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中药资源繁缕属植物分类研究进展



全 文 :园艺学 现代农业科技 2014年第 1期
中药资源繁缕属植物分类研究进展
孙建超 陈旭波 叶挺梅 *
(丽水学院生态学院,浙江丽水 323000)
摘要 综述了中药资源繁缕属植物的分类学研究进展,以期为繁缕属的进一步研究及应用提供参考。综合相关文献,着重探讨了在形
态学、实验分类学、化学分类等方面的研究进展。该属资源丰富,特有性高,但研究范围较窄,多种分类方法的有效结合是该属分类的最好
手段。该属分类学的工作重点在于进一步调查种子资源,扩大研究对象,增加分子标记等手段,结合药理学研究以发掘新药源。
关键词 中药资源;繁缕属;分类;形态学;实验分类学;化学分类
中图分类号 R281 文献标识码 A 文章编号 1007-5739(2014)01-0136-04
Study Advances in Classification of Chinese Medicinal Resource Stellaria L.
SUN Jian-chao CHEN Xu-bo YE Ting-mei*
(College of Ecology,Lishui University,Lishui Zhejiang 323000)
Abstract The classification study advances on Stellaria L.were introduced,so as to provide a reference for further study and application in the
genus.Based related literature,the study advances such as morphological,experimental taxonomy and chemical classification etc for Stellaria L.were
focused on.It pointed that the genus was rich in resources,high endemism,but the range of study was narrow,identification combined with a variety of
classification was the most effective method for Stellaria L.It showed that the current studies should focused on investing the germplasm resources ,
expanding the objection,increasing the molecular marker techniques,combining pharmacological research to expand herbal sources in Stellaria L.
Key words Chinese medicinal resource;Stellaria;classification;morphological;experimental taxonomy;chemical classification
繁缕属(Stellaria L.)隶属石竹科(Caryophyllaceae)繁缕
亚科(Subfam.Alsinoideae),民间用途广泛,多具清热解毒、活
血止痛、消肿等功效。主治痢疾、痈疮肿毒、乳痈、肠痈、疖
肿、跌打损伤,产后瘀滞腹痛等 [1]。该属植物世界上大概有
190 种,《Flora of China》收载有 64 种(不含种下单位),其中
28 种为我国特有 [2]。繁缕属药材资源丰富,据黄元等调查,
我国药用繁缕主要为繁缕 S.media (L.) Cyr.、中国繁缕(S.
chinesis Regel)、湖北繁缕 (S.henyri Williams)、鸡肠繁缕 (S.
neglecta Weihe)、银柴胡(S.dichotoma L.var.lanceolata Beg).等
超过 10 种,并且指出其黄酮碳苷类成分有很好的应用前
景 [3]。马利华等指出繁缕多糖及其黄酮碳苷具有一定的抗病
毒活性,比如艾滋病和疱疹病毒。繁缕属植物因其有明确的
抗菌、抗病毒活性逐渐成为科研领域的研究热点 [4]。
近年来,植物药越来越受到重视,但是《中国药典》2010
版一部收载的仅为银柴胡的干燥根 [5]。药典记载的品种的供
应能力有限,因此产生了许多伪品,比如丝石竹(Gypsophila
paniculata L.)、蚤缀(Arenaria serpyllifolia L).和麦瓶草(Silene
conoidea L.)3 种同科植物的根充银柴胡使用;另外,一些民
间习用的单方、验方也屡屡用到繁缕属植物;同时,繁缕属
植物中许多优良的药效成分有待于进一步的挖掘。为此,繁
缕属的分类研究应当放在重点位置,为进一步发掘新药源
奠定基础。就近年来繁缕属植物的分类作一综述,以期能得
到进一步的开发利用。
1 繁缕属的形态学分类
国外学者 Candolle(1824)、Ledebour(1842)、Bentham 和
Hooker(1862)、Maximowicz(1873)、Hooker和 Edgeworth(1875)、
Engler(1893)、Williams(1907)都对该属的形态学作了研究,
主要涉及物种的描述、修订及检索表的编制方面。对繁缕属
的形态学研究贡献较大的是 Komarov[6]。其《Flora of The U.S.
S.R.》第六卷中列出了 50 种繁缕属植物的分种检索表。所列
特征简洁明了,并且进行了属下分类。依据花瓣的数目与
形态、花柱的数目、种子的数目等特征将该属分成了 6 个
组,1 个亚组,11 个系。这 6 个组分别是:Section 1.Eustellaria
Fenzl,Section 2.Fimbripetalum Turcz.,Section 3.Adenonema
Fenzl,Section 4.Leucostemma Fenzl,Section 5.Oligosperma
Boiss., Section 6.Pseudalsine Boiss.。然后根据一些特征细分
大组 Section 1.Eustellaria Fenzl,建立了一个亚组 Subsection
Larbreae Fenzl 和 11 个系。Komarov 对属下的划分被后来的
多数学者采纳,其中 5 个属下分类单位都被保留下来,另外
其采用 Endlicher(1840)的观点将雀舌草组 Section Larbreae
Fenzl 作为亚组放在了繁缕组下,为繁缕属的分类奠定了良
好的基础。但是,其组 4 和组 6 的分组特征并不明显,把一
年生还是多年生作为划分的依据似乎不够合理。
我国学者刘汝强早在 1925 就对华北地区繁缕属植物
进行了采集。“Cowdry 在中国北部直隶属(以及烟台市)采集
植物目录”中记载繁缕属植物 3种,但是其中一种 S.aquatica
已被移出 ,作为 Myosoton aquaticum 的异名 。《中国高等植
物图鉴》第一卷及其补编中记载我国约有繁缕属植物 50
种 ,并对 16 个种进行了描述 [7],其中 S.pseudosaxatilis 和 S.
saxatilis 已经被合并到箐故草 S.Vestita Kurz.。
柯平和吴征镒 2 位学者对国产繁缕植物进行了较为详
细的研究。早在 1985,柯 平 [8]对繁缕属植物进行了研究,记
载了国产的 44 种 10 变种及 1 变型,隶属于 5 个组及 11 个
系。与前人的研究工作相比较,笔者新拟了 1 组 2 系,分别
是退化花瓣组 (Sect.Apetalum Y.W.Tsui)、无柄叶系 (Ser.
Sessi-lifoliae Y.W.Tsui)和垫状系 (Ser.Pulvinatae Y.W.Tsui et
P.Ke)。随后发表了采自陕西省周至县等地方的新种柳叶繁
缕(S.Salicifolia Y.W.Tsui ex P.Ke)。与此同时,一些地区性的
基金项目 浙江省丽水市科技局重点科研项目(20100412)。
作者简介 孙建超(1991-),男,浙江余姚人,在读本科生。研究方向:植
物学(中草药方向)。
* 通讯作者
收稿日期 2013-11-27
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工作也同步开展,如赵一之对内蒙古行政区范围内繁缕属植
物做了全面的考证,收载了 17 种、8 个变种、1 个变型,并发
表 1 个新种(Stellaria bistyla Y.Z.Zhao) [9]。朱长山 [10-11]补充了
无瓣繁缕在河南省的新记录,随后发表了采自华北的繁缕
属的新变种缘毛中国繁缕(S.chinensis var.ciliata C.S.Zhu et
H.M.Li)。另外,地方植物志的编写出版也为该属的研究提供
了资料。
吴征镒 [12]研究了国产的 36 种繁缕属植物,将已发表的
1 组、1 系、12 种、4 变种和 1 变型进行了归并或者废除,并
讨类了其系统位置与分类的问题,为以后中国植物志繁缕
属的编写提供了大量的资料。《中国植物志》第 26 卷中记载
了国产繁缕属植物 63 种、15 变种、2 个变型,将它们划分到
繁缕组(Sect.Stellaria)、腺丝组(Sect.Adenonema Pax)、繸瓣组
(Sect.Fimbripetalum Turcz.)、白冠组(Sect.Leucostemma Pax)、
独子组 (Sect.Schizothecium Fenzl)、寡子组 (Sect.Oligosperma
Boiss.)6 组、2 个亚组、11 个系中。其中繁缕组植物占了近
83%[13]。在其《中国被子植物科属综论》[14]中指出,繁缕属倾向
于花瓣多裂,种子减少。并且对各组在我国的分布及其特点
做了介绍。在系统安排中将繁缕属安排在了孩儿参属的前
面,指出孩儿参属明显从繁缕属特化而来。
《中国高等植物》第四卷中记载国产繁缕属植物 64 种,
14 变种,2 个变型 [15]。随后英文版植物志的编写对该属再次
修订,陈世龙等 [2]在其编写《Flora of China》第六卷中记载了
繁缕属植物 64 种,其中 28 种为我国特有,但是并没有对繁
缕属进行属下分类的处理,直接分种叙述。与中文版的相比
取消了千针万线草(S.yunnanensis Franch.)的变型密柔毛繁
缕 (S.yunnanensis Franch.f.Villosa C.Y.Wu ex P.Ke)和长叶繁
缕 (S.longifolia Muehl.ex Willd.)的变型睫毛长叶繁缕 (S.
longifolia Muehl.ex Willd.f.ciliolata Y.C.Chu),将其归并 。另
外,对不合格发表的种长毛箐姑草(S.pilosa Franch.)和沙生
繁缕(S.arenaria Maxim.)的命名给予了纠正,分别为 S.pilo-
soides Shi L.Chen et al.和 S.arenarioides Shi L Chen et al.。陈旭
波等 [16]采用聚类分析和主坐标分析,选取了根、茎、叶、种子
等 55 个形态特征对繁缕属和鹅肠菜属进行了数量分类学
研究,探讨属间及属内种间的亲缘关系,并且指出叶型、毛
被特征等在分类中具有重要的作用,为形态分类研究提供
了一些新思路。
以上分类学的研究表明形态学研究具有不可替代的
地位,能直接阐明其种属关系。由此编制的检索表提高了野
外识别与采集的效率。但是,由于环境的差异性导致分类特
征的可变性。 比如中国繁缕在特定的生境中出现被毛的情
况,又如银柴胡与线叶繁缕(S.dichotoma var linearis Fenzl)的
叶形的相似性。因此,需要其他手段来配合进行分类。
2 实验分类学研究
2.1 细胞生物学研究
早在 1927 年,Rocen 就对繁缕属植物的染色体进行了
计数。迄今为止,据报道(Aryavand & Fanarger,1980;Morton,
1984;王汉屏,2004;徐炳声,2006),繁缕属植物的基本染色
体组 x=9,10,11,12,13,14,15,16。孔 红等 [17]对叉歧繁缕做
了核型分析,指出核型对划分种和属具有很大的价值 。比
如,叉歧繁缕与其变种银柴胡染色体数目相同,但是在染色
体长度的变异范围却存在差异。并且指出,从染色体基数来
看,叉繁缕与鹅肠菜属均为 X=14,说明两者的亲缘关系较
近。有研究表明,该属植物存在异源多倍体和同一种具不同
数目染色体现象。如,Sinha et al[18]指出由于表型变化的可塑
性,使得 S.media、S.neglect、S.pallida 表现为一定的重叠性。
通过的对染色体核型的研究得出了 S.media 为异源四倍体,
染色基数均为 11,而它的祖先极可能为 S.neglecta 和 S.
pallida,后两者都为二倍体。又如 S.longipes 具有 4X、6X、8X3
种细胞类型,Macdonald 等推断其可能的祖先是 S.longifolia。
并且,比较了细胞型和环境的差异对表型可塑性的影响。指
出,不同细胞型可塑性差异表现在数量上,而不同生境的差
异往往表现在表型类型上,另外根据性状的相关性分析得
出可塑性的类型和数量可能是独立进化的 [19]。可见,细胞生
物学研究对于种间及种下单位的分类提供了很好的证据。
2.2 分子生物学研究
鹅肠菜早期曾被归于繁缕属,但其花柱数为 5、蒴果 5
瓣裂、裂瓣顶端再二齿裂与繁缕属植物不同,因此单列成一
属。刘 瑾等 [20]研究指出,依据繁缕属核基因 ITS 序列分析,
为了保证繁缕属的单系性,鹅肠菜应重新划入该属。赵海光
等 [21]基于 ITS 和 trnL- F 序列指出,N-J 系统树的结果支持
将鹅肠菜重新归入繁缕属的分类处理;鹅肠菜与繁缕、雀舌
草和箐姑草聚为一支,表明它们的亲缘关系相对较近。分子
生物学主要应用到了属间关系的讨论,未见其在种间亲缘
关系的讨论中。随着生物学的发展,一些分子标记技术,比
如 RAPD、RFLP、AFLP、SSR、SNP、ITS 等都可以运用到种间
的分类。这也是该属分子生物学研究的方向。
2.3 花粉形态学研究
国外的一些学者对该属植物的花粉形态作了一些研
究 [22-27],他们描述了花粉的大小、萌发孔的数目、孔径、花粉
的外壁及表面纹饰等。党荣理 [28]对产自新疆的 13 种繁缕属
植物的花粉进行了扫描电镜的研究,指出该属植物的花粉
的孔膜特征、萌发孔数目、表面纹饰有一定的分类意义;由
于叉歧繁缕与其变种披针叶叉繁缕花粉纹饰一致,因此得
出其对种下单位的讨论存在局限性。为了进一步掌握该属
植物花粉微形态,陈旭波等 [29]人利用扫描电子显微镜对产
华北地区的 13 种进行了观察。指出孔膜的特点、孔穴的密
度、萌发孔的数目等在种内表现出了多变性,因此,在类群
的划分方面意义不大。以上研究表明,该属的花粉形态还有
待进一步的研究。
2.3.1 种皮、叶表皮等形态的研究。为解决石竹科属、种水
平上的一些分类学问题,近年来,不少学者也进行了种皮微
型态特征的相关研究。证明可以为属下分类以及一些种的
亲缘关系的探讨提供重要证据 [30]。但是他们只涉及到繁缕
属中的个别种,比如繁缕 [31]。为此,陈旭波等 [32]利用扫描电
子显微镜对华北地区繁缕属 20 种(包括变种)的种皮微形
态特征进行了观察研究。结果表明,种皮表皮细胞齿的数目
和表面附属物,在部分种类中存在明显差异,可作为种类
划分和探讨亲缘关系的依据 。该属表皮细胞微形态研究
较少,陈旭波等 [33]人采用光学显微镜,对华北地区分布的繁
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园艺学 现代农业科技 2014年第 1期
缕属植物 18 种,以鹅肠菜属、卷耳属、石竹属、孩儿参属植
物 4 种作为外类群,观察叶表皮形态,结果显示可以为分种
及属间亲缘关系的探讨提供依据。种皮与叶表皮的显微结
构显示其在分类中具有一定辅助作用,在该属物种鉴定中
可以利用。
2.3.2 化学分类研究。繁缕属植物主要含有黄酮类、多糖、
环肽、酚酸类、挥发油、皂苷、甾醇等 [3-4,34-35]。贾爱群等 [36]研究
了三种石竹科植物(包括一种繁缕属植物 S.crassipes)的挥
发油成分,共得到 54 种化学成分,对挥发油成分进一步分
析,证明繁缕属和卷耳属具有较近的亲缘关系。由于繁缕属
种类繁多,各种间可能存在化学成分的种类和数量上的差
异,这也是化学分类的一方面。比如环肽类化合物在不同的
种中其结构存在差异 [4]。
近年来发展起来的中药指纹图谱技术,比如薄层扫描
(TLCS)、紫外光谱法(UV)、红外光谱法(IR)等逐渐在该属
中开展起来,并作为分类的依据。韩 健等[37]利用紫外光谱及
一阶导数光谱对繁缕属等四属植物进行了研究,表明其可
鉴别《中国药典》品种和非《中国药典》品种;并可区分不同
的属;证实了披针叶繁缕的特征峰,这与李同芬 [38]的研究结
果一致。而不同栽培年限的银柴胡其峰值具有一定的规律,
四至五年生>三年生>一至二年生。尹世清等 [39]用双波长薄
层扫描法对野生银柴胡、栽培银柴胡以及 4 种山银柴胡甾
醇含量进行了比较研究,结果显示,野生银柴胡中甾醇含量
较高,但栽培种会逐年积累;银柴胡(无论栽培与否)其甾醇
含量均远高于其他种;紫外光谱方法显示银柴胡与山银柴
胡图谱不同,可用于鉴别,甾醇类化合物银柴胡为山银柴胡
的 4倍。
孙 艳 [40]运用 GC-MS 方法对银柴胡的挥发油成分作了
鉴定,认为 2-甲基-5-异丙烯基-2,5-己二烯-1-乙酸酯、去
乙酰基蛇形毒素、14-甲基十五烷酸甲酯、 糠醇等是银柴胡
的主要有效成分;而黄 元等 [41]采用水蒸气蒸馏法提取繁缕
全草挥发油, 并用 GC-MS 联用技术对挥发油成分进行分
析,共鉴定 49 种成分,脂肪醇和烷烃及其衍生物是繁缕挥
发油的主要成分。可见,化学成分在鉴定野生种及物种间关
系上起到了很好的作用,如果合理利用,必能进一步规范药
材市场。
3 问题与展望
综上所述,繁缕属内分类研究已经出现多学科、多元化
发展局面。涉及形态学、细胞学、分子生物学、化学、解剖学
等学科。具体实践可知,只有各个鉴定手段有机联合使用,
才能克服某个方面的不足。
该属植物分布广泛,资源丰富。东北和西南山区是我国
的分布中心,种质资源丰富。我国西南山区(青藏高原、横断
山区)种类达 39 种,13 变种,占全国总数约 61%。而且类型
多样,变种数达 13 种。因此,做好这该 2 个地区的种子资源
调查、鉴定与化学成分研究,对于繁缕属植物的进一步开发
尤为重要。该属植物特有性较高,占国内分布的 43.8%。这些
特有种的研究非常少,涉及的资源利用及药理学内容非常
匮乏,有待于进一步深入。
分子生物学特别是分子标记技术的研究在该属中比
较缺乏,实践证明其在中药鉴定中有很大应用价值 [42],今后
应加大研究力度,补充鉴定资料。化学成分及诸多的药理试
验及资料表明该属植物提取物具有明显的抗菌抗病毒、驱
虫活性。因此,有必要采用中药现代化技术和手段对这一
资源丰富、药用价值较高的植物进行深入的研究和开发,发
掘新药来源。
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1~2 d 浇水 1 次。
4.4.2 中耕除草。每年 4 次。首次在春季未长春梢前,最后
一次在冬季进行。
4.4.3 追肥。每年 3 次。2—3 月,每穴施腐熟沼气液或人畜
粪水 10~20 kg 和过磷酸钙 50 g;5—7 月,每穴施腐熟沼气
液或人畜粪水 10~20 kg;11—12 月,每穴施腐熟堆肥或厩
肥 5~10 kg、过磷酸钙 200 g、硫酸铵 100 g,开环形沟施下,然
后培土。
4.4.4 整形修剪。需立杆辅助整形。定植后,于植株旁立一
高约 1.3 m 的辅助杆(木杆或竹竿等),绑扎小苗顺杆往上生
长,生长高度平辅助杆后摘去茎尖。每年修枝整形 2 次,将
坠地的枝条剪除,往上或横长的枝条适当剪短,使植株形成
直立型。
5 病虫害防治
5.1 防治原则
5.1.1 原则。按照“预防为主,综合防治”的植保方针,坚持
“农业防治、物理防治、生物防治为主,化学防治为辅”的无
害化防治原则。
5.1.2 标准。使用农药时,参照 GB 4285、GB 8321 和 NY/T
393 的有关规定执行。
5.2 防治方法
5.2.1 农业防治。合理修剪,及时清除病虫危害的枝、叶,将
植株根际落叶和表土清理掩埋。
5.2.2 物理防治。①悬挂诱虫灯。根据地形布局,每 1~2 hm2
挂灯 1 盏,诱杀尺蠖、天牛和金龟子等害虫的成虫。②人工
捕杀。5—7 月人工捕杀天牛和金龟子成虫;天牛幼虫蛀入树
干会有新鲜蛀口,可用钢丝钩杀。
5.2.3 生物防治。用“鲁保 1 号”粉剂兑水,配成含孢子量
2 000 万~3 000 万个/mL 的溶液喷雾防治菟丝子。
5.2.4 化学防治。①病害。白粉病:发病初期选用 15%粉锈
宁 (三唑酮)1 500 倍液或 10%己唑醇 1 000 倍液或四氟醚
唑+多菌灵 800~1 000 倍液或禾益乙醚酚 1 200 g/hm2+甲基
硫菌灵 800 倍液喷雾防治,每 7d 喷 1 次,连喷 2~3 次。炭疽
病: 发病初期选用 65%的代森锌+50%多菌灵 800 倍液或
70%甲基硫菌灵 800 倍+80%百菌清 600 倍液喷雾。褐斑病:
发病初期选用 70%甲基硫菌灵可湿性粉剂 800 倍液+70%
代森锰锌可湿性粉剂 800 倍液或扑海因 1500~2 000 倍液喷
雾交替防治交替,每隔 7~10 d 喷 1 次,连喷 2~3 次。②虫害。
蚜虫在植株未发芽前用波美 0.3~0.5 °Bé 的石硫合剂喷雾防
治,3月下旬至 4 月上旬叶片伸展开,蚜虫开始发生时,选用
万里红(10%吡虫啉可湿性粉剂)1 500~2 000 倍液,或 20%
啶虫脒可湿性粉剂 2 000 倍液,或 10%烯啶虫胺 2 000 倍液
喷雾,每 5~7 d 喷 1 次,连喷数次。咖啡虎天牛产卵期至产卵
盛期用 50%辛硫磷乳油 600 倍液喷射灭杀。每 7~10 d 喷 1
次,连喷数次;夏秋发现天牛寄生枝条时,可用药棉浸 80%
敌敌畏原液塞入虫孔,用泥封口,将幼虫毒杀。银花尺蠖于
幼虫发生初期用康宽(20%氯虫苯甲酰胺)2 500~3 000 倍液
或 2.5%鱼藤精乳油 400~600 倍液喷雾防治。
6 采收加工
6.1 采收方法
宜于花蕾呈白色,尚未开放时采收。手工采摘,保持花
蕾完好,不夹带花梗、枝叶。
6.2 盛装器具
用竹(藤)篮(筐)等透气性好的容器。
6.3 加工方法
6.3.1 直接烘干。 将鲜花分层放入烘箱或烘房, 初烘温度
40 ℃,2 h 后升温至 45~50 ℃,打开通风口,烘 8 ~10 h 后,升
温至 55℃左右使花速干。
6.3.2 杀青烘干。①蒸汽杀青烘干。用锅炉产生的蒸汽将鲜
花杀青,杀青温度 100~150 ℃,处理 15~60 s,然后将花分层
置烘房内,温度控制在 60~80 ℃,烘 3~8 h 即干。②机械杀青
烘干。设备由杀青机、热风炉、多层翻转干燥箱和温控箱组
成。杀青温度 250~300 ℃,处理 2 min,然后利用 80~110 ℃热
风通过多层烘干箱循环翻转脱水 40 min 左右即干。
7 分级、包装
按照 DB431221/T002 执行。
8 生产档案
对生产技术、病虫害防治、采收加工各个环节所采取的
措施进行详细记录,建立生产档案。
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