全 文 ：第 10卷　第 1期
1998年
江　西　中　医　学　院　学　报
JOURNAL OF JIANGX I COLLEGE OF
T RADIT IONAL CHINESE M EDICINE
Vol. 10　 No. 1
1998
亚香棒虫草中腺苷的 HPLC测定
陈　勇
(江西省九江市药品检验所　九江 332000)
　　关键词　腺苷　 HPLC法　亚香棒虫草　含量测定
　　冬虫夏草 ( Co rdyceps Sinensis Sacc)又名
虫草 ,为我国名贵强壮滋补中药。近年来 ,国内
外对该药的需求量逐年增加 ,而野生资源极为
有限 ,虫草已成为珍稀药材。为解决药源紧缺问
题 ,一方面 ,人们设想分离培养虫草的菌丝体 ,
通过发酵菌丝体生产药物 ,如我国生产的第一
个一类中药金水宝。另一方面 ,我国有丰富的虫
草资源 ,除冬虫夏草外 ,发现虫草种类约有 60
种 [1 ] ,研究较多的有蛹虫草〔 Co rdyceps mili-
taris ( L. ex. Fi ) Link〕、亚香棒虫草 ( Cordyceps
hawkesii Ging )、古尼虫草 ( Co rdyceps gunnii
Berk)等。因此 ,通过对上述众多虫草的深入研
究 ,有望找到天然虫草的代用品。亚香棒虫草是
冬虫夏草的类似品。两者药材形态及化学成分
相似 [1, 2 ] ,无明显毒副作用 ,民间用于滋养身体 ,
其生长条件也不象冬虫夏草那么苛刻 ,故认为
有望成为虫草代用品 [1 ]。
本文首次用 HPLC法测定了江西省产的
亚香棒虫草中主要活性成分腺苷的含量 ,为该
药利用提供了科学依据。
1　仪器和试剂　 HP1090M高效液相色谱仪 ;
乙醇 ;冰醋酸 ( AR) ;甲醇 ( GR) ;腺苷为 sigma
公司对照品。
2　实验材料　亚香棒虫草 ,采自江西省吉安地
区 ;冬虫夏草 ,购于江西省南昌市医药公司。
3　色谱条件　色谱柱: YMC- ODS( 6 mm×
150 mm);流动相: 0. 3%冰醋酸水溶液∶甲醇
( 93∶ 7) ;流速: 1 ml /min;柱温: 45℃ ;检测波
长: 260 nm。
在此色谱条件下 ,腺苷对照品、样品保留时
间分别为 6. 10 min、 6. 15 min (冬虫夏草 )和
6. 12 min(亚香棒虫草 )。
4　实验方法
4. 1　提取溶剂的选择　鉴于所测成分为水溶
性物质 ,并参照文献报道 ,选用水、 30%乙醇、
50%乙醇、 70%乙醇、甲醇和磷酸三钠水溶液
( 0. 01 mol /L )为提取溶剂 ,对样品 (亚香棒虫
草子实体 ,以下同 )作腺苷提取比较。实验发现 ,
甲醇对腺苷溶解度不好 ,磷酸三钠样品溶液极
为粘稠 ,不易过滤 ,影响测定结果 , 50% 、 70%
乙醇样品溶液含量测定结果也偏低 , 30%乙醇
和水作溶剂提取的腺苷含量差异不大 ,但水作
溶剂杂质多且样品不易保存 ,故选 30%乙醇作
为提取溶剂。
4. 2　超声时间选择　选择 15、 30、 45、 60 min
作超声提取比较 ,每组称 3份样品 ,测腺苷含
量。结果表明 ,超声提取 15 min或 30 min腺苷
含量低 ,超声 45 min和 60 min所测含量相差
不大 ,故选定超声提取时间为 45 min。
4. 3　超声提取次数选择　称取 3组样品 ,每组
3份 ,分别超声提取 1次、 2次和 3次后测腺苷
含量。结果表明 ,超声提取 1次所测得的腺苷含
量低 ,超声 2次和 3次 ,测得腺苷含量差异不
大 ,故选择超声提取 2次。
4. 4　标准曲线的制备　精密称取对照品 1. 15
mg于 2 ml容量瓶中 ,加 30%乙醇溶解 ,稀释
至刻度 ,摇匀。 自动进样 0. 3、 0. 6、 0. 9、 1. 2、
1. 5、 1. 8μl测定。以峰面积对进样量 (μg)作图 ,
在 0. 1～ 1. 0μg范围内线性关系良好 ,回归方
程为: Y = 2160. 75 X - 12. 76,相关系数 r =
0. 9994( n = 6)。
4. 5　样品液的制备　精密称取样品 2. 0 g ,置
于 50 m l磨口三角瓶中 ,分别加入 30%乙醇
( 30 m l、 20 ml) ,超声提取 2次 ( 45 min、 45
min) ,滤过 ,滤液减压浓缩至干 ,加入 30%乙
醇液溶解 ,定量转移至 2 m l容量瓶中 ,作为供
试品溶液。
4. 6　加样回收率测定　精密称取腺苷对照品
·32·
9. 80mg于 10 ml容量瓶中 ,加入 30%乙醇溶
液并定容。精密加入一定量对照品液到含有样
品的 50 ml磨口三角瓶中 ,后操作同样品制备。
测定 ,计算回收率 ,结果见表 1。
表 1　回收率测定结果
序号 添加量 (μg ) 回收量 (μg )回收率 (% )平均回收率 (% )RSD%
1 0. 0780 0. 0788 99. 8
2 0. 2350 0. 2340 99. 6
3 0. 3140 0. 3187 101. 5 99. 8 1. 75
4 0. 3910 0. 3832 98. 0
5 0. 4120 0. 4120 100. 0
4. 7　样品精密度考察　取样品溶液 ,按拟定的
色谱条件进样 10次 ,测峰面积 , RSD%为
1. 96。
4. 8　样品测定　分别称取亚香棒虫草、冬虫夏
草各部分 (包括全虫草、子实体、虫体 ) ,按样品
制备项下方法制成供试品溶液 ,测定 ,计算 ,结
果见表 2。
表 2　样品含量测定结果
样品 亚香棒虫草 冬虫夏草全虫草 子实体 虫体 全虫草 子实体 虫体
含量 ( mg /g ) 0. 19 0. 34 0. 11 0. 25 0. 45 0. 15
5　讨论　腺苷有广泛的生理活性 ,为虫草的主
要药理作用的活性成分之一 [3 ] ,本文首次采用
HPLC法测定了亚香棒虫草不同部位中腺苷的
含量 ,并与冬虫夏草相应部位所含腺苷量作了
比较。实验结果表明 ,子实体中腺苷含量分别为
全虫草和虫体的 1. 8倍和 3. 0倍 ,但亚香棒虫
草各部位腺苷含量均低于冬虫夏草。由于亚香
棒虫草对生长环境的要求不像冬虫夏草那么苛
刻 ,通过生态环境改善的研究 ,以提高亚香棒虫
草中有效成分的含量 ,使其成为冬虫夏草的理
想代用品。
参考文献
1　王国栋 . 冬虫夏草类生态、培植、应用 .北京: 科学技术文
献出版社 , 1995
2　中国医学科学院药用资源开发研究所 . 中药志 (第 5册 ) .
北京:人民卫生出版社 , 1994. 775
3　中国医学科学院药物研究所编著 . 中草药现代研究 . 北
京:北京医科大学中国协和医科大学联合出版社 , 1995. 91
(收稿日期 : 1997- 10- 30)
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(上接第 22页 ) 12岁时身高 1. 44 m ,体重 26
kg ,饮食卫生均好 ,从未患过任何疾病。
5　体会　妊娠与肾气、冲、任、气血密切相关 ,
妇人肾气盛 ,冲任通 ,气血充盛 ,月事正常 ,阴阳
相合 ,阳施阴化 ,乃能成孕 ,妊育胎儿。受孕后 ,
脏腑经络之气血皆注于冲任以养胎 ,肾气以系
胎。故妊娠后机体肾气、肾精、气血常处于偏虚
的状态。肾虚冲任不固 ,胎失所系 ,气虚不摄 ,血
虚失养。而胎儿的营养生长发育完全依靠母体 ,
胎儿与母体是一脉相承 ,息息相关。因此母亲的
营养和健康直接影响胎儿。 故以八珍汤加川杜
仲、菟丝子以补肾、补气、补血、补养母体 ,促胎
儿发育。正如元朱震亨《格致余论· 慈幼论》中
所说: “儿之在胎 ,与母同体 ,得热则俱热 ,得寒
则俱寒 ,病则俱病 ,安则俱安 ,母之饮食起居 ,尤
当慎密 ,不可不知也。”这段文字充分说明 ,胎儿
与母体是一脉相承 ,息息相关。孕妇在妊娠期应
从各方面很好地调摄自己 ,让胎儿在舒适的内
环境中生长 ,能得到充足的气、血、精的充养。而
八珍汤加川杜仲、菟丝子汤能益气健脾、补肾益
精、养血滋阴、和胃安胎 ,对胎儿在母体内的先
天发育 ,能起到充髓壮骨、宁神益智、强健体魄
作用。故胎儿生长发育旺盛、智能发育良好 ,母
子体健无病 ,以达优生目的。
现代药理研究证明:四物汤、四君子汤、杜
仲、菟丝子具有免疫调节作用。对各种原因引起
免疫功能低下的机体 ,有明显的扶升作用。这些
研究揭示了中医学中的“正气”与机体免疫功能
有密切关系。 说明中医学的“扶正固本”治则与
提高机体免疫功能是相辅相成的。 而菟丝子提
高其卵巢 hCG /LH受体功能 ,促进其成熟卵细
胞分泌雌激素或孕激素。
婴儿的生长发育超正常生理常数 ,智能发
育超正常儿童即为优生的标准。在临床实践中 ,
凡服八珍汤加川杜仲、菟丝子汤的孕妇 ,生下来
的婴儿 ,其生长发育和智能发良一般均超过正
常婴儿的生理常数。 但亦有少数婴儿的个别项
目不能超过正常婴儿生理常数的。 这说明单从
药物的补养是不够全面的。妊娠期孕妇必须全
面调摄如节制房事、调摄情志、饮食调摄、劳逸
适度及避风、寒、湿、热 ,防邪气入侵等。 以上几
点是孕妇自身能做到的 ,加上药物的补养 ,才是
完美无缺的。
(收稿日期 : 1997- 07- 15)
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1期 陈　勇: 亚香棒虫草中腺苷的 HPLC测定