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·中药与天然药物·
不同产地 、部位和采收期的缬草属植物中缬草素成分含量比较
倪　兰1 ,陈　磊2＊(1.中国人民解放军第 313医院药械科 葫芦岛市 125000;2.南京军区福州总医院药学科
福州 350025)
摘要:目的　测定不同产地 、部位和采收期的缬草属植物中 3种缬草素成分的含量。方法　采用 RE-HPLC进行测定。结果　缬草类生药蜘
蛛香 、缬草 、宽叶缬草和黑水缬草之间缬草素类成分含量差异显著 ,其中以蜘蛛香含量最高 ,缬草次之 ,宽叶缬草再次 , 黑水缬草含量最低。不同
产地的蜘蛛香中缬草素类成分含量差异较大 ,其中以贵州贵阳蜘蛛香含缬草素类成分最高。 不同产地的缬草中缬草素类成分含量差异也较明
显 ,其中以重庆南川产缬草中含缬草素类成分最高。缬草属植物地下部分缬草素类成分含量比地上部分含量高。不同采收期蜘蛛香和缬草药
材中缬草素类成分的含量测定结果表明:蜘蛛香和缬草均以 9月采收的药材中缬草素类成分含量较高。结论　不同产地 、部位和采收期的缬
草属药用植物中缬草素类成分差异明显。
关键词:缬草属植物;缬草素;二氢缬草素;乙酰缬草素;反相高效液相
中图分类号:R284.1　文献标识码:A　文章编号:1006-3765(2010)-08-0044-03
作者简介:倪兰 ,女(1980.8-)。毕业于上海市第二军医大学 ,药学 ,
药师。联系电话:13860667094 , 15942939519。
＊通讯作者:陈磊 , Tel:(0591)22859466 , E-m ail:chenl974lei @
sina.com
　　蜘蛛香(Valeriana jatamansi Jones)、缬草(V.officinalis L)、
宽叶缬草(V.officinalis L var Ilatifolia Miq)和黑水缬草
(V.amurensis Smir.ex Kom)均为败酱科缬草属的植物。蜘
蛛香主治脘腹胀痛 、消化不良 、腹泻 、痢疾等疾病 , 曾收载于
1977 年版中国药典(一部)〔1〕。缬草在民间用于治疗神经衰
弱 、失眠等疾病。宽叶缬草和黑水缬草在个别地方作缬草
用〔2〕。在这 4 种生药中 , 缬草素类成分是其镇静催眠活性的
主要成分之一〔3〕。我们对不同产地和不同部位的上述 3种缬
草类生药中的 3 种缬草素类成分———缬草素(valtr ate)、二氢
缬草素(didro valtrate)和乙酰缬草素(acevaltrate)作一含量测
定 ,以期为合理利用缬草类生药提供理论依据 。
1　仪器和试药
Waters 高效液相系统(Waters600E 四元泵 、Waters996 紫
外检测器 、Waters脱气机)。 甲醇为色谱纯 , 水为超纯水。缬
草素 、二氢缬草素和乙酰缬草素为自制 , 并经光谱鉴定 ,HPLC
检测为单一峰。药材样品(见表 1),均为同年 7 月采集 , 并经
作者鉴定。
表 1　各样品的名称 、部位和来源
样品号 名称 部位 采集地
1 蜘蛛香 根茎及根 云南开远
2 蜘蛛香 地上全植株 云南开远
3 蜘蛛香 根茎及根 贵州安顺
4 蜘蛛香 根茎及根 贵州兴义
5 蜘蛛香 根茎及根 贵州贵阳
6 缬草 根茎及根 重庆南川
7 缬草 地上全植株 重庆南川
8 缬草 根茎及根 甘肃武都
·44·
海峡药学　2010年　第 22卷 第 8期
样品号 名称 部位 采集地
9 缬草 地上全植株 甘肃武都
10 缬草 根茎及根 陕西留坝
11 缬草 地上全植株 陕西留坝
12 宽叶缬草 根茎及根 浙江天目山
13 宽叶缬草 地上全植株 浙江天目山
14 黑水缬草 根茎及根 黑龙江佳木斯
2　实验方法
2.1　色谱条件　Symmerry C1 8色谱柱(250mm ×3.9mm ,
5μm);流动相:甲醇-水(80∶20);检测波长:缬草素和乙酰缬
草素为 256nm ,二氢缬草素为 206nm;柱温:室温。
图 1　缬草素和乙酰缬草素对照品 HPLC图(256nm)
1.缬草素;2.乙酰缬草素(图 3同)
图 2　二氢缬草素对照品 HPLC图(206nm)
3.二氢缬草素(图 4同)
图 3　样品 1 HPLC图(256nm)
2.2　线性范围考查　取缬草素适量 , 用甲醇配成不同浓度的
对照品溶液 ,按选定的色谱条件 , 分别进样 20μL ,同一浓度的
对照品溶液进样 3 次 ,取平均值:以对照品峰面积(A)对进样
量μg 进行线性回归 ,得到缬草素回归方程为:A=238789.76
+1356787.99V , r=0.9998。同法求得二氢缬草素的回归方
程为:A=-9597.68 +767994.74V , r=0.9992;乙酰缬草素
的回归方程为:A =635576.01 +1495987.81V , r=0.9992。
实验结果表明:缬草素在 0.25～ 5.0μg 范围内 ,二氢缬草素在
0.27～ 5.9μg范围内 , 乙酰缬草素在 0.28 ～ 5.7μg 范围内线
性良好。
图 4　样品 1 HPLC图(206nm)
图 5　不同采收期蜘蛛香中 3种缬草素总含量比较
图 6　不同采收期缬草中 3种缬草素总含量比较
2.3　样品溶液制备　将药材干燥粉碎,过肋目筛, 40℃烘干,每
份样品精密称取适量 ,加入甲醇 30mL进行超声提取, 共提取 3
次 ,每次 40min ,用 0.45μm 微孔滤膜过滤 ,定容为 100mL, 进行
HPLC测定,每个样品液重复测定5 次,取平均值。
2.4　精密度试验　取同一样品溶液 , 重复进样 5 次 , 每次
20μL , 缬草素 、二氢缬草素和乙酰缬草素的 RSD 分别为 4 ,
6%、2.3%、2.4%。
2.5　回收率试验　精密量取药材(已知含量)适量 ,分别精密
加入对照品缬草素 、二氢缬草素和乙酰缬草素溶液适量 , 挥干
溶剂后 , 用 2.3 项下方法提取和测定。取 5 次测定的平均值
计算回收率。平均回收率:缬草素为 98.3%(RSD 为 3.0%),
二氢缬草素为 100 , 6%(RSD 为 1.8%), 乙酰缬草素为 99 ,
3%(RSD为 2.8%)。
·45·
Strait Pharmaceutical Journal Vol 22 No.8 2010
2.6　稳定性实验　室温下 , 将新制备样品液于室内避光放
置 ,每隔 4h 测定 1 次。结果表明缬草素(峰面积 RSD 为
2.6%, n=13)、二氢缬草素(峰面积 RSD为 1.5%, n=13)和
乙酰缬草素(峰面积 RSD为 2.0%, n=13)的峰面积在 48h 内
保持稳定。
2.7　重现性试验　用2.3项下方法制备同一批样品的供试液
5 份 ,在上述色谱条件下取 20μL 进样 , 测定并计算 3 种缬草
素含量 , 结果缬草素 RSD 为 1.08%、二氢缬草素 RSD 为
0.76%、乙酰缬草素 RSD为 1.95%。
2.8　不同产地 、不同部位缬草类生药中 3 种缬草素含量测定
结用(见表 2)。
表 2　不同产地 、不同部位缬草类生药中三种缬草素含量测定结果(n=5)
样品号 缬草素/ % 二氢缬草素/ % 乙酰缬草素/ % 3种缬草素总含量/ %
1 1.871 0.218 0.147 2.236
2 0.310 0.119 0.338 0.767
3 1.532 0.334 0.240 2.106
4 2.772 0.456 0.261 3.489
5 3.141 0.714 0.517 4.372
6 0.141 0.078 0.054 0.273
7 0.016 — 0.002 0.018
8 0.157 0.032 0.020 0.209
9 0.003 — 0.001 0.004
10 0.124 0.025 0.015 0.164
11 0.003 — 0.001 0.004
12 0.003 0.013 0.064 0.080
13 0.001 — — 0.001
14 0.020 0.003 0.019 0.042
“—”表示痕量或未检出
2.9　不同采收期的缬草和蜘蛛香中3种缬草素的含量测定结
果(见表 3 、4 、图 5 、图 6)。
表 3　不同采收期蜘蛛香(贵州贵阳)含量测定结果(参见图 5)n=5
不同采收期(月) 缬草素/ % 二氢缬草素/ % 乙酰缬草素/ % 总含量/ %
7 3.141 0.714 0.517 4.371
8 4.122 1.104 0.729 5.955
9 8.373 1.213 1.005 10.591
10 7.922 0.909 0.915 9.746
11 5.333 0.524 0.432 6.289
表 4　不同采收期缬草(重庆南川)含量测定结果(参见图 6)n=5
不同采收期(月) 缬草素/ % 二氢缬草素/ % 乙酰缬草素/ % 总含量/ %
5 0.052 0.037 0.028 0.117
6 0.073 0.052 0.041 0.166
7 0.141 0.078 0.054 0.273
8 0.204 0.048 0.065 0.317
9 0.483 0.032 0.078 0.593
10 0.404 0.022 0.080 0.506
11 0.193 0.010 0.052 0.255
3　讨论
3.1　实验结果表明　缬草类生药蜘蛛香 、缬草 、宽叶缬草和
黑水缬草之间缬草素类成分含量差异显著 , 其中以蜘蛛香含
量最高 , 缬草次之 ,宽叶缬草再次 , 黑水缬草含量最低。不同
产地的蜘蛛香中缬草素类成分含量差异较大 , 其中以贵州贵
阳蜘蛛香含缬草素类成分最高。不同产地的缬草中缬草素类
成分含量差异也较明显 ,其中以重庆南川产缬草中含缬草素
类成分最高。缬草属植物不同部位之间缬草素类成分含量差
异显著 , 地下部分比地上部分含量高。
3.2　不同采收期蜘蛛香和缬草药材中缬草素类成分的含量
测定结果表明:蜘蛛香和缬草均以在 9 月采收为宜。
3.3　蜘蛛香地上全植株样品含缬草素类成分较高 , 甚至超过
了其它缬草属植物根茎及根中缬草素类成分的含量 , 具有很
好的开发利用价值。
3.4　二氢缬草素在紫外区基本无吸收 ,仅在近紫外区 204nm
左右有末端吸收。实验表明 , 波长越长 , 噪音越小 , 灵敏度越
低 , 故选择 206nm 为测定波长。
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海峡药学　2010年　第 22卷 第 8期