全 文 ：第 48 卷 第 2 期 河 南 农 业 大 学 学 报 Vol． 48 No． 2
2014 年 4 月 Journal of Henan Agricultural University Apr． 2014
收稿日期:2013 － 11 － 08
基金项目:国家科技支撑计划专题项目(2013BAD01B06);郑州市科技领军人才计划项目(10LＲC177)
作者简介:李翰书，1990 年生，女，河南新乡人，硕士研究生，主要从事林木遗传育种方向研究．
通讯作者:茹广欣，1963 年生，男，河南洛阳人，教授，博士生导师．
文章编号:1000 － 2340(2014)02 － 0140 － 05
泡桐属植物遗传多样性的 FISH-AFLP分析
李翰书1，卢妍妍1，李海英1，2，茹广欣1，杨 阳1，候 婷1，杨永红1
(1．河南农业大学林学院，河南 郑州 450002;2．华北水利水电学院，河南 郑州 450002)
摘要:运用 FISH-AFLP技术对泡桐属 14 个种及变种进行了基因组 DNA 分子水平上的检测．结果表明，从 64 对
AFLP引物组合中筛选出 9 对，共获得 1 171 条清晰可辨的条带，其中多态性条带 1 158 条，多态性带百分率达
98． 89%，14 份供试材料的遗传相似系数为 0． 603 4 ～ 0． 740 2，平均相似系数为 0． 671 8，反映出泡桐属不同种质
间差异明显，具有丰富的多态性．本研究运用 NTSYS 2． 1 版软件对样品进行 UPGMA聚类，分析了泡桐属植物 14
个种的遗传多样性和亲缘关系，并对泡桐属部分植物的分类问题进行讨论．
关键词:泡桐属;遗传多样;FISH-AFLP;聚类分析;亲缘关系
中图分类号:S 792 文献标志码:A
FISH-AFLP analysis of genetic dversity of genus Paulownia plants
LI Han-shu1，LU Yan-yan1，LI Hai-ying1，2，ＲU Guang-xin1，YANG yang1，HOU ting1，YANG Yong-hong1
(1． College of Forestry，Henan Agricultural University，Zhengzhou 450002，China;
2． North China Institute of Water Conservancy and Hydroelectric Power，Zhengzhou 450002，China)
Abstract:The FISH-AFLP analysis was conducted in order to investigate the sibship among the 14 ge-
nus Paulownia plants． A total of 1 171 DNA fragments were amplified using 9 out of 64 AFLP primers
with unambiguous unique polymorphic bands，among which 1 158 DNA bands were polymorphic and
the average percentage of polymorphic bands was 98． 89% ． The genetic similarity indexes among the 14
genus Paulownia plants ranged from 0． 603 4 to 0． 740 2 with an average of 0． 671 8，indicating signifi-
cant genetic differentiation among Paulownia accessions tested． NTSYS 2． 1 version of the software was
used to analyze the genetic diversity and genetic relationship between the 14 genus Paulownia plants，
and the taxonomy of some Paulownia species was discussed．
Key words:Paulownia;genetic diversity;FISH-AFLP;cluster analysis;sibship
泡桐属(Paulownia)属于玄参科(Scrophula-
riaceae)落叶乔木，原产于中国，在全国 23 个省、
市、自治区均有分布，是重要的速生优质用材树种
和绿化树种． 由于泡桐材质轻软，不翘裂，胀缩性
小，是优质的家具用材和装饰用材［1］． 另外，由于
泡桐的叶、花、果、树皮还具有良好的药用价值，因
此，泡桐占有重要的国民经济地位． 关于泡桐属植
物的栽培、育种以及依据外部形态指标进行的种间
亲缘关系探讨已做了比较深入研究［2］，但由于表
型性状经常会受环境因素的影响而发生变化，有些
情况下表型变化并不能真实反映遗传变异，要更加
准确、细致地理解种群的遗传变异状况，仅仅依赖
表型性状是远远不够的，还必须进行更深层次的研
究，并加以比较和验证［3］． 目前对泡桐在分子水平
上的分类只有卢龙斗等［4］运用 ＲAPD 分析方法将
泡桐属 7 种植物分为白花泡桐、川泡桐、楸叶泡桐、
DOI:10.16445/j.cnki.1000-2340.2014.02.017
第 2 期 李翰书等:泡桐属植物遗传多样性的 FISH-AFLP分析 141
南方泡桐、山明泡桐组和毛泡桐、兰考泡桐组 2 大
类群;马浩等［5］利用 ＲFLP分子标记法对泡桐属 15
个植物的叶绿体 DNA 进行分析，最终将研究材料
分为南方泡桐组、毛泡桐组和白花泡桐组;莫文娟
等［6］则运用 ISSＲ分子标记对泡桐属 21 份种、变种
及变型材料进行亲缘关系分析，最终将供试材料分
为 3 大类群，分别是台湾泡桐和川泡桐;白花泡桐、
南方泡桐 2、南方泡桐 1、南方泡桐 3、鄂川泡桐、建
始泡桐和成都泡桐;兰考泡桐 1、兰考泡桐 2、山明
泡桐 2、山明泡桐 1、白花兰考泡桐、楸叶泡桐 2、楸
叶泡桐 l、圆冠泡桐、宜昌泡桐、亮叶毛泡桐、毛泡桐
l和毛泡桐 2．上述所得结论存在一定差异，种群之
间的分类仍存在较多争议． 扩增片段长度多态性
(amplified fragment length polymorphism AFLP) ，结
合了 ＲFLP 和 ＲAPD 技术的优点，扩增条带丰富、
多态性高、重复性好是目前综合效应较高的分子标
记方法．目前广泛应用于种质资源研究［7 ～ 11］、系统
分类［12，13］、遗传多样性检测［14 ～ 16］以及遗传图谱的
构建和基因定位等方面，已成为材料间遗传多样性
和分类研究的有效手段［17］． 但有关 AFLP 技术在
泡桐上的应用还未见报道，本研究旨在利用 FISH-
AFLP分子标记技术，研究探讨泡桐属植物种间的
亲缘关系，为该属植物的系统分类和遗传育种提供
更可靠的理论依据．
1 材料与方法
1． 1 材料与试剂
试验所用材料(表 1)采自江西九江共青城泡
桐种源育种基地，每份材料选取 3 ～ 5 片新鲜嫩叶，
置于采样箱中带回实验室，－ 20 ℃保存备用．
表 1 供试材料
Table 1 Materials tested in the experiment
编号
No
种(变种，变型)
Species(Varietas，Forma)
来源
Origin
1 白花泡桐 P． fortunei 江西共青城 Gongqingcheng，Jiangxi
2 毛泡桐 P． tomentosa 河南郑州市 Zhengzhou City，Henan
3 川泡桐 P． fargesii 湖北建始县 Jianshi County，Hubei
4 台湾泡桐 P． kawakamii 福建邵武县 Shaowu County，Fujian
5 南方泡桐 P． australis 江西共青城 Gongqingcheng，Jiangxi
6 楸叶泡桐 P． catalpifolia 山东泰安市 Tai’an City，Shandong
7 鄂川泡桐 P． albiphloea 四川简阳县 Jianyang County，Sichuan
8 成都泡桐 P． albiphloea var． chengtuensis 四川成都市 Chengdu City，Sichuan
9 兰考泡桐 P． elongata 江西共青城 Gongqingcheng，Jiangxi
10 山明泡桐 P． lamprophylla 河南镇平县 Zhenping County，Henan
11 宜昌泡桐 P． ichangensis 湖北宜昌市 Yichang City，Hubei
12 建始泡桐 P． jianshiensis 湖北建始县 Jianshi County，Hubei
13 白花兰考泡桐 P． elongata f． alba 河南南阳市 Nanyang City，Henan
14 亮叶毛泡桐 P． tomentosa var． lucida 辽宁大连市 Dalian City，Liaoning
本试验所用试剂:Taq 酶(2 U·μL －1)、dNTPs
(10 mmol·L －1)、引物(10 mmol·L －1)以及 B002-
1 Marker，DGL 2000 Marker均由北京鼎国昌盛生物
技术有限责任公司提供，内切酶(10 U·μL －1)、T4
连接酶(5 U·μL －1)及 ＲOX 500 相对分子质量内
标则分别购自 NEB 公司和 ABI 公司． 试验所用接
头和扩增引物序列详见表 2．
1． 2 总 DNA的制备及检测
参照 DOYLE 等［18］经典的 CTAB 法略加改动
提取 DNA总基因组并加以纯化．具体方法:称取泡
桐叶片 50 mg，液氮研磨成粉状，并将粉末转移到
装有 800 μL 2 × CTAB 提取液的 2 mL 离心管中，
加入 60 μL巯基乙醇混匀，60 ℃预热 30 min，其间
混匀 2 ～ 3 次，取出样品于室温放置，待样品冷却到
室温加入 800 μL［V(氯仿)∶ V(异戊醇)= 24∶ 1］，
振荡混匀，12 000 r·min －1离心 15 min，取上清液
到另一新 2 mL离心管，加入等体积的氯仿与异戊
醇［V(氯仿)∶ V(异戊醇)= 24 ∶ 1］，振荡混匀，
12 000 r·min －1离心 15 min，取上清液到新的 2
mL离心管中加入 1． 5 倍体积 1 × CTAB 沉淀液，放
置 20 ～ 30 min，12 000 r·min －1离心 15 min 将沉
淀晾干溶于 200 μL TE-buffer(溶解) ，加入 400 μL
95% 乙醇，20 μL 3 mmol·L －1乙酸钠，－ 20 ℃ 沉
淀 1 h后 4 ℃ ，12 000 r·min －1离心 15 min，加入
500 μL 75%乙醇洗涤，12 000 r·min －1离心 10 min
后加入 30 ～ 50 μL TE-buffer稀释，经 0． 8%琼脂糖
凝胶电泳检测后 － 20 ℃保存备用，使用前将其稀
释为 50 mg·L －1 ．
142 河 南 农 业 大 学 学 报 第 48 卷
表 2 扩增引物序列及名称
Table 2 The sequences and name of the amplification primer
Pst I 引物
Pst I primers
引物序列
Sequence(5’to 3’)
Mse I 引物
Mse I primers
引物序列
Sequence(5’to 3’)
adaptor P1 5’＞ CTCGTAGACTGCGTACATGCA ＜3’ adaptor E1 5’＞ GACGATGAGTCCTGA G ＜3’
adaptor P2 5’＞ TGTACGCAGTCTAC ＜ 3’ adaptor E2 5’＞ TACTCAGGACTCAT ＜ 3’
P-GAA 5’＞ GACTGCGTACAT GCAGAA ＜3’ M-CAC 5’＞ GATGAGTCCTGAGTAACAC ＜ 3’
P-GAC 5’＞ GACTGCGTACATGCAGAC ＜3’ M-CAG 5’＞ GATGAGTCCTGAGTA ACAG ＜3’
P-GAG 5’＞ GACTGCGTACATGCAGAG ＜3’ M-CTA 5’＞ GATGAGTCCTGAGTA ACTA ＜ 3’
P-GAT 5’＞ GACTGCGTACATGCAGAT ＜ 3’
P-GTG 5’＞ GACTGCGTACATGCAGTG ＜3’
1． 3 AFLP分析
1． 3． 1 限制性酶切及连接反应 采用北京鼎国生
物技术公司的试剂盒，按照其操作指南酶切连接一
步进行．在 20 μL 反应体系中含有 DNA 模板(50
mg·L －1)4 μL，Adapter 1 μL，PstI和 MseI 2 μL，10
× Ｒeaction buffer 2． 5 μL，10 mM ATP 2． 5 uL，T4
Ligase 1 μL，AFLP-Water7 μL． 将上述混合液混匀
离心数秒，37 ℃保温 5 h，8 ℃保温 4 h，4 ℃过夜．
1． 3． 2 预扩增 参照马庆国等［17］的 16 个早实核
桃良种遗传多样性 AFLP分析的预扩增体系及预扩
增程序，将预扩产物经 1∶ 20稀释后作为选扩模板．
1． 3． 3 选择性扩增 用筛选出的 9 对引物组合
(表 2)经荧光标记后进行选择性扩增(对 MseI 引
物的 5’端进行荧光标记)． 25 μL 扩增体系中含有
2 μL 预扩稀释样品，2． 5 μL 10 × PCＲ buffer，0． 5
μL dNTPs，PstI 和 MseI 引物各 1 μL，0． 5 μL Taq
酶，最后用 ddH2O 补足体系． 将上述体系混匀，离
心数秒后参照宁德鲁等［19］的云南省核桃品种遗传
多样性的 FISH － AFLP扩增程序进行选择性扩增．
1． 4 电泳与数据分析
将选择扩增后的样品在 ABI 377 自动测序仪
上电泳分离检测［20］，然后把 14 份供试材料 9 对荧
光引物产生的电泳凝胶图通过 GeneScan 3． 1 软件
转换为“0 /1”矩阵(即根据凝胶上不同材料同一位
置条带的有无进行统计，有带记为“l”，无带记为
“0”)．对原始矩阵用 NT-SYSpc 2． 10 软件进行数
据分析，通过 SimQual 程序求相似系数，并获得相
似系数矩阵;用 SHAN程序中的 UPGMA 进行聚类
分析，并通过 Treeplot模块生成聚类图．
2 结果与分析
2． 1 泡桐属植物叶片 DNA的检测结果
所提取的泡桐属植物基因组 DNA 通过 DG-III
双稳数显电泳仪在电压 180 V，电泳时间 1 h 条件
下经 1． 5%的琼脂糖凝胶电泳检测结果如图 1 所
示，所提取的 DNA 有较清晰的电泳条带，可用于
AFLP扩增．
2． 2 泡桐属植物叶片 DNA的多态性分析
从 64 对引物组合中筛选出扩增产物稳定、重
复性好、多态性高且分辨能力强的引物组合［20］，利
用所选出的 9 对引物组合(表 3)对 14 份供试材料
进行选择性扩增，获得了较好的扩增结果(图 2)．
共检测到 DNA片段 1 171 条，大小为 70 ～ 500 bp，
其中多态性条带 1 158 条，平均每个引物组合检测
到多态性片段 128． 7 条，平均多态性比率高达
98． 9%，这表明 14 份泡桐品种具有较高比例的多
态性条带．其中引物组合 P-GTG / M-CAG 检测到
的条带最多，171 条均为多态性条带，多态性比例
为 100%;引物组合 P-GAG / M-CAC共获得总条带
115 条，多态性条带 107 条，多态性比例为
93． 04%，但在所选用的 9 对引物组合中多态性比
例最低．可见，FISH-AFLP 检测泡桐品种遗传多样
性的效率很高，也充分体现了试验材料具有丰富的
遗传多样性．
注:1．白花泡桐;2．毛泡桐;3．川泡桐;4．台湾泡桐;5．南方泡桐;6．
楸叶泡桐;7．鄂川泡桐;8． 成都泡桐;9． 兰考泡桐;10． 山明泡桐;
11．宜昌泡桐;12．建始泡桐;13．白花兰考泡桐;14．亮叶毛泡桐
Note:1． P． fortunei;2． P． tomentosa;3． P． fargesii;4． P． kawakamii;5．
P． australis;6． P． catalpifolia;7． P． albiphloea;8． P． albiphloea var．
chengtuensis;9． P． elongata;10． P． lamprophylla;11． P． ichangensis;
12． P． jianshiensis;13． P． elongata f． alba;14． P． tomentosa var． lucida;
图 1 泡桐属植物基因组 DNA电泳
Fig． 1 Gel electrophoretogram of the
genus Paulownia genomic DNA
2． 3 泡桐属种间聚类与遗传关系分析
利用 NT-SYSpc 2． 10 软件计算泡桐属植物种
间遗传相似系数并基于 UPGMA 法绘制泡桐属种
质间亲缘关系树状图(图 3)．由图 3 可知，当阈值
第 2 期 李翰书等:泡桐属植物遗传多样性的 FISH-AFLP分析 143
为 0． 675 时，可将 14 份供试材料分成Ⅳ个类群．其
中，类群Ⅰ包括白花泡桐、台湾泡桐、南方泡桐、山
明泡桐、宜昌泡桐、鄂川泡桐、兰考泡桐、建始泡桐
以及白花兰考泡桐;类群Ⅱ包括毛泡桐、亮叶毛泡
桐以及川泡桐;类群Ⅲ和Ⅳ均由 1 个泡桐种群组
成，分别为楸叶泡桐和成都泡桐．
表 3 不同引物组合在泡桐种群中的多态位点比率
Table 3 The polymorphic ratio of different
primers combination in Paulownia species
引物组合
Primer
combination
总条带数
Number
of bands
多态性条带
Number of
polymorphic
bands
多态性比率 /%
Proportion
polymorphic
fragments
P-GAA /M-CAC 133 133 100． 00
P-GAA /M-CAG 146 146 100． 00
P-GAC /M-CTA 117 116 99． 15
P-GAG /M-CAC 115 107 93． 04
P-GAG /M-CAG 127 126 99． 21
P-GAG /M-CTA 129 128 99． 22
P-GAT /M-CAC 137 136 99． 27
P-GAT /M-CAG 96 95 98． 96
P-GTG /M-CAG 171 171 100． 00
平均值 Mean 130． 1 128． 7 98． 92
注:1．白花泡桐;2．毛泡桐;3．川泡桐;4．台湾泡桐;5． 南方泡桐;6．
楸叶泡桐;7．鄂川泡桐;8． 成都泡桐;9． 兰考泡桐;10． 山明泡桐;
11．宜昌泡桐 12． 建始泡桐;13．白花兰考泡桐;14．亮叶毛泡桐;M
代表 Marker(ＲOX500 )
Note:1． P． fortunei;2． P． tomentosa;3． P． fargesii;4． P． kawakamii;5．
P． australis;6． P． catalpifolia;7． P． albiphloea;8． P． albiphloea var．
chengtuensis;9． P． elongata;10． P． lamprophylla;11． P． ichangensis;
12． P． jianshiensis;13． P． elongata f． alba;14． P． tomentosa var． lucida;
M． Marker(ＲOX500)
图 2 引物组合 P-GAT/ M-CAG对
14 个泡桐属植物的 AFLP扩增结果
Fig． 2 Amplification results of primer combination
P-GAT/M-CAG to 14 genus Paulownia plants
3 结论与讨论
卢龙斗等［4］对泡桐属 7 种植物的 ＲAPD分析
注:1．白花泡桐;2．毛泡桐;3．川泡桐;4．台湾泡桐;5．南方泡桐;6．
楸叶泡桐;7．鄂川泡桐;8． 成都泡桐;9． 兰考泡桐;10． 山明泡桐;
11．宜昌泡桐 12．建始泡桐;13．白花兰考泡桐;14．亮叶毛泡桐
Note:1． P． fortunei;2． P． tomentosa;3． P． fargesii;4． P． kawakamii;5．
P． australis;6． P． catalpifolia;7． P． albiphloea;8． P． albiphloea var．
chengtuensis;9． P． elongata;10． P． lamprophylla;11． P． ichangensis;
12． P． jianshiensis;13． P． elongata f． alba;14． P． tomentosa var． lucida;
图 3 14 份泡桐属植物的聚类分析图
Fig． 3 Clustering analysis diagram of
the 14 genus Paulownia plants
中，选用 13 个引物共扩增出 89 条谱带，其中多态
性谱带有 63 条，多态性比率为 70． 79%;莫文娟
等［6］运用 9 条 ISSＲ引物对泡桐属植物进行亲缘关
系分析，共扩增出 85 条片段，多态性条带 74 条，多
态性比率为 87． 05% ． 本试验采用 FISH-AFLP 技
术，运用 9 对引物组合对 14 份泡桐属植物进行了
基因组 DNA分子水平上的检测，共获得多态性条
带 1 158 条，多态性百分率达 98． 89 % ，表现出更
高的检测效率，说明 FISH-AFLP 方法得到的信息
量较大，是一种较好的用于分析遗传多态性和指纹
图谱分析的标记方法［19］．陈志远等［21］认为南方泡
桐(Paulownia australis)和台湾泡桐(Paulownia
kawakamii)应合为 1 种并将南方泡桐作为异名，本
研究在 DNA水平上提供了一定的理论基础，显示
南方泡桐和台湾泡桐亲缘关系最近，被聚在 1 个亚
群．同时，鄂川泡桐与兰考泡桐聚为 1 个亚群，这与
陈志远等［21］鄂川泡桐应为南方泡桐与兰考泡桐的
杂交种的观点一致．白花兰考泡桐是根据花冠颜色
而定的［22］，本试验结果也得出白花兰考泡桐与兰
考泡桐聚为 1 组的结论，它们间的遗传相似系数比
较大，也说明它们的亲缘关系较近． 本研究同样在
DNA水平上支持白花兰考泡桐为兰考泡桐的变型
这一观点． 陈志远等［21，23］的泡桐属植物同工酶分
析及泡桐属的地理分布中均认为山明泡桐的谱带
一部分与兰考泡桐相同，一部分与毛泡桐相同，因
此得出结论，山明泡桐可能是兰考泡桐和毛泡桐的
144 河 南 农 业 大 学 学 报 第 48 卷
杂交种．本研究结果显示，山明泡桐与兰考泡桐被
聚在 1 个亚群，支持了这一观点． 1995 年熊金桥
等［2］用数量分类的方法对泡桐属植物的 38 个性状
进行分析，并对所分析的种或变种进行了系统聚
类，最终把该属植物分成 3 个组，即白花泡桐组:白
花泡桐、兰考泡桐等;毛泡桐组:毛泡桐、川泡桐、南
方泡桐等;楸叶泡桐组:楸叶泡桐、山明泡桐等．在
本研究结果中，虽然山明泡桐没有归入楸叶泡桐组
中，但从遗传相似系数可以看出二者的遗传一致度
也比较大，这与熊金桥等［2］的研究结果基本相符．
但在本研究中，成都泡桐和楸叶泡桐被单独聚为 1
组，且成都泡桐被聚在了最外类群，得出了与以往
结果不一致的结论，还需要更进一步试验验证．
参考文献:
［1］ 茹广欣，何瑞珍，朱秀红，等．泡桐无性系间木材性状
的差异［J］．河南农业大学学报，2007，41(5) :531 －
535．
［2］ 熊金桥． 泡桐属的数量分类研究［J］． 植物研究，
1992，12(2) :185 － 188．
［3］ 王 念，何 威，王文君，等． AFLP 分子标记在泡桐
遗传育种中的应用与前景［J］．安徽农业科学，2008，
36(1) :151 － 153．
［4］ 卢龙斗，谢龙旭，杜启艳，等． 泡桐属七种植物的
ＲAPD分析［J］．广西植物，2001，21(4) :335 － 338．
［5］ 马 浩，张冬梅，李荣幸，等． 泡桐属植物种类的
ＲFLP分析［J］．植物研究，2001，21(1) :136 － 139．
［6］ 莫文娟，傅建敏，乔 杰，等．泡桐属植物亲缘关系的
ISSＲ分析［J］．林业科学，2013，49(1) :61 － 67．
［7］ 吴锦程，杨向晖，林顺权，等．枇杷 AFLP 分析体系的
建立与应用［J］．果树学报，2006，23(5) :774 － 778．
［8］ 雷新涛，王家保，徐雪荣，等．杧果主要品种遗传多态
性的 AFLP 标记研究［J］． 园艺学报，2006，33(4) :
725 －730．
［9］ 王同坤，柏素花，董超华，等． 燕山板栗种质资源
AFLP遗传多样性分析［J］． 分子植物育种，2007，5
(1) :121 － 127．
［10］王永康，田建保，王永勤，等． 枣树品种品系的 AFLP
分析［J］．果树学报，2007，24(2) :146 － 150．
［11］闫 龙，关建平，宗绪晓，等． 木豆种质资源 AFLP 标
记遗传多样性分析［J］． 作物学报，2007，33(5) :
790 － 798．
［12］易干军，余晓英，霍合强，等． 粉蕉、大蕉和龙牙蕉的
AFLP分类研究［J］． 园艺学报，2002，29(5) :413 －
417．
［13］张德强，张志毅，杨 凯，等．分子标记技术在杨树遗
传变异及系统分类中的应用［J］． 北京林业大学学
报，2001，23(1) :76 － 80．
［14］刘 萍，王子成，尚富德，等．河南部分牡丹品种遗传
多样性的 AFLP 分析［J］． 园艺学报，2006，33(6) :
1369 － 1372．
［15］朱根发，李冬梅，郭振飞，等．大花蕙兰遗传多样性及
亲缘关系的 AFLP分析［J］．园艺学报，2007，34(2) :
417 － 424．
［16］程振家，王怀松，张志斌，等． 甜瓜遗传多样性的
AFLP分析［J］． 西北植物学报，2007，27(2) :244 －
248．
［17］马庆国，齐 静，裴 东，等． 16 个早实核桃良种遗传
多样性的 FISH-AFLP 分析［J］． 林业科学研究，
2010，23(5) :631 － 636．
［18］ DOYLE J J，DOYLE D J． Isolation of plant DNA from
fresh tissue［J］． Focus，1990，12:13 － 15．
［19］宁德鲁，马庆国，张 雨，等．云南省核桃品种遗传多
样性的 FISH-AFLP 分析［J］． 林业科学研究，2011，
24(2) :189 － 193．
［20］茹广欣，袁金玲，张 朵，等． 运用 AFLP 技术分析筇
竹种群遗传多样性［J］．林业科学研究，2010，23(6) :
850 － 855．
［21］陈志远．泡桐属的起源，演化与地理分布［J］．武汉植
物学研究，2000，18(4) :325 － 328．
［22］蒋建平． 泡桐栽培学［M］． 北京:中国林业出版社，
1990:17 － 43．
［23］陈红林，陈志远，梁作侑，等．泡桐属植物同工酶分析
［J］．湖北林业科技，2003(2) :1 － 4．
(责任编辑:常思敏)