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亚香棒虫草菌丝体不同培养基筛选试验



全 文 :江西农业学报 2008, 20(12):95 ~ 96ActaAgriculturaeJiangxi
亚香棒虫草菌丝体不同培养基筛选试验
张 诚1 ,涂 艳2 ,陈柳萌 1 ,陈庆隆1 ,熊中良1 ,魏云辉 1 ,熊宏亮 1 ,涂寿兰1
   收稿日期:2008-08-15
基金项目:江西省科技厅科技攻关项目。
作者简介:张诚(1968-),男 ,江西南丰人 ,副研究员,主要从事食 、药用菌育种和栽培技术的研究。
(1.江西省农业科学院农业应用微生物研究所 ,江西南昌 330200;2.江西广播电视大学科研处 ,江西南昌 330046)
摘 要:通过设计 9个配方 ,研究了不同培养基对亚香棒虫草菌丝体生长的影响。结果表明 , 配方 3(绿豆芽 250g、白糖
10 g、琼脂 10g、KH2PO4 0.5g、MgSO4 0.5g、蛋白胨 0.25g、水 500mL)和配方 7(葡萄糖 15 g、淀粉 20 g、琼脂 15g、硝酸钾 1 g、
氯化钙 0.05 g、硫酸锰 0.1g、蛋白胨 2 g、水 500mL)为最佳配方 ,亚香棒虫草菌丝体在这两个配方培养基上生长得又好又快。
关键词:亚香棒虫草;菌丝体;培养基;筛选试验
中图分类号:S567.39 文献标识码:A 文章编号:1001-8581(2008)11-0095-02
ScreeningofDiferentMediaforMyceliumofCordycepshawkesi
ZHANGCheng1 , TUYan2 , CHENLiu-meng1 , CHENQing-long1 , XIONGZhong-liang1 ,
WEIYun-hui1 , XIONGHong-liang1 , TUShou-lan1
(1.InstituteofAppliedAgriculturalMicrobiology, JiangxiAcademyofAgriculturalSciences, Nanchang330200, China;
2.ScientificResearchDepartment, JiangxiRadioandTVUniversity, Nanchang330046, China)
Abstract:TheeffectsofninediferentmediaonthegrowthofmyceliumofCordycepshawkesiiGraywerestudied.Experimental
resultsshowedthatformulationNo.3(mungbeansprout2 5 0g, whitesugar1 0g, agar1 0g, KH2 PO4 0.5g, MgSO4 0.5g, peptone
0.25g, water500mL)andformulationNo.7(glucose15 g, amylum20g, agar15g, KNO3 1g, CaCl2 0.05g, MgSO4 0.1g, pep-tone2 g, water500mL)weretheoptimumformulations.ThegrowthofmyceliumofCordycepshawkesiGraywasfastandwellonthe
above-mentionedtwomediumformulations.
Keywords:CordycepshawkesiiGray;Mycelium;Medium;Screening
  虫草是 Cordyceps属真菌感染于昆虫 ,并从昆虫头部
或体表上长出子实体的虫菌复合体。据不完全统计 ,我
国目前发现的虫草不少于 100种 。冬虫夏草 Cordyceps
sinensis是其中之一 ,为我国特有的名贵药用真菌 ,与人
参 、鹿茸齐名 ,为传统三大补品之一。 《本草从新 》谓冬
虫夏草保肺益肾 、止血化痰 、已劳嗽。 《本草纲目拾遗 》
则称其补精益气 ,可抵人参。冬虫夏草性温味甘 ,主治肺
结核、咳嗽咯血、年老体衰、贫血虚弱、盗汗、阳痿、遗精 、
腰膝疲酸及增强身体免疫功能等。近代医学发现 ,它还
有抑制癌症作用。但冬虫夏草分布范围狭窄 ,主要分布
在我国的四川 、西藏、青海 、云南和甘肃等地的高寒地带 ,
自然资源有限 。随着人们生活水平的提高 ,保健意识的
增强 ,冬虫夏草需求量不断增大。
亚香棒虫草 Cordycepshawkesi广泛分布于我国江
西 、湖南、安徽、福建等省山区、丘陵地带 ,据分析测定 ,其
有效成份甘露醇、氨基酸等有机成份和无机元素与冬虫
夏草相似 ,在民间把它作为冬虫夏草的代用品进行药用 ,
江西万安县等地已有 100多年的历史 ,它是一种极具开
发潜力的虫草资源 。目前 ,亚香棒虫草还不能进行人工
栽培 ,因此本文对亚香棒虫草菌丝体在不同配方培养基
上的生长情况进行了研究 ,以期为亚香棒虫草人工栽培
奠定基础。
1 材料与方法
1.1 供试菌株 yxbh:为经航天搭载的亚香棒虫草菌
株。 yxb:为未经航天搭载的亚香棒虫草原始菌株(由本
所从江西泰和县山上野生采集并分离)。其中 yxbh菌株
来源:将亚香棒虫草 yxb菌株培养活化 7 d的菌丝块转
移至无菌的 EP管(1.5 mL),封口后进行航天搭载 ,所搭
载航天器为第 22颗返回式科学与技术试验卫星 ,卫星轨
道的近地点 210 km,远地点 350 km,轨道倾角为 63°,平
均周期 90 min,运行日期为 2005年 8月 29日 ~ 9月 16
日 ,共 18 d。yxbh和 yxb菌株均由本所提供。
1.2 试验内容与方法 在参考国内有关资料的基础上 ,
共设计了 9个母种培养基配方:配方 1:马铃薯 100 g(煮
汁)、葡萄糖 10 g、琼脂 10 g、KH2PO4 0.5g、MgSO4 0.5 g、
蛋白胨 0.25 g、牛肉膏 0.25 g、水 500 mL;配方 2:蛋白胨
0.5g、葡萄糖 10g、酵母膏 0.5g、KH2 PO4 0.5g、MgSO4
0.5g、VB10.5g、VB120.5 g、琼脂 10 g、水 500mL;配方 3:
绿豆芽 250g(煮汁)、白糖 10g、琼脂 10g、KH2PO4 0.5g、
MgSO4 0.5 g、蛋白胨 0.25 g、水 500 mL;配方 4:马铃薯
125g(煮汁)、葡萄糖 12.5 g、琼脂 10 g、KH2PO4 0.5 g、
MgSO4 0.75g、VB110mg、水 500 mL;配方 5:马铃薯 100 g
(煮汁)、蔗糖 10 g、蛋白胨 0.25 g、KH2PO4 0.5 g、MgSO4
0.25g、琼脂 10 g、水 500 mL;配方 6:黄豆芽 250 g(煮
汁)、葡萄糖 10 g、蛋白胨 0.25 g、牛肉膏 0.25 g、KH2PO4
0.5 g、MgSO40.25 g、琼脂 10 g、水 500mL;配方 7:葡萄糖
15g、淀粉 20 g、琼脂 15 g、硝酸钾 1 g、氯化钙 0.05 g、硫
酸锰 0.1g、蛋白胨 2g、水 500mL;配方 8:葡萄糖 10g、淀
粉 20 g、琼脂 15 g、VB15 mg、肌醇 0.5 mg、蛋白胨 1.5 g、
水 500 mL;配方 9:KH2PO4 1g、MgSO41 g、蛋白胨 2.5 g、
葡萄糖 10 g、VB1 5mg、琼脂 10 g、水 500 mL。
分别按上述配方称量 ,分装试管 、消毒、倒入培养皿 、
接种等均按常规进行 ,接种后置于 24 ℃ ±1 ℃生化箱内
培养。该试验分别在试管和培养皿中进行 。每天从纵横
两方向测量各配方的菌落直径 ,共测 6次 ,取平均值 ,据
此算出对照与航天种各配方菌丝日均长速;观察记载各
配方中菌丝浓密和分泌色素情况。
2 结果与分析
试验结果见表 1、表 2。
表 1 亚香棒虫草航天种 yxbh菌株菌丝体
在不同配方培养基上的生长情况
配方 菌丝日均长速
(cm/d)
菌丝浓
密程度
色素
分泌
差异显著性
5% 1%
1 1.36 - ┄ b A
2 1.38 -- * b A
3 1.5 +++ ** a A
4 1.37 + ┄ b A
5 1.36 - * b A
6 1.38 ++ ┄ b A
7 1.49 +++ ** a A
8 1.33 - *** b A
9 0.7 -- *** b B
 注:+++表示菌丝浓密, ++表示菌丝较浓密 , +表示菌丝一般 ,
-表示菌丝较稀疏 , --表示菌丝稀疏;***表示色素分泌
多, **表示色素分泌较多 , *表示色素分泌一般 , ┄表示色素
分泌少。下同。
从表 1、表 2中可以看出 ,亚香棒虫草菌丝体在 9个
配方培养基中均能生长 ,其中亚香棒虫草两个菌株的菌
丝体在配方 3和配方 7中菌丝生长浓密、色素适中 、生长
速度居前 2位 。方差分析结果表明 ,配方 3和配方 7中
菌丝体的日均长速在 5%水平上与其它配方存在显著差
异 ,配方 9中菌丝体的日均长速在 1%水平上与其它配
方存在极显著差异。而配方 8和配方 9中菌丝体色素分
泌最多(航天种更明显),适合进行色素的提取 。配方 3
和配方 7为亚香棒虫草菌丝体生长的最佳配方。
3 讨论
冬虫夏草为我国传统的名贵药材 ,由于其分布海拔
高 ,生长期长 ,因而货源短缺 ,供不应求 ,其价格也愈来愈
高。亚香棒虫草因外形与冬虫夏草相似 、化学成分与冬
虫夏草基本相同而常被作为冬虫夏草的代用品使用 。目
前 ,有关亚香棒虫草人工栽培的研究在广泛而深入地进
行。本文在参考有关资料的基础上 ,对用于亚香棒虫草
菌丝体生长的不同培养基配方进行了筛选试验 ,从中选
出了配方 3和配方 7两个最佳配方 ,为亚香棒虫草的人
工栽培奠定了基础。有关亚香棒虫草感染寄主幼虫的试
验目前也在进行中 ,我们期望通过一系列试验研究 ,能人
工培育出亚香棒虫草子实体 。
表 2 亚香棒虫草 yxb菌株菌丝体在
不同配方培养基上的生长情况
配方 菌丝日均长速
(cm/d)
菌丝浓
密程度
色素
分泌
差异显著性
5% 1%
1 1.41 + ** b A
2 1.4 -- * b A
3 1.56 +++ ** a A
4 1.42 -- ┄ b A
5 1.42 -- ┄ b A
6 1.4 ++ * b A
7 1.56 +++ ** a A
8 1.4 - *** b A
9 0.88 - *** b B
参考文献:
[ 1] 朱斗锡.冬虫夏草的菌种制作 [ J].中国食用菌 , 1993, 12(4):
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[ 2] 吴德龙 ,王卫芳 ,薛芳森 ,等.亚香棒虫草的研究 [ J] .江西农业
大学学报 , 1997, 19(2):31~ 36.
[ 3] 李昊 ,吴百昌 ,李春兰.虫草人工栽培与深度开发 [ M].北京:
科学技术文献出版社 , 2003.96 ~ 98.
(上接第 94页)
3 结论
采用正交实验法优选荔枝果酒的最佳发酵条件 ,结
果表明 ,最适控制条件为温度 21 ℃、接种量 10%、糖度
25%、柠檬酸添加量 8g/L、有效 SO2添加量 0.13g/L、发
酵时间 10 d。
参考文献:
[ 1] 周文化 ,钟秋平.荔枝全汁果酒酿造过程中抗氧化研究 [ J] .
食品科学 , 2006, (3).
[ 2] 吴谋成 ,等.食品分析与感官评定 [ M] .北京:中国农业出版
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96 江 西 农 业 学 报                   20卷