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医药世界2006年第12期36
淫羊藿(Epimedium)全世界约有20余种,主要分布于亚洲
和欧洲的温带和亚热带地区,该属的无花植物和淫羊藿药材的鉴
定一直十分混乱 [1]。
淫羊藿为九味参蓉胶囊中的君药,因此选择淫羊藿苷作为其
定量分析的指标成分。淫羊藿及其制剂中淫羊藿苷的含量测定方
法有库仑滴定法,分光光度法[2]、TLC—分光光度法、薄层扫描
法和高效液相色谱法,高效液相色谱法具有灵敏、准确和分离好
等优点,因此首先选用反相高效液相色谱法测定九味参蓉胶囊中
的淫羊藿苷。实验结果表明,九味参蓉胶囊成分组成复杂,干扰
成分多,在HPLC进样前必须净化处理;用聚酰胺小柱对胶囊提
取物净化后,淫羊藿苷达到基线分离;该方法简单,准确,重复
性好,可作为九味参蓉胶囊的含量测定方法[4]。
1 实验部分
1.1实验药品 淫羊藿苷(中国药品生物物品检定所),九
味参蓉胶囊(黑龙江仁合堂药业有限责任公司)。
1.2实验设备和仪器 L—7100高效液相色谱仪(日本日立
公司),H—2000数据处理工作站,L—7400紫外检测器,医用
超声波清洁器材(昆山市超声仪器有限公司),FA1604 型电子
天平(上海天平仪器厂),SE—93 自动双重纯水蒸馏器(上海
亚荣生化仪器厂)。
1.3实验内容
1.3.1色谱工作条件的选择。十八烷基硅烷键合硅胶为填充
剂,柱温为室温,乙晴—水(27:73)为流动相,流速 1.0ml/
min,检测波长为270nm,理论塔板数按淫羊藿苷峰计算应不低
于2000。
1.3.2流动相的配置。取分析纯的乙晴和超纯水按体积比27:
73配液,进行过滤抽气,作为流动相。
1.3.3淫羊藿苷标准系列溶液的配置 精密称取在105℃干
燥至恒重的淫羊藿苷对照品0.04g,加甲醇制成100ml(400μg/
ml)的溶液,即得。依次稀释成120、160、200、240ug/ml的淫羊
藿苷对照品标准系列溶液。
1.3.4样品的处理。取样品九味参蓉胶囊装量差异项下的内
容物,研细,取1g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入70%
乙醇50mL,密塞,称定重量,超声处理(功率250W,频率33KHz)
45分钟,放冷,再称定重量,用70%乙醇补足减失的重量,摇匀,
滤过,取续滤液,即得。
1.3.5对照品溶液的测定。待液相色谱基线稳定平直后,分
别注入淫羊藿苷标准系列溶液10μl,重复两次,要求两次所得
的淫羊藿苷色谱面积基本一致,记下峰面积和保留时间。用系统
绘制出标准曲线。
1.3.6样品的测定。待液相色谱基线稳定平直后,分别注入
待测样品,平均进样三次,记下峰面积。
2 结果与讨论
2.1保留时间的确定:待液相色谱柱的基线稳定平直后,注
入200mg/L的淫羊藿苷标准溶液,淫羊藿苷标准溶液只出现了一
个峰,保留时间为10.900分钟,该峰高且窄,基线平稳。
2.2标准工作曲线的绘制:待基线稳定平直后分别注入淫羊
藿苷标准溶液,得到保留时间和峰面积数据,见表1。
表 1 淫羊藿苷系列标准溶液浓度的保留时间和峰面积
2.3样品的数据处理:将处理好的待测样品注入色谱柱,重
复三次,得到峰面积,见表2。
表 2 重复三次所得到的峰面积比较
样品的色谱图中在保留时间为10.890处出现了一个峰,保留时
间与标准样品的保留时间相同,可以确定为淫羊藿苷。根据峰面
积对照淫羊藿苷的标准工作曲线即可求得样品中引羊藿苷的含量
为163.26mg/L。即九味参蓉胶囊中淫羊藿苷的含量为2.03mg/粒。
3 结论
本文采用了高效液相色谱法对中药九味参蓉胶囊中淫羊藿苷
进行含量的测定,确定了最佳的分离条件,对分离结果进行了探
究,对于高效液相色谱应用和鉴定药材中成分含量的测定很有现
实的意义。用高效液相色谱法测定九味参蓉胶囊中淫羊藿苷含量
具有准确率高、快速的优点。
参考文献:
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3 中华人民共和国药典(一部),2000,267.
文章编号:1008-6919(2006)12-0036-03中图分类号:R282.71文献标识码:A 【论 著】
木通科木通栽培技术的研究概况
谢丽莎,黄茂春,刘寿养,谈远锋
(广西省南宁市广西中医学院 530001)
【摘要】 目的:查阅了国内近十多年的文献报道,综述了木通科木通生长条件、育苗、搬蔸集约栽培、造林、施肥、保
花保果及病虫害防治、理化诱变等栽培技术的研究,为木通科木通的栽培提供了参考。木通科木通栽培技术还应进一步研究
以提高座果率。
关键词:木通科木通 栽培 综述
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2006.12 MEDICINE WORLD 37
木通为木通科木通属植物五叶木通 Akebia quinata
(Thunb.)Decne,三叶木通A.trifoliata(Thunb.)Koidz或白木通
A.trifoliata(Thunb.)Koidz.var.australis(Diels)Rebd。有较好的
利尿作用,且配伍很广。2003年,国家取消关木通的药用标
准之后,木通的需求量大增,但因其资源短缺,国家科技部
已把木通作为濒危紧缺药材组织全国攻关,木通栽培技术的
研究引起越来越多人的关注。近年有关木通科木通栽培技术
的报道颇多,现将近十多年的研究报道综述如下。
1 生长条件研究
侯元同认为五叶木通适应性强,对水、土、光、温无特殊
要求,易于繁殖。一般在8~9月果实成熟时采收,除去果壳,
搓洗出种子,用湿沙混合贮藏,次年 3~4月播种,在宽 1 . 3
米的高畦上按30cm行距开横沟,每沟播种100粒,播后施腐
熟有机肥,盖一薄层草木灰,再盖细土约 15cm。当幼苗开始
长出蔓茎时定苗,每隔6cm留苗1棵。同时用带枝的小竹条间
插于行中以供攀援。2年后移栽,移栽宜在2~3月进行。用
分根和压条法亦可繁殖[1]。
郭春秋等对采自湖南、湖北两省木通产地的2 8个土壤样
品进行风干、弃去杂物、磨细以及过筛处理,分别测定 2 8个
土样的 p H值、有机质、全氮、碱解氮、速效磷以及速效钾含
量等 6项农化指标。初步确定,养分含量比较丰富的酸性土壤
适合木通生长[2]。
2 育苗技术研究
2.1 种子繁殖研究 3月中旬,于播种前半月取出沙藏种
子用水冲洗干净,放入布袋或瓦盆中,上盖湿纱布,置塑料
大棚内,每天用温水冲洗 1次;或把种子埋入塑料大棚地沟
内,盖土4~6cm厚,经常洒水,保持湿润,待种子有30%左
右裂嘴、露白时取出播种。风干种子直接播种。研究发现种
皮是阻碍木通风干种子快速发芽的主要因素。三叶木通种子
发芽率不高,仅 5 0 %左右。木通种子风干易丧失发芽力,宜
用湿沙储藏越冬。冬季湿沙储藏的种子比自然风干的种子成
苗率高[3~5]。
熊大胜等认为贮藏期间,种子含水量应该维持在2 8%以
上,低于 8%时,不能作为生产栽培用种。用 3 O℃清水浸种
22~24h,12~23℃下发芽,其发芽率可达88%左右,湿沙层
积发芽是三叶木通种子比较理想的发芽方式[6]。
2.2 压条繁殖研究 因三叶木通的藤条有落地生根的能
力,在四月下旬将二、三年生健壮藤条拉匍于地面,每隔 1~
2节在被压节的着地处挖宽10~16cm、深15cm的坑,再顺藤
条走向在坑内挖一条深5cm小沟,把藤条压下,覆土10cm踏
实。待节上生根,长 3~5 c m时,切断藤条即为一株新生苗。
据试验,压条育苗成活率高于种子和扦插育苗,但大量育苗
难以使用[4]。
2.3 扦插繁殖研究 4月上旬,将去冬沙藏种条和今春现
采1年生种条分别以15cm×20cm株行距,开沟斜插入苗床
内,地面只露上部一芽,覆土踏实,浇透水,使种条与土壤
密接。据试验,冬季湿沙储藏翌春扦插的种条比春季随采随
插成活率高,而春季扦插和秋季10月初扦插成活率高,夏、初
秋、冬扦插不易成活。100ppmABT生根粉和萘乙酸可促进插
条生根,提高成活率。[4~5]。
周惠玲等采用ABT(2号)生根粉、萘乙酸(NAA)、清水(对
照)三种处理方法进行扦插育苗试验,用ABT生根粉处理的插
穗生根时间比对照提前1O~20天;生根数量比对照多一倍;苗
高全年生长期比对照长1个月;茎蔓高生长量比对照大65.42
% ;发枝数比对照多66.67% 。经方差分析检验结果,差异
达到极显著水平,而萘乙酸和对照生长表现基本一致[ 7 ]。
熊大胜等用 1年生三叶木通茎藤进行扦插试验及切片观
察,三叶木通插条茎节及节间周身都能发生不定根,插条离开
母体之前就形成了根原始体,为皮部生根型;从扦插到生根到
成苗经历了根原基活动期、根系形成期、黄苗期及成苗期 4个
时期。三叶木通带芽插条扦插的成苗率比带节插条扦插的成苗
率显著地提高,比不带节插条扦插的成苗率极显著提高[8]。
3 搬蔸集约栽培技术研究
据试验,基肥有机质施用量的多少直接影响到三叶木通
搬蔸集约栽培的成活率和茎叶生长量。光照和湿度良好的生
长环境,是三叶木通茎、叶生长量显著的影响因素之一。主
茎直径大小对移栽成活率有一定影响,但对茎叶生长量影响
不大。土壤质地是影响三叶木通搬蔸栽培成活率高低、茎叶
生长量大小的第三因素。种皮是阻碍风干种子快速发芽的主
要因素。过量的有机质施量是阻碍三叶木通茎叶生长的主要
因素[9]。驯化栽培不同郁闭度成活率有差异,郁闭度越大,成
活率愈低,无郁闭的成活率高[10]。
熊大胜等用三叶木通二年生实生苗为试材,对其叶片生长
的生物学特性进行了研究。全株叶片生长期240d左右,可划
分为母茎叶片生长期,叶片速生期和叶片缓生期3个时期 [11]。
林圣玉等在野生三叶木通中选取长势较好的优良单株在
红壤坡地进行搬蔸集约栽培,对引种的三叶木通进行了物侯
期、生长动态及成活率等特性调查。三叶木通生长适应性强,
在红壤坡地引种成功;施肥与不施肥两种处理对三叶木通生
长影响较大,充足的肥水对三叶术通生长至关重要[12]。
据熊大胜等试验,避风向阳、水源充足的小气候地段栽培
三叶木通,其茎藤生长量是背阳干旱当风口小气候地段的 2
倍;挖沟撩壕栽培能极显著地提高三叶木通单位面积内茎藤
和果实产量;河沙改良农田土壤能显著地增加三叶木通花芽
分化量[13]。
4 造林技术研究
周惠玲等研究了三叶木通建园的园地选择和造林方法。
一般选择土层深厚,光照条件好的林地建园,土层深度最低
不能小于 60cm。据试验,将三叶木通苗假植后,第 2年春季
萌动后至发芽前种植可显著提高造林的成活率。但栽培密度
应依土壤肥力和品种而定,土壤肥力好的宜稀植,土壤瘠薄
的林地可适当密植。一般品种的种植密度为(2~3m)×3m,
每穴 2株为宜。三叶木通林地早期可间作套种,以提高早期结
果产量和林地的经济效益[14]。
5 施肥技术研究
钾肥(F)对第一、二、三次攀援茎及全株攀援茎生长都有
显著或极显著地促进作用;中等施肥水平有利于攀援茎生长[15]。
三叶木通开花,叶幕形成,新梢生长同时进行,花后又为
幼果速长期,需要消耗大量营养,故花前应施足肥水。在果
实膨大期,花芽开始分化,增施磷钾肥,可促进果实成熟,有
利开花[16]。
三叶木通施肥应以农家肥为主,各发育期追施适量有机
化肥,以协调生长结果对养分的需求。三叶木通对肥料三要
素的需要量有一定的正常比,N:P:K比例一般为5∶3∶4[14]。
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医药世界2006年第12期38
6 保花保果及病虫害防治技术研究
在花粉开裂时花粉生活率最高,此期应加强异花授粉,同
时在花期要稍加遮光,防雨淋,以提高座果率[16]。三叶木通在
花前l0~25天喷施爱多收2~3次,能有效地提高三叶木通的
座果率。
危害三叶木通害虫的防治,主要是做好冬季清园,消除越
冬虫蛹、虫卵。果园要适时喷布农药防治虫害等,或进行人
工捕捉,也可采用生物综合防治。尤其应注意春季施用药剂,
防止白吹绵蚧、蚜虫、红蜘蛛等对幼嫩枝蔓的危害[14]。
7 理化诱变技术研究
经试验,以50ppm浓度的秋水仙素常温下处理12~18小
时,成活率较高;诱变能否选育出少籽或无籽的三叶木通,还
有待继续试验鉴定[10]。用γ射线及甲基磺酸乙酯(EMS)诱变三
叶木通种芽,γ射线诱变剂量既是诱变苗成活率极显著的影
响因素,又是成熟期变异率显著的影响因素。早实变异株雄
性败育,叶片生长速度减慢[17]。
8 小结
木通科木通药用需求量大,果实味美,营养丰富,藤状缠
绕,花朵美丽,且花期长,可绿化和美化篱垣、棚架,是药果
观赏兼用的树种,经济价值极高[1,16],值得大量栽培。在育苗
方面,以冬季湿沙储藏翌春扦插繁殖较好,成活率高,可大量
育苗,栽培时间较短。木通花易落,座果率不高,应进一步研
究以提高座果率。果实方面可研究开发早熟无籽的品种,以开
发成优质水果。三种木通中,以三叶木通的栽培技术研究得最
多,对五叶木通及白木通的栽培也应进一步研究,以扩大药材
来源,以满足市场的需求,创造更大的经济价值。
参考文献
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及其成熟期变异研究. 常德师范学院学报(自然科学版),2001,
13(4):79.
文章编号:1008-6919(2006)12-0038-02中图分类号:R282 文献标识码:A 【论 著】
外固定架植骨治疗胫骨干感染性骨不连
张晚生
(山西晋城煤业集团总医院骨科 048006)
【摘要】 目的:评价外固定架植骨治疗胫骨干感染性骨不连的临床疗效。方法 运用此技术治疗胫骨干感染性骨不连 2 0
例。手术去除胫骨之内固定物,彻底清创后骨折端植入自体松质骨,改用单臂三维外固定加压固定。结果 全部病例均获随
访,时间3~36个月,平均17个月,骨折愈合时间14~24周,平均18周,去除外固定架后无再骨折发生。患肢及关节功能
良好。结论 外固定架固定加自体松质骨植骨治疗胫骨干感染性骨不连,均达骨性愈合,疗效满意。
关键词:外架 植骨 胫骨干骨折 感染性骨不连
胫骨干骨折在四肢骨折中十分常见,因其特殊的解剖部
位及特点,手术治疗后骨不连及感染发生率较高。而骨不连
合并感染时处理则更为棘手,常规方法治疗难以取得满意疗
效。我院自1996年6月~2004年6月共收治胫骨干骨折切开
复位内固定术手感染性骨不连20例,其中外院转来12例,均
采用外固定架固定加植骨治疗,效果良好,现介绍如下。
2 资料与方法
1.1一般资料:本组病人共20例,男14例,女6例;年
龄20~55岁。致伤原因:交通事故伤8例,井下炭块砸伤8例,
高处坠落伤4例。合并其他部位骨折6例。骨折部位:中上段
4例,中段12例,中下段4例。骨折类型(以АО分型分类):
ⅡВ型6例,ⅡС型10例,ⅢА型4例。局部软组织情况:闭