全 文 ：的条带数 , NAB则表示 A、B两个基因型共有的条带
数 。F值越大 ,表示其亲缘关系越近;F值越小 ,表
示其亲缘关系越远。结果显示海风藤的相似系数范
围分布较窄 ,说明其遗传关系不太复杂 ,具有一定的
遗传多态性。 1 ～ 9号样品的相似系数在 0.468 ～
0.754之间 ,遗传距离比较接近 ,但也表现出了较大
的区域特异性。其中 7号样品与其他 8个样品间的
相似系数在 0.468 ～ 0.621,其中有 3个相似系数小
于 0.5,说明它与其它采集地植物间遗传距离较大 。
通过经典方法鉴别 ,福建市售海风藤均系以当地产
的胡椒科胡椒属植物山蒟作替代品 ,它与海风藤同
科同属不同种 ,因此与各地海风藤之间相似系数较
小 ,遗传差异较大 , RAPD法可以有效的将它们区别
开来。
5 结论
采用 RAPD技术 ,筛选出 10条引物 ,扩增出 10
张清晰 DNA图谱 ,充分展示海风藤药材的遗传多样
性。相似系数的计算结果显示 ,山蒟与不同采购地
海风藤之间的相似性较小。由此判断药材海风藤和
山蒟在 DNA分子水平上有一定差异 。
参 考 文 献
[ 1] 国家药典委员会 .中华人民共和国药典 .一部 .北京:
化学工业出版社 , 2005:206-207.
[ 2] 梅全喜 .现代中药药理与临床应用手册 .北京:中国中
医药出版社 , 2008:641.
[ 3] 孙绍美 , 於兰 ,刘俭 , 等.海风藤及其代用品药理作用的
比较研究 .中草药 , 1998, 29(10):677-679.
[ 4] 王培训 , 周联 ,赖小平 .分子生物学技术与中药鉴别 .
广州:广东世界图书出版公司 , 2002:92.
[ 5] 罗恒 , 王和勇 ,孙敏 .应用 RAPD快速鉴别中药材海风
藤及其代用品 .中医药学报 , 2004, 32(5):33-36.
(2008-02-18收稿)
四种缬草属药用植物的近红外漫
反射指纹图谱聚类分析
黄宝康 1 ,黄流清2 ,秦路平 1 ,赵忠新 2 ,陆 峰1 ,郑汉臣 1
(1.第二军医大学药学院 ,上海 200433; 2.第二军医大学长征医院 ,上海 200003)
摘要 目的:对四种国产缬草属药用植物及不同居群样品进行指纹图谱分析鉴定 , 探讨其种间种内变异现象。
方法:用近红外指纹漫反射光谱技术及聚类分析方法对不同缬草样品进行聚类分析。结果:缬草属四种药用植物
即中国缬草 、宽叶缬草 、蜘蛛香 、黑水缬草与欧缬草的指纹图谱存在明显差异 , 不同居群缬草之间也存在一定差别。
结论:该方法可用于缬草药材的种间鉴定 , 近红外漫反射指纹图谱也可用于分析种内变异 , 快速方便。 不同居群缬
草之间的差异表明缬草存在广泛的种内变异现象。
关键词 缬草属;近红外漫反射光谱;聚类分析;种内变异
中图分类号:R282.71 文献标识码:A 文章编号:1001-4454(2008)10-1494-03
基金项目:上海联合利华研究与发展基金(06SU07005);国家自然科学基金(30270152)作者简介:黄宝康(1969-),男,博士 ,副教授 ,主要从事中药及天然药物的研究与开发;Tel:021-25070395, E-mail:hbkcn@163.com。
缬草 ValerianaoficinalisL.为败酱科缬草属植
物 ,又名欧缬草。在欧美被广泛应用于治疗轻 、中度
失眠 ,或作为镇静剂用来改善睡眠 〔1〕。缬草属植物
全世界约有 200余种 ,分布于欧亚大陆 、南美和北美
中部。在中国有一些种类供药用和香料用 ,主要有
中国缬草 V.pseudoficinalis、蜘蛛香 V.jatamansi、宽
叶缬草 V.oficinalisvar.latifolia和黑水缬草 V.
amurensis, 以宽叶缬草分布较为广泛〔2〕。由于缬草
分布区域广泛 ,从我国的新疆 、内蒙到云南均有分
布 ,并存在广泛的种内变异现象 ,不同居群植株的形
态 、化学成分及其含量差异很大 ,使药材的基源鉴定
和原料的质量控制受到严重影响 。陈虎彪等曾对国
产药用缬草近缘种进行过形态分类研究 ,认为我国
产的药用缬草近缘种与欧洲产缬草在化学成分与形
态方面均有较大的差别 〔3〕。近红外漫反射光谱
(NIRDRS)近几年发展较快 ,不但可用于定性分析 ,
还可以进行定量分析某些成分 。为了建立一种快
速 、简便的药材鉴别方法 ,并对国产缬草属植物种间
及种内变异进行研究 ,本实验采用近红外漫反射光
谱结合聚类分析法对我国国产的四种欧缬草近缘种
·1494· 中药材 JournalofChineseMedicinalMaterials 第 31卷第 10期 2008年 10月DOI :10.13863/j.issn1001-4454.2008.10.019
植物进行了种间种内的分析比较。
1 仪器和材料
Vector22 /N型傅立叶变换近红外光谱 (德国
Bruker公司)。四种国产缬草属药用植物样品为于
7月至 9月采挖的地下部分 。部分样品为同时采集
不同生境的居群样品。药材样品购自药材市场。欧
缬草为用种子在本校药用植物园播种所得。所有样
品均经第二军医大学药学院生药学教研室鉴定。样
品编号及来源见表 1。
2 方法
表 1 缬草样品来源表
编号 名称 来源 编号 名称 来源
V.1 V.officinalisvar.latifolia 南川
V.2 V.officinalisvar.latifolia 南川
V.3 V.officinalisvar.latifolia 南川
V.4 V.officinalisvar.latifolia 天目山
V.5 V.officinalisvar.latifolia 天目山
V.6 V.officinalisvar.latifolia 天目山
V.7 V.officinalisvar.latifolia 黄山
V.8 V.officinalisvar.latifolia 贵州
V.9 V.officinalisvar.latifolia 贵州
V.10 V.officinalisvar.latifolia 贵州
V.11 V.pseudofficinalis 南川
V.12 V.pseudofficinalis 南川
V.13 V.pseudofficinalis 五台山
V.14 V.pseudofficinalis 五台山
V.15 V.officinalis 比利时
V.16 V.officinalis 捷克
V.17 V.officinalis 波兰
V.18 V.officinalisvar.latifolia 武都
V.19 V.officinalisvar.latifolia 武都
V.20 V.pseudofficinalis 北京
V.21 V.officinalisvar.latifolia 凤凰
V.22 V.officinalisvar.latifolia 凤凰
V.23 V.officinalisvar.latifolia 九江
V.24 V.officinalisvar.latifolia 九江
V.25 V.pseudofficinalis 甘肃
V.26 V.pseudofficinalis 甘肃
V.27 V.amurensis 鸡西
V.28 V.amurensis 鸡西
V.29 V.amurensis 沈阳
V.30 V.jatamansi 成都
V.31 V.jatamansi 成都
V.32 V.jatamansi 贵州
V.33 V.jatamansi 贵州
V.34 V.jatamansi 贵州
V.35 V.jatamansi 峨眉山
V.36 V.jatamansi 峨眉山
V.37 V.jatamansi 药材
V.38 V.jatamansi 药材
V.39 V.jatamansi 药材
V.40 V.jatamansi 云南
V.41 V.jatamansi 云南
V.42 V.jatamansi 重庆
V.43 V.jatamansi 重庆
V.44 V.jatamansi 南川
V.45 V.jatamansi 南川
V.46 V.jatamansi 贵州
V.47 V.jatamansi 贵州
图 1 不同缬草样品的 NIRDRS指纹图谱聚类图
·1495·中药材 JournalofChineseMedicinalMaterials 第 31卷第 10期 2008年 10月
测定方式:积分球漫反射;扫描次数:64次;扫
描范围:3700 ～ 12000 cm-1;分辨率:4 cm-1。缬草样
品药材经净选后 , 60℃干燥 ,粉碎过 60目筛 ,取约 2
g置测量杯中 ,以金箔为参比 , 按实验条件进行扫
描 ,每个样品重复 3次 ,求平均光谱。取光谱信息丰
富 、强度相对较大的 4000 ～ 5500 cm-1的谱段用
OPUS/INDENT软件进行聚类分析 ,以 Vectornor-
malization进行数据预处理 , 以 Ward salgorithm
standard算法计算类平均距离 ,对所有样品进行聚
类 。
3 结果
缬草属四种药用植物尤其是蜘蛛香与其他几种
之间差别最为明显 ,但不同产地不同居群间缬草的
原谱差异不显著 ,通过对原谱求一二阶导数后则差
异明显 。
对四种缬草及不同居群样品的 NIRDRS谱进行
聚类分析 ,见图 1。结果表明 ,蜘蛛香与其他几种缬
草相差较远 ,各聚为一类 ,这也与其形态特征相符 。
蜘蛛香叶基本为全缘不分裂 ,而中国缬草 、欧缬草 、
宽叶缬草与黑水缬草均为羽状分裂。进一步的聚类
可以将中国缬草 、欧缬草 、宽叶缬草分开。种内的差
异则与纬度及海拔等因素有关 ,地域相近或生长环
境相似的同种缬草各自聚为一类。
4 讨论
缬草属植物含有挥发油 、环烯醚萜类及黄酮类 、
生物碱类等成分 ,而近红外光谱波长范围为 0.75 ～
2.5μm,该谱区主要是含氢基团(C-H, N-H, O-H)的
倍频与合频吸收。随着计算机和化学计量学的发
展 ,该谱区得到广泛应用。同时采用漫反射技术可
以直接测定固体样品 ,操作方便 、快速 ,是一种理想
的药材分析鉴定及质量控制方法 。缬草由于种间及
种内变异引起化学成分方面的变化是近红外漫反射
光谱用于缬草类药材分析鉴别的基础 ,结合形态分
类与化学分类学的方法 ,可以用于探讨缬草属植物
的种间及种内变异规律 。
四种缬草的聚类分析表明 ,欧缬草与中国缬草
存在较大差别 ,本研究结果支持陈虎彪等的观点 ,将
中国缬草另立为一新种 〔4〕。在化学成分方面 ,蜘蛛
香与缬草差别较大 ,药理作用也有很大不同 ,这些差
别在聚类分析图中也得到了验证 。同种缬草由于纬
度 、海拔及其它生境的差别造成化学成分的变异而
分成不同分支 ,表明缬草存在广泛的种内变异现象。
参 考 文 献
[ 1] 陈磊 ,秦路平 , 郑汉臣.缬草的化学成分 、植物资源和药
理活性 .药学实践杂志 , 2000, 18(5):277-279.
[ 2] 黄宝康 ,郑汉臣 , 秦路平 ,等 .国产缬草属药用植物资源
调查 .中药材 , 2004, 27(9):632-634.
[ 3] 陈虎彪 ,朱建民 , 赵玉英 ,等 .药用缬草及其中国近缘种
的化学分类学研究 .中成药 , 1999, 21(12):652-654.
[ 4] 陈虎彪 , 诚静容.中国欧缬草近缘种的分类订正.植物
研究 , 1991, 11(3):29-40.
(2008-03-04收稿)
壮药香姜的生药鉴定
赵奎君1 ,梁晓乐 2 ,韦家福 3 ,廖月葵4
(1.首都医科大学附属北京友谊医院 ,北京 100050;2.贵阳中医学院 ,贵州贵阳 550006;3.广西食品药品
检验所 ,广西南宁 530021;4.广西中医学院 ,广西南宁 530001)
摘要 目的:对香姜药材进行生药鉴定研究。方法:对香姜的根茎 、叶横切面及根茎粉末进行显微观察 , 并描
绘组织详图及根茎粉末图。结果:香姜根茎及叶的横切面有明显的显微鉴别特征。结论:根茎及叶横切面组织特
征可作为该药生药鉴定依据。
关键词 香姜;药材性状;显微特征
中图分类号:R282.5 文献标识码:A 文章编号:1001-4454(2008)10-1496-03
香姜 AlpiniacoriandriodoraD.Fang为姜科植
物 ,其根茎具有驱风行气等功效 ,用于治疗宿食不消
等疾病 〔1, 2〕。在壮族地区民间常用香姜药材治疗哮
喘和小儿高烧惊风及作为香料调味品使用 。有关该
药材的生药鉴定研究目前尚未见报道 ,为进一步开
发利用这一药用资源 ,笔者对香姜的根茎及叶进行
了生药鉴定研究。
1 材料与仪器
·1496· 中药材 JournalofChineseMedicinalMaterials 第 31卷第 10期 2008年 10月