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安徽产大戟属(Euphorbia)药用植物抑真菌活性研究



全 文 :安徽产大戟属(Euphorbia)药用植物抑真菌活性研究
孟 娜1 ,蒋继宏2 ,周守标1
(1.安徽师范大学生命科学学院 ,安徽芜湖 241000;2.江苏省药用植物技术重点实验室 ,江苏徐州 221116)
摘 要:以小麦赤霉病菌(Gibberella zeae)、油菜菌核病菌(Sclerotinia scleotiorum)、棉花黄萎病菌
(Verticillium dahliae)、苹果炭疽病菌(Glomerella cingulata)、甜瓜蔓枯病菌(Mycosphaerella melonis)
为供试病原菌 ,采用琼胶平板法对安徽产大戟属 6种药用植物丙酮提取物进行了离体抑真菌活性
测定;样品提取物供试质量浓度设为 0.1g/mL.结果表明:相同浓度的大戟属不同植物样品对 5种
供试病原菌均有抑制作用 ,其中大戟根及月腺大戟根提取物样品对供试病原菌有强烈的抑菌活性.
该研究为安徽产大戟属药用植物的进一步开发植物性农药提供理论依据.
关键词:大戟属;活性筛选;抑菌作用
中图分类号:Q949.96  文献标识码:A   文章编号:1001-2443(2005)03-0333-03
  在植物中寻找生物活性物质或直接开发植物性农药 ,是当今农药研究领域的热点之一[ 1] .目前对楝科 、
豆科和卫矛科等植物的杀虫作用研究较多 ,且已取得了显著的成果[ 2] ;冯俊涛等[ 3]研究了西北地区植物的抑
菌活性 ,测定出 200余种植物提取物样品对植物病原菌的抑制作用;冯俊涛等[ 4]为充分利用西北地区植物资
源 ,对选自西北地区的 56种植物的60种丙酮提取物抑制活性进行了初步筛选.
  大戟属(Euphorbia)为大戟科(Euphorbiaceae)中最大的一属 ,全世界有 2000余种 ,安徽产 6个野生种 ,本
属植物含白色或黄白色乳汁 ,具有重要的药用价值[ 5] .目前对大戟属植物研究主要集中在对其化学成分及药
理方面[ 6-8] ,对其提取物的抑菌作用尚未见报道.本研究用琼胶平板法测定安徽产大戟属 6种药用植物的丙
酮提取物样品对 5种供试病原菌的抑制作用 ,旨在为大戟属药用植物的进一步开发植物性农药提供理论依
据.
1 材料与方法
1.1 供试样品
1.1.1 植物样品 本研究所用供试植物样品均采自安徽省(表 1),凭证标本存安徽师范大学标本室.
1.1.2 样品处理 样品采回后将根洗净 ,阴凉处晾干 ,于干燥箱中 60℃烘干 ,粉碎后过 40目筛(孔径0.37
mm)后密封 ,于-30℃保存备用 ,详见表 1.
1.1.3 样品的制备 取粉碎的植物样品 ,室温下用丙酮(分析纯 ,下同)进行 48h ,24h , 12h 3次浸渍提取 ,合
并3次滤液浓缩后转入刻度试管中 ,用丙酮分别定容至 1g/mL(即 1mL 提取液相当于 1g 植物干样品 ,下同),
密封 ,0-4℃保存备用.
1.2 供试菌种
  试验所用的5种病原菌分别为小麦赤霉病菌(Gibberella zeae)、油菜菌核病菌(Sclerotinia scleotiorum)、棉
花黄萎病菌(Verticillium dahliae)、苹果炭疽病菌(Glomerella cingulata)、甜瓜蔓枯病菌(Mycosphaerella
melonis),皆由江苏省药用植物生物技术重点实验室提供.
1.3 实验方法
  用琼胶平板法测定植物样品的抑菌活性 ,在无菌条件下 ,分别取 1mL 提取液至 20mL 刻度试管 ,对照组
加入等量丙酮 ,再倒入融化的 PDA培养基至 10mL ,摇匀 ,趁热倒入 9cm培养皿中制成平板 ,用直径为10.0mm
的打孔器在PDA平板上打取菌丝块 ,倒扣在已凝固的PDA平板中央 ,每皿接 1个菌饼 ,每处理设3次
收稿日期:2004-09-24
基金项目:安徽省自然科学基金(00042415).
作者简介:孟娜(1977-),女 ,安徽宿州人 ,硕士研究生;周守标(1964-),男 ,安徽和县人 ,教授 ,博士.
第 28卷 3期
2005年 9月    安 徽师 范大 学学 报(自然科学版)Journal of Anhui Normal University(Natural Science) Vol.28 No.3Sep .20 0 5
DOI :10.14182/j.cnki.1001-2443.2005.03.021
表 1 供试植物样品
Table 1 Catalogue of plants tested
物 种
Species
采集地
Locality
采集人
Collector
凭证标本号
Voucher No.
采用部位
Tested parts
大戟
E .pekinensis
琅琊山
Langyashan , Chuzhou
孟娜等
MengNa
Meng N.0301 根 、茎、叶
root , stem , leaf
乳浆大戟
E.esula
芜湖
Wuhu
孟娜等
MengNa
Meng N.0302 茎、叶
stem , leaf
月腺大戟
E .ebracteolata
琅琊山
Langyashan , Chuzhou
孟娜等
MengNa
Meng N.0303 根 、茎、叶
root , stem , leaf
地锦草
E.humifusa
繁昌
Fanchang
周守标等
ZhouShou-biao Zhou S.B.0304
全株
the whole
斑地锦
E.supina
繁昌
Fanchang
周守标等
ZhouShou-biao Zhou S.B.0305
全株
the whole
泽漆
E.helioscopia
芜湖
Wuhu
孟娜等
MengNa
Meng N.0306 全株
the whole
重复 ,25-27℃培养至对照菌丝生长至 7cm左右观察结果 ,用十字交叉法测量供试病原菌菌丝生长直径 ,用
下述公式计算抑制率[ 8 , 9] :
      菌落直径(mm)=测量菌落直径平均值-10.0
      相对抑制率=对照菌落直径-处理菌落直径对照菌落直径 ×100%
2 结果分析
  采用琼胶平板法测定了安徽产大戟属药用植物丙酮提取物对小麦赤霉病菌 、油菜菌核病菌 、棉花黄萎病
菌 、苹果炭疽病菌 、甜瓜蔓枯病菌的抑制作用.结果表明:质量浓度为 0.1g/mL 时 ,不同样品对同一病菌的抑
制活性差异较大 ,同一植物样品对不同菌种的抑制作用亦存在显著差异 ,同一样品的不同部位的抑菌结果亦
有差别 ,尤其大戟根及月腺大戟根对5种植物病原菌均有明显的抑制作用(表2).
表 2 大戟属植物提取物对 5 种病菌的相对抑制率
Table 2 Antifungal rates of extracts of Euphorbia to five species of tested fungi
样品名称
Sample
小麦赤霉病菌
Gibberella zeae
油菜菌核病菌
Sclerot inia
scleotiorum
甜瓜蔓枯病菌
Mycosphaerella
melonis
棉花黄萎病菌
Vertici llium
dahliae
苹果炭疽病菌
Glomerella
cingulata
大戟叶 - - - - -
the leaf of E .pekinensis
大戟茎 - - - - -
the stem of E.pekinensis
大戟根 60.6 88.3 70.8 61.2 59.7
the root of E.pekinensis
月腺大戟叶 - - - - -
the leaf of E .pekinensis
月腺大戟茎 - - - - -
the stem of E.pekinensis
月腺大戟根 80.8 98.7 66.7 58.2 76.1
the root of E.pekinensis
乳浆大戟叶 52.2 - - - -
the leaf of E.esula
乳浆大戟茎 - - - - -
the stem of E.esula
泽漆 - - - - -
the whole of E.helioscopia
地锦草 46.7 - - - -
the whole of E.humifusa
斑地锦 - - - - -
the whole of E.supina
   注:①所有样品供试浓度为质量浓度 0.1g/mL;②表内数字为抑制率(%);③抑制率在 40%以下的试验结果以“-”表示
3 讨论
  植物源杀菌剂的研究前景广阔[ 10] .通过本试验 ,发现月腺大戟根和大戟根的活性突出 ,对 5种植物病原
334 安 徽 师 范 大 学 学 报 (自 然 科 学 版 ) 2005 年
菌均表现出较高抑制率 ,具有广阔的应用前景 ,值得进一步研究.对于本试验结果有必要作进一步的探讨和
研究.首先 ,可能存在活性物质漏筛现象.其次 ,在实验中考虑到溶剂抑菌作用小的要求及操作方便 ,在植物
样品的提取 、定容及生物测定中选用丙酮为溶剂 ,这样不一定能将极性和非极性较强的物质抽提出来.再次 ,
所有样品在 60-70℃条件下烘干过程中 ,某些具有较强挥发性的杀菌成分可能会遗失或被破坏.另外 ,本实
验仅初步进行了离体试验 ,其作用方式和作用机制及在活体植物上的杀菌活性 ,均有待于进一步研究.
参考文献:
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SCREENING STUDIES ON FUNGISTASIS OF
PLANT EXTRACTS OF EUPHORBIA OF ANHUI
MENG Na1 ,  JIANG Ji-hong2 ,  ZHOU Shou-biao1
(1.College of Life Science , Anhui Normal University , Wuhu 241000 , China;2.Key Laboratory of Medicine Plant and Biotechnology , Xuzhou 221116, China)
Abstract:The fungistasis of plant extracts of Euphorbia were tested with Fusarium graminerum , Sclerotinia
sclerotiorum , Verticillium dahliae , Glomerella cingulata and Myphaerella melonis.The concentrations of sample ex-
tracted from acetone were 0.1 g/mL.The result showed that the plant extracts of Euphorbia had antifungal activities , es-
pecially the roots of E.ebracteolata and E.pekinensis hadstronger antifungal activities than others.The experiment evi-
dence was provided for developing vegetable pesticide on the plant of Euphorbia.
Key words:Euphorbia;bioactivity-screening;anti-fungal activities
(责任编辑 巩  )
33528 卷第 3期    孟 娜 , 蒋继宏 ,周守标: 安徽产大戟属(Euphorbia)药用植物抑真菌活性初步研究