全 文 ：书　［收稿日期］　２０１４－０３－２０；２０１４－０９－１０修回
　［基金项目］　贵州中药现代化项目“贵州龙胆属药用植物资源调查及利用评价研究”（黔科合ＺＹ字２０１２３００７）；六盘水市科学技术局项目
“民族药红花龙胆的驯化栽培及快繁技术研究”（５２０２０－２０１２－０１－０９－０６）；六盘水市科学技术局创新人才团队建设计划项目
（５２０２０－２０１２－０４－０１－０１）
　［作者简介］　孙爱群（１９６１－），女，教授，从事遗传学的教学与研究工作。Ｅ－ｍａｉｌ：ｓｕｎａｉｑｕｎ２２８０＠１２６．ｃｏｍ
［文章编号］１００１－３６０１（２０１４）１１－０６７０－００６２－０４
龙胆属５种植物的同工酶比较
孙爱群，游进国，林长松，李 鹏
（六盘水师范学院 生命科学系，贵州 六盘水５５３００４）
　　［摘　要］为探明龙胆属植物种间亲缘关系，采用聚丙烯酰胺垂直凝胶电泳技术，对龙胆属红花龙胆
Ｇｅｎｔｉａｎａ　ｒｈｏｄａｎｔｈａ、草甸龙胆Ｇ．ｐｒａｔｉｃｏｌａ、翼萼龙胆Ｇ．ｐｔｅｒｏｃａｌｙｘ、滇龙胆Ｇ．ｒｉｇｅｓｃｅｎｓ和头花龙胆Ｇ．
ｃｅｐｈａｌａｎｔｈａ的过氧化物酶同工酶（ＰＯＤ）、超氧化物歧化酶同工酶（ＳＯＤ）和淀粉酶同工酶（ＡＭＹ）的酶谱和
亲缘关系进行比较。结果显示：１）５种龙胆属植物的３种同工酶共显示２９条酶带，其酶带数和相对迁移率
不同，酶活性也存在差异；２）红花龙胆与翼萼龙胆的亲缘关系较近，滇龙胆与头花龙胆的亲缘关系也较近。
５种龙胆的聚类分析结果与形态分类结果一致。
［关键词］龙胆属；过氧化物酶同工酶；超氧化物歧化酶同工酶；淀粉酶同工酶；聚类分析
［中图分类号］Ｓ５６７ ［文献标识码］Ａ
Ｓｔｕｄｙ　ｏｎ　Ｉｓｏｅｎｚｙｍｅｓ　ｏｆ　Ｆｉｖｅ　Ｓｐｅｃｉｅｓ　ｉｎ　Ｇｅｎｔｉａｎａ
ＳＵＮ　Ａｉｑｕｎ，ＹＯＵ　Ｊｉｎｇｕｏ，ＬＩＮ　Ｃｈａｎｇｓｏｎｇ，ＬＩ　Ｐｅｎｇ
（Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｌｉｆｅ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｌｉｕｐａｎｓｈｕｉ　Ｎｏｒｍａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｌｉｕｐａｎｓｈｕｉ，Ｇｕｉｚｈｏｕ５５３００４，Ｃｈｉｎａ）
　　Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅ　ＰＯＤ，ＳＯＤ　ａｎｄ　ＡＭＹ　ｚｙｍｏｇｒａｍ　ａｎｄ　ｇｅｎｅｔｉｃ　ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ　ｏｆ　Ｇ．ｒｈｏｄａｎｔｈａ，Ｇ．
ｐｒａｔｉｃｏｌａ，Ｇ．ｐｔｅｒｏｃａｌｙｘ，Ｇ．ｒｉｇｅｓｃｅｎｓ　ａｎｄ　Ｇ．ｃｅｐｈａｌａｎｔｈａ　ｗｅｒｅ　ａｎａｌｙｚｅｄ　ａｎｄ　ｃｏｍｐａｒｅｄ　ｂｙ　ｐｏｌｙａｃｒｙｌａｍｉｄｅ
ｖｅｒｔｉｃａｌ　ｇｅｌ　ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ　ｔｏ　ｓｔｕｄｙ　ｔｈｅ　ｇｅｎｅｔｉｃ　ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ　ａｍｏｎｇ　ｆｉｖｅ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｓｐｅｃｉｅｓ　ｉｎ　Ｇｅｎｔｉａｎａ．Ｔｈｅ
ｒｅｓｕｌｔｓ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ：１）ｔｈｅｒｅ　ａｒｅ　２９ｅｎｚｙｍｅ　ｂａｎｄｓ　ｉｎ　ＰＯＤ，ＳＯＤ　ａｎｄ　ＡＭＹ　ｉｓｏｚｙｍｅｓ　ｏｆ　ｆｉｖｅ　ｓｐｅｃｉｅｓ　ｉｎ
Ｇｅｎｔｉａｎａ，ａｎｄ　ｔｈｅｒｅ　ａｒｅ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ　ｉｎ　ｔｈｅｉｒ　ｅｎｚｙｍａｔｉｃ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｂｅｃａｕｓｅ　ｏｆ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｅｎｚｙｍｅ　ｂａｎｄｓ　ａｎｄ
ｒｅｌａｔｉｖｅ　ｍｏｂｉｌｉｔｙ；２）Ｔｈｅ　ｇｅｎｅｔｉｃ　ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ　ｂｅｔｗｅｅｎ　Ｇ．ｒｈｏｄａｎｔｈａ　ａｎｄ　Ｇ．ｐｔｅｒｏｃａｌｙｘｉｓ　ｃｌｏｓｅ，ａｎｄ　ｔｈｅ
ｇｅｎｅｔｉｃ　ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ　ｂｅｔｗｅｅｎ　Ｇ．ｒｉｇｅｓｃｅｎｓ　ａｎｄ　Ｇ．ｃｅｐｈａｌａｎｔｈａ　ｉｓ　ｃｌｏｓｅ　ａｌｓｏ．Ｔｈｅ　ｃｌｕｓｔｅｒｉｎｇ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　ｆｉｖｅ
ｓｐｅｃｉｅｓ　ｉｎ　Ｇｅｎｔｉａｎａｉｓ　ｎｏｔ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅｉｒ　ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌ　ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｒｅｓｕｌｔｓ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｇｅｎｔｉａｎａ；ｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ（ＰＯＤ）ｉｓｏｅｎｚｙｍｅ；ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅ　ｄｉｓｍｕｔａｓｅ（ＳＯＤ）ｉｓｏｅｎｚｙｍｅ；ａｍｙｌ－
ａｓｅ（ＡＭＹ）ｉｓｏｅｎｚｙｍｅ；ｃｌｕｓｔｅｒｉｎｇ　ａｎａｌｙｓｉｓ
　　龙胆属（Ｇｅｎｔｉａｎａ）植物全球约４００种，分布于
欧洲、亚洲、北美洲、非洲北部、大洋洲的澳大利亚北
部及新西兰，我国有２４７种，主要生长在高山流石
滩、高山草甸和灌丛中［１］。据初步调查及资料考证，
贵州有２９种１变种［２］，六盘水约有１３种［２－３］。龙胆
属植物大多含有环烯醚萜类、黄酮类、山酮类及三萜
类物质，具有泻肝胆实火、清湿热、镇咳健胃及祛风
湿、退虚热、舒筋止痛之功效，主治肝炎、胆囊炎、关
节炎及消化系统疾病［４］。
目前对龙胆属植物的研究主要集中在形态
学［５－６］、植 物 资 源［３，７－８］、化 学 成 分［９－１１］及 药 用 价
值［１２－１３］等方面，未见龙胆属植物同工酶方面的报道。
同工酶指生物体内催化相同反应而分子结构不同的
酶，在植物器官中普遍存在，主要是从蛋白质水平上
显示物种或种质资源的遗传多样性，可用于物种之
间、同一物种不同品种之间的遗传差异鉴定［１４］。为
探讨龙胆属植物遗传基础及亲缘关系，笔者等采用
聚丙烯酰胺垂直凝胶电泳技术，对龙胆属植物红花
龙胆（Ｇｅｎｔｉａｎａ　ｒｈｏｄａｎｔｈａ）、草甸龙胆（Ｇ．ｐｒａｔｉｃｏ－
ｌａ）、翼萼龙胆（Ｇ．ｐｔｅｒｏｃａｌｙｘ）、滇龙胆（Ｇ．ｒｉｇｅｓ－
ｃｅｎｓ）和头花龙胆（Ｇ．ｃｅｐｈａｌａｎｔｈａ）的过氧化物酶同
工酶（ＰＯＤ）、超氧化物歧化酶同工酶（ＳＯＤ）和淀粉
酶同工酶（ＡＭＹ）进行比较研究，旨在为龙胆属遗传
变异、系统发生、亲缘关系及种属鉴定等方面提供基
础资料。
１ 材料与方法
１．１ 材料
龙胆属５种植物采自贵州六盘水境内（表１），
采集时间为２０１２年８—１１月。凭证标本存放于六
盘水师范学院生命科学系植物标本室。
１．２ 样品制备与电泳
按实验室常用方法［１５－１６］进行样品制备。
１．３ 同工酶染色
过氧化物酶同工酶染色参照胡能书［１７］的联苯
胺法：０．１ｇ联苯胺＋５ｍＬ无水乙醇，１．５ｍｏｌ／Ｌ乙
酸钠１０ｍＬ，１．５ｍｏｌ／Ｌ乙酸１０ｍＬ，蒸馏水７５ｍＬ，
Ｈ２Ｏ２原液６滴，混合即为染色液。
　贵州农业科学　２０１４，４２（１１）：６２～６５
　Ｇｕｉｚｈｏｕ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ
表１ 龙胆属５种植物的采集地及生境
Ｔａｂｌｅ　１　Ｃｏｌｅｃｔｉｏｎ　ｓｉｔｅｓ　ａｎｄ　ｈａｂｉｔａｔｓ　ｏｆ　ｆｉｖｅ　ｓｐｅｃｉｅｓ　ｉｎ　Ｇｅｎｔｉａｎａ
种名
Ｓｐｅｃｉｅｓ
采集地
Ｃｏｌｅｃｔｉｏｎ　ｓｉｔｅｓ
采集号
Ｃｏｌｅｃｔｉｏｎ　Ｎｏ．
海拔／ｍ
Ａｌｔｉｔｕｄｅ
生境
Ｈａｂｉｔａｔｓ
红花龙胆Ｇ．ｒｈｏｄａｎｔｈａ 贵州水城 ８０１１８２３　 １　８００ 山坡草地
草甸龙胆Ｇ．ｐｒａｔｉｃｏｌａ 贵州水城 ８０１１８２６　 １　８００ 草丛
翼萼龙胆Ｇ．ｐｔｅｒｏｃａｌｙｘ 贵州水城 ２０１１８１１　 ２　３５０ 山坡草地
滇龙胆Ｇ．ｒｉｇｅｓｃｅｎｓ 贵州水城 ８０１１８２５　 １　８００ 灌木丛
头花龙胆Ｇ．ｃｅｐｈａｌａｎｔｈａ 贵州水城 ２０１１８０５　 ２　３４０ 山坡灌木丛
将凝胶放在染色液中，置３７℃恒温培养箱中保温
３０～６０ｍｉｎ。
超氧化物歧化酶同工酶染色：将凝胶置０．２％
ＮＢＴ溶液中，黑暗下浸泡 ２０ ｍｉｎ，转入混合液
（１００ｍＬ　３．６×１０－２　ｍｏｌ／Ｌ　ｐＨ７．８ 磷 酸 缓 冲
液＋０．４２ｍＬＴＥＭＥＤ＋０．００１ｇ核黄素＋１ｍＬ　１×
１０－３　ｍｏｌ／Ｌ　ＫＣＮ）中黑暗下继续浸泡１５ｍｉｍ，再转
入混 合 液 （０．００４ ｇ　ＥＤＴＡ 钠 盐 ＋１００ ｍＬ
０．０５ｍｏｌ／Ｌ　ｐＨ７．８磷酸缓冲液）中，白炽光下浸泡
２０～３０ｍｉｎ。
淀粉酶同工酶染色：将凝胶放入０．１５ｍｏｌ／Ｌ、
ｐＨ　５．０钙纳醋酸缓冲液（含０．２２％ＣａＣｌ２、０．１１％
ＮａＣｌ）中，３７℃恒温下保温１．５ｈ，倒去缓冲液，用
０．１５ｍｏｌ／Ｌ　ｐＨ　５．０醋酸钠缓冲液冲洗胶板上多余
的淀粉，然后用稀释２０倍的显色碘液染色。
出现酶带后，迅速倒出染色液，用蒸馏水冲洗凝
胶，拍照，并记录其酶谱，统计酶带数及强弱特征，凝
胶用７％乙酸固定保存。
１．４ 同工酶酶谱分析和命名
参照熊全沫［１８－１９］的方法，以同工酶缩写名称的
大写代表酶蛋白，以１、２、３……表示向阳极迁移位
点，越靠近阳极的位点以越小的数字表示，如
ＰＯＤ－１、ＰＯＤ－２等。统计酶带数，计算其相对迁移率
及酶谱相似度指数［２０］；同时进行聚类分析，依据数
量分类中二态特征的０／１编码原则［２１］，结合３种同
工酶，有酶带的计为１，无酶带的计为０，由此生成０
和１原始矩阵，应用ＤＰＳｖ　７．５５软件，采用Ｊａｃｃａｒｄ
系数，用类平均法（ＵＰＧＭＡ）对５种龙胆属植物进
行聚类分析。
２ 结果与分析
２．１ 同工酶酶谱
２．１．１ 过氧化物酶 ５种龙胆属植物的ＰＯＤ同工
酶共有８条酶带（图１）。其中，红花龙胆有４条酶
带，表达较弱；草甸龙胆有１条酶带，表达较强；翼萼
龙胆有５条酶带，ＰＯＤ－２、ＰＯＤ－３表达较强，ＰＯＤ－１、
ＰＯＤ－４、ＰＯＤ－８ 表达较弱；滇龙胆有 ４ 条酶带，
ＰＯＤ－４、ＰＯＤ－５表达较强，ＰＯＤ－６、ＰＯＤ－７表达较弱；
头花龙胆有４条酶带，表达均较弱。过氧化物酶Ｒｆ
的变化范围为０．０５～０．３４，Ｒｆ　０．０７为滇龙胆的特
有酶带。特有酶带占总酶带数的１２．５％。Ｒｆ０．２１为
红花龙胆、翼萼龙胆、滇龙胆和头花龙胆的共有酶带，
说明，这４种龙胆之间保持着一定的遗传一致性。
注：左为同工酶酶谱，右为酶谱模式图。 泳道：1，红花龙胆；2，草甸龙胆；
3，翼萼龙胆； 4，滇龙胆；5，头花龙胆。模式： 表示较强酶带， 弱
酶带， 很弱酶带（下同）。
Note: Left, Zymogram; Right, Electrophoresis.1, Gentiana rhodantha；2, G.
praticol; 3. G.pterocalyx; 4. G.rigescens；5, G.cephalantha.means strong enzyme
band, poor enzyme band and very poor enzyme band respectively. The same
below.
　　　图１ 龙胆属５种植物的过氧化物酶同工酶
酶谱及模式图
　Ｆｉｇ．１　Ｚｙｍｏｇｒａｍ　ａｎｄ　ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ　ｏｆ　ＰＯＤ　ｉｓｏｚｙｍｅ
ｏｆ　ｆｉｖｅ　ｓｐｅｃｉｅｓ　ｉｎ　Ｇｅｎｔｉａｎａ
　　图２ 龙胆属５种植物的超氧化物歧化酶同工酶
酶谱及模式图
　Ｆｉｇ．２　Ｚｙｍｏｇｒａｍ　ａｎｄ　ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ　ｏｆ　ＳＯＤ　ｉｓｏｚｙｍｅ
ｏｆ　ｆｉｖｅ　ｓｐｅｃｉｅｓ　ｉｎ　Ｇｅｎｔｉａｎａ
２．１．２ 超氧化物歧化酶 ５种龙胆属植物的ＳＯＤ
同工酶共有９条酶带（图２）。其中，红花龙胆有３
条酶带，ＳＯＤ－４表达稍强，ＳＯＤ－７和ＰＯＤ－８表达较
弱；草甸龙胆有４条酶带，ＳＯＤ－３和ＰＯＤ－６表达较
强，ＳＯＤ－５和ＰＯＤ－９表达较弱；翼萼龙胆有１条酶
带，表达较弱；滇龙胆有３条酶带，ＳＯＤ－４和ＰＯＤ－７
表达较强，ＳＯＤ－２表达较弱；头花龙胆有２条酶带，
表达较弱。超氧化物歧化酶 Ｒｆ的变化范围为
０．４５～０．９３，Ｒｆ　０．５５为红花龙胆的特有酶带，Ｒｆ
０．４５、０．６２、０．６８及０．７５为草甸龙胆的特有酶带，
Ｒｆ　０．８为滇龙胆的特有酶带，Ｒｆ　０．９３为头花龙胆
的特有酶带。特有酶带占总酶带数的７７．７８％。Ｒｆ
０．７３为红花龙胆、翼萼龙胆、滇龙胆和头花龙胆的
共有酶带。同样表明这４种龙胆之间保持着一定的
遗传一致性。
·３６·
　孙爱群 等　龙胆属５种植物的同工酶比较
　ＳＵＮ　Ａｉｑｕｎ　ｅｔ　ａｌ　Ｓｔｕｄｙ　ｏｎ　Ｉｓｏｅｎｚｙｍｅｓ　ｏｆ　Ｆｉｖｅ　Ｓｐｅｃｉｅｓ　ｉｎ　Ｇｅｎｔｉａｎａ
　图３ 龙胆属５种植物的淀粉酶同工酶酶谱及模式图
Ｆｉｇ．３　Ｚｙｍｏｇｒａｍ　ａｎｄ　ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ　ｏｆ　ＡＭＹ　ｉｓｏｚｙｍｅ
ｏｆ　ｆｉｖｅ　ｓｐｅｃｉｅｓ　ｉｎ　Ｇｅｎｔｉａｎａ
２．１．３ 淀粉酶 ５种龙胆属植物的 ＡＭＹ同工酶
共有１２条酶带（图３）。其中，红花龙胆有３条酶
带，表达较弱；草甸龙胆有３条酶带，表达较强；翼萼
龙胆有２条酶带，表达较弱；滇龙胆有６条酶带，表
达较弱；头花龙胆有４条酶带，表达较弱；淀粉酶同
工酶Ｒｆ的变化范围为０．１７～０．４９，Ｒｆ　０．１７、０．３２
的酶带为红花龙胆的特有酶带，Ｒｆ　０．２０、０．３１为草
甸龙胆的特有酶带，Ｒｆ　０．２５、０．４３、０．４９为滇龙胆
的特有酶带，Ｒｆ０．４５为头花龙胆的特有酶带，特有
酶带占总酶带数的６６．６７％。Ｒｆ　０．２７为草甸龙胆、
滇龙胆、头花龙胆的共有酶带，Ｒｆ０．３５为翼萼龙胆、
滇龙胆、头花龙胆的共有酶带。
龙胆属５种植物的酶带数不同，酶带强弱也存
在一定差异。说明，龙胆属种间有一定的分化。
２．２ 相似度指数及其聚类
１）相似度指数。Ｖａｕｇｈａｎ［２０］提出，以酶谱相
似度指数预测种间亲缘关系，相似度指数越大，说明
物种间的酶谱差异愈小，其亲缘关系越密切。表２
看出，红花龙胆与翼萼龙胆的相似度指数最大
（０．５０），表明两者之间的亲缘关系较近；其次是滇龙
胆与头花龙胆，其相似度指数为０．４３８，两者之间的
亲缘关系也较近；红花龙胆与草甸龙胆及翼萼龙胆
与草甸龙胆相似度指数最小（０），表明红花龙胆、翼
萼龙胆与草甸龙胆的亲缘关系较远。根据相似度指
数的大小，这５种植物两两之间的亲缘关系由近到
远依次排列为红花龙胆－翼萼龙胆、滇龙胆－头花龙
胆、翼萼龙胆－头花龙胆、草甸龙胆－头花龙胆、翼萼
龙胆－滇龙胆、红花龙胆－滇龙胆、红花龙胆－头花龙
胆、草甸龙胆－滇龙胆、红花龙胆－草甸龙胆及草甸龙
胆－翼萼龙胆。
表２ 龙胆属５种植物的同工酶相似度指数
Ｔａｂｌｅ　２　Ｓｉｍｉｌａｒｉｔｙ　ｉｎｄｅｘ　ｏｆ　ｉｓｏｚｙｍｅｓ　ｏｆ　ｆｉｖｅ　ｓｐｅｃｉｅｓ　ｉｎ　Ｇｅｎｔｉａｎａ
种名
Ｓｐｅｃｉｅｓ
草甸龙胆
Ｇ．ｐｒａｔｉｃｏｌａ
翼萼龙胆
Ｇ．ｐｔｅｒｏｃａｌｙｘ
滇龙胆
Ｇ．ｒｉｇｅｓｃｅｎｓ
头花龙胆
Ｇ．ｃｅｐｈａｌａｎｔｈａ
红花龙胆Ｇｅｎｔｉａｎａ．ｒｈｏｄａｎｔｈａ　 ０ ０．５００　 ０．１５０　 ０．１１１
草甸龙胆Ｇ．ｐｒａｔｉｃｏｌａ　 ０ ０．１０５　 ０．２００
翼萼龙胆Ｇ．ｐｔｅｒｏｃａｌｙｘ ０．１６７　 ０．２８６
滇龙胆Ｇ．ｒｉｇｅｓｃｅｎｓ　 ０．４３８
注：相似度指数＝相同酶带数／（相同酶带数＋不同酶带数）。
Ｎｏｔｅ：Ｓｉｍｉｌａｒｉｔｙ　ｉｎｄｅｘ＝ｔｈｅ　ｓａｍｅ　ｅｎｚｙｍｅ　ｂａｎｄｓ／（ｔｈｅ　ｓａｍｅ　ｅｎｚｙｍｅ　ｂａｎｄｓ＋ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｅｎｚｙｍｅ　ｂａｎｄｓ）．
　　图４ 龙胆属５种植物的同工酶聚类图（ＵＰＧＭＡ法）
　　Ｆｉｇ．４　Ｃｌｕｓｔｅｒｉｎｇ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｏｆ　ｔｈｒｅｅ　ｉｓｏｚｙｍｅｓ　ｏｆ　ｆｉｖｅ
ｓｐｅｃｉｅｓ　ｉｎ　Ｇｅｎｔｉａｎａ
　　２）聚类分析。图４看出，５种龙胆属植物分为
２个类群，类群Ⅰ为草甸龙胆；类群Ⅱ包括另４种龙
胆，在这个类群中，红花龙胆与翼萼龙胆聚为一支，
滇龙胆和头花龙胆聚为另一支。
３ 讨论与结论
１）５种龙胆属植物的３种同工酶共显示２９条
酶带，其中ＰＯＤ同工酶有８条酶带，ＳＯＤ同工酶有
９条酶带，ＡＭＹ同工酶有１２条酶带。根据 Ｇｒａｖａ
和Ｔｓｕｎｗａｋｉ［２２］的观点，物种同工酶条带数越多的
品系越进化，分化程度较高，为较进化种，物种同工
酶条带数越少的品系越原始，分化程度较低，为较原
始种。滇龙胆的酶带数最多，３种酶共有１３条酶
带；其次是红花龙胆与头花龙胆，３种酶共有１０条
酶带；翼萼龙胆与草甸龙胆相对较少，３种酶共有８
条酶带。表明，滇龙胆为较进化物种，翼萼龙胆、草
甸龙胆相对为较原始物种。５种龙胆属植物的酶带
数、迁移率及酶带强弱不同，同工酶谱可以将５种龙
胆属植物分开，说明５种龙胆属植物间有一定的分
化。同工酶酶谱特征在一定程度上能较好地反映种
间的遗传差异，对于探讨种间亲缘关系有一定价值。
２）相关数据和聚类分析显示，５种龙胆属植物
被分为２个类群，类群Ⅰ为草甸龙胆；类群Ⅱ包括另
４种龙胆，在这个类群中，红花龙胆与翼萼龙胆聚为
一支，滇龙胆和头花龙胆聚为另一支。表明，红花龙
胆与翼萼龙胆的亲缘关系较近，滇龙胆与头花龙胆
的亲缘关系也较近。草甸龙胆与这４种龙胆的亲缘
关系相对较远。
３）形态分类上，红花龙胆和翼萼龙胆同属龙胆
属的狭蕊组，两者的茎生叶均为宽卵形或卵状三角
形，未开花前两者形态非常相似，很难区分。滇龙胆
和头花龙胆同属龙胆属的多枝组，外部形态也很相
·４６·
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　贵 州 农 业 科 学
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　Ｇｕｉｚｈｏｕ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ
似，不同的只是花期滇龙胆的基生叶不发达，头花龙
胆的基生叶发达。依据过氧化物酶、超氧化物歧化
酶酶谱特征可以将这几种龙胆区分开来。因而对于
外部形态相似的龙胆属不同种植物，同工酶水平可
以对它们进行区分。并且聚类分析结果与传统形态
分类结果具一致性，支持何廷农［１］对狭蕊组、多枝
组、小龙胆组的划分。
［参 考 文 献］
［１］ 何廷农，刘尚武，吴庆如．中国植物志（第６２卷）［Ｍ］．
北京：科学出版社，１９８８．
［２］ 孙爱群，林长松，左经会，等．贵州龙胆属植物资源调
查及利用［Ｊ］．贵州农业科学，２０１４，４２（１０）：２３－２７．
［３］ 孙爱群，左经会，林长松，等．六盘水市龙胆科植物资
源及药用价值研究［Ｊ］．北方园艺，２０１２，２５７（２）：１７８－
１８１．
［４］ 杨维霞，周 乐，耿会玲，等．龙胆科药用植物化学成
分的研究现状［Ｊ］．西北植物学报，２００３，２３（１２）：
２２３５－２２４０．
［５］ 闫志刚，涂冬萍，董青松，等．华南龙胆的性状与显微
鉴别［Ｊ］．中药材，２０１２，３５（７）：１０７６－１０７８．
［６］ 罗集鹏，楼之岑．中药龙胆的形态组织学研究［Ｊ］．药
学学报，１９８７，２２（８）：６１９－６３６．
［７］ 戴晓勇，陈景艳，李 慧，等．贵州龙胆科植物资源分
布及观赏特性研究［Ｊ］．安徽农业科学，２０１０，３８（８）：
４００２－４００３，４００６．
［８］ 戴晓勇，陈景艳，李 惠，等．贵州龙胆科植物种类及
新分布［Ｊ］．种子，２０１０，２９（２）：６３－６５．
［９］ 杨爱梅，韩 晗，孙 静，等．藏药高山龙胆的化学成
分［Ｊ］．中国实验方剂学杂志，２０１１，１７（１９）：１２１－１２４．
［１０］ 张敬莹，王世盛，宋其玲，等．糙龙胆地上部分化学成
分研究［Ｊ］．中草药，２００９，４０（１）：２４－２７．
［１１］ 许传梅，张春红，董 琦，等．藏药提宗龙胆花的化学
成分研究［Ｊ］．西北植物学报，２００８，２８（１２）：２５４３－
２５４６．
［１２］ 王彩君，王智民，王维皓，等．龙胆属植物中的化学成
分及药理活性研究进展［Ｊ］．中国中药杂志，２００９，３４
（２３）：２９８７－２９９４．
［１３］ 金香子，徐 明．龙胆草提取物抗炎、镇痛、耐缺氧及
抗疲劳作用的研究［Ｊ］．时珍国医国药，２００５，１６（９）：
８４２－８４３．
［１４］ 王中仁．植物等位酶分析［Ｍ］．北京：科学出版社，
１９９６：３７－１６１．
［１５］ 孙爱群，苏 丽，周 未，等．双团棘胸蛙与棘腹蛙酯
酶同工酶的比较研究［Ｊ］．四川动物，２０１１，３０（２）：
２３６－２３８．
［１６］ 李红宁，孙爱群，左经会，等．贵州３种小檗属植物种
间的亲缘关系［Ｊ］．贵州农业科学，２０１１，３９（１０）：１１－
１６．
［１７］ 胡能书，万贤国．同工酶技术及其应用［Ｍ］．长沙：湖
南科技出版社，１９８５：７４－７５．
［１８］ 熊全沫．鱼类同工酶谱分析（上）［Ｊ］．遗传，１９９２，１４
（２）：４１－４４．
［１９］ 熊全沫．鱼类同工酶谱分析（下）［Ｊ］．遗传，１９９２，１４
（３）：４７－４８．
［２０］ Ｖａｕｇｈａｎ　Ｊ　Ｇ，Ｄｅｎｆｏｒｄ　Ｋ　Ｅ．Ａｎ　ａｃｒｙｌａｍｉｄｅ　ｇｅｌ　ｅｌｅｃｔｒｏ－
ｐｈｏｒｅｔｉｃ　ｓｔｕｄｙ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｓｅｅｄ　ｐｒｏｔｅｉｎｓ　ｏｆ　Ｂｒａｓｓｉｃａ，Ｓｉｎａｐ－
ｓｉｓ　ｓｐｅ－ｃｉｅｓ　ｗｉｔｈ　ｓｐｅｃｉａｌ　ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ　ｔｏ　ｔｈｅｉｒ　ｔａｘｏｎｏｍｉｃ
ｖａｌｕｅ［Ｊ］．Ｊ．Ｅｘｐ．Ｂｏｔ．，１９６８，１９：７２４－７３２．
［２１］ 徐克学．数量分类学［Ｍ］．北京：科学出版社，１９９４：
４７－４８．
［２２］ Ｇａｒｖａ　Ａ，Ｔｓｕｎｅｗａｋｉ　Ｋ．Ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｔｉｃａｌ　ｓｔｕｄｉｅｓ　ｏｎ－
ｐｅｒ－ｏｘｉｄａｓｅｉｓｏｚｙｍｅｓ［Ｊ］．Ｊａｐａｎｅｓｅ　Ｊ　Ｇｅｎｅｔｉｃｓ，１９７７，
５２：２８４－２８６．
（责任编辑：姜　萍）
·５６·
　孙爱群 等　龙胆属５种植物的同工酶比较
　ＳＵＮ　Ａｉｑｕｎ　ｅｔ　ａｌ　Ｓｔｕｄｙ　ｏｎ　Ｉｓｏｅｎｚｙｍｅｓ　ｏｆ　Ｆｉｖｅ　Ｓｐｅｃｉｅｓ　ｉｎ　Ｇｅｎｔｉａｎａ