全 文 ：北方园艺 2008(5):43～ 44 ·研究简报 ·
第一作者简介:祝朋芳(1971-),女 ,博士 ,副教授 ,从事观赏园艺植
物育种研究。 E-mail:peng fangzhu@yahoo.com.cn。
基金项目:辽宁省教育厅科学研究计划资助项目(20040329)。
收稿日期:2007-12-16
芸薹属种间 F1与羽衣甘蓝回交亲和性及子房培养研究
祝 朋芳 , 张 　月
(沈阳农业大学林学院 ,辽宁沈阳 110161)
　　摘　要:以大白菜与羽衣甘蓝CMS种间杂种F1为母本 ,以羽衣甘蓝自交系为父本进行回交 ,
并对杂交子房进行了离体培养。结果表明:上述亲本间存在较强的生殖隔离 ,花期杂交不结实 ,
蕾期重复授粉提高了亲和力。授粉后9 d的杂交子房进行挽救培养效果最佳 ,离体条件下结籽率
10%。其次为授粉后 12 d及 6 d的子房 ,结籽率分别为 5%和 4.4%。外源激素及其配比对子房
离体结实具有极显著影响 ,以 BA 2+NAA 0.1最佳 ,结籽率为9%;其次为 BA 2+NAA 0.2 ,结籽
率为 3%;BA 2+NAA 0.3及无激素 MS培养基上均未获得饱满种子。
关键词:种间F1 ;羽衣甘蓝;回交;亲和性;离体培养
中图分类号:S 635.903.6　文献标识码:A　文章编号:1001-0009(2008)05-0043-02
　　羽衣甘蓝(Brassica oleracea var.acephala DC.)是十
字花科芸薹属植物 ,观赏价值高 ,耐寒性强。大白菜与
羽衣甘蓝 CMS种间杂种 F1是在试验中获得的中间育种
材料[ 1] ,试验旨在通过上述种间杂种与羽衣甘蓝回交 ,
探讨种间回交过程的可交配性 ,定向转育羽衣甘蓝重要
观赏性状 ,为选育出羽衣甘蓝 CMS 雄性不育系奠定
基础。
1　材料与方法
1.1　试验材料
大白菜与羽衣甘蓝CMS种间杂种 G3 ,羽衣甘蓝自
交系 A1(05-17-18)、A2(05-13-5)。
1.2　方法
1.2.1　回交　回交试验于 2006年在沈阳农业大学植物
园进行 ,以G3为母本 ,A1、A2为父本 ,人工花期及蕾期
授粉。角果成熟时按组合收获 ,统计膨大角果数 、种子
数 ,并计算结角率和结实率。结角率(%)=膨大的角果
数/授粉花朵数×100 ,结实率(%)=饱满种子数/授粉
花(蕾)数×100。
1.2.2　子房培养　取授粉后 6 、9、12 、15 d的子房 ,先用
70%乙醇表面处理 30 s ,再用 0.1%HgCl2消毒 4min ,无
菌水冲洗 5次 ,接种在 MS+BA 2(mg/L ,下同)+NAA
0.1培养基上。蔗糖 30 g/L ,琼脂 6.5 g/ L ,培养室温度
(25±2)℃,光强 1 000 ～ 1 500 lx ,16 h/d。激素配比试验
中 ,以授粉后 9 d的子房为外植体 ,以无激素 MS 为对
照 ,每处理接种30个子房 ,重复 3次。
2　结果与分析
2.1　花期 、蕾期授粉亲和性比较
表 1结果表明 ,花期授粉时 ,以A1、A2为父本的结
角率分别为 6.47%和 9.4%,但结实率均为 0。而在蕾
期授粉时 ,结角率明显提高 ,分别为55.08%和44.12%,
并均可获得饱满的种子 , 结实率分别为 3.56%和
1.18%。由此可见 ,与花期授粉相比 ,蕾期授粉是克服上
述回交障碍的有效方法 ,这与种间初始杂交结果
类似[ 1] 。
　　表 1　　　　花期 、蕾期授粉亲和性比较
杂交
组合
授粉
时期 授粉数 结角数 种子数
结角率
/ %
结实率
/ %
G3×A1 花期 170 11 0 6.47 0
蕾期 590 325 21 55.08 3.56
G3×A2 花期 190 18 0 9.4 0
蕾期 170 75 2 44.12 1.18
2.2　子房日龄对离体培养的影响
表 2结果表明 ,授粉后 9 d的子房培养效果最佳 ,结
籽率为 10%。其次为授粉后 12 d及 6 d(结籽率分别为
5%和4.4%)。授粉后 15 d的子房培养后没有获得种
子 ,此时子房长约 2 cm ,子房壁已木质化。
　　表 2　　　子房日龄对离体培养的影响
子房日龄/d 接种子房数 收获种子数 结籽率/ %
6 45 2 4.4
9 40 4 10
12 40 2 5
15 45 0 0
2.3　外源激素及其配比对子房培养的影响
子房培养 3周后 ,3种激素组合均在子房接触培养
基处产生愈伤组织。其中 Ⅲ号最多 ,呈聚生状 ,4周后逐
渐有丛生苗分化 ,这些丛生苗的过度生长影响了子房的
进一步发育。培养6周后调查(表3),在Ⅰ号和Ⅱ号培养
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基上均收获到了饱满的成熟种子 ,而 Ⅲ号及对照培养基
上仅见膨大的空瘪珠被组织 ,均未见成熟种子。方差分
析结果表明 ,4种培养基(含对照)上子房离体结实率差
异极显著(F=64.07>3.34=F0.01),其中Ⅰ号培养基效果
最好 ,平均结籽率为9%。其次为Ⅱ号培养基 ,平均结籽
率为 3%。
　　表 3　　　激素对子房离体培养的影响
培养基编号 激素组合 收获种子数 平均结籽率/ %
Ⅰ BA2+NAA0.1 11 9
Ⅱ BA2+NAA0.2 4 3
Ⅲ BA2+NAA0.3 0 0
对照 BA0+NAA0 0 0
3　讨论
芸薹属不同染色体组间远缘杂交时 ,即使通过有效
方法克服生殖隔离 ,但由于染色体数目不同 ,导致种间
F1花粉母细胞减数分裂异常 ,表现在花期授粉结实率为
0 ,蕾期授粉虽获得了饱满种子 ,但结实率极低 ,这表明
回交过程仍然存在较严重障碍。离体挽救技术已成为
有效获得远缘后代的手段之一[ 2] ,试验主要研究了子房
取材时间 、外源 BA及 NAA的变化对子房离体结实的
影响 ,试验结果与芸薹属内其他相关研究的细微差异可
能与试验材料有关[ 3] 。试验采用子房培养获得了较多
BC1饱满种子 ,为成功获得回交后代提供了保证 ,这些宝
贵中间育种材料的获得为进一步选育出羽衣甘蓝雄性
不育系奠定了基础。
参考文献
[ 1] 　祝朋芳,魏毓棠.Ogura胞质大白菜和羽衣甘蓝种间杂交的亲和性
[ J] .园艺学报, 2006, 33(5):1090-1092.
[ 2] 　张国庆,唐桂香 ,周伟军.白菜型油菜和甘蓝杂交子房培养初步研究
[ J] .中国农业科学, 2003, 36(11):1409-1413.
[ 3] 　周清元,李加纳 ,殷家明 ,等.白菜型油菜和羽衣甘蓝种间杂交的初
步研究[ J] .西南农业大学学报(自然科学版), 2003, 25(6):495-497.
Studies on Backcross Compatibility Between Brassica Hybrid F1 and
B.oleracea var.acephala andOvary Culture
ZH U Peng-fang , ZHANG Yue
(Fo restry Co llege , Shenyang Agricultural University , Shenyang , Liaoning 110161 , China)
Abstract:The paper studied on backcross between Brassica hybrid F1 and B.oleracea var.acephala.The results indicated
that there was an obvious segregation between the above parents , which could not give birth to new seeds normally.
More times pollination at bud stage enhanced compatibility.The ovaries f rom that of 9 day s after pollination was the best
time of materials , with the rate of seeds 10%.Ovaries of 12 days and 6 days af ter pollination were secondary , with the
rates of seeds 5% and 4.4% respectively.Hormone prescriptions had marked ef fects to achieving seeds , where BA 2+
NAA 0.1 did best , with the rate of seeds 9%, then BA 2+NAA 0.2.BA 2+NAA 0.3 and empty MS did not succeed.
Keywords:Brassica hybrid F1 ;Kale;Backcross;Compatibility;Ovary culture
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