全 文 ：2011 年 5 月
第 24 卷第 3 期
黑龙江生态工程职业学院学报
Journal of Heilongjiang Vocational Institute of Ecological Engineering
May 2011
Vol． 24 No． 3
分子标记在松科植物种质资源研究中的应用
李红艳 罗 旭 张海峰
(黑龙江省林业科学研究所，哈尔滨 150081)
摘 要:综述了近年来 DNA分子标记技术在松科植物物种鉴定及种间亲缘关系分析、分子遗传图谱构建、群体
遗传结构及多样性分析领域的研究进展，指出了分子标记在松科种质资源研究领域存在的问题，并提出今后的研究
方向。
关键词:分子标记;松科植物;种质资源
中图分类号:Q7 文献标志码:A 文章编号:1674 － 6341(2011)03 － 0011 － 05
收稿日期:2011 － 04 － 07
基金项目:黑龙江省自然科学基金项目:利用分子标记
进行杂种落叶松优良家系的鉴别(C200530) ，杂种落叶松体
细胞胚胎发生技术的研究(C200801)
作者简介:李红艳(1977 －) ，女，硕士生。研究方向:林
木遗传育种、分子生物学。
分子标记技术也称 DNA 分子诊断技术，是基于研究
DNA分子由于缺失、插入、易位、倒立、重排或由于存在长短
与排列不一的重复序列等机制而产生的多态性。它反映生
物个体或群体间在基因组上某种差异特征的 DNA 片段，与
表型标记相比，分子标记具有以下优越性: (1)直接以 DNA
的形式表现，在动植物体的各个组织，各发育时期均可检测
到，不受季节、环境限制，不存在表达与否的问题;(2)数量极
多，遍及整个基因组;(3)多态性高，自然存在着许多等位变
异，不需专门创造特殊的遗传材料;(4)表现为“中性”，即不
影响目标性状的表达，与不良性状无必须连锁;(5)许多分子
标记表现为共显性，能够鉴别纯合基因型与杂合基因型，提
供完整的遗传信息［1］。分子标记技术发展迅速，种类包括:
限制性片断长度多态(Restriction Fragment Length Polymor-
phism，简称 RFLP)、随机引物扩增多态性 DNA(Random Am-
plified Polymorphic DNA，简称 RAPD)、扩增片段长度多态
(Amplified Fragment Length Polymorphism，简称 AFLP)、SSR /
VNTR(简单序列重复或微卫星 /数量可变串联重复或小卫
星)、微卫星引动的 PCR(MP － PCR)、锚定的 SSR － PCR、
PCR扩增微卫星位点等。
林木种质资源是国家重要的基础战略资源，是林木良种
选育的基础。长期以来，林木种质资源的评价、保存与利用
工作十分薄弱，种质资源的流失非常严重。我国虽然树种资
源丰富，但森林资源贫乏，大量具有特殊价值和利用潜力的
树种的遗传资源及其有效群体逐渐减少，种质资源的流失，
不仅对林木良种选育工作造成很大损害，而且对整个森林生
态安全已经构成威胁。利用分子标记技术对种质资源进行
研究是一个新的学科方向，近年来分子标记技术越来越多地
应用于松科植物种质资源研究工作中。
1 物种鉴定及种间亲缘关系分析
林木种子的真实性鉴定，一直是种苗生产、贸易中的突
出问题。一些亲缘关系较近的种，特别是松科中松属及落叶
松属的某些种，其种子甚至幼苗的形态都非常相似，往往难
以根据形态对其进行区分。另外，落叶松的一些杂交种往往
集合了双亲的优点，在种子园中这些杂交种和它们的亲本种
子很难鉴别，甚至生长几年后也难以区分［2］。对于不同的物
种，其基因组 DNA所携带的遗传信息必然有所不同，只不过
亲缘关系近的物种差异程度小，亲缘关系远的差异程度大。
因此，DNA分子标记被越来越多地用于物种鉴定和种间亲缘
关系分析。早在 1992 年，Bobola等［3 ～ 5］利用 RFLP标记技术
对红云杉和黑云杉进行了鉴别，虽然获得的标记不具有
100%种的特异性，但通过细胞器和核基因组 RFLP标记的组
合，可以对红云杉和黑云杉进行可靠的区分。1995 年，Perron
等［6］对红云杉和黑云杉进行研究，获得了所有检测样本 4 个
种一级水平上 100%保守的 RAPD 标记。1996 年，Khasa［7］
等用 RAPD片段作为标记区别云杉属不同种白云杉、恩氏云
杉以及它们的杂交种。1997 年，Furman 等［8］获得了中美洲
和墨西哥几个松属树种一级水平上的特异的 RAPD 谱带。
1999 年，Germano 等［9］用 SNPs 做分类群鉴定，区别红云杉、
黑云杉、白云杉。2000 年 Scheepers 等［10］用 RAPD 的方法鉴
定落叶松和其杂种，得到了特异的 RAPD 条带。2003 年，
Nkongolo等［11］从多脂松(Pinus resinosa)中分离了少量的微
卫星 DNA引物，其中的一对引物产生了丰富的信息，可以用
来鉴别松树树种。2004 年，Achere 等［12］根据叶绿体基因组
父系遗传，而线粒体基因组母本遗传的特性，用 PCR － RFLP
的方法扩增了叶绿体基因组基因，通过酶切片断的差异区分
了日本落叶松和欧洲落叶松，结合线粒体基因特异片断，区
分落叶松的父本和母本;同年，我国国家质量监督检验检疫
总局也出版了用 RAPD 进行落叶松种子鉴定的实验方
法［13］。2005 年，赵阿风［14］用 8 对 SSR引物的指纹组合建立
了福建省五一林场马尾松无性系测定林的 DNA 指纹图谱，
可以简便有效地区分开全部供试的 120 个不同无性系。
2006 年，曲丽娜等［15］采用 RAPD和 ISSR分子标记对兴安落
叶松、华北落叶松和长白落叶松进行不同物种的种间鉴别，
得到鉴别三种落叶松苗木的 3 个 RAPD引物，鉴别三种落叶
松种子的 3 个 RAPD 引物和 2 个 ISSR 引物。2008 年，张磊
等［16］采用 ISSR分子标记技术对兴安、长白和日本落叶松种
间以及不同无性系进行了鉴别，从 49 条引物中筛选出 13 条
ISSR引物可以对落叶松种间和无性系间进行鉴别，特异条带
个体的百分率为 100%。2009 年，郭树杰［17］利用 RAPD技术
—11—
对陕西陇县八渡林场油松种子园 14 个无性系进行鉴别，其
中 6 个 RAPD引物可有效对 14 个无性系进行分子鉴别。
2 群体遗传结构及遗传多样性分析
遗传多样性泛指地球上所有生物的遗传信息的总和，包
括不同物种间以及物种内的遗传变异。狭义上遗传多样性
通常指物种内的不同种群内不同个体间的遗传变异［18］。它
反映着一个物种适应环境的能力及其被改造和利用的潜力。
遗传结构就是遗传变异或者基因和基因型在时间和空间上
的分布式样，它受突变、基因流、自然选择和遗传漂变的共同
作用，同时还和物种的进化历史和生物学特性有关［19］。遗
传多样性是生物界几十亿年进化所产生的宝贵资源，是人类
生存和社会生产发展的基础。遗传多样性的研究为揭示生
物分子进化、地理变异和物种形成提供了强有力的证据和方
法，是保护人类赖以生存的种质资源的基础，是推动生命科
学进步的重要工具。
在松科植物的遗传多样性研究中，以张恒庆等对凉水国
家自然保护区天然红松的研究报道较多。对天然红松遗传
多样性在时间尺度上变化的 RAPD 分析结果表明:红松在时
间尺度上的遗传分化比空间尺度的低，凉水保护区内的红松
遗传多样性在 1581—1900 年的时间段内没有太大的波动，
龄级间遗传多样性分化不明显，红松遗传多样性主要存在于
龄级内［20，21］。对凉水、丰林国家自然保护区红松居群遗传多
样性的研究，无论采用 RAPD 标记，还是 ISSR 标记，结果均
表明:红松的遗传多样性凉水居群大于丰林居群。对比分析
了这两个天然红松居群的遗传多样性变化，红松种内的遗传
变异主要存在于居群内，居群内存在一定的遗传分化［22 ～ 25］。
冯富娟等［26］利用 ISSR 技术分析了长白山不同海拔高度红
松的遗传分化，发现该地区的遗传多样性水平呈现随海拔升
高而降低的趋势。长白山不同海拔高度红松的变异主要来
自群体内，红松之间的遗传距离和垂直地理距离之间有明显
的正相关性。推测:红松的垂直分布由低海拔向高海拔处扩
散而形成的。杨传平等［27］应用 ISSR 技术，以俄罗斯的西伯
利亚红松不同地理分布区的 19 个种源为材料进行遗传多样
性研究，结果表明:种源的平均多态位点比率为26． 48%，具
有高的遗传多样性，种源间存在一定程度的基因流动和遗传
分化。此外，张冬东［28］利用 SRAP技术分析露水河林业局红
松种子园种源试验林中 24 个种源的遗传结构，王洪梅［29］利
用 ISSR分子标记技术分析了露水河种子园和天然红松的遗
传多样性和遗传结构，结果均表明:群体的遗传变异主要存
在于种源(群体)内。
马尾松遗传结构和遗传多样性研究方面，艾畅等［30］对
福建五一，朱必凤等［31］对广东韶关，张薇等［32］对福建白砂，
万爱华等［33］对湖北京山，杨玉洁等［34］对湖南桂阳马尾松种
子园的遗传结构和遗传多样性进行了分析，结果表明马尾松
种子园均具有较高的遗传多样性。李丹等［35］采用 RAPD 技
术分析测定了 3 个马尾松海拔梯度种群的分子遗传特征，发
现马尾松种群中遗传多样性较高，种群间的分化程度较低，
大部分变异存在于种群内。刘爱萍［36］用 RAPD和 ISSR标记
对我国 12 个省(区)马尾松优良种质资源代表品种进行了亲
缘关系和遗传多样性分析，多态性百分率分别为89． 5%和
88． 9%。李志辉［37］等用 ISSR标记对广西古蓬和浪水两个种
源区的马尾松天然林 5 个群体共 85 份样品进行遗传多样性
分析，古蓬种源多态位点百分率为94． 35%，浪水多态位点百
分率为94． 38%，表明马尾松天然林群体内遗传多样性水平
高，个体间基因多样性变异大。
油松是我国的特有树种，从目前研究的有关资料来看，
国外的研究报道甚少，国内最近几年对油松的遗传多样性和
遗传结构研究的较多。2008 年，李毳［38］利用 RAPD 和 ISSR
两种分子标记方法对山西 5 个天然油松群体进行了遗传多
样性分析;周飞梅［39］等，利用 RAPD 分析了陕西地区油松天
然群体的遗传结构;2009 年，王磊［40］利用随机微卫星扩增多
态性 DNA(RMAPD)分子标记技术，分析了油松 12 个天然居
群 245 个个体的遗传多样性和遗传结构;郝真真［41］采用 IS-
SR分子标记方法，研究了油松整个分布区的 13 个代表种种
群遗传多样性和空间遗传结构特征。结果均表明:种群间有
一定程度的变异，但大部分变异存在于种群内。
对于松科其他植物，1993 年，Strauss等［42］利用 RAPD 技
术分析了日本落叶松的遗传多样性，Hong 等［43］分析了辐射
松、刺果松和瘤果松线粒体 DNA的 RFLP遗传多样性。1995
年，Hamelin等［44］应用 RAPD 标记研究了美国白松 22 个群
体的核 DNA的遗传变异，Vicario 等［45］采用 12 个随机引物
对 7 个冷杉群体进行 RAPD 标记的遗传多样性研究。1996
年，Szmidt等［46］对欧洲赤松的两个群体进行了 RAPD 分析，
Bobola等［47］分析了红云杉和黑云杉基因组 rDNA 的 RFLP
遗传多样性。1998 年，Echt 等［48］利用 SSR 技术分析了脂松
的遗传多样性。1999 年，Lerceteau 和 Szmodt［49］利用 AFLP
技术研究了樟子松的遗传多样性;Rajora［50］基于 RAPD 标记
分析了来自天然林、天然次生林、人工林和树木改良选择林
共 420 株白云杉的遗传结构。2000 年，Collignon and
Favre［51］分析了挪威云杉的 RAPD 遗传多样性;Karhu 等［52］
分析了黑松的 RAPD 及 STR 遗传多样性;易能君等［53］分析
了湿地松抗病种子园的遗传多样性。2001 年，Mariette 等［54］
利用 AFLP和 SSR技术对 23 个种群的海岸松进行遗传多样
性研究;Vikram等［55］用 AFLP标记研究严酷的气候条件和微
生态环境对挪威云杉群体遗传结构的影响。2002 年，Kraj［56］
基于 RAPD 多态性分析原产于波兰的挪威云杉群体的遗传
变异。唐娟娟等［57］利用 RAPD分析了黄山松 10 个家系的遗
传多样性。2003 年，Diaz and Ferrer［58］用 RGAP 标记分析了
卵果松群体遗传变异，张志勇和李德铢［59］分析了五针白皮
松的 RAPD遗传多样性。2004 年，王秋玉等［60］对红皮云杉
地理种源遗传多样性进行了 RAPD 分析，张新叶等［61］利用
cpSSR分子标记对日本国内的 7 个日本落叶松群体遗传结
构进行了研究。2005 年，税珺等［62］对火炬松 19 个原生种源
和国内早期引进的 5 个群体进行 RAPD 遗传多样性研究。
2006 年，周志强等［63］研究了大兴安岭北段天然樟子松林遗
传多样性，那冬晨等［64］利用 ISSR标记对 17 个兴安落叶松种
源 170 个个体遗传多样性进行了分析。2007 年，刘占林和杨
雪［65］研究了巴山松(P． henryi Mast．)、黄山松、油松、马尾松
以及云南松(P． yunnanensis Franch．)5 种松树的遗传多样性。
3 分子遗传图谱构建
遗传图谱(genetic map)又称连锁图(linkage map) ，是以
具有多态性的遗传标记为路标，以两个位点的交换率为图距
的图谱，它包括将基因定位于某一特定染色体上，以及测定
基因在染色体上线性排列的顺序和距离。遗传图谱既是遗
传研究的重要内容，又是种质资源、育种及分子克隆等许多
应用研究的理论依据和基础。
分子标记从一产生就在松科植物遗传连锁图谱构建中
得到了广泛的应用和认可。据统计显示，迄今国内外利用
RAPD、RFLP、AFLP和微卫星标记对松科植物已经构建了 20
多张遗传连锁图谱。Tulsieram 等［66］最早利用 RAPD 标记构
—21—
建了白云杉的遗传图谱，用相同的技术，又相继建成了多种
松科植物的遗传图谱，如湿地松、长叶松、糖松、海岸松、欧洲
赤松、土耳其松、南欧海松、北美乔松、马尾松、挪威云杉
等［67 ～ 77］。
随着 RFLP和 AFLP标记技术的开发，RFLP 和 AFLP 标
记技术也被用于松科植物遗传连锁图谱构建中。1994 年，
Devey等［69］首先构建了火炬松的 RFLP 遗传图谱;之后，
Remington等［78］利用 AFLP标记技术又构建了一张较为完整
的火炬松的遗传连锁图谱，建立起来的完全连锁图谱可将现
存的火炬松图谱合并成高密度图谱;1998 年 Travis 等［79］构
建了赤松的 AFLP遗传图谱;2003 年 Yin等［80］构建了樟子松
的 AFLP 遗传图谱。此外，Devey 等［81］用 RAPD、RFLP 和
SSR标记构建辐射松的遗传连锁图谱，Costa 等人［82］利用
AFLP、RAPD和蛋白质标记构建了含有 239 个 AFLP 标记、
127 个 RAPD标记和 31 个分离蛋白的一张长叶松遗传连锁
图谱。
比较基因组研究就是利用共同的分子标记在相关物种
中进行物理或遗传作图，比较这些标记在不同物种基因组中
的分布情况，揭示染色体片段上同线性或共线性的存在，从
而对不同物种的基因组结构及基因组进化历程进行精细分
析。比较基因组作图需要用相同的标记构建不同种的遗传
连锁图，在松科植物中比较基因组作图也取得了一定的进
展，Devey等［83］用 RFLP和 SSR标记构建了火炬松和辐射松
的比较遗传图谱;Brown 等［84］构建了火炬松与湿地松的
RFLP及 EST 的比较遗传图谱;Komulainen 等［85］用 EST、
AFLP及 SSR标记构建了欧洲赤松与火炬松的比较遗传图
谱。Mitchell等［86］将两张不相关的三代群体火炬松连锁图
整合成一张较完整的连锁图，整合后的火炬松遗传连锁图含
有 357 个标记，分属于 12 个连锁群，覆盖火炬松基因组约
1 300cm，整合后的这张连锁图可作为火炬松的一张参考遗
传连锁图，为研究松科植物结构和进化关系奠定了基础。
4 问题与展望
综上所述，分子标记在松科植物种质资源中已有较多的
应用，取得了相应的研究成果。但从报道的情况看还存在以
下问题:(1)目前应用于松科植物的分子标记中，RAPD 技术
用得较多，其他分子标记技术没有被广泛地应用，尤其是一
些较新的分子标记技术在松科植物中没有应用;(2)已构建
的松科植物遗传图谱的标记大部分小于 300 个，密度较低，
不能对简单及复杂的经济性状进行精确定位;(3)我国在松
科植物上这方面的研究还做得很少，研究的广泛与系统性以
及研究的层次与深入的程度上，与国际水平差距较大。因
此，在今后的研究中，应该加强国际国内交流合作，积极主动
地开展这方面的基础性研究，针对松科植物本身的生物学特
性和生产中的突出问题，发展适合松科植物自身特点的理论
和分析方法，开展多种分子标记的研究，提高标记的多态性
和稳定性，构建高密度的遗传连锁图谱、定位重要生长性状
和经济性状，通过有效的选择手段，从古老品种或野生种中
鉴定出一些优良性状基因，并将这些优良遗传物质引入栽培
品种中，拓宽松科植物主要栽培树种的遗传基础，加速松科
植物遗传改良的进程，为种质资源的保护及开发利用提供极
为重要的科学理论依据和良好的技术条件。
参考文献:
［1］邹喻苹，葛颂，王晓东．系统与进化植物学中的分子标记
［M］．北京:科学出版社，2001:1 ～ 8．
［2］李淑娴，尹佟明，邹惠渝，黄敏仁．利用分子标记技术对林
木近缘种进行遗传鉴别的研究［J］． 林业科学，2003，39
(3) :129 ～ 135．
［3］Bobola M． S．，Eckert R． T．，Klein A． S．，et al． Restriction
fragment variation in the nuclear ribosomal DNA repeat unit
within and between Picea rubens and P． mariana［J］． Can J
For RES，1992，(22) :255 ～ 263．
［4］Bobola M． S．，Eckert R． T．，Klein A． S．，et al． Five major
nuclear ribosomal repeats represent a large and variable frac-
tion of the genomic DNA of Picea rubens And P． mariana
［J］． Mol Biol Evol，1992，(9) :125 ～ 137．
［5］Bobola M． S．，Eckert R． T．，Klein A． S．，et al． Using nu-
clear and organelle DNA markers to discriminate among
Picearubens，Picea mariana，and their hybrids［J］． Can J
For Res，1996，(26) :433 ～ 443．
［6］Perron M．，Gordon A． G．，Bousquet J． Species － specific
RAPD fingerprints for the closely related Picea mariana and
P． rubens［J］． Theor Appl Genet，1995，(91) :142 ～ 149．
［7］Khasa P． D．，Dancik B． P．，Rapid identification of white －
Engelmann spruce species by RAPD markers［J］． Theor Ap-
pl Genet，1996，92(1) :46 ～ 52．
［8］Furman B． J，Grattapaglia D．，Dvorak W． S．，et al． Analy-
sis of genetic relationships of central american and mexican-
pines using RAPD markers that distinguish species［J］． Mo-
lecular Ecology，1997，(6) :321 ～ 331．
［9］Germano J．，Klein A． S． ． Species － specific nuclear and
chloroplast single nucleotide polymorphisms to distinguish
Picea glauca，P． mariana and P． rubens［J］． Theor Appl
Genet，1999，99(1) :37 ～ 49．
［10］Scheepers D．，Eloy M． C．，Briquet M． I． dentification of
larch species(Larix decidua，Larix kaempferi and Larix ×
Eurolepis)and estimation of hybrid fraction in seed lots by
RAPD fingerprints［J］． Theor Appl Genet，2000，(100) :71
～ 74．
［11］K． K． Nkongolo，P． Michael and N． S． Kim． Molecular dif-
ferentiation of pine species usinga primer pair［J］． Silvea
genetica，2003，(52) :3 ～ 4．
［12］V． Achere，et． al． Chloroplast and mitochondrial molecular
tests identify European × Japanese larch hybrids［J］． The-
or Appl Genet，2004，(108) :1643 ～ 1649．
［13］国家质量监督检验检疫总局． 落叶松种子鉴定实验方
法———随机扩增多态性 DNA法［M］．北京:中国标准出
版社，2004．
［14］赵阿风．马尾松无性系指纹图谱构建［D］．南京:南京林
业大学学位论文，2005．
［15］曲丽娜．兴安、长白及华北落叶松 RAPD和 ISSR分子标
记的物种特异性鉴定［D］．哈尔滨:东北林业大学学位
论文，2006．
［16］张磊，张含国，李雪峰，等．落叶松种间及无性系间 ISSR
鉴别技术的研究［J］．植物研究，2008，28(2) :216 ～ 221．
［17］郭树杰．利用 RAPD标记对油松种子园进行遗传多样性
研究［D］．西安:西北农林科技大学学位论文，2009．
［18］陈灵芝，马克平，等．生物多样性科学:原理与实践［M］．
上海:科学技术出版社，2001．
［19］Liu Z． L．，Zhan G． F． Populations’genetic variation and
—31—
its implications for conversation of rare and endangered
plants［J］． Chin Biodiver，1999，(4) :340 ～ 346．
［20］张恒庆，刘德利，金荣一，等．天然红松遗传多样性在时
间尺度上变化的 RAPD 分析［J］． 植物研究，2004，24
(2) :204 ～ 210．
［21］邵丹，裴赢，张恒庆．凉水国家自然保护区天然红松种群
遗传多样性在时间尺度上变化的 cpSSR 分析［J］．植物
研究，2007，37(4) :473 ～ 477．
［22］吕建洲，吴隆坤，刘德利，等．凉水、丰林国家自然保护区
红松居群遗传多样性的 RAPD 分析［J］． 植物研究，
2005，25(2) :192 ～ 196．
［23］吴隆坤，李岩．凉水、丰林国家自然保护区红松居群遗传
多样性的 ISSR分析［J］．沈阳师范大学学报:自然科学
版，2005，23(2) :204 ～ 206．
［24］夏铭，周晓峰．天然红松群体遗传多样性的 RAPD 分析
［J］．生态学报，2001，21(5) :730 ～ 737．
［25］张恒庆，安利佳．凉水国家自然保护区天然红松林遗传
变异的 RAPD 分析［J］． 植物研究，2000，20(2) :201 ～
206．
［26］冯富娟，王凤友，李长松，等．长白山不同海拔条件下红
松的遗传分化［J］． 东北林业大学学报，2004，32(3) :1
～ 3．
［27］杨传平，魏利，姜静，等．应用 ISSR—PCR 对西伯利亚红
松 19 个种源的的遗传多样性分析［J］．东北林业大学学
报，2005，33(1) :1 ～ 3．
［28］张冬东． SRAP 对不同地理种源红松遗传结构的研究
［D］．哈尔滨:东北林业大学学位论文，2008．
［29］王洪梅．红松种子园优良无性系遗传结构研究［D］． 哈
尔滨:东北林业大学学位论文，2008．
［30］艾畅，徐立安，赖焕林，等．马尾松种子园的遗传多样性
与父本分析［J］．林业科学，2006:42(11) :146 ～ 150．
［31］朱必凤，陈德学，陈虞禄，等．广东韶关马尾松种子园遗
传多样性分析［J］．福建林业科技，2007，34(3) :1 ～ 5．
［32］张薇，龚佳，季孔庶．马尾松实生种子园遗传多样性分析
［J］．分子植物育种，2008，6(4) :717 ～ 723．
［33］万爱华，徐有明，管兰华，等．马尾松无性系种子园遗传
结构的 RAPD 分析［J］． 东北林业大学学报，2008，36
(1) :18 ～ 22．
［34］杨玉洁，张冬林，杨模华，等．湖南桂阳马尾松种子园遗
传多样性的 ISSR 分析［J］． 中南林业科技大学学报，
2010，30(3) :85 ～ 89．
［35］李丹，彭少麟．三个不同海拔梯度马尾松种群的遗传多
样性及其与生态因子的相关性［J］． 生态学报，2001，21
(3) :415 ～ 421．
［36］刘爱萍． 中国 12 个省(区)马尾松主要种质资源的
RAPD 与 1SSR 分析［D］． 福州:福建农林大学学位论
文，2007．
［37］李志辉，陈艺，张冬林，等．广西马尾松天然林古蓬和浪
水种源群体遗传多样性 ISSR 分析［J］．中国农学通报，
2009，25(16) :116 ～ 119．
［38］李毳．油松天然种群遗传多样性及系统地位分析［D］．
太原:山西大学博士学位论文，2008．
［39］周飞梅．陕西地区油松天然群体遗传结构的 RAPD分析
［J］．东北林业大学学报，2008，36(12) :1 ～ 3．
［40］王磊．我国油松主要分布区群体遗传多样性的 RAPD技
术研究［D］．西安:西北农林科技大学学位论文，2009．
［41］郝真真．油松遗传多样性与空间遗传结构研究［D］． 太
原:山西大学学位论文，2009．
［42］Strauss S． H．，Hong Y． P．，and Hipkins V． D．，High lev-
els of population differentiation for mitochondrial DNA hap-
lotypes in Pinus radiata，Muricata，and Attenuata［J］． Theor
Appl Genet．，1993，86(5) :605 ～ 611．
［43］Hong Y． P．，Hipkins V． D．，and Strauss S． H．，Chloroplast
DNA diverdity among trees，populations and species in the
Califormia closed － conepine(Pinus radiata，Pinus miuricata
and Pinus attenuata) ［J］． Genetics，1993，(135) :1187 ～
1196．
［44］Hamelin R． C．，Beaulien J．，and Plourde A． Genetic diver-
sity in populations of Cronartium ribicolain plantations and
natural stands of Pinus strobes［J］． Theor Appl Genet，
1995，91(8) :1214 ～ 1221．
［45］Vicario F．，Vendramin G．，Rossi P． Allozyme，chroro-
plast DNA andRAPD markers for determining genetic rela-
tionship betweenAbies albaand the relic population ofAbies
nebrodensis［J］． Theor Appl Genet，1995(90) :1012 ～
1018．
［46］Szmidt A． E．，Wang X． R．，and Lu M． Z．，Empirical as-
sessment of allozyme and RAPD variation in Pinus lvestris
(L．)using haploid tissue analysis［J］． Heredity，1996，
(76) :412 ～ 420．
［47］Bobola M． S．，Eckert R． T．，Klein A． S．，et al． Using nu-
clear and organelle DNA markers to discriminate amongPi-
cea rubens，Picea mariana，and their hybrids［J］． Can JFor
Res，1996，(26) :433 ～ 443．
［48］Echt C． S．，Verno L． L．，Anzidei M．，et al． Chloroplast
microsatellite reveal population geneticdiversity in redpine，
Pinus Resinosa Ait［J］． Molecular Ecology，1998，7(3) :
307 ～ 316．
［49］Lerceteau E．，and Szmidt A． E． Properties of AFLP mark-
ers in inheritance and genetic diversity studies of Pinus syl-
vestris L［J］． Heredity，1999，82(3) :252 ～ 260．
［50］Rajor O． P． Genetic biodiversity impacts of silvicultural
practices and phenotypic selection in white spruce［J］．
Theor Appl Genet，1999，99(6) :954 ～ 961．
［51］Collignon A． M．，Favre J． M． Contribution to the postgla-
cial history at the western margin ofPicea abies’natural Ar-
ea rsing RAPD markers［J］． Ann Bot，2000，(85) :713 ～
722．
［52］Karhu A．，Dieterich J． H．，and Savolainen O． Rapid ex-
pansion of microsatellite sequences in pines［J］． Mol Biol
Evol，2000，17(2) :259 ～ 265．
［53］易能君，韩正敏，尹佟明，等．湿地松抗病种子园的遗传
多样性分析［J］．林业科学，2000，36(S1) :51 ～ 55．
［54］Mariette S．，Chagne D．，Lezier C．，et al． Genetic diversity
within and among Pinus pinaster populations:comparison
between AFLP and microsatellite markers［J］． Heredity，
2001，86(4) :469 ～ 479．
［55］Vikram E． Chhatre． Island population establishment and
genetic structure of Picea abies(L．) ［D］． Sweden:Ar-
betslivsinstitutet，Ume．，2001．
—41—
［56］Kraj M． The estimation of genetic variation within and be-
tween Polish provenances of Norway spruce〔Picea abies
(L．)Karst．〕on the basis of RAPD polymorphism［J］．
Electr J Polish Agric Univ(Forestry) ，2002，5(2)Available
Online．
［57］唐娟娟．黄山松分子标记图谱构建及群体遗传多样性分
析［D］．杭州:浙江大学学位论文，2002．
［58］Diaz V．，and Ferrer E． Genetic variation of populations of
Pinus oocarpa revealed by resistance gene analog polymor －
phism(RGAP) ［J］． Genome，2003，(46) :404 ～ 410．
［59］张志勇，李德铢．极度濒危植物五针白皮松的保护遗传
学研究［J］．云南植物研究，2003，25(5) :544 ～ 550．
［60］王秋玉，任旭琴，姜静．红皮云杉地理种源遗传多样性的
RAPD分析［J］．东北林业大学学报，2004，32(6) :1 ～ 3．
［61］张新叶，白石进，黄敏仁．日本落叶松群体的叶绿体 SSR
分析［J］．遗传，2004，26(4) :486 ～ 490．
［62］税珺，黄少伟，陈炳铨，等．火炬松原生种源和引种群体
RAPD遗传多样性［J］． 华南农业大学学报，2005，26
(3) :74 ～ 81．
［63］周志强，郝雨，刘彤，等．大兴安岭北段天然樟子松林遗
传多样性与主要生态因子的相关性研究［J］．北京林业
大学学报，2006，28(6)22 ～ 27．
［64］那冬晨，杨传平，姜静，等．利用 ISSR标记分析兴安落叶
松种源的遗传多样性［J］． 2006，31(1) :1 ～ 4．
［65］刘占林，杨雪． 5 种松树的遗传多样性和遗传分化研究
［J］．西北植物学报，2007，27(12) :2385 ～ 2392．
［66］Tulsieram L． K．，Glaubitz J． C．，and Kiss G． Single tree
genetic linkage mapping in confiers using haploid dna
megagmetophytes，Biotechnology［J］． 1992，(18) :689 ～
692．
［67］Nelson C． D．，Nance W． L．，and Doudrick R． L． A partial
genetic linkage map of slash pine(Pinus elliottii Engelm
var． elliottii)base on random amplified polymorphic DNAs
［J］． Theor Appl Genet，1993，(87) :145 ～ 151．
［68］Nelson C． D．，Kubisiak T． L．，Stine M．，and Nance W． L．
A genetic linkage map of longleaf pine(Pinus palustris
Mill．)based on random amplified polymorphic DNAs，The
Journal of Heredity［J］． 1994，85(6) :433 ～ 439．
［69］Devey M． E．，Fiddler T． A．，Liu B． H．，et al． An RFLP
linkagemap for loblolly pine based on three － generation
outbred pedigree［J］． Theor Appl Genet，1994，88(3 － 4) :
273 ～ 278．
［70］Plomion C．，Omalley M．，and Durel C． E． Genomic analy-
sis in maritime pine(Pinus pinaster)comparison of two
RAPD maps using selfed and open － pollinated seeds of the
same individual［J］． Theor Appl Genet，1995，90(7 － 8) :
1028 ～ 1034．
［71］Yazdani R．，Yeh F． C．，and Rimsha J． Genomic mapping
of Pinus sylvestris(L．)using random amplified polymor-
phic DNA markers［J］． Forest Genetics，1995，2(2) :109 ～
116．
［72］Kaya Z．，and Neal D． B． Linkage mappingin Turkish pine
(Pinus brutia Ten)using random amplified polymorphic
DNA (RAPD)markers［J］． Silvec Genetiea，1995，44:110
～ 116．
［73］Plomionc，Omal Leydm，Durelce． Genomic analysis in mar-
itime pine (Pinus － Pinaster)·Comparison oftwo RAPD
maps using selfed and open － pollinated seeds of the same
individual［J］． Theor Appl Genet，1995，(90):1028 ～1034．
［74］Echt C． S．，and Nelson C． D． Linkage mapping and genome
length in eastern white pine(Pinus strobes L．) ［J］． Theor
Appl Genet，1997，94(8) :1031 ～ 1037．
［75］尹佟明，黄敏仁，王明庥，等． 利用 RAPD 标记和单株树
大配子体构建马尾松的分子标记连锁图谱［J］．植物学
报，1997，39(7) :607 ～ 612．
［76］Binelli G．，and Bucci G． A genetic linkage map of Picea
abies Karst．，based on RAPD markers，as a tool in popula-
tion genetics［J］． Theor Appl Genet，1994，88(3 － 4) :283
～ 288．
［77］Bucci G．，Kubisiak T． L．，Nance W． L．，and Menozzi P． A
population consensus partial linkage map of Picea abies
Karst． based on RAPD markers［J］． Theor Appl Genet，
1997，95(4) :643 ～ 654．
［78］Remington D． L．，Whetten R． W．，Liu B． H．，and O＇Malley
D． M． Construction of an AFLP genetic map with nearly
complete genome coverage in Pinus Taeda［J］． Theor Appl
Genet，1999，98(8) :1279 ～ 1292．
［79］Travis S． E．，Ritland K．，Whiteham T． G．，and Keim P． A
genetic map Pinyon pine(Pinusedulis)based on amplified
fragment length poymorphisms［J］． Theor Appl Genet，
1998，97(5 － 6) :871 ～ 880．
［80］Yin T． M．，Wang X． R．，Anderson B．，and Lerceteau E．
Nearly complete genetic maps of Pinus Sylvestris L．
(Scotspine)constructed by AFLP marker analysis in a full
－ sib family［J］． Theor Appl Genet，2003，106(6) :1075 ～
1083．
［81］Devey M． E．，Bell J． C．，Smith D． N．，Neale D． B．，and
Moran G． F． A genetic linkagemap for Pinus radiata based
on RFLP，RAPD，and microsatellite markers［J］． Theor
Appl Genet，1996，92(6) :673 ～ 679．
［82］Costa P．，Pot D．，Dubos C．，et al． A genetic map of Mari-
time pine based on AFLP，RAPD and protein markers［J］．
Theor Appl Genet，2000，(100) :39 ～ 48．
［83］Devey M． E．，Vren T． L．，Neale D． B．，and Sewell M． M．
Comparative mapping in loblolly and radiata pine using
RFLP and microsatellite markers［J］． Theor Appl Genet，
1999，99(3 － 4) :656 ～ 662．
［84］Brown G． R．，Edward E． K．，Daniel L． B．，et al． Anchored
reference loci in loblolly pine(Pinus taeda L．)for integra-
ting pine［J］． Genomics，2001，(159) :799 ～ 809．
［85］Komulainen P．，Brown G． R．，Mikkonen M．，et al． Compa-
ring EST － based genetic maps between Pinus sylvestris and
Pinus taeda［J］． Theor Appl Genet，2003，107(4) :667 ～
678．
［86］Mitchell M． S．，Bradley K． S． and David B． N． A consensus
map for loblolly pine(Pinus taeda)． I． Construction and in-
tegration of individual linkage maps from two outbred three
－ generation pedigrees［J］． Genetics，1999，(151) :321 ～
330．
责任编辑:王洪军
—51—