全 文 ：第 1 4卷 第通期
1 93 9年 1 2月
首都师范大学学报 (自然科学版 )
J ou r na l`〕 fC a P ita l N orm a U l n ie s v r ity
( Na tu ra lS
e ie ne e Ed it ion)
V ol
.
1 生, N o . 4
D e e
.
1 9 9 3
亚香棒虫草菌的纯培养分离和鉴定
张维来 李友刚 周孟津 付应春
(首都师范大学生物系 )
摘 要
亚香棒虫草 ( 〔汤r d 笋 , p 、 h“ 。 )触 vl ( ; ar y ) 的活体材料采自湖南省桃江县 . 用虫草的虫体 、 菌
柄 、 子座 、 及子囊抱子进行了纯培养分离 , 结果获得了分 生饱子阶段的真菌的纯培养物 · 经鉴定
分离到的菌体为亚香棒虫草的无性阶段 . 亚香棒虫草的寄 主 昆虫为蝙蝠 蛾科的湖南棒蝠 蛾
( N
` , Pi u l z , 戈 h z一习u 刀 f n , , * ) .
关键词 : 亚香棒虫草 , 纯培养分离 , 霍克期拟青霉菌 . 湖南棒蝠蛾 .
中图分类号 : R 282 . 71 .
虫草是我国药材中的珍品 , 据分析虫草含有虫草酸 , 多种氨基酸和维生素成分 . 具有
益肺肾 、 补精髓 , 止血化痰的功效 ” , 近期报道有强心作用和抗癌作用 · 现报道我们于 19 9 2
年进行的亚香棒虫草菌的分离及纯培养以及 亚香棒虫草菌的无性阶段的特征 .
1 材料和方法
卜 1 供试培养物
所用材料系李斌才于 1 9 9 2年 4月在湖南省桃江县山区采集的亚 香棒虫草 i舌体材料 . 子座
已形成并正在释放子囊饱子 , 僵虫体外带 菌套 , 淡黄褐色 .
.1 2 培养基
分离用培养基 : 马铃薯 2 0 0 9 , 蔗糖 2 0 9 , 蛋白陈 5 9 , 酵母粉 2 9 , M g S ( ) ; O · 5 9 , K ZH p ( ) 、
g
,
V B , 5 m g
, 琼脂 14一 1 6 9 , 链霉素 3 () m g , ( 灭菌后冷却至 5 () 〔 、 左右时再加入 ) . 水 l () ( ) ( )
m I
J ,
p H 自然 , 此培 养基也适用于菌种扩大培养 ·
.1 3 分离及培养方法
卜 :.3 l 组织分离
剥去僵虫体外菌套 , 用水冲洗 于净 , 将样品于 。 . 1%升汞水中消毒 5 m in , 无菌水冲洗浸
泡 3遍 , 无菌情况下分别将子座 、 柄 、 虫体切成薄片 , 移到分离培养基上 , 每个培养皿 3片 ,
于 2。 〔 ’ 恒温培养 .
l
·
3
.
2 子囊袍子分离
收稿 日期 : ! 。似 一 ()4 一 l(3
第 4期 张维来等 :亚香棒虫草菌的纯培养分离和鉴定 7 8
选取子座已成熟的样品 , 洗净 , 勿让子座沾水 , 用铁丝插入虫体 , 支于灭菌玻璃罩内 ,
下铺一层无菌砂纸片 , 周围保湿 , 干散射光处培养 48 h 子囊饱子放出并落在砂纸片上 , 再
将砂纸片扣在培养基平板上 , 20 ’ C 培养 s d 后揭去砂纸 , 转接于试管斜面上培养 .
.1 3
·
3 子座菌丝生长样品分离
取还在生长的虫草菌栽植于盛有菜园土的烧杯中 , 每杯 1个 , 使子座顶部与烧杯 口 差
1 m m
, 将平板培养基扣于烧杯上 , 20 C 培养 4一 s d 后子座菌丝可长及平板 , 取下培养皿培
养 , 并转斜面试管中培养 .
2 结 果
3种方式经培养 、 选择 , 最后共培养出真菌 29 株 , 其中僵虫组织 8株 , 子座 14 株 , 子囊
袍子 7株 . 绝大多数菌株是具有同一种分生抱子阶段的菌体 , 且菌落特征及菌丝形态基本相
同 , 附表列出一些典型菌株 .
附表 分离菌株的特征描述
菌 株 来 源 菌落 ( J / m n , ) 菌落形态 菌丝形态 瓶梗及分生袍子
体 B
泡 F
子 I
虫体
组织
分离
致密 , 初为白色后中央白
色 , 外周显粉色 . 背 后橙
黄至暗褐色
营养菌丝粗 . .5 5一 7 拜m ,
具分枝 . 分生抱子梗光滑
透明生于气生菌丝上
子砚
抱子
致密 , 薄 . 白色有环坟 . 背
面中央棕褐 色 , 外围淡橙
黄 色
营养 菌丝 为 5 ~ .6 5 拜m ·
有分枝 , 分生袍子梗生于
气生菌丝 上 ( 见图 2)
子座
分离
致密 . 初为白色 , 后中央
稍带绿色 . 微凸或高高凸
起 . 外围 显粉色 , 背后中
央褐色 , 外周橙黄 色
营 养菌 丝有分 枝 , 5 一 7
拜m , 分生抱子梗生于气生
菌丝上 , 光滑 , 透明
瓶梗瓶状 . 单生 , 对生或
轮生 18 ~ 2 2 肛m . 袍 子圆
形至椭圆形 . 4 ~ 巧夕 万一 6
” m , 链状 ( 见图一)
瓶梗瓶状 , 单生 , 对生或
轮生 , 1 6一 2 0 半, m . 分生袍
子椭圆形 , 3 . 只一 4 . 5 丫
.4 5 拌m 一 6 lI m , 链状
瓶梗瓶状 , 单生对生或轮
生 , 14 ~ 1 9 林m . 分生袍 子
椭圆形 , 链状 , 3 ~ 4 丫 4 -
5 拜m
由附夫叮以 看出各组菌的菌落菌牲形态纂本相同 . 陈庆涛用亚香棒虫草菌 分离出来的
山 体 卜菌体 的瓶使泛分生袍 子 (放大涪数钊 、 几州 . ,” 图艺 泡 F 的背养菌丝及分生袍子 (放大倍数 l。 、 几 ? :弓. : ”
霍克斯拟青霉形态特征为 : 菌落淡粉红色 , 有时中央部分菌丝 自溶 , 菌落背后淡黄至暗茶
色 , 轮状排列的瓶梗长况一 28 “ m , 分 生饱子宽椭圆形 , 3 ~ 6 . 5 x Z~ 4 拌m . 表面有脊纹和
细刺 ’ “ ’ , 由此可 见分离到的菌株与霍克斯拟青霉基本相似 .
首都师范大学学报 ( 自然科学版 ) 1 9 9 3年
图 3子 J 菌株的营养菌丝及分生袍子 ( 放大倍数0 1又 SX : 1 .”
3讨 论
a
.要十分确切地确定一种虫草的分生饱子阶段 ,最好的办法是按小林义雄提 出的 5个条
件进行研究试验 , 但是要做到这点是很困难的 ’ 3 . 根据我们通过 多批次 、 多途径 、 大数量的
分离结果 皆得到同一种真菌的事实 , 确定所分离到的菌株即亚 香棒虫草的无性阶段 , I 一L属
于拟青霉属 , 与陈庆涛分离到霍克斯拟青霉极为相似 , 有可能是一种 .
b
. 经中国科学院动物研究所的王林瑶研究 员鉴定 , 亚香棒虫草的寄主昆虫确定为蝙蝠
蛾科的湖南棒蝠蛾 ( N a P i a l u s h u n a n e n s i s ( 、 h u e t W a 沁g ) l ` , 这与现有报道亚香棒虫草 专一
寄生于夜蛾科的小地老虎 A g or st y sP l on ( R t,t t en ,加 r^ ) 不同 ’ 5 ’ , 需进一步研究 ·
参 考 文 献
刘波 . 中国药用真菌 . 太原 : 山西 人民出版社 , 1 9 7 5 , 2zl
陈庆涛 · 拟青霉属的一个新种 . 真菌学报 , 19 81 , 3 ( 2 ) :
梁宗琦 . 古尼虫草分生袍子阶段的分离和鉴定 . 真菌学报 ,
朱弘复 . 王林瑶 . 冬虫夏草与蝙蝠蛾 . 动物学集刊 , 1 9 85 ,
蒋三俊 . 虫草菌的寄主昆虫开发利用 . 食用菌 , 1 9 8 9 , 4 :
1 0 9~ 1 6 6
1 9 8 5
,
4 ( 3 )
:
1 6 2一 16 fl
3
:
12 1~ 1 3 1
5~ 6
、
I s o l a t i o n o f p u r e C u l t u r e a n d I d e n t i f i c a t i o n
o f C o r d y c e P s H a w k e s i i
Z h a n g W
e i l a i L i Y o u g a n g Z h o u M e n g j i n F u Y i n g e h u n
(跳 p a r t me n t o f iB o lo g y · ( ` a p l t a l N o r m a l U a in v e r s i t y )
A b s t r a e t
T h e f r e s h s p e e im e n s o f e o r d y e e p s h a w k e s i i w e r e e o l l e e t e 〔1 f r o m T a o j i a n g 〔’ (川 n t y
H u n a n P r o v i n e e
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T h e i s o l a t i o n o f P u r e e u l t u r e b y u s i n g h y p h a l
、
e o s p o r e o b t a i n e d t h e p u r e e u l t u r e o f e o n id i u m p h a s e
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8 9第 4期 张维来等 : 亚香棒虫草菌的纯培养分离和鉴定
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n a p i a l t
一5 h u n a n e n s i s
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