全 文 ：·论　著·
[文章编号 ]　 0258-879X ( 2000) 10-0952-03
HPLC法测定酸模属植物根中蒽醌类成分的含量
原　源 1 ,　陈万生1 ,　张汉明 1 ,　柴逸峰 2 ,　李　力 1 ,　郑水庆 1
[摘要 ]　目的:考察酸模属植物根中蒽醌类成分的含量 ,以评价其药用价值。 方法: 采用 HPLC法对 5种酸模属植物根及 3
个不同产地羊蹄根中的蒽醌类成分进行含量测定。结果:该属 5种植物根中蒽醌类成分的含量范围分别为: 大黄素 0. 051% ～
0. 303% 、大黄酚 0. 095% ～ 0. 320% 、大黄素甲醚 0. 025% ～ 0. 142% ; 3个不同产地羊蹄根中的蒽醌类成分的含量范围分别
为: 大黄素 0. 051% ～ 0. 125% 、大黄酚 0. 127% ～ 0. 193% 、大黄素甲醚 0. 049% ～ 0. 096%。结论:巴天酸模及羊蹄根中的蒽醌
类成分含量相近 ,从化学上支持两者都作为“羊蹄”入药的传统用法 ;不同产地及生境的羊蹄根中 ,蒽醌类成分含量存在差异 ,
3种蒽醌类成分以南京产羊蹄为最高 ;金不换及酸模根中蒽醌类成分较高 ,而齿果酸模中各成分含量均较低。
[关键词 ]　酸模属 ;蒽醌类 ;色谱法 ,高效液相 ;化学
[中图分类号 ]　 R 284. 1　　　　 [文献标识码 ]　 A
Content determination of three kinds of anthraquinones in the root of Rumex by
HPLC
YU AN Yuan1 , C HEN Wan-Sh eng1 , ZHANG Han-M ing1 , C HAI Yi-Feng2 , L I Li1 , ZHENG Shui-Qing1 ( 1. Depar tment of
Pha rmacognosy , Colleg e o f Pha rmacy , Second M ili ta ry M edical Univ er sity , Shanghai 200433, China; 2. Depa rtment of Phar-
maceutical analy sis)
[ABSTRACT ]　 Object ive: T o investiga te the contents o f anthraquinones in the ro ot of Rumex , a nd to evalua te its pha rmaceu-
tical v a lue. Methods: HPLC m ethod was applied to measure th e contents of anthr aquinones in the roo t o f 5 kinds of Rumex
and 3 intr aspecies o f R . japonicus. Results: The contents o f emodin, chry sophano l, phy scion ranged from 0. 051% -0. 303% ,
0. 095% -0. 320% , 0. 025% -0. 142% in the ro o t o f 5 kinds of Rumex , and ranged fr om 0. 051% -0. 125% , 0. 127% -0. 193% ,
0. 049% -0. 096% respectiv ely in 3 intraspecies of R . japonicus. Conclusion: Bo th R . patientia and R . japonicus can be em-
plo yed as` Yang ti’ clinically as antibio tics fo r their anth raquinone contents ar e almost the same. Contents o f anthr aquinone in
R . japonicus fr om diffe rent place and under different enviroment a re differ ent. Contents o f 3 anth raquinones in R . japonicus
( Nanjing ) a re the highest, and those in R .madaio and R . acetosa a re nex t to th em, but less in R . dentatus.
[KEY WORDS]　Rumex ; a nth raquinone; chromatog r aphy , high pe rfo rmance liquid; content determination
[ Acad J Sec Mil Med Univ , 2000, 21( 10): 952-954 ]
⒇
　 巴天酸模 ( Rumex patientia L. )又名洋铁酸模、
牛西西、土大黄等 ,为蓼科酸模属植物 ,广泛分布于
我国长江以北地区 ,为较常用草药 ,以根入药 ,性味
苦、酸、寒。有清热解毒、活血止血、通便杀虫之功效 ,
用于治疗多种皮肤病、出血症及各种炎症 [1～ 3 ]。同属
其他植物在形态上与巴天酸模相近 ,民间也做药用 ,
称“羊蹄类药材”。习惯上称巴天酸模为“北羊蹄” ,分
布于长江以南的羊蹄 Rumex japonicus Hout t.为
“南羊蹄”。
文献报道及我们进行的研究都表明 ,巴天酸模
等酸模属植物的根中含有大黄素、大黄酚、大黄素甲
醚等蒽醌类有效成分 ,具有抑菌及止血的作用 [4 ]。为
考察酸模属不同来源生药的品质及化学成分的差
异 ,我们对 5种酸模属植物及不同产地羊蹄中含有
的蒽醌类成分进行含量测定。
1　材料和方法
1. 1　仪器和试剂　美国 Waters高效液相色谱仪 ,
包括 510泵、 2487紫外检测器、 Rheodyne 7725i进
样阀 ; HPLC工作站 ; Branson1200超声清洗器 ;大
黄素、大黄酚、大黄素甲醚标准品自已提取获得 ,经
HPLC检查 ,纯度均在 99. 1%以上 ;甲醇、氯仿、丙
·952· 第 二 军 医 大 学 学 报Acad J Sec Mil Med Univ　 2000 Oct; 21( 10)
⒇ [基金项目 ]　国家自然科学基金资助项目 ( 29902009) .
[作者单位 ]　 1.第二军医大学药学院生药学教研室 ,上海 200433;
2.药物分析教研室 .
[作者简介 ]　原　源 ( 1974-) ,女 (汉族 ) ,硕士 .
酮、高氯酸为分析纯 ,水为蒸馏水 ;酸模属植物药材
中巴天酸模采自吉林省长春市 ,羊蹄分别采自第二
军医大学药学院药圃、南京及上海郊区佘山 ,金不换
采自第二军医大学药学院药圃 ,齿果酸模和酸模均
采自佘山 ,均由张汉明教授鉴定。
1. 2　色谱条件　色谱柱: YWGC18 ( 250 mm× 4. 5
mm, 10μm,大连依列特公司 ) ;流动相:甲醇 -水-高
氯酸 ( 950∶ 50∶ 1) ;紫外检测波长: 254 nm;流速:
1. 5 ml /min;灵敏度: 0. 5 AU FS;进样量: 20μl。
1. 3　样品制备　将生药于 50℃干燥 12 h,粉碎 ,过
60目筛。精密称取 100. 0 mg ,加入甲醇 10. 0 ml,超
声波提取 20 min,离心 5 min( 3 000 r /min) ,取上清
液用 0. 45μm微孔滤膜过滤 ,待测。
2　结　果
2. 1　提取溶剂的选择　取巴天酸模样品 100. 0
mg,共 3份 ,分别用氯仿、丙酮和甲醇提取 20 min,
按照上述色谱条件进样 ,记录 3种蒽醌类成分峰面
积 ,结果表明甲醇作为提取溶剂时 ,提取效率最高。
2. 2　超声波提取时间的选择　取巴天酸模样品
100. 0 mg , 4份 ,以甲醇为溶媒 ,分别用超声波提取
10, 15, 20, 30 min,测定结果表明 ,超声 20 min时已
基本提取完全。
2. 3　标准曲线的绘制　精密称取各标准品 ,用甲
醇 -氯仿 ( 1∶ 1)配制成标准溶液 ,浓度为: 大黄素
0. 291 mg /ml、大黄酚 0. 172 8 mg /ml、大黄素甲醚
0. 131 6 mg /ml ,分别用甲醇稀释成 1 /3, 1 /6, 1 /12,
1 /24, 1 /48, 1 /144六个浓度 ,按上述色谱条件以蒽
醌浓度 (Y , mg /m l)对峰面积 (X )进行线性回归 ,回
归方程为:
Y大黄素 = 8. 47× 10- 8X+ 8. 00× 10- 4　 r= 0. 999 5
线性范围为 72. 02× 10- 3～ 9. 70× 10- 2 mg /ml
Y大黄酚 = 5. 59× 10- 8X+ 9. 5× 10- 5　 r= 0. 999 8
线性范围为 2. 40× 10- 3～ 5. 76× 10- 2 mg /ml
Y大黄素甲醚 = 1. 07× 10- 7X+ 3. 00× 10- 4　 r= 0. 999 8
线性范围为 9. 15× 10- 4～ 4. 39× 10 - 3　 mg /ml
　　待测各化学成分在线性范围内线性关系良好 ,
各对照品色谱图见图 1。
2. 4　精密度和重现性实验　取巴天酸模测定 3种
蒽醌类成分的含量 ,重复进样 6次 ,每次 20μl,测定
其含量的 RSD分别为: 大黄素 1. 21%、大黄酚
0. 21% 、大黄素甲醚 0. 46%。 同一种样品 (巴天酸
模 )称量 3份 ,同样方法制备和测定 ,其 RSD分别
为: 大黄素 1. 52% 、大黄酚 0. 69%、大黄素甲醚
0. 96%。
图 1　 3个对照品的 HPLC图
Fig 1　 Chromatogram of emodin,
chrysophanol and physcion
1: Emodin; 2: Chrysoph anol; 3: Ph yscion
2. 5　稳定性实验　取巴天酸模样品液 ,在 1, 2, 3,
4, 5 d分别进样 20μl,测定含量 , RSD分别为:大黄
素 1. 42%、大黄酚 0. 98% 、大黄素甲醚 1. 52% 。
2. 6　加样回收率实验　取已知含量的样品 (巴天酸
模 ) 100. 0 mg,分别加入其含有量的 1 /2, 1倍 , 2倍
的蒽醌类成分 ,各 3份。 按样品测定方法制备和测
定 ,取 3次测定的平均值计算回收率 , 3个化合物的
加样回收率分别为: 大黄素 ( 99. 4± 1. 76)% ,大黄酚
( 99. 6± 2. 44)% ,大黄素甲醚 ( 100. 1± 2. 07)%。
2. 7　样品测定　样品的 HPLC图谱见图 2,大黄
素、大黄酚、大黄素甲醚的出峰时间分别在 5, 6, 8
min左右 ,测定结果见表 1。
表 1　 5种酸模属植物中 3种蒽醌
类成分的平均百分含量 (% )
Tab 1　 Average contents of 3 kinds of
anthraquinone in roots of Rumex
(% )
Sample Emodin Ch rysophanol Physcion
Rumex pat ient ia L. 0. 115 9 0. 154 3 0. 058 7
Rumex japonicus Hout t　 ( yaopu) 0. 125 2 0. 147 9 0. 096 5
Rumex japonicus Hout t　 ( Nanjing ) 0. 088 3 0. 193 2 0. 081 0
Rumex japonicus Hout t　 ( Sh eshan) 0. 050 8 0. 128 3 0. 048 7
Rumex madaio Makino 0. 120 4 0. 319 9 0. 142 3
Rumex denta tus L. 0. 080 5 0. 094 5 0. 024 9
Rumex actosa L. 0. 302 5 0. 118 7 0. 113 3
·953·第 10期 . 原　源 ,等 . HPLC法测定酸模属植物根中蒽醌类成分的含量
图 2　 7个酸模属样品的 HPLC图
Fig 2　 HPLC chromatograms of 7 samples of Rumex
A: Rumex patien tia L. ; B: R umex japonicus Hou tt ( yaopu) ; C: Rumex japonicus Hou tt ( Nanjing ) ;
D: Rumex japonicus Hout t ( Sh esh an ) ; E: R umex mada io Makino;
F: Rumex d entatus L. ; G: Rumex actosa L.
3　讨　论
蒽醌类成分的定量分析方法 ,文献报道主要有
紫外分光光度法 [5, 6 ]和高效液相色谱法 [7, 8 ] ,但酸模
属植物蒽醌类成分的定量分析未见报道。 本文选用
甲醇-水 -高氯酸 ( 95∶ 5∶ 0. 1)为流动相 ,流速提高至
1. 5 ml /min,使每个样品在 10 min内测完 , 3种蒽醌
类成分分离效果好 ,回收率高。该方法快捷、准确 ,适
用于羊蹄类生药中蒽醌类成分的定性定量分析。
5种酸模属植物根中游离蒽醌类成分相同 ,均含
有大黄素、大黄酚及大黄素甲醚 ,但含量存在较大差
异。巴天酸模和羊蹄根中 3种蒽醌类成分的含量相
近 ,表明两者在用于抗菌止血时具有相同的品质 ,支
持民间把两者都作为“羊蹄”入药 ;另外 ,大黄素在酸
模中的含量最高 ,而金不换又含有最高量的大黄酚
和大黄素甲醚 ,这两种植物具有抗菌消炎及止血药
的开发利用价值 ;齿果酸模中 3种蒽醌类成分的含
量都较低 ,利用价值不高。
不同产地的羊蹄 ,其有效成分的含量也有差别 ,
采自第二军医大学药学院药圃的羊蹄和采自南京长
江大堤边的羊蹄 ,在品质上相近 ;而采自上海郊区佘
山的羊蹄 ,可能是由于生长环境恶劣 ,造成了其品质
稍差 ,羊蹄品质的种内差异有待进一步研究。
[参 考 文 献 ]
[1 ]　谢宗万主编 . 全国中草药汇编 [M ] .第 2版 . 北京:人民卫生出
版社 , 1996. 323-325.
[2 ]　江苏新医学院编 . 中药大辞典 [ M ]. 上海:上海科学技术出版
社 , 1986. 423-424.
[3 ]　朱有昌 主编 . 东北药用植物 [M ] . 哈尔滨:黑龙江科学技术出
版社 , 1989. 292.
[4 ]　何丽一 , 陈碧珠 ,肖培根 . 酸模属中草药的调查鉴定与成分分
析 [ J]. 药学学报 , 1981, 16( 4): 289-293.
[5 ]　郭　澄 , 张　纯 , 邵元福 . 大黄蒽醌类成分含量测定方法的探
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[6 ]　贾元印 ,赵渤年 ,刘善新 ,等 . 石斛夜光丸中蒽醌类成分的含量
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[7 ]　大岛俊幸 ,平山总良 ,齐藤文孝 ,等 . 高效液相色谱法测定何首
乌和夜交藤中蒽醌类成分的含量 [ J] . 药物分析杂志 , 1996, 16
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[8 ]　曹　红 ,刘　云 . 高效液相色谱法测定金薏尿石颗粒剂及大黄
药材中大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚和芦荟大黄素的含
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[收稿日期 ]　 2000-03-05　　 [修回日期 ]　 2000-07-14
[本文编辑 ]　姚春芳
·954· 第二军医大学学报　 2000年 10月 ,第 21卷