全 文 ：作者简介:卢仁宣 , 主管药师;研究方向:临床药学;Tel:(0771) 3121558;E-mail:l rx 2@126.com
HPLC法测定复方矮地茶片中岩白菜素含量
卢仁宣 (广西民族医院 , 南宁　530001)
摘要:　目的 应用 HPLC法测定复方矮地茶片中岩白菜素含量。方法 采用 HPLC 法 , 色谱柱为 Shim-
pack CLD-ODS C18柱 , 流动相为甲醇-水 (20∶80);检测波长为 275nm;流速为 0.8mL·min-1 。结果 岩
白菜素与样品中其它成分分离好 , 线性范围为 0.09184 ～ 0.64288μg (r =0.9999), 回收率为 98.1%,
RSD为 0.92%。结论 本法简便 、 准确 , 重现性好 , 可用作该制剂的含量测定 。
关键词:　HPLC;复方矮地茶片;岩白菜素;含量测定
中图分类号:R284 ;R927.2 　　文章标识码:A 　文章编号:1002-7777 (2010)10-1000-02
Determination of Bergeninum in Compound Japanese Ardisia Herb Tablets by HPLC
Lu Renxuan(Guangx i National Hospital , Nanning 530001)
Abstract:　Objective To estali sh a HPLC method for determination of berg eninum in Compound Japanese
Ardisia Herb Tablets .Methods The Shim-pack CLD-ODS C18 co lumn and the mobile phase of methanol-
water(20 ∶80)was used , the f low rate w as 0.8mL · min-1 ;the w ave length w as 275nm.Results The
impurity in samples did not interfere w ith the dete rminat ion of berg eninum.Bergeninum show ed a good
linear relationship in the range of 0 .09184 ～ 0.64288μg (r=0.9999).The average recovery rate and RSD
was 98 .1% and 0 .92% respectively .Conclusion The method is simple , accurate and reproducible w hich
may be used for the quality cont rol of Compound Japanese A rdisia Herb Tablets.
KEYWORDS:　HPLC;Compound Japanese Ardisia Herb T ablets;bergeninum;determination
　　复方矮地茶片原收载于 《卫生部药品标准》 中
药成方制剂第九册 , 由矮地茶 、岗松等 5味中药组
成。具有清热解毒 , 化痰止咳作用 。用于肺热咳嗽
及慢性气管炎等症。原标准无含量测定项 , 为了更
好控制该产品的质量 , 本试验采用高效液相色谱法
测定制剂中岩白菜素含量 , 方法简便 、 准确 、重复
性好 , 为该制剂质量控制提供可靠实验方法 。
1　仪器与试药
日本岛津 LC-10A TVP 高效液相色谱仪;
S PD-10AVP 紫外检测仪;威玛龙工作站;日本 GR-
202双量程10万分之一及万分之一电子分析天平。
甲醇为色谱纯;水为重蒸馏水 。岩白菜素对照
品 (批号:1532-200202 , 供含量测定用 , 中国药
品生物制品检定所)。复方矮地茶片 (市售 , 批号:
090115 、 090401 、 090510 , 其中批号为 090401 样
品平均片重:0.3089g)。
2　方法与结果
2.1　色谱条件
色谱柱:Shim-pack CLD-ODS C18 (4.6mm×
150mm , 5μm);流动相:甲醇-水 (20 ∶80);流
速:0.8mL · min-1 ;柱 温:25℃;检测 波长:
275nm;进样量 20μL ;理论板数按岩白菜素峰计
算应不低于 3000;分离度为 5.5。
2.2　供试品溶液制备
取本品 20 片 (批号:090401), 除去糖衣后 ,
精密称定 , 研细 , 混匀。取约 0.3g , 精密称定 ,
置 100mL 三角烧瓶中 , 精密加入甲醇 25mL , 称
重 , 超 声 处 理 30min (功 率:150W , 频 率:
40KHz), 放冷 , 再称重 , 用甲醇补足减失的重量 ,
摇匀 , 滤过 。取续滤液 5mL 置 20mL 量瓶中 , 加
甲醇至刻度 , 摇匀 , 即得。
2.3　对照品溶液制备
1000 中国药事 2010年第 24卷第 10期
DOI :10.16153/j.1002-7777.2010.10.006
精密称取岩白菜素对照品 11.48mg , 置 50mL
量瓶中 , 加甲醇适量使溶解并稀释至刻度 , 摇匀 。
精密量取 5mL , 置 50mL 量瓶中 , 用甲醇稀释至刻
度 , 摇匀 , 即得 (每1mL中含岩白菜素0.023mg)。
2.4　阴性溶液制备
按本品处方及制备工艺制得不含矮地茶的阴性
样品 , 取约 1片量 , 按供试品溶液制法制成阴性溶
液即得。
2.5　干扰试验
取对照品溶液 、 供试品溶液和阴性溶液各
20μL 进样 , 测定 , 结果:空白无干扰。见图 1。
a.对照品溶液;b.供试品溶液;c.阴性溶液 ;1.岩白菜素。
图 1　复方矮地茶片 HPLC 色谱图
2.6　线性关系考察
精密称取岩白菜素对照品 11.48mg , 置 50mL
量瓶中 , 加甲醇适量使溶解 , 并稀释至刻度 , 摇
匀 , 精密吸取 0.2 、 0.5 、 0.8 、 1.1 、 1.4mL , 分
别置 10mL 量瓶中 , 加甲醇至刻度 , 摇匀 , 分别进
样 20μL (定量环), 测定 , 以峰面积为纵坐标 , 浓
度为横坐标 , 计算得回归方程:
Y =1.6316035×106X +4.51114×104 　r=0.9999
结果表明:岩白菜素进样量在 0.09184 ～ 0.64288μg范
围内 , 其浓度与峰面积呈良好的线性关系。
2.7　精密度试验
取同一批供试品溶液 , 依法连续进样 6次 , 测
定样品峰面积 , 结果:峰面积平均值为 817924 ,
RSD为 0.57%, 表明本试验方法精密度良好。
2.8　重复性试验
取同一批样品 (批号:090401), 依法平行测
定 6次 , 结果:岩白菜素平均含量 2.45mg ·片-1 ,
RSD为 1.30%。表明本法重复性良好。
2.9　稳定性试验
取供试品溶液 , 在相同色谱条件下 , 分别于 0 、
3 、 6 、 9h进样测定峰面积 , 结果:峰面积平均值为
821730 , RSD为 0.42%, 表明本品在 9h内稳定。
2.10　回收率试验
取已知含岩白菜素 2.45mg ·片-1的样品 (批
号:090401)6份 (每份约 0.15g), 精密称定 , 分
别精密加入岩白菜素 1.38mg (每份加入每 1mL 含
0.2296mg 岩白菜素对照品溶液 6mL), 按供试品
溶液制备方法制得回收试验供试液 , 依法进样测
定 , 计算回收率 , 结果见表 1 。
表 1　岩白菜素回收率测定结果
样品中岩白菜
素量 (mg)
加入对照品
量 (m g)
测得量
(mg)
回收率
(%)
平均回收率
(%)
RSD
(%)
1.23 1.38 2.59 98.6
1.26 1.38 2.63 99.3
1.31 1.38 2.65 97.1 98.1 0.92
1.25 1.38 2.60 97.8
1.30 1.38 2.64 97.1
1.35 1.38 2.71 98.6
2.11　样品测定
取 3个批号 (090115 、 090401 、 090510)的样
品 , 分别按上述方法制得供试品溶液 , 依法进样测
定岩白菜素的峰面积 , 以外标法计算岩白菜素含
量 , 结果见表 2。
表 2　样品测定结果 (n=3)
批号 090115 090401 090510
平均值 (mg·片-1) 2.46 2.45 2.47
3　讨论
文献报道[ 1] , 矮地茶中岩白菜素含量测定的波长
为 275nm。选择为本品测定岩白菜素含量的波长。
比较了甲醇-水 (20 ∶80)、 甲醇-水 (15 ∶85)
和甲醇-水 (30 ∶70), 试验结果表明:甲醇-水
(15∶85), 岩白菜素峰保留时间过长;甲醇-水
(30∶70), 岩白菜素峰形不佳。本法采用的流动
相:甲醇-水 (20 ∶80), 岩白菜素保留时间约
17min , 峰形较好 , 分离度也好 。
用甲醇 15 、 25 、 50mL 超声处理 20 、 30 、
40min (功率:150W , 频率:40KHz), 结果以甲
醇 25mL , 超声 30min , 已能提取完全 , 故选择为
供试品提取法。
分别比较了 shim-pack CLD-ODS C1 8 (4.6mm
×150mm , 5μm)和 Diamonsil (钻石)C18 2种不
同色谱柱 , 25 、 30 、 35 ℃ 3 种不同柱温及 0.8 、
0.9 、 1.0mL · min-1 3 种不同流速对试验的影响 ,
结果表明:不同色谱柱 、柱温及流速条件均能使岩
白菜素与样品中其它成分较好地分离 , 峰形亦较
好 。本试验选择 Shim-pack CLD-ODS C1 8 (4.6mm
×150mm , 5μm), 柱温 25℃, 流速:0.8mL ·
min-1 , 差异性不大 , 说明方法可行。
参考文献:
[ 1] 中国药典 [ S] .一部 , 2005:251-251.
1001中国药事 2010年第 24卷第 10期