全 文 ：中 药及天然药物
促 进 天 麻 等 兰 科 药 用 植 物 种 子
萌 发 的 真 菌 发 酵 液 的 抑 菌 作 用
中国医学科学 院药用植物资源开发研 究所 ( l。。。9引 郭 顺星 徐锦 堂
提要 用 6种促 进兰 科种子 萌发 的 真菌 发酵液 , 分别村 6 种试验 菌 ( 枯草杆 菌 、 犬 肠 杆 菌、 滕毙
八 叠球 菌 、 根霉 、 立枯丝 核 菌 、 金黄 色葡萄球 菌 ) 进行 了抑 菌试验 , 证 明真 菌的 代谢 产 物 中含 有抑 菌
物质
欣 强
通过对 : 二些 真菌不 同 发酵 天 数取 样测 试 , 结 果表 明 , 在 发酵 到 5 一 s d时 的 发酵液 其抑 菌 作用
并 五付 该 类 真菌 严 生 的杭 生素的 应 用 , 进行 了探 讨 。
关键词 天脉 ; 真菌发酵 液 ; 抑 菌作 fJ]
据文献报道 , 有些兰科植物的共生真菌 ,
可产生多种糖类江’ J、 氨基酸类仁“ 」、 核昔酸类等
初生代谢产物 , 并证明是提供给兰科植物生长
的营养物质 。 在某些真菌的次生 代谢产物 中 , 曾
检测出含有植物激素及其它生理活性 的物质 萝3」
它们对植物的生长发育有促进效果 。 其 中由真
菌产生 的抗菌素类物质 , 如青霉素对高等植物
种子。 一淀粉酶等水解酶 的形成 〔峨 , 5 ], 及促进 叶
绿体 色素的合成 ` 6一 ” 、 叶的生长 「5, 9 , 、 根的形
成和生长亡 ’ ” ,等方面均有显著效应 , 还可调节植
物 内源激素的代谢 〔 ” 〕。 但在兰科植物种子共生
真菌的次生代 谢产物 中 , 对抗生素的研究尚未
见文献记载 , 作者从几种兰科药用植物种子发
芽原球茎中分离的真菌 , 经试验对种子发芽有
良好的促进作用 仁` “ ]。 用壳斗科 ( F a g a e e a e ) 植
物树叶培养这些真菌的提取液 , 装入未经灭菌
的三角瓶中 , 在室温下保存不易污染杂菌 , 而
无菌树叶的提取液则与此相反 , 提示真菌的提
取液中含有抗生素类物质 , 本文将这方面的初
步研究结果报道如下 。
材料和方法
1
. 待测菌是从兰科药用植物 天麻 ( ` a s -
r r o d i a e l a t a )
、细叶石解 (D e o d r o b i u 川 h a 。 -
c o c k i i )
、 见血清亿 i娜 r i s o e r v o s a )种子 萌
发的原球茎 中分离并纯化的 0 2 、 0 2 、 0 3 、 04 、 G 3 、
G 4号菌株 。 其中01 号菌经鉴定为紫其小菇 ( M 了/ -
c e n a 0 5 爪 u ” d i c o l a ) 〔 `“ 了。 0 2 、 0 3 、 04号菌 , 显
微镜下观察 , 菌丝无 色透明有分枝和分隔 , 菌
丝上可观察到明显的锁状联合 , 根据这 3 种真
菌菌丝体 形态 及培养性状 , 经鉴定 属担子菌
( B a s i d i o m y c e t e s )
。 根据 C 3 、 G 4号菌营养体
及繁殖体形态特征 , 经鉴定属于 子囊菌 ( A s c o -
m y c e t e s )
。
2
. 试验菌为枯草芽抱杆菌 (B a e i l l u s s叻 -
r i l i 、 )
、金黄色葡萄球菌 ( S r a 户h刀 l o e o e u 、
a o r e o s )
、 葡枝根霉 ( R h i z o P u s s r o l 〔, n i fe r ) 、
大肠杆菌 ( E : c h e ir c h i d c ol 公) 、 滕黄八叠球
菌 (S a r i e i n a l u t e a ) 、 立枯丝核菌 ( R h f : o c -
t o n i a s o l a n i )
。
3
. 待测菌培养基 为麦鼓糖液体培养基 ; 试
验细菌培养基为牛肉膏蛋白陈培养基 ; 试验真
菌培养基为 P D A培养基 。
4
, 待测菌 发酵 液及试验菌菌悬液的制备
均采用常规方法进行 。 抑菌作用的测定 ,采用管
碟法并参照 〔 ` 4 」改进 。
结 果
1
. 通过 6种促进种子萌发的真菌发酵液对
6 种试验菌的拮抗性 筛选表明 , 各待测菌对试
验菌有不 同的抑菌作用 ( 附表 ) 。 证明待测菌的
胞外次生代谢产物中含有抗菌素成分 。 所用待
中国药学杂志工990 年第 2 5卷第 4 期
待 测
1咐表 待测 菌不同 发酵天数对试验菌的抑菌作用
一一不赢蔽石不石不痴蔽霜丽下妈薇 。 x t。 单位 :。 m
发酵 天数 1 枯草杆菌
菌 号 ( B
.
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大肠杆菌
E (
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滕 黄八 叠
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根 霉
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_一 - -一一 - ~ ~ - - ~ - - -一 一 - -一 - , - 一 - ~一~ - 一 ~ _ _* 差异测定是根据 6 种待测菌取样中对各试验菌抑菌作 用最大的分别统计 。 具相同字母者表示差异不 显著 (尸 > 0 . 0 5 ) 。一 表示 无抑菌作用 。测菌的无菌培养基作对照抑菌作用为零 。2 . 抑菌范围 : 试验表明 , 03 、 G 3 、 G 4 号菌的发酵液 , 对枯 草芽抱杆菌 、 大肠杆菌 、 滕
黄八叠球菌 、 金黄色葡萄球菌等细菌均有抑制
效果 , 同时对真菌类的根霉 , 立枯丝核菌也有
较强的拮抗作 用 。
3
. 抑菌强度 : 取各待测 菌发酵 液抑菌最强
的取样天数观测值方差分析 ( L S R 0 . 05 ) ,对枯
草芽抱杆菌 04 号同紫其小菇待测菌作 用无差异 ,
但显著高于 G 4 、 G 3待测菌 ; 对大肠杆菌 02 同
03 待测菌无差异 , 同其余待测菌相比有明显 差
异 ; 对滕黄八叠球菌 以 G 3 号待测菌对其拮抗
性最强 ; G 4 、 G 3 、 03 号待测菌的发酵液对金
黄色葡萄球菌 、 根霉 、 立枯丝核菌的抑菌强度显
著高于其余待测菌 。实验 中还观察到 , G 4 、 G 3 、
0 3号菌的发酵液对试验菌的抑菌圈特别整齐 ,
透明 。 本 试验结果证明 , 不 同待测菌的次生代
谢产物中抗菌素的质与量有差异 。
4
. 待测菌发酵不同天数的发酵液对抑菌效
果的影响 : 待测菌随着发酵天数的不同 , 其抑
菌 作 用 差 别 较 大 , 如 附表 所 示 , 发 酵时间
在 5 一 s d左右的发酵液抑菌作用较强 , 说明此时抗
中国药学杂志 1990 年第25 卷第 4 期
生素积累多 , 早斯或晚期 其拮抗作用明显下降 。
讨 论
1
. 促进种子萌发的真菌含有不 同的抑菌物
质 , 和种子共生后 , 可创造一个免遭其它有害
微生物侵染的环境 , 有利于种子发芽后的继续
发育 。 目前 , 对天麻 、 石解等有经济价值的兰
科植物种子无菌培养的研究较多 , 有些种子在
人工培养基上能很好萌发 , 但从无菌 条件下移
入自然状态下进一步生长 , 幼苗生长缓 慢 , 成
活率低 , 而利用兰科植 物长期与共生真菌形成
的密切营养关系 , 探索一条生产上简便 、 经济
的真菌伴播种子新途径 , 对大面积推广兰科药
用植物栽培是非常有意义的 。 促进种子萌发的
真菌抗生素的生 物测定 , 是从另一个侧面证明
共生菌不但能提供 种子发芽的营养物质 , 同时
还可创造种子发芽后幼 苗继续发育的有利条件 。
2
.
50 年代 , B r i a评 `5 3曾对抗菌素对高等植
物的影响作过系统报道 , 许多学者先后进一步
证实了抗菌 素具有生长素 、 赤霉 素和细胞 分裂
素三类生长促进型激素所具有的多种生长促进
作用 。 本实验在真菌对兰科药用植 物种子萌发
有明显促进作用的基础上 , 从抗菌 素的测定结
果说明 , 共生真菌含有不同类型的抗菌素 , 可
能作为兰科种子萌发的营养物质之一 。 由于真
菌的次生代谢物质复杂 , 其抗菌素类型 、 含量
及所含不同抗菌 素对种子发芽的影响等 , 还有
待深入研究 。
3
. 从待测菌不同培养时间取样 , 测得的拮
抗作用明显不 同 , 但这些真菌在 5 一 s d 左右
产生的抗菌素类 物质较多 。 抗菌素是产生菌的
次生代谢产物 , 这类物质的产生 , 一般是 在菌
生 长的后期或停止生长阶段 。 待测菌在培养的
第 s d 左右抑菌物质含量较高 , 此时待测菌正
处于生长的停滞阶段 , 实验结果符合次生代谢
产物的产生规律 。 培养后期发酵液的拮抗 作用
下降 , 是否由于待测菌本身对抗菌素类物质的
重新利用或环境 等因素造成抗 菌素的分解 、 转
化 , 同样有待于深入研究 。
参 考 文 献
尸 e r o m b e l o n M
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〔 9 J M u k h e r j i 5 e t a l . 〔, a ” J B o t 19 8 5 ; 6 3 : 1 1 5 0
【10 ] B h a ` 十a e h a r y a 5 . S c i C “ 1 1 19 83 ; l : 49
仁1川 李海航等 . 植物生理通讯 19 87 ; 、 5 ) : 1
【12 〕徐锦堂等 . 中药通报 l , 8 1 ; 6 ( 3 ) : 2
【13 〕 徐锦堂等 . 中国医学科学院学报 19 8 8 ; 10 ( 4 ) , 2 70
[ 14 〕 中国科学院 南京土壤研究所微生物室编著 , L壤微生物
研究法 . 科学出版 社 . 19 8 :5 162
! 15 〕 B r 一 a n P 叭 . A 凡” R e 出 P l a ” z 尸h 刀` 1 0 1 19 5 7 : 8 :
4 13
肉 桂 及 其 混 淆 品 的 比 较 鉴` 别
广西药品检验所 (5 3 0 0 0) 温 尚开 韦家福 洪 明接
提要 本 文 时 肉桂 及其 两种 燕淆品— 阴 香 、 柴桂 的 药材性状 、 显微 观 察 、 薄 层层析 、 紫 外吸收 光语 测 定等方 面 进 行 了比 较研 究 。 列表 区 别 它 们 的 不 同特征 , 并附 横 切 面 组 织 简图和主 要 粉末特
征 图 。
关键词 肉桂 ; 阴香 ; 朵桂 ; 鉴 别
肉桂为温热散寒 、 健胃止痛的常用中药 , 19 8 5年版均收载 ,
(神农本草经肠纽为上品 。 中国药典 19 63 、 19 7 7 、 仇 o 川 “ 川 c a “ s , a
原植物系樟科肉桂 ( C i n九 a 一
P r es l) 的干燥树皮 。 袁阿
中国药学杂志 19 90 年第 25卷第 4 期
A BS T RA C TS O FO RIG I NA LA RI TC E LS
T h eba et erios tas is o f f erm en怕 tio n liq u i do f
fu ng i讲o mo ti ng s e edg erm i a n tio o n fG sa to ri da
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一 xi ng , X U J in 一 t a n g ( In s t i t u te o f M e d i e in a l P l a n r
决 v e l o p m e n t , C h in c s e A e a d e m y o f M曰 i e a l S e i e n e e s , B e i j i n g ,
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T h e re 犯 l ts of b ioa , , l y u s in g 6 s tar in s o f se de -
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o r h u m a n P a t h o g e n i e b a e t e r i a P r o v e d th a t a l l t h e 6
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(o r ig in a l a r t ie le o n P a g e 206 )
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r e s t u d i e d
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I n a d d i t io n se v
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fe re n t ia l t a b le s w e r e p re se n t e d as a Ppe n d i e es
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( O r ig in a l a r t ie le o n P a g e 2 0 2 )
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L I A N G B in g 一w e n
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C H A N G Y u e
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m e n t o f P h a r m a c y
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H o s P i t a l N o
.
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N a n 少n g , 2 l 0 0() 2 ) 、
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T h e P la s m a d r u g e o n e e n t r a t i o n w a s st u d i e d i n
r a b b ist b y d e t e mr i
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T h e er la t iv e b ioa
v a i la b i l it y o f
e n o x a e in at b l e t s p
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ed u ce d in C h in a w
a s e v a lu a t e d b y
S tU d y o f 5 1
一N i一a n g su P P o s i t o r i e s
C H E N G Y u 一 h u i
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L I A O G o n兮 t i e , H O U 5 1一 x ia n g ( S e h o -
0 1 o f P h a r m a e y W e s t〔 h in a U n i v e r s i t y o f M e d i e a l S e 一e n -
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T h i s P a pe
r d e a ls w i t h th e P r e P a r a t io n
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q u a l r t y
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· 中国药学杂志 1990 年第25 卷第 4 期