml容量瓶中 , 用
60%乙醇溶解后定容至刻度制成标准溶液。精密量取标准液 0,
0.1, 0.2, 0.4, 0.6, 0.8, 1.0 ml, 置于具塞试管中 , 加 60%乙醇稀
释至 1 ml,分别加入碱性苦味酸试剂(A液:1%苦味酸溶液;B
液:1NNaOH溶液 ,使用前按 A∶B=95∶5混合)4ml, 摇匀 , 室温
放置 20 min,在波长 494nm测吸光度。以吸光度 A对浓度 C作
标准曲线 ,得回归方程为 A=15.529C+0.033 1, r=0.9991, 表明
地高辛对照品在 0 ~ 0.08mg/ml之间呈良好的线性关系。
2.2 稳定性实验 精密量取样品溶液 1.0 ml, 依法显色 20 min
后 ,在波长 494 nm, 每隔 5 min测定 1次吸光度。吸光度的 RSD
为 2.1%, 表明显色后室温放置 20 ~ 40 min内 , 其吸光度较稳定
(见表 1)。
表 1 稳定性实验结果
时间 t/min 吸光度(A)
20 0.433
25 0.425
30 0.419
35 0.414
40 0.408
x±s 0.420±0.0087
RSD(%) 2.1
2.3 精密度实验 精密量取样品溶液 1.0ml,依法显色 20min后 ,
在波长 494nm,重复测定 6次(表 2)。吸光度的 RSD为 0.2%,表
明仪器精密度很好。
2.4 重复性实验 精密量取 6份地高辛标准溶液各 1.0ml, 依法
显色后 ,测定吸光度(表 3)。吸光度的 RSD为 1.5%。结果表明
本方法的重复性良好。
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LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2010VOL.21NO.6 时珍国医国药 2010年第 21卷第 6期
表 2 精密度实验结果
实验号 吸光度(A)
1 0.434
2 0.434
3 0.433
4 0.434
5 0.433
6 0.432
x±s 0.433±0.0008
RSD(%) 0.2
表 3 重复性实验结果
实验号 吸光度(A)
1 0.660
2 0.655
3 0.673
4 0.671
5 0.653
6 0.680
x±s 0.667±0.0097
RSD(%) 1.5
2.5 加样回收率实验 精密称取已知含量的寄主或寄生 2.0g, 5
份 ,分别加入一定量的地高辛对照品 ,依法测定强心苷含量 , 平均
回收率为 92.3%, RSD为 1.6%(见表 4)。
表 4 加样回收率试验结果
试验

样品重
量 m/g
样品中强心
苷含量 m/mg
对照品加
入量 m/mg
强心苷测
得量 m/mg
回收率
(%)
平均回收
率(%)
RSD
(%)
1 2.014 15.57 5.01 20.17 91.8
2 2.021 12.71 5.04 17.38 92.7
3 2.030 2.03 5.00 6.65 92.4 92.3 1.6
4 2.049 2.05 5.08 6.84 94.3
5 2.033 4.76 5.03 9.30 90.3
2.6 样品制备与含量测定
2.6.1 样品制备 分别精密称取寄主 、寄生枝 、叶等样品 2 g, 分
别置于 50ml三角瓶中用 70%乙醇超声提取 3次 ,每次乙醇用量
为 20ml,每次超声提取时间为 20min,过滤合并提取液 ,挥发去乙
醇 ,过滤 , 滤液采用碱式醋酸铅溶液沉淀过滤去除色素 , 用饱和硫
酸胺脱铅 ,用乙醇定容至 50ml(样品液乙醇浓度 60%)备测 [ 8] 。
2.6.2 样品强心苷含量测定 精密量取各样品液 1.0ml, 置于具
塞试管中 ,分别加入碱性苦味酸试剂(A液:1%苦味酸溶液;B
液:1NNaOH溶液 ,使用前按 A∶B=95∶5混合)4ml, 摇匀 , 室温
放置 20min, 在波长 494nm测吸光度 , 计算出各样品强心苷含量 ,
样品强心苷含量见表 5。
表 5 寄主夹竹桃与黄花夹竹桃及其寄生广寄生枝 、叶强心苷含量
寄主植物

广寄生
/mg· g-1
寄主
/mg· g-1
相对含量
(寄生 /寄生)

广寄生
/mg· g-1
寄主
/mg· g-1
相对含量
(寄生 /寄生)
夹竹桃寄生 0.33 7.73 4.3 0.98 6.29 11.5
黄花夹竹桃 0.27 2.34 15.6 0.84 1.00 84.0
3 讨论
强心苷是一类能增强心肌收缩能力具有强心生物活性的甾
体类物质 ,广泛存在于玄参科 、百合科 、萝藦科 、十字花科 、夹竹桃
科等植物中 ,桑寄生原植物不含强心苷。研究结果发现寄生在夹
竹桃 、黄花夹竹桃上的桑寄生含有强心苷成分 , 推断是由寄主影
响的缘故 ,桑寄生除了从寄主植物夹竹桃 、黄花夹竹桃吸取水分
与无机盐的同时 ,也积累其寄主植物特有的强心苷成分。但周芳
等的离体蛙心强心作用实验表明以夹竹桃为寄主的桑寄生无强
心作用 ,是否是桑寄生所累积的强心苷在功能作用上存在差异有
待于进一步研究。
桑寄生属半寄生性植物 , 在野生状态下其寄主植物具有复杂
多样的生态特点。 《中国药典》对桑寄生药材质量规范要求除了
不能检出强心苷外 , 对寄主植物没有作任何规范要求。本研究结
果提示凡寄生在含有强心苷类物质的寄主上的桑寄生可能都会
带有强心苷类成分 ,在药材采收过程中务必通过制定相应的采收
要求以防范采收可能含有强心苷成分寄主的桑寄生作为桑寄生
药材 ,为桑寄生药材的安全使用提供源头保障。否则在野外采收
过程中由于量大面广 , 对于可能采收到含强心苷成分的药材原料
由于抽样检查的局限性没能在抽检部分检到强心苷影响到用药
的安全性。
从桑寄生不同部位强心苷成分含量的研究结果看 , 桑寄生的
不同部位累积寄主植物强心苷成分表现出量的不同 , 其中叶的累
积量是枝的累积量的 3倍左右;而从桑寄生与寄主植物强心苷含
量的相关性方面的研究结果看 , 夹竹桃寄主的桑寄生枝是寄主枝
强心苷含量的 3.3%,桑寄生叶是寄主叶强心苷含量的 15.6%,
黄花夹竹桃寄主的桑寄生枝是寄主枝强心苷含量的 11.5%, 桑
寄生叶是寄主叶强心苷含量的 84.0%, 但无论是以夹竹桃还是
以黄花夹竹桃为寄主其桑寄生的强心苷含量基本一致。
本研究在提取方法上我们考察了索氏回流提取与超声波提
取 ,结果两方法提取的检测结果大致相当 , 考虑到超声波提取方
法简单快捷 , 故选择超声波提取法。在强心苷的含量检测上以地
高辛(洋地黄毒苷)为对照品 ,采用碱性苦味酸试剂(Baljet反应)
与甲型强心苷 α, β -不饱和内酯环的显色反应对强心苷成分含
量进行测定。地高辛 、夹竹桃苷 、黄花夹竹桃苷同属甲型强心苷
类物质 ,检测方法专属性强 ,方法简单 、快捷 、可靠。
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时珍国医国药 2010年第 21卷第 6期 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2010VOL.21 NO.6