全 文 :【方药纵横】
栗属植物总苞鞣质含量的测定*
张小慧1 刘 霞1 牛艳艳2 席啸虎1
摘要:目的 测定栗属植物干燥总苞的鞣质含量。方法 收集不同产地的栗属植物总苞如板栗壳、茅栗壳、锥栗壳、日本栗壳,
根据《中国药典》附录ⅩA磷钼钨酸-干酪素法测定鞣质含量,采用紫外-可见分光光度法,在 760nm 波长处测定总酚与不被吸附的
多酚的吸光度。结果 板栗壳和茅栗壳鞣质含量较高,日本栗壳及锥栗壳鞣质含量较低。结论 建立的鞣质含量测定方法准确,
可为栗属资源总苞利用提供依据。
关键词:栗属;板栗壳;鞣质;含量测定
doi:10. 3969 / j. issn. 1003-8914. 2016. 14. 066 文章编号:1003-8914(2016)-14-2126-02
Determination on the Content of Tannin in Castanea Mill Involucre
ZHANG Xiaohui Liu xia NIU Yanyan Xi Xiaohu
(1. Pharmacy Department,Shanxi Province Hospital of Traditional Chinese Medicine,Shanxi,Taiyuan 030012,China;
2. Central Laboratory,Shanxi Province Institute of Traditional Chinese Medicine,Shanxi,Taiyuan 030012,China)
Abstract:Objective To determine the tannins content of dry involucre in plants of Castanea Mill. Methods Collecting involucre of four
kinds of plants C. mollissima Bl.,C. seguinii Dode,C. henryi Rehd. & Wils,C. crenata Sieb. & Cuce from different growing area,
visible spectrophotometry was used to determine the tannin content. Results C. mollissima shell and C. seguinii Dode shell had high tannin
content,and C. crenata Sieb. &Cuce and C. henryi Rehd. & Wils. had low tannin content. Conclusion The method of deterring tannin
content is accurate. It can provide basis for use chestnut resources involucre.
Key words:Castanea Mill;Chestnut shell;Tannin;Content determination
* 基金项目:山西省中药材、中药饮片地方标准研究(No. 2013004A)
作者单位:1. 山西省中医院药剂科(太原 030012) ;2. 山西省中医药
研究院中心实验室(太原 030012)
栗属(Castanea Miller)是壳斗科(Fagaceae)中较
小的属,全世界有 7 种,广泛分布于北半球温带地
区[1]。其中,亚洲分布有 4 种:板栗(C. mollissima
Bl.)、茅栗(C. seguinii Dode)和锥栗(C. henryi Rehd. &
Wils.)分布在中国大陆,日本栗(C. crenata Sieb.
&Cuce)分布在日本和朝鲜半岛,在中国有引种。我国
栗属资源丰富,其果实及加工品享誉海内外,而留下的
带刺总苞却成废弃物,未有效利用。古籍记载栗壳治
消渴、痰火头疬、火核、丹毒红肿及小儿百日咳,《中药
辞海》记载,栗属植物总苞有 2 种能入药[2],做为药材
使用的主要为板栗总苞(即板栗壳)。1977 年版《中国
药典》首次收载板栗壳,并记载其性味归经为:甘、涩,
平,归肺经。板栗壳化学成分主要有黄酮(或其苷
类)、鞣质、糖、多糖(或苷类)、有机酸等,其中黄酮类
成分如棕色素有抗氧化和清除自由基作用[3]。板栗
壳还具有降血糖功能[4],改善高脂糖尿病模型大鼠的
糖脂代谢紊乱[5],有抗菌活性[6],这些活性多认为与
鞣质类物质有关,有文献报道从板栗壳分离出的鞣质
为没食子酸及其乙酯[7],而鞣质一般认为与“涩”味相
关,符合中医学对板栗壳的性味归经。因鞣质具有多
方面生物活性,如抗肿瘤、止血、止泻、治烧伤等,鞣质
具有多方面的重要活性,而栗属植物总苞的鞣质含量
未见报道,鉴于此,笔者收集了不同产地的栗属植物总
苞,按照 2010 年版《中国药典》一部附录ⅩB方法测定
其鞣质含量,为进一步研究利用栗属资源总苞提供
依据。
1 材料
1. 1 药材 板栗壳、茅栗壳、锥栗壳、日本栗壳各 2
批,分别为秋季果实成熟时采摘。本文样品的收集根
据栗壳总苞基底疤痕数目:板栗壳斗多纵向裂开成 2
~ 4 瓣,基底有 2 ~ 3 个坚果脱落后的疤痕;茅栗壳斗
较小,基底有 2 ~ 3 个坚果脱落后的疤痕;锥栗壳基底
有 1 个坚果脱落后的疤痕;日本栗壳总苞有 3 ~ 7 个坚
果脱落后的疤痕,日本栗壳较板栗壳大,其横切面厚度
较板栗壳小。样品信息见表 1。
1. 2 试剂 没食子酸:中国药品生物制品检定所,批
号:0831-9501;干酪素:中国医药(集团)上海化学试剂
公司,批号:98032;碳酸钠、钨酸钠、钼酸钠、硫酸锂、
盐酸、磷酸、溴均为分析纯。
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1. 3 仪器 752N 紫外可见分光光度计:上海精密科
学仪器有限公司。
2 方法与结果
2. 1 试剂配制 ①磷钼钨酸试液:取钨酸钠 100 g,钼
酸钠 25 g,加水 700ml 使溶解,加盐酸 100ml、磷酸
50ml,加热回流 10 小时,放冷,再加硫酸锂 150 g,水
50ml和溴 0. 2ml,煮沸除去残留的溴(约 15 分钟) ,冷
却,加水稀释至 1000ml,滤过,即得。本液不得显绿色
(如放置后变为绿色,可加溴 0. 2ml,煮沸除去多余的
溴即可)。②10% (质量浓度)Na2CO3 溶液:取无水
碳酸钠 10. 5 g,加水使溶解成 100ml,即得。
2. 2 没食子酸对照品溶液的制备 精密称取没食子
酸对照品 50mg,置 100ml 棕色量瓶中,加水溶解并稀
释至刻度,精密量取 5ml,置 50ml 棕色量瓶中,用水稀
释至刻度,摇匀,即得(每 1ml中含没食子酸 0. 05mg)
2. 3 标准曲线的制备 分别精密量取对照品溶液
0. 5、1. 0、2. 0、3. 0、4. 0、5. 0 ml,分别置 25 ml 棕色量瓶
中,各加入磷钼钨酸试液 1ml,再分别加水 11. 5、11. 0、
10. 0、9. 0、8. 0、7. 0 ml,用 10%(质量浓度)Na2CO3 溶
液稀释至刻度,摇匀,放置 30 min。以相应的试剂为空
白,照紫外-可见分光光度法,在 760 nm波长处测定其
吸光度。以吸光度(A)为纵坐标,没食子酸质量浓度
(C)为横坐标,绘制标准曲线,得回归方程 A =
120. 87C + 0. 0625,r = 0. 998。
2. 4 供试品溶液的制备 取栗壳粉末 1 g,精密称定,
置 100ml棕色量瓶中,加水 60ml,放置过夜,超声处理
10 分钟,放冷,用水稀释至刻度,摇匀,静置使沉淀,滤
过,弃去初滤液 30ml,精密量取续滤液 20ml,置 100ml
棕色量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀,即得。
2. 5 样品测定法 2 批板栗壳、2 批茅栗壳,2 批日本
栗壳,2 批锥栗壳粉末,按“2. 4”项下方法分别制备供
试品溶液,并测定总酚和不被吸附的多酚质量,以计算
鞣质质量分数。每个样品平行处理两次,结果取平
均值。
2. 6 总酚的测定 精密量取供试品溶液 2ml,置 25ml
棕色量瓶中,照标准曲线的制备项下的方法,自“加入
磷钼钨酸试液 1ml”起,加水 10ml,依法测定吸光度,从
标准曲线上读出供试品溶液中没食子酸的质量(mg) ,
计算即得。
2. 7 不被吸附的多酚的测定 精密量取供试品溶液
25ml,加至已盛有干酪素 0. 6 g 的 100 ml 具塞锥形瓶
中,密塞,置 30℃水浴中保温 1 小时,时时振摇,取出,
放冷,摇匀,滤过,弃去初滤液,精密量取续滤液 2ml,
置 25ml棕色量瓶中,照标准曲线制备项下的方法,自
“加入磷钼钨酸试液 1ml”起,加水 10ml,依法测定吸
光度,从标准曲线上读出供试品溶液中没食子酸的质
量(mg) ,计算即得。按下式计算鞣质的含量:鞣质含
量 =总酚质量-不被吸附的多酚质量
板栗壳质量
× 100%。结果显
示,板栗壳和茅栗壳鞣质含量较高,日本栗壳及锥栗壳
鞣质含量较低。见表 1。
表 1 栗属植物总苞鞣质含量测定结果
药材品种 产地 平均含量(%)
板栗壳 河北省邢台县浆水镇 3. 2
板栗壳 河北省邢台县营房台村 2. 5
茅栗壳 陕西省商洛市 2. 2
茅栗壳 安徽省金寨县 3. 3
锥栗壳(长芒仔) 福建省建瓯市 1. 3
锥栗壳(白露仔) 福建省建瓯市 0. 8
日本栗壳 安徽省肥西县 1. 7
日本栗壳 山东省日照市 1. 4
3 讨论
目前对栗属植物带刺总苞的研究存在化学成分研
究较少、有效部位不明确、药效研究不充分的问题,已
有的药效研究认为其功效主要与鞣质有关,本文初步
测定了其鞣质含量,结果显示栗属植物的板栗壳与茅
栗壳含有较高的鞣质含量,这为提取纯化鞣质,用较纯
的部位进一步研究该属植物鞣质特有的功效提供
依据。
参考文献
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(本文校对:王世伟 收稿日期:2015 - 11 - 14
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殮
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房事不远,则耗其精。劳动不戒,则耗其力。
言语不省,则耗其气,此邪之自内受者也。起居不
谨则风露侵,饮食不节则肠胃损,此邪之自外入者
也。健人有此,不免于病。
———明·王绍隆《医灯续焰·病家须知》
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