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苦苣菜属5种植物的黄酮类成分含量分析



全 文 :植物资源与环境学报 2008, 17(2):77-78       
JournalofPlantResourcesandEnvironment     
    苦苣菜属 5种植物的黄酮类成分含量分析
霍碧姗a, b, 秦民坚a, b, ①
(中国药科大学 a.中药资源学教研室;b.教育部现代中药研究重点实验室 , 江苏南京 210038)
ContentanalysisofflavonoidsinfivespeciesofSonchusL. HUO Bi-shana, b, QIN Min-jiana, b, ① (China
PharmaceuticalUniversitya.DepartmentofResourcesScienceofTraditionalChineseMedicines;b.KeyLaboratoryofModernTraditionalChineseMedicinesofMinistryofEducation, Nanjing210038, China), J.PlantResour.&Environ.
2008, 17(2):77-78
Abstract:Thecontentsofflavonoidsincludingquercetin, luteolinandapigenininfivespeciesofSonchusL.wereanalyzedbyHPLC.Theresultsshowedthatthecontentsofquercetin, luteolinandapigenininS.arvensisL., S.oleraceusL.and
S.brachyotusDC.were0.101, 0.185 and0.063 mg· g-1 , 0.036, 0.201 and0.069 mg· g-1 , 0.052, 0.113 and
0.037 mg· g-1 , respectively.InS.asper(L.)Hil, thecontentsofluteolinandapigeninwere0.031 and0.018
mg· g-1 , respectively, andquercetinwasnotbedetected.InS.lingianusShih., thecontentofluteolinwasonly0.084
mg· g-1 , andthecontentsofquercetinandapigeninweretrace.Thetotalcontentofflavonoidsinthesefivespecieswas
0.049-0.349 mg· g-1 , inwhichthatinS.arvensisandS.oleraceuswerethehighestwith0.349 and0.306 mg· g-1 ,andthatinS.asperwasthelowest.
关键词:苦苣菜属;黄酮类;含量;高效液相色谱法Keywords:SonchusL.;flavonoids;content;HPLC
中图分类号:R284.2;S567.2  文献标志码:A  文章编号:1004-0978(2008)02-0077-02
  菊科(Compositae)苦苣菜属(SonchusL.)的许多种类在
民间作为药用植物使用 , 大多具有清热解毒 、消肿排脓及凉
血利湿等功效 [ 1] 。苦苣菜属植物主要含有黄酮类及倍半萜
类活性成分 , 其中苦苣菜(S.oleraceusL.)中的总黄酮对脑
缺血缺氧小鼠及实验性肝损伤均有明显的保护作用 [ 2-3] 。
目前 , 已有研究者对苦苣菜中黄酮类化合物的含量进行了初
步的分析 [ 4] 。作者采用 HPLC法测定了苦苣菜属 5种药用
植物全草中的槲皮素 、木犀草素及芹菜素含量 , 并对 5种植
物所含的这 3种黄酮类成分的含量进行了初步的种间比较 ,
以期为苦苣菜属植物药用价值的开发利用提供实验依据。
1 实验部分
1.1 实验材料
供试的苣荬菜(SonchusarvensisL.)于 2007年 5月采自
安徽芜湖;苦苣菜(S.oleraceusL.)于 2007年 4月采自新疆
新源;南苦苣菜(S.lingianusShih.)于 2007年 4月采自广东
信宜;花叶滇苦菜〔S.asper(L.)Hill〕于 2007年 4月采自江
苏南京;长裂苦苣菜(S.brachyotusDC.)于 2007年 5月采自
宁夏银川。 供试种类均由中国药科大学秦民坚教授鉴定。
全草阴干后 , 粉碎 ,过 30目筛 ,备用。
槲皮素 (quercetin)、木犀草 素 (luteolin)和芹菜素
(apigenin)标准品均由上海中药标准化研究中心提供;使用
的主要试剂有甲醇(色谱纯 , 淮阴汉邦科技有限公司)、磷酸
(优级纯 ,上海联合化工厂)和乐百氏纯净水(广州乐百氏食
品饮料有限公司),其他试剂均为分析纯。
1.2 方法
1.2.1 色谱条件 使用 Agilent1100高效液相色谱仪进行
色谱分析。色谱柱为 AgilentZORBAXSB-C18(4.6 mm×250
mm, 5 μm);流动相:V(甲醇)∶V(0.05% H3PO4)=50∶50;流
速 1.0 mL· min-1;检测波长 355 nm;柱温为室温 ,进样量 20
μL。
1.2.2 标准曲线的绘制 分别精密称取经 P
2
O
5
过夜干燥的
槲皮素标准品 1.14 mg、木犀草素标准品 1.31 mg和芹菜素
标准品 1.07mg, 置于同一个容量瓶中 , 甲醇溶解并定容至
10 mL, 配制成槲皮素 、木犀草素和芹菜素浓度分别为 114、
131和 107 mg· L-1的混合标准品溶液。
分别精密吸取上述标准品溶液 5.000、 2.500、 1.250、
0.625及 0.313 mL, 用甲醇稀释并定容至 10 mL, 分别取 20
μL按上述色谱条件进行 HPLC分析 ,记录峰面积。
以标准品浓度为自变量 x、峰面积为因变量 y进行线形
回归分析 , 槲皮素 、木犀草素和芹菜素 3个标准品溶液的回
归方程分别为:y1 =58.866x1 -53.851, r=0.999 4, 槲皮素
的线形范围为 0.003 56~ 0.114 00 mg· L-1;y2=75.688x2-
33.473, r=0.999 8,木犀草素 的线形 范围 为 0.004 09 ~
收稿日期:2007-09-19
作者简介:霍碧姗(1981—),女,广东南海人 ,硕士研究生 ,主要从事
药用植物种质资源与质量关系研究。
①通讯作者 E-mail:minjianqin@163.com
0.131 00 mg· L-1;y3 =76.016x3 + 5.990 7, r=1.000 0,芹
菜素的线形范围为 0.003 3 ~ 0.107 0mg· L-1。
1.2.3 样品的提取和分析 精密称取样品细粉 5.0 g, 置于
具塞锥形瓶中 , 加入 200 mL甲醇超声提取 45 min, 过滤;样
品加少量甲醇洗涤 , 洗液并入滤液中;将滤液减压浓缩至干 ,
加入 V(甲醇)∶V(25%盐酸)=4∶1的混合液 20 mL, 溶解浓
缩物 , 90 ℃水浴回流 1.5 h, 迅速冷却至室温后 , 转移至 25
mL容量瓶中 , 加入甲醇稀释并定容至 25 mL, 摇匀;用 0.45
μm微孔滤膜过滤后 ,即得供试品溶液。
采用与标准曲线相同的色谱条件进行 HPLC分析 , 计算
峰面积并根据标准曲线计算样品中槲皮素 、木犀草素和芹菜
素的含量。实验重复 3次。
1.2.4 精密度实验 取混合标准品溶液 ,按上述色谱条件
重复进样 6次 , 槲皮素 、木犀草素和芹菜素的 RSD分别为
1.39%、1.10%和 1.61%。
1.2.5 稳定性实验 取同一供试品溶液 , 在 0、 2、4、 6、 8和
10 h按上述色谱条件测定 , 槲皮素 、木犀草素和芹菜素的
RSD分别为 2.95%、1.03%和 1.28%, 表明供试的样品溶液
于 10h内稳定。
1.2.6 重现性实验 取同一批苣荬菜样品 5份 , 精密称定 ,
按样品溶液制备方法及色谱条件进行提取和测定 , 槲皮素 、
木犀草素和芹菜素的 RSD分别为 2.70%、1.60%和 2.94%。
1.2.7 加样回收率实验 精密称取已知含量的苣荬菜样品
6份各 5.0g, 分别加入含槲皮素 440mg· L-1 、木犀草素 696
mg· L-1和芹菜素 435 mg· L-1的混合标准品溶液 1 mL, 按
样品溶液的制备方法及色谱条件进行提取和测定。槲皮素 、
木犀草素和芹菜素的加样回收率分别为 96.77%、101.30%
和 100.49%, RSD分别为 0.32%、1.58%和 1.66%。
2 结果和讨论
5种苦苣菜属植物的槲皮素 、木犀草素和芹菜素含量见
表 1。由表 1可见 , 槲皮素含量以苣荬菜中最高 , 达 0.101
mg· g-1;长裂苦苣菜及苦苣菜中的槲皮素含量较低;而南苦
苣菜中仅含痕量的槲皮素 , 花叶滇苦菜中未检测出槲皮素。
木犀草素含量以苦苣菜中最高 , 达 0.201 mg· g-1;苣荬菜 、
长裂苦苣菜和南苦苣菜中的木犀草素含量低于苦苣菜 , 分别
为 0.185、0.113和 0.084 mg· g-1;花叶滇苦菜中的木犀草
素含量最低 , 仅为 0.031 mg· g-1。 芹菜素含量以苦苣菜中
最高 , 达 0.069 mg· g-1;苣荬菜中的芹菜素含量略低于前
者 , 达到 0.063 mg· g-1;长裂苦苣菜和花叶滇苦菜中的芹菜
素含量较低 , 分别为 0.037和 0.018 mg· g-1;南苦苣菜仅含
痕量的芹菜素 。由表 1还可以看出 ,在供试的 5种苦苣菜属
植物中 , 木犀草素为共有的黄酮类成分。
表 1 5种苦苣菜属植物黄酮类成分含量的比较 1)
Table1 ComparisonofflavonoidcontentsinfivespeciesofSonchusL.1)
种类
Species
不同成分的含量 /mg· g-1 Contentofdifferentcomponents
槲皮素 Quercetin 木犀草素 Luteolin 芹菜素 Apigenin
总含量 /mg· g-1
Totalcontent
苣荬菜 S.arvensis 0.101 0.185 0.063 0.349
苦苣菜 S.oleraceus 0.036 0.201 0.069 0.306
南苦苣菜 S.lingianus + 0.084 + 0.084
花叶滇苦菜 S.asper - 0.031 0.018 0.049
长裂苦苣菜 S.brachyotus 0.052 0.113 0.037 0.202
1) +:痕量 Trace;-:未检出 Notdetectable.表中数据为 3次重复的平均值 Thedatumsinthistablearetheaverageofthreereplications.
  在实验过程中 , 对提取条件进行了比较 , 确定最佳提取
条件为:用 V(甲醇)∶V(25%盐酸)= 4∶1的混合溶液在
90 ℃下水解 1.5h。对 HPLC色谱条件比较筛选后 , 确定最
佳流动相为 V(甲醇)∶V(0.05% H3PO4)=50∶50的混合溶
液 , 且在流速 1.0mL· min-1 、检测波长 355 nm、柱温为室温
的条件下测定苦苣菜属植物中黄酮类成分的含量 , 方法简
便 、准确 、重现性好。
根据表 1数据发现 , 供试的 5种苦苣菜属植物中黄酮类
成分的种类和含量存在较大的种间差异。苣荬菜 、苦苣菜和
长裂苦苣菜的黄酮类含量均高于花叶滇苦菜和南苦苣菜 ,表
明苣荬菜 、苦苣菜和长裂苦苣菜的药用品质可能优于花叶滇
苦菜和南苦苣菜 , 应用价值较高 , 因而 , 苣荬菜 、苦苣菜和长
裂苦苣菜常作为民间用药及蔬菜食用。近年的临床研究结
果表明 , 苦苣菜属植物对各种肝炎有显著疗效 , 并具有抗肿
瘤 、治疗冠心病 、解尼古丁毒等作用 [ 1] 。在实际生产中 , 苦苣
菜属植物常被作为田间野草清除 , 造成资源浪费 , 因此 , 加强
对苦苣菜属植物的综合开发利用研究具有重要意义。
参考文献:
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