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枳属砧木对柑橘黄龙病的抗性评价



全 文 :2014年第 5期 东南园艺
收稿日期:2014-09-06
基金项目:农业部公益性行业(农业)科研专项 (201003067-05);福建省农业科学院博士科研启动基金项目(2011BS-1);福建省自然科学基
金项目(2012J01106)
作者简介:林雄杰(1979-),男,博士,助理研究员,从事分子植物病理学相关研究
通讯作者:范国成(1967-),男,博士,副研究员,从事植物病理及分子生物学研究。E-mail:guochengfan@126.com
柑橘是世界第一大水果,它广泛分布在全球热
带、亚热带以及温带地区,现已有中国、美国、巴
西等 138个国家(地区) 在种植,总产量 1.24亿
吨 [1-2]。据统计,柑橘及其加工产品年贸易额达
232亿美元,是仅次于小麦和玉米的第三大国际贸
易农产品 [3]。柑橘砧木是嫁接栽培的基础,它直接
影响着接穗的园艺和病理学性状 [4]。世界各柑橘生
产国因主栽品种和环境条件的不同选择的砧木也各
不相同。如美国柑橘的常用砧木为卡里佐枳橙、施
文格枳柚和特洛亚枳橙等;墨西哥和意大利以酸橙
为主要砧木;巴西的主要砧木为兰卜莱蒙;印度的
主要砧木为粗柠檬;我国虽然柑橘种质资源极为丰
富,但开展柑橘砧木资源选育研究比较晚,目前常
用的柑橘砧木为枳壳和红橘,其中枳壳的应用范围
枳属砧木对柑橘黄龙病的抗性评价
林雄杰 胡菡青 王贤达 蔡子坚 范国成 *
(福建省农业科学院果树研究所,福建 福州 350013)
摘 要:柑橘砧木影响着柑橘品种多种园艺学与病理学性状,选育优良砧木是柑橘优质丰产的基础。本研究以
13个枳属及其杂交种砧木为研究对象,分别嫁接黄龙病接穗后,通过观察症状表现及黄龙病菌浓度检测评估供试
砧木对黄龙病的抗性。结果表明供试的砧木品种嫁接病穗 3个月后除 LT54、LT52、飞龙枳和枳柚外上均表现出了
黄龙病症状,嫁接 6个月后所有供试砧木品种均表现出黄龙病症状。黄龙病菌浓度检测结果显示,嫁接 3个月后
除了 8株砧木外结果均为阳性,嫁接后 6个月所有砧木检测结果均为阳性,供试接穗嫁接前和嫁接 6个月后的病
菌平均浓度相当。本研究结果表明供试的砧木品种均不抗黄龙病,为抗柑橘黄龙病砧木的进一步筛选奠定了良好
基础。
关键词:枳属;黄龙病;砧木;抗性评价
Resistance Evaluation of Poncirus Rootstocks on Huanglongbing
LIN Xiong-jie HU Han-qing WANG Xian-da CAI Zi-jian FAN Guo-cheng*
(Fruit Research Institute, Fujian Academy of Agricultural Sciences, Fuzhou350013, Fujian China)
Abstract: Citrus rootstocks affect many horticultural and pathological traits of citrus varieties. It is a good basis for high
yield and quality of citrus with good stock. In this study, 13 Poncirus trifoliate or hybrid rootstocks were used as materials
with scions infected by Huanglongbing. Resistance evaluation of Poncirus rootstocks on Huanglongbing was carried out by
symptoms observation and Las titer detection. The results showed that all the tested rootstocks had shown symptom of
Huanglonbing except LT54, LT52, Flying Dragon Trifoliate and citrumelo 3 months after grafting. All the tested rootstocks
showed the symptom of Huanglongbing 6 months after grafting. All the tested rootstocks were positive except 8 plants on
the Las titer detection 3 months after grafting and were positive 6 months after grafting. The average of Las titer on the
tested scions was almost the same before grafting and 6 months after grafting. All the tested rootstocks were not resistant to
Huanglongbing. It laid a good foundation for screening rootstocks with resistante to Huanglongbing furtherly.
Key words: Poncirus; Huanglongbing; Rootstock; Resistant evalution;
1
2014年第 5期东南园艺
最广 [5]。各地区根据当地方条件和特色不同,所选
用的砧木也存在一定的差异性。
柑橘黄龙病 ( Citrus Huanglongbing,HLB)
自 20世纪初在华南地区首次报道以来 [6] 已有近百
年的历史,现已在亚洲、非洲、大洋洲、南美洲和
北美洲的近 50个国家和地区广泛分布 [7],它主要
通过柑橘木虱、带菌苗木和接穗进行传播 [8],截至
目前尚无抗病品种和防治特效药,主要以防治柑橘
木虱和防止病原菌入侵作为该病害的防控手段。本
研究主要以中国柑橘研究所收集的简阳枳柚、墨西
哥枳橙、厚皮枳等 13种枳属及其杂交种作为柑橘
砧木材料,分别嫁接芦柑病穗,通过对嫁接 3个月
和 6个月后砧木及接穗上黄龙病菌含量测定,以明
确供试砧木对黄龙病抗性差异,从而为抗柑橘黄龙
病砧木的进一步筛选提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 供试材料
本研究供试的砧木材料为福建省农科院果树研
究所从中国柑橘研究所引进的 LT49、5号小花枳、
墨西哥枳橙、LT54、飞龙枳、卡里佐枳橙、鄢陵枳
橙、腊斯克(rusk) 枳橙、枳柚、薄皮枳、LT52、
LT53和小院枳柚等 13个枳属其杂交种 (表 1)。
按每个品种 10株将这些砧木分别定植于试验园中
备用。
供试接穗为 2013年 9月从顺昌县和建瓯市采
集的具有典型黄龙病症状,经定量 PCR检测结果
为阳性的芦柑接穗,采回后塑料膜包好放置 4℃冰
箱备用。
1.2 病穗嫁接
将供试接穗剪成 15~20 cm(包含 3~4个芽)
长的小段,参照柑橘常用的嫁接方法(切接法)[9],
每株砧木在距离地面 10 cm以上的地方选两个枝干
分别嫁接 1个接穗,然后用塑料条将整个接穗和砧
木的伤口包扎好,接穗需封顶戴帽,每个砧木品种
嫁接 10株,嫁接后保持正常肥水管理,供进一步
试验。
1.3症状评价、样品采集及 DNA提取
嫁接后的 3个月和 6个月分别调查 1次接穗及
砧木上新梢黄龙病症状,每次调查 5张叶片,根据
叶片黄化或斑驳的面积占整张叶片的比例 ( SI)
将其分为 4个等级:无症状为 1级;0 ≤ SI ≤ 1/3
为 2级;1/3 ≤ SI ≤ 2为 3级;2/3 ≤ SI 为 4级。
调查完后随机采集 3~4片完全展开的叶片,用自来
水洗净后自然风干,剪取其的叶片中脉,并剪成
1~2 mm的小段,冷冻干燥后,用研磨仪(MM400)
将其磨碎,参照 Murray [10] 等的方法提取 DNA。用
微量紫外分光光度计(NANODROP 2 000C)测量各
样品 DNA 浓度,并将其浓度调到 50 ng·ul-1,置
于-28℃冰箱备用。
表 1 供试砧木品种及来源
编号 品种名称 拉丁学名 来源
1 LT49 Poncirus trifoliata Rafin. 中国农业科学院柑橘研究所
2 5号小花枳 Poncirus trifoliata Rafin. 中国农业科学院柑橘研究所
3 墨西哥枳橙 Poncirus trifoliata×Citrus reticulata 中国农业科学院柑橘研究所
4 LT54 Poncirus trifoliata Rafin. 中国农业科学院柑橘研究所
5 飞龙枳 Poncirus trifoliata Rafin. 中国农业科学院柑橘研究所
6 卡里佐枳橙 Poncirus trifoliata×Citrus reticulata 中国农业科学院柑橘研究所
7 鄢陵枳橙 Poncirus trifoliata×Citrus reticulata 中国农业科学院柑橘研究所
8 腊斯克枳橙 Poncirus trifoliata×Citrus sinensis 中国农业科学院柑橘研究所
9 枳柚 Poncirus trifoliata×Citrus paradisi 中国农业科学院柑橘研究所
10 薄皮枳 Poncirus trifoliata Rafin. 中国农业科学院柑橘研究所
11 LT52 Poncirus trifoliata Rafin. 中国农业科学院柑橘研究所
12 LT53 Poncirus trifoliata Rafin. 中国农业科学院柑橘研究所
13 小院枳柚 Poncirus trifoliata×Citrus paradisi 中国农业科学院柑橘研究所
2
2014年第 5期 东南园艺
序号 品种名称
砧木 接穗 砧木 接穗
1 LT49 0.15 0.75 0.25 1.00
2 5号小花枳 0.10 0.80 0.20 1.00
3 墨西哥枳橙 0.15 0.70 0.15 1.00
4 LT54 0.00 0.60 0.20 1.00
5 飞龙枳 0.00 0.60 0.20 0.85
6 卡里佐枳橙 0.10 0.75 0.20 0.65
7 鄢陵枳橙 0.15 0.75 0.25 1.00
8 腊斯克枳橙 0.10 0.60 0.20 0.85
9 枳柚 0.00 0.50 0.10 0.80
10 薄皮枳 0.15 0.70 0.20 0.60
11 LT52 0.00 0.50 0.15 0.85
12 LT53 0.10 0.65 0.20 0.70
13 小院枳柚 0.10 0.55 0.15 0.90
病情指数(3个月后) 病情指数(6个月后)
1.4病菌含量定量 PCR检测
引物和探针序列参照 Li等 [11],由大连宝生物
( Takara)有限公司合成。PCR反应体系为 20 μl,
其中 Premix Ex Taq 10 μl,250nM 的引物各 1 μl,
150 nM 探针 1 μl,样品 DNA 1 μl,无菌双蒸水
6 μl。反应在 Bio-rad CFX96TM上进行,扩增程序
如下:95℃预变性 2 min,95℃ 10 s,58℃ 30 s,
40个循环。
1.5 数据分析
砧木及接穗嫁接前后的病情指数及叶片病菌浓
度差异用 DPS v7.05 软件的单因素试验统计方法分
析,先分别计算出嫁接前后砧木及接穗的病情指数
和叶片的病菌浓度,再分别比较它们之间的差异。
2 结果与分析
2.1 症状调查结果
砧木嫁接病穗后 3个月统计结果表明嫁接的成
活率平均在 70%以上。嫁接后 3个月和 6个月对砧
木和接穗的症状调查统计结果如表 2所示。由表 2
可知,供试的 13个砧木品种嫁接病穗后 3个月除
LT54、LT52、飞龙枳和枳柚 4个品种外,其余的砧
木上均表现出了黄龙病状(SI>0),所有供试品种的
接穗上均可见典型的黄龙病症状;嫁接后 6个月所
有供试砧木品种均表现出黄龙病症状,而 LT49、5
号小花枳、墨西哥枳橙、LT54和鄢陵枳橙等 5个
品种接穗上的黄龙病症状最为严重,病情指数为
1.00。嫁接后 6个月无论是砧木还是接穗上的症状
都有明显加重的趋势,它们的病情指数与嫁接后 3
个月的差异均为极显著(p < 0.01)(表 3)。
注:病情指数= ∑(各级病叶数×各级代表值)/(调查总叶数×最高级代表值)。
表 2 砧木及接穗病情指数
表 3 砧木及接穗病情指数方差分析
类别
病情指数(SI)
3个月后均值 6个月后均值 P 差异显著性
砧木 0.0846 0.1885 0.0000 AaBb
接穗 0.6500 0.8615 0.0005 AaBb
3
2014年第 5期东南园艺
2.2 病菌含量测定结果
分别对嫁接前、嫁接 3个月后、嫁接 6个月后
的砧木和接穗的病菌浓度进行检测,结果如表 4和
表 5所示。表 4的统计结果表明,供试接穗嫁接前
和嫁接 6个月后的平均病菌浓度相当,嫁接 3个月
后的病菌浓度减少了 95.4%,其中有 8株检测结果
为阴性。由表 5可知,嫁接 3个月后除了 8株砧木
外,其余检测结果均为阳性,嫁接 6个月后所有砧
木检测结果均为阳性,嫁接 3个月后和 6个月后黄
龙病菌平均浓度基本一致。
表 4 接穗黄龙病菌浓度变化
品种 编号
Ct0 CN0 Ct1a CN1 Ct2a CN2
LT49
1 27.53 3.11E+07 33.02 5.75E+05 25.91 1.01E+08
2 25.78 1.11E+08 29.18 9.35E+06 25.57 1.29E+08
3 26.76 5.45E+07 31.24 2.10E+06 26.78 5.36E+07
4 26.85 5.09E+07 - - 26.35 7.35E+07
5 25.36 1.51E+08 32.24 1.02E+06 25.99 9.51E+07
5号小花枳
1 24.51 2.79E+08 28.50 1.54E+07 25.66 1.21E+08
2 26.20 8.16E+07 32.67 7.40E+05 22.25 1.45E+09
3 24.17 3.57E+08 35.02 1.34E+05 25.20 1.69E+08
4 25.45 1.41E+08 29.46 7.64E+06 25.09 1.84E+08
5 26.24 7.93E+07 - - 24.96 2.01E+08
墨西哥枳橙
1 24.90 2.10E+08 32.32 9.57E+05 24.63 2.55E+08
2 24.29 3.27E+08 35.12 1.25E+05 25.83 1.07E+08
3 24.10 3.76E+08 27.14 4.12E+07 25.48 1.38E+08
4 27.58 2.99E+07 30.55 3.47E+06 24.81 2.25E+08
5 25.64 1.23E+08 28.69 1.34E+07 25.06 1.87E+08
LT54
1 29.25 8.88E+06 - - 26.41 7.04E+07
2 25.51 1.35E+08 31.21 2.14E+06 26.47 6.71E+07
3 30.11 4.77E+06 27.91 2.35E+07 26.13 8.62E+07
4 27.02 4.49E+07 29.54 7.24E+06 27.64 2.88E+07
5 25.04 1.90E+08 32.07 1.15E+06 27.07 4.34E+07
飞龙枳
1 26.39 7.10E+07 32.33 9.51E+05 25.91 1.01E+08
2 26.16 8.41E+07 30.91 2.67E+06 25.83 1.07E+08
3 24.23 3.42E+08 30.28 4.21E+06 24.59 2.63E+08
4 27.45 3.30E+07 35.81 7.58E+04 31.26 2.07E+06
5 26.51 6.52E+07 33.67 3.59E+05 26.37 7.24E+07
鄢陵枳橙
1 26.47 6.72E+07 31.24 2.10E+06 24.98 1.99E+08
2 26.10 8.79E+07 30.52 3.54E+06 28.64 1.39E+07
3
4
5
24.86
25.14
25.75
2.16E+08
1.76E+08
1.13E+08
34.79
29.95
29.03
1.59E+05
5.35E+06
1.04E+07
24.95
27.59
26.20
2.03E+08
2.97E+07
8.16E+07
嫁接前 嫁接后 3个月 嫁接后 6个月
4
2014年第 5期 东南园艺
注:表中“-”表示样品中未检测到黄龙病菌,Ct值>38.05结果视为阴性(表 5同)。
续表 4
品种 编号
Ct0 CN0 Ct1a CN1 Ct2a CN2
鄢陵枳橙
1 26.98 4.64E+07 32.08 1.14E+06 25.83 1.07E+08
2 26.52 6.49E+07 39.65 - 25.35 1.52E+08
3 25.36 1.50E+08 31.86 1.34E+06 25.62 1.25E+08
4 26.67 5.80E+07 30.25 4.31E+06 25.03 1.91E+08
5 27.01 4.53E+07 29.96 5.32E+06 25.26 1.62E+08
腊斯克枳橙
1 25.44 1.42E+08 27.20 3.95E+07 25.50 1.36E+08
2 25.77 1.11E+08 28.52 1.51E+07 - -
3 24.15 3.62E+08 30.02 5.09E+06 28.45 1.60E+07
4 27.67 2.81E+07 31.07 2.37E+06 26.35 7.35E+07
5 26.01 9.37E+07 - - 25.75 1.14E+08
枳柚
1 26.41 7.00E+07 35.51 9.42E+04 26.42 6.98E+07
2 26.97 4.68E+07 32.53 8.21E+05 26.61 6.08E+07
3 25.57 1.29E+08 28.06 2.11E+07 26.06 9.04E+07
4 26.36 7.27E+07 33.17 5.15E+05 30.09 4.84E+06
5 28.68 1.35E+07 30.58 3.39E+06 28.85 1.19E+07
薄皮橙
1 29.19 9.30E+06 38.95 - - -
2 31.08 2.35E+06 32.29 9.78E+05 26.93 4.82E+07
3 30.62 3.30E+06 33.33 4.59E+05 27.12 4.20E+07
4 25.15 1.75E+08 29.87 5.67E+06 29.08 1.01E+07
5 27.20 3.94E+07 30.48 3.65E+06 31.25 2.08E+06
LT52
1 22.37 1.32E+09 27.52 3.13E+07 28.96 1.10E+07
2 30.38 3.91E+06 30.92 2.65E+06 25.61 1.25E+08
3 25.54 1.32E+08 33.00 5.85E+05 26.87 5.02E+07
4 28.35 1.71E+07 33.76 3.36E+05 26.87 1.47E+08
5 26.35 7.32E+07 - - 25.69 1.19E+08
1 25.68 1.19E+08 29.19 9.29E+06 27.17 4.04E+07
2 27.00 4.57E+07 34.86 1.51E+05 25.86 1.05E+08
3
4
24.11
24.93
3.71E+08
2.05E+08
28.92
29.25
1.13E+07
8.90E+06
27.55
26.93
3.06E+07
4.80E+07
LT53
小院枳柚
5
1
2
3
4
5
25.41
26.26
24.82
30.11
27.60
24.45
1.45E+08
7.80E+07
2.23E+08
4.77E+06
2.94E+07
2.92E+08
30.24
29.61
29.62
38.35
34.77
36.55
4.34E+06
6.86E+06
6.80E+06
-
1.62E+05
4.43E+04
27.01
26.28
26.60
26.56
26.06
25.73
4.53E+07
7.73E+07
6.13E+07
6.29E+07
9.07E+07
1.15E+08
嫁接前 嫁接后 3个月 嫁接后 6个月
5
2014年第 5期东南园艺
表 5 砧木黄龙病菌浓度变化
品种名称 株号
Ct0a CN0 Ct1 CN1 Ct2 CN2
LT49
1 38.53 - 30.37 3.95E+06 28.32 1.75E+07
2 39.21 - - - 30.87 2.74E+06
3 - - 29.54 7.22E+06 31.40 1.87E+06
4 - - 29.23 9.00E+06 33.99 2.84E+05
5 38.55 - 25.61 1.26E+08 28.93 1.13E+07
5号小花枳
1 39.25 - 28.23 1.86E+07 28.24 1.85E+07
2 - - 28.11 2.03E+07 27.51 3.15E+07
3 - - 26.82 5.20E+07 29.76 6.17E+06
4 39.36 - 28.06 2.11E+07 30.03 5.05E+06
5 - - 25.81 1.08E+08 28.77 1.26E+07
墨西哥枳橙
1 - - 27.88 2.40E+07 27.12 4.18E+07
2 - - 30.08 4.87E+06 30.70 3.10E+06
3 38.57 - 28.16 1.96E+07 35.58 8.99E+04
4 - - 28.22 1.88E+07 29.80 5.97E+06
5 38.05 - 29.58 7.01E+06 32.98 5.92E+05
LT54
1 38.84 - - - 31.65 1.56E+06
2 39.05 - 30.61 3.33E+06 29.70 6.44E+06
3 - - 31.35 1.94E+06 28.34 1.72E+07
4 - - 31.70 1.50E+06 28.05 2.13E+07
5 - - 25.56 1.30E+08 27.05 4.42E+07
飞龙枳
1 38.08 - - - 26.97 4.68E+07
2 38.95 - 30.13 4.70E+06 30.27 4.26E+06
3 - - 26.70 5.68E+07 30.37 3.95E+06
4 38.58 - 30.88 2.73E+06 29.17 9.44E+06
5 39.63 - 29.09 1.00E+07 28.17 1.95E+07
1 - - 30.14 4.66E+06 27.64 2.87E+07
2 39.05 - 27.25 3.81E+07 26.92 4.84E+07
3
4
-
39.36
-
-
33.11
26.16
5.37E+05
8.38E+07
27.57
28.69
3.02E+07
1.34E+07
卡里佐枳橙
5 - - 28.37 1.69E+07 27.38 3.46E+07
嫁接前 嫁接后 3个月 嫁接后 6个月
2.3 黄龙病菌浓度差异显著性分析
对 13个砧木品种的叶片及接穗上黄龙病菌浓
度差异进行方差分析结果如表 6 所示。由表 6
表 5~6可知,嫁接 3个月后供试的砧木除鄢陵枳橙
与枳柚和小院枳柚 3个品种间的病菌浓度差异外,
其余品种间差异均不显著;嫁接 6个月后除卡里佐
枳橙与 LT49、枳柚、LT52和小院枳柚间的病菌浓
度差异显著外,其余差异均不显著。各砧木品种接
穗叶片的病菌浓度嫁接后 3个月与嫁接前均无显著
差异,嫁接 6个月后,仅 5号小花枳与其余品种的
病菌浓度差异显著。
6
2014年第 5期 东南园艺
品种名称 株号
Ct0a CN0 Ct1 CN1 Ct2 CN2
鄢陵枳橙
1 - - 24.60 2.62E+08 28.29 1.79E+07
2 - - 29.07 1.01E+07 28.19 1.92E+07
3 38.57 - 26.54 6.37E+07 29.34 8.37E+06
4 - - 28.36 1.70E+07 28.22 1.88E+07
5 - - 27.06 4.37E+07 28.65 1.38E+07
腊斯克枳橙
1 - - 26.96 4.71E+07 26.72 5.60E+07
2 39.03 - 26.56 6.28E+07 27.72 2.71E+07
3 39.85 - 32.98 5.93E+05 28.37 1.69E+07
4 38.88 - 28.97 1.09E+07 28.69 1.34E+07
5 - - 29.28 8.72E+06 27.34 3.58E+07
枳柚
1 - - - - 28.98 1.08E+07
2 39.36 - 29.76 6.15E+06 27.91 2.37E+07
3 - - - - 32.13 1.10E+06
4 - - 28.33 1.73E+07 30.04 5.02E+06
5 39.74 - - - 31.28 2.04E+06
薄皮橙
1 38.57 - 31.62 1.59E+06 30.16 4.60E+06
2 - - - - 32.74 7.08E+05
3 39.67 - 32.61 7.73E+05 30.47 3.68E+06
4 - - 27.28 3.74E+07 26.57 6.26E+07
5 38.15 - 27.12 4.18E+07 26.75 5.48E+07
LT52
1 - - 34.21 2.43E+05 31.32 1.99E+06
2 39.66 - 33.08 5.51E+05 31.50 1.74E+06
3 - - - - 30.92 2.65E+06
4 38.89 - 27.49 3.20E+07 29.50 7.42E+06
5 - - 26.97 4.65E+07 30.29 4.18E+06
1 - - 28.25 1.85E+07 27.83 2.50E+07
2 38.78 - 30.54 3.48E+06 29.03 1.04E+07
3
4
-
39.96
-
-
29.47
30.28
7.59E+06
4.22E+06
29.26
30.08
8.84E+06
4.87E+06
LT53
5
1
2
3
4
5
-
38.54
-
39.65
-
38.58
-
-
-
-
-
-
25.55
28.25
27.52
32.54
33.15
31.89
1.31E+08
1.84E+07
3.13E+07
8.16E+05
5.24E+05
1.31E+06
28.23
29.01
31.62
28.24
29.76
28.93
1.87E+07
1.06E+07
1.60E+06
1.85E+07
6.15E+06
1.12E+07
小院枳柚
嫁接前 嫁接后 3个月 嫁接后 6个月
续表 5
7
2014年第 5期东南园艺
表 6 黄龙病浓度变化显著性分析
品种名称
嫁接后 3个月 嫁接后 6个月 嫁接前 嫁接后 3个月 嫁接后 6个月
LT49 Aab Abc Aa Aa Bb
5号小花枳 Aab Ababc Aa Aa Aa
墨西哥枳橙 Aab ABc Aa Aa ABb
LT54 Aab ABabc Aa Aa Bb
飞龙枳 Aab Ababc Aa Aa Bb
卡里佐枳橙 Aab Aa Aa Aa Bb
鄢陵枳橙 Aa Aabc Aa Aa ABb
腊斯克枳橙 Aab Aab Aa Aa Bb
枳柚 Ab ABc Aa Aa Bb
薄皮枳 Aab Ababc Aa Aa Bb
LT52 Aab Bc Aa Aa Bb
LT53 Aab Ababc Aa Aa Bb
小院枳柚 Ab Abc Aa Aa Bb
砧木 接穗
3 小结与讨论
枳是一种良好的柑橘种质资源,它具有抗柑橘
速衰病(Citrus tristeza virus,CTV)、某些柑橘线虫
(Tylenchulus semipenetrans Cobb)及星天牛(Ro-
plophora chinensis Forster)等的危害。但它对柑橘裂
皮病敏感,且容易感立枯病(Rhizoctonia solani
Kuhn 或 Phytopnthora parasitica Dastur)、青枯病及
火疫病(高湿条件下)。嫁接甜橙(C. sinensis Os-
beck)表现较好,而嫁接温州蜜柑 (C. unshiu
Marc.)、金香柚(C.grands Osbeck)、晚白柚 (C.
grands Osbeck)的亲和性差 [12]。20世纪 70 年代柑
橘砧木的研究主要是调查田间嫁接亲和性、生长和
产量等,一般不分析果实品质,且以寻找矮化砧作
为主要研究目标;80年代,结合果实品质分析继
续寻找矮化砧为主要目标,寻找一些特殊品种及地
区的适宜砧木;90 年代至今进行了较系统试验,
以寻找矮化砧和满足各地特殊生态需要的砧木为主
要目标 [5]。
目前,学术界对于是否存在抗黄龙病的砧木一
直存在争议。Miyakawa [13] 曾报道在常用砧木枳上
未观察到明显的黄龙病症状。Nariani [14] 将莫桑比
甜橙(Mosambi Orange)嫁接到 12种感染黄龙病的
砧木上 1.5~2年后接穗症状观察结果表明,嫁接枳
橙和枳砧的莫桑比甜橙只表现出轻微的症状,嫁接
在尤力克柠檬(C. limon‘Eureka Lemon’)、甜来檬
(C. limotta a‘ Sweet Lime’) 和意大利柠檬(C.
limon ‘Italian Lemon’)砧木上的莫桑比甜橙则不表
现症状。Folimonova等 [15] 报道枳在嫁接黄龙病接
穗后的症状表现不稳定,而卡里佐枳橙表现出耐黄
龙病。Shokrollah 等 [16] 将感染黄龙病的 limau 橘
(C. reticulata)嫁接到 12种由基砧和中间砧组成的
砧木组合上,结果发现以柚为基砧和马蜂柑为中间
砧的砧木组合在接种病菌后半年都没有表现出症
状,显示出一定的抗性。本研究供试的 13个砧木
品种嫁接黄龙病接穗 6个月后所有供试砧木品种均
表现出黄龙病症状,其中 LT49、5号小花枳、墨西
哥枳橙、LT54和鄢陵枳橙等 5个品种接穗上的黄
龙病症状表现较为严重。病菌浓度的定量 PCR检
测结果表明砧木和接穗上并无显著差异。这与
Folimonova等之前的研究存在较大差异,这可能与
使用的接穗是不同品种有一定关系。
8
2014年第 5期 东南园艺
随着科学技术的不断发展,人们认识到培育新
砧木与培育新品种一样重要 [17]。因为砧木不仅可
以增强品种的抗性与适应性,还可改善果实的品
质,从而在育种过程中遇到的一些难题在一定程度
内可以通过砧木的合理应用而实现。因此,我国目
前除了砧木的常规人工育种技术研究外,还需要加
强细胞工程与基因工程技术在育种中的应用,发挥
其遗传改良的优势,提高砧木育种效率,利用接穗
果实不会遗传砧木的变异原理,通过转基因定向改
良砧木来解决常规育种中的一些难题。
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(责任编辑:林燕金)
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