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小叶莲提取物抗乳腺肿瘤活性研究



全 文 :中国药房 2014年第25卷第7期 China Pharmacy 2014 Vol. 25 No. 7
小叶莲系常用藏药,为小檗科桃儿七 Sinopodophyllum hexandrum(Royle)Ying干燥成熟果实,不但具有活血调经的
功能[1],还有明显的抗肿瘤活性[2]。笔者所在课题组前期研究
发现,小叶莲乙醇提取物(X1)以及主要成分8,2’-二异戊烯基
槲皮素-3-甲醚(S1)对于人乳腺癌细胞增殖有抑制作用[3-4]。为
此,拟继续对X1、小叶莲的乙酸乙酯提取物(X2)、小叶莲正丁
醇提取物(X3)以及小叶莲主要成分S1和槲皮素(S2)进行体内、
外抗乳腺肿瘤活性研究,旨在阐明小叶莲抗乳腺癌活性作用
Δ基金项目:国家科技重大专项重大新药创制项目(No.2013ZX
09103002-006)
*硕士研究生。研究方向:天然药物化学。E-mail:384603212
@qq.com
# 通信作者:副教授,博士。研究方向:生药学。电话:010-
82802534。E-mail:myshang@bjmu.edu.cn
·中药研究·
小叶莲提取物抗乳腺肿瘤活性研究Δ
郭 帅 1*,王 璐 1,苏 丹 1,孔 越 1,2,尚明英 1 #,蔡少青 1(1.北京大学医学部药学院天然药物学系生药研究室,
北京 100191;2.国家知识产权局专利局专利审查协作北京中心,北京 100190)
中图分类号 R285 文献标志码 A 文章编号 1001-0408(2014)07-0577-04
DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2014.07.01
摘 要 目的:研究小叶莲提取物抗乳腺肿瘤活性。方法:培养人乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231,每孔分别加入1、25、50、
100 μg/ml小叶莲乙醇提取物(X1)、乙酸乙酯提取物(X2)、正丁醇提取物(X3),6.25、12.5、25、50、100 μmol/L 8,2’-二异戊烯基槲皮
素-3-甲醚(S1)、槲皮素(S2),测定各成分对癌细胞的抑制率。裸小鼠腋下注射MCF-7人乳腺癌细胞以复制荷瘤小鼠模型。模型小
鼠分别灌胃给予等容生理盐水(模型组)、15 mg/kg环磷酰胺(环磷酰胺组)、500 mg/kg X1(X1组)、500 mg/kg X2(X2组)、500 mg/kg
X3(X3组),每天1次,连续15 d,测定小鼠体质量、瘤质量,计算瘤质量抑制率。模型小鼠分别灌胃给予等容生理盐水(模型组)、15
mg/kg环磷酰胺(环磷酰胺组)、15 mg/kg S1(S1组)、15 mg/kg S2(S2组),每天 1次,连续 9 d,测定小鼠瘤体积,计算瘤体积抑制率。
结果:1、25、50、100 μg/ml X1、X2与12.5、25、50、100 μmol/L S1、S2对MCF-7人乳腺癌细胞有较强抑制作用;各成分对MDA-MB-231
细胞抑制作用均较弱。与模型组比较,X1组、X2组、X3组小鼠瘤质量抑制率升高,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。与模型
组比较,S1组、S2组小鼠瘤质量抑制率、瘤体积抑制率升高,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:小叶莲提取物有一定
的抗乳腺肿瘤活性。
关键词 小叶莲提取物;8,2’-二异戊烯基槲皮素-3-甲醚;槲皮素;人乳腺癌细胞;裸鼠移植瘤
Study on Anti-breast Tumor Activity of Sinopodophyllum hexandrum Extracts
GUO Shuai1,WANG Lu1,SU Dan1,KONG Yue1,2,SHANG Ming-ying1,CAI Shao-qing1(1.Division of Pharmacog-
nosy,Dept. of Natural Medicine,School of Pharmaceutical Sciences,Peking University Health Science Center,
Beijing 100191,China;2.Patent Examination Cooperation Center,State Intellectual Property Office,Beijing
100190,China)
ABSTRACT OBJECTIVE:To study the anti-breast tumor activity of Sinopodophyllum hexandrum extracts. METHODS:Human
breast cancer cell line MCF-7 and MDA-MB-231 were treated by 1, 25, 50 and 100 μg/ml ethanol extract of S. hexandrum(X1),
ethyl acetate extract of S. hexandrum(X2)and n-butanol extract of S. hexandrum(X3),6.25,12.5,25,50 and 100 μmol/L 8,2’-di-
prenylquercetin-3-methyl ether(S1)and quercetin(S2). The inhibitory rate of tumor was detected.Tumor bearing mice was induced
by subaxillary injection of human breast cancer cell line MCF-7. Tumor bearing mice were given constant volume of normal saline
intragastrically(model group),15 mg/kg cyclophosphamide(cyclophosphamide group),500 mg/kg X1(X1 group),500 mg/kg X2(X2
group),500 mg/kg X3(X3 group),once a day for consecutive 15 days.Inhibitory rate of tumor weight,body weight, tumor weight
and inhibitory rate were determined. Tumor bearing mice were divided into model group(constant volume of normal saline),cyclo-
phosphamide group(15 mg/kg),S1 group(15 mg/kg)and S2 group(15 mg/kg). They were given relevant medicines intragastrically
once a day for consecutive 9 days. Inhibitory rate of tumor volume,tumor volume of mice was detected. RESULTS:1,25,50,100 μg/
ml X1 and X2,12.5,25,50,100 μmol/L S1 and S2 significantly inhibited the growth of human breast cancer cell line MCF-7,while
they inhibited MDA-MB-231 slightly. Compared with model group,inhibitory rate of X1 group,X2 group and X3 group were all in-
creased significantly;there was statistically significance(P<0.05 or P<0.01). Compared with model group,inhibitory rate of tu-
mor volume and tumor weight of S1 group and S2 group were decreased significantly;there was statistical significance(P<0.05 or
P<0.01). CONCLUSIONS:S. hexandrum extracts show some anti-breast tumor activity.
KEYWORDS Sinopodophyllum hexandrum extracts;8,2’-diprenylquercetin-3-methyl ether;Quercetin;Human breast cancer
cell;Nude mice transplantable tumor
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China Pharmacy 2014 Vol. 25 No. 7 中国药房 2014年第25卷第7期
和其物质基础,为新药研发和临床用药提供依据。其中,小叶
莲不同极性提取物和异戊烯基黄酮类化合物的体内抗乳腺肿
瘤研究尚属首次报道。
1 材料
1.1 仪器
超净工作台(北京伟达净化厂);CP214型电子天平(美国
Ohaus公司);培养箱(德国Binder公司);流式细胞仪(美国B
DPharmingen 公司);VersaMax 型酶标仪(美国 Molecular
Devices公司);CKX31型倒置显微镜(日本Olympus公司);96
孔板(美国Corning Costar公司)。
1.2 药材
小叶莲,2009年 10月购于青海晶珠藏药公司,产地为青
海,凭证标本(编号:6339)存放于北京大学医学部药学院生药
标本室。
1.3 药品与试剂
环磷酰胺(CTX,美国 Acros Organics 公司,批号:
A1064185);碘化丙锭(PI)、磺酰罗丹明B、核糖核酸酶RNase
(美国Sigma公司);1640培养基、胎牛血清(美国Gibco公司);
二甲基亚砜(DMSO)、羧甲基纤维素钠(CMC-Na)均为分析
纯,购自北京化工厂。
1.4 动物与细胞株
Balb/c裸小鼠,♀,4~6周龄,体质量(19.0±2.5)g,由北京
大学医学部实验动物中心提供[实验动物使用许可证:SCXK
(京)2011-0012]。人乳腺癌细胞株MCF-7、MDA-MB-231均由
北京大学医学部药学院药剂学系吕万良教授惠赠。
2 方法
2.1 小叶莲提取物的制备
取小叶莲干燥药材17.5 kg,粉碎为粗粉,以8倍量的95%
乙醇回流提取2次,每次2 h,50%乙醇提取1 h,提取液合并后
浓缩至基本无醇味,得到 4.17 kg X1。取 4.01 kg X1,加蒸馏水
12 L至完全悬浮后,依次用等倍体积乙酸乙酯、水饱和正丁醇
各提取 5次。提取液分别减压回收溶剂,得各提取物。其中,
X2为深棕色浸膏 1 150.0 g,X3为红棕色浸膏 794.8 g。分别取
X1、X2、X3各 10 g,制成冻干粉,备用。每 1 g X1相当于原生药
4.19 g,每 1 g X2相当于原生药 14.5 g,每 1 gX3相当于原生药
20.9 g。S1和S2为笔者从小叶莲中分离得到并经结构鉴定,二
者纯度>98.0%。
2.2 溶液的制备
2.2.1 小叶莲提取物溶液的制备 取X1、X2、X3冻干粉适量,
以蒸馏水制备成质量浓度为100 mg/ml的蒸馏水贮备液(供动
物实验用);以DMSO制备成质量浓度为 10 mg /ml的DMSO
贮备液(供体外细胞实验用)。
2.2.2 S1和 S2溶液的制备 取 S1和 S2适量,以 0.5%CMC-Na
制备成质量浓度为1.5 mg/ml的0.5%溶液(供动物实验用);以
DMSO制备成浓度为 10 μmol/ml的DMSO贮备液(供体外细
胞实验用)。
2.3 小叶莲提取物对人乳腺癌细胞MCF-7、MDA-MB-231的
抑制作用
人乳腺癌细胞MCF-7、MDA-MB-231复苏后,于 37 ℃、
5% CO2细胞培养箱中培养,2~3 d传代培养。将处于对数生
长期的贴壁肿瘤细胞以 200 μl/孔接种于 96孔培养板,每孔
8 000个细胞。贴壁生长 24 h后给药。制备 4种质量浓度的
X1、X2、X3溶液(1、25、50、100 μg/ml)和4种浓度的S1和S2溶液
(12.5、25、50、100 μmol/L)。每个浓度设 3个复孔。48 h取出
培养板,每孔加入10%(m/V)的三氯乙酸(TCA)100 μl固定细
胞,4℃放置1 h。弃固定液,用蒸馏水洗涤5次,空气中自然干
燥,每孔加磺酰罗明B溶液 100 μl,室温下放置 10~30 min。
用 1%醋酸洗涤 5次,自然干燥。最后加入 150 μl/孔 Tris溶
液,在平板振荡器上振荡 5 min。用酶标仪在 515 nm波长处
测定光密度(OD),用空白对照调零。以细胞内加DMSO作
模型对照。按下式计算肿瘤细胞生长的抑制率:抑制率=
(OD 模型对照-OD给药)/OD515模型对照×100%。
2.4 小叶莲提取物对荷瘤小鼠MCF-7移植瘤的抑制作用
2.4.1 模型的复制 人乳腺癌细胞MCF-7复苏后,置 37℃、
5% CO2细胞培养箱中培养,2~3 d传代培养。将贴壁细胞用
PBS洗2次,用0.25%胰酶消化,1640培养基(含10%血清)终
止消化后,吹打成细胞悬液,计数,离心收集,PBS洗2次,离心
收集。加入PBS,使细胞密度为5×107 ml-1,每只裸小鼠腋下注
射 200 μl。正常喂养 4 d后,裸小鼠腋下长出肿瘤块。处死裸
小鼠,无菌操作下取瘤块,除去边缘坏死组织部分。将取下的
瘤块以相同大小(3 mm3)包埋于每只裸小鼠右侧腋窝皮下。
2.4.2 分组与给药 (1)X1对荷瘤小鼠移植瘤的抑制作用:
实验分为 3组,即模型组(等容生理盐水)组、X1(500 mg/kg)
组、CTX(15 mg/kg)组。复制模型第 2天后 ig给药,每天 1次,
连续15 d。末次给药1 d后处死小鼠,先称体质量,后解剖皮下
瘤块,称瘤质量。裸小鼠实际体质量为所称体质量减去瘤质
量。计算瘤质量抑制率[瘤质量抑制率(%)=(1-用药组平均
瘤质量/模型组平均瘤质量)×100%]。(2)X2、X3对荷瘤小鼠移
植瘤的抑制作用:实验分为4组,即模型(等容生理盐水)组、X2
(500 mg/kg)组、X3(500 mg/kg)组、CTX(15 mg/kg)组。给药与
指标检测同“2.4.2(1)”项下方法。(3)S1和S2对荷瘤小鼠移植瘤
的抑制作用:实验分为 4组,即模型组(等容生理盐水)组、S1
(15 mg/kg)组、S2(15 mg/kg)组、CTX(15 mg/kg)组,ig给药,每
天 1次,连续 9 d。瘤质量抑制率计算方法同“2.4.2(1)”项下。
给药后第3、6、9天分别测量瘤体积。以数显游标卡尺分别测量
移植瘤的长径和短径,计算平均瘤体积[肿瘤体积=(长径×短
径 2)/2。]和瘤体积抑制率[瘤体积抑制率(%)=(1-用药组平
均瘤体积/模型组平均瘤体积)×100%][5-6]。
2.5 统计学方法
实验数据以x±s表示,采用SPSS 21.0统计学软件进行数
据分析。多组间单因素比较先用单因素分析其正态分布,后
以LSD法进行统计。P<0.05为差异有统计学意义。
3 结果
3.1 小叶莲提取物对人乳腺癌细胞MCF-7、MDA-MB-231的
抑制作用
X1、X2可较强抑制人乳腺癌细胞MCF-7,X3的抑制作用较
弱,3种提取物的半数抑制浓度(IC50)分别为 39.51、55.18、
89.10 μg/ml。X1、X2、X3对人乳腺癌细胞MDA-MB-231的抑制
作用较弱,IC50分别为 101.70、96.09、196.00 μg/ml。S1、S2对人
乳腺癌细胞MCF-7有较强抑制作用,IC50分别为 17.67、39.87
μmol/L;S1、S2对人乳腺癌细胞MDA-MB-231的抑制作用较弱,
IC50分别为36.33、58.76 μmol/L。小叶莲提取物、S1、S2对人乳腺
癌细胞MCF-7和MDA-MB-231的抑制作用分别见表1、表2。
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中国药房 2014年第25卷第7期 China Pharmacy 2014 Vol. 25 No. 7
表1 小叶莲提取物对人乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231
的抑制作用(%,x±s,n=3)
Tab 1 Inhibitory effect of S. hexandrum extracts on human
breast cancer cell line MCF-7 and MDA-MB-231(%,x±s,
n=3)
质量浓度,
μg/ml
1
25
50
100
人乳腺癌细胞MCF-7
X1
26.25±5.30
38.63±6.80
52.63±3.79
59.47±2.11
X2
26.85±3.61
34.94±4.76
44.33±4.83
59.52±5.23
X3
29.11±3.02
34.10±7.10
44.01±6.94
53.76±8.89
人乳腺癌细胞MDA-MB-231
X1
5.24±4.84
14.32±6.37
37.36±4.17
55.13±4.85
X2
7.53±7.58
13.29±5.16
42.12±3.78
52.09±4.25
X3
-5.34±6.72
24.80±6.01
33.58±7.69
45.77±4.92
表 2 S1、S2对人乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231的抑制
作用(%,x±s,n=3)
Tab 2 Inhibitory effect of S1,S2 on human breast cancer cell
line MCF-7 and MDA-MB-231(%,x±s,n=3)
浓度,μmol/L
12.5
25
50
100
人乳腺癌细胞MCF-7
S1
42.13±8.37
62.45±6.33
65.39±8.61
87.05±3.46
S2
28.89±4.40
42.64±3.96
45.62±5.54
72.50±3.32
人乳腺癌细胞MDA-MB-231
S1
18.75±6.77
23.01±2.74
51.95±5.89
81.34±8.62
S2
13.75±4.44
13.01±2.74
26.95±5.61
76.34±3.93
3.2 小叶莲提取物对荷瘤小鼠MCF-7移植瘤的抑制作用
与模型组比较,X1组、X2组、X3组、S1组、S2组荷瘤小鼠
MCF-7移植瘤质量减轻,瘤质量抑制率明显升高(P<0.01或
P<0.05)。S1、S2对荷瘤小鼠MCF-7移植瘤体积的抑制作用相
似。与模型组比较,第3~6天,S1组瘤体积抑制率大于CTX组
及S2组;第 6~9天,模型组移植瘤体积继续增长,而S1组移植
瘤体积未增大,S2组移植瘤体积减小。X1、X2、X3对荷瘤小鼠
MCF-7移植瘤的抑制作用分别见表 3、表 4;S1、S2对荷瘤小鼠
MCF-7移植瘤质量、体积的抑制作用分别见表5、表6。
表3 X1对荷瘤小鼠MCF-7移植瘤的抑制作用(x±s,n=7)
Tab 3 Inhibitory effect of X1 on MCF-7 transplantable tum-
or(x±s,n=7)
组别
模型组
X1组
CTX组
n
7
7
7
体质量/g
给药前,g
18.36±0.48
18.07±1.13
18.57±1.37
给药后,g
21.29±0.86
21.57±1.34
20.93±1.54
增质量,g
2.93±1.13
3.50±0.76
2.36±1.68
瘤质量,g
0.61±0.18
0.32±0.14**
0.33±0.08**
瘤质量抑制
率,%
47.54*
45.90*
与模型组比较:*P<0.05,**P<0.01
vs.model group:*P<0.05,**P<0.01
表 4 X2、X3对荷瘤小鼠MCF-7移植瘤的抑制作用(x±s,n=
6)
Tab 4 Inhibitory effect of X2,X3 on MCF-7 transplantable
tumor(x±s,n=6)
组别
模型组
X2组
X3组
CTX组
n
6
6
6
6
体质量,g
给药前,g
20.05±1.26
22.31±1.28
21.63±0.58
19.85±1.3
给药后,g
23.31±1.10
25.08±1.35
25.60±1.86
23.38±2.16
增质量,g
3.27±0.48
2.77±0.67
3.97± 1.54
3.53±1.11
瘤质量,g
2.56±0.60
1.26±0.29**
1.88±0.62**
1.50±0.31**
瘤质量抑制
率,%
50.98**
26.56**
41.34**
与模型组比较:**P<0.01
vs.model group:**P<0.01
表5 S1、S2对荷瘤小鼠MCF-7移植瘤质量的抑制作用(x±s,
n=6)
Tab 5 Inhibitory effect of S1,S2 on tumor weight of MCF-7
transplatable tumor(x±s,n=6)
组别
模型组
S1组
S2组
CTX组
n
6
6
6
6
体质量,g
给药前,g
16.90±0.70
17.17±0.87
17.05±0.59
16.98±0.88
给药后,g
18.50±1.06
19.07±1.12
19.72±0.59
19.32±1.12
增质量,g
1.68±0.50
1.90±0.37
2.67±0.27
2.33±0.38
瘤质量,g
0.150 3±0.022 7
0.025 7±0.008**
0.030 7±0.008**
0.014 8±0.004 9**
瘤质量抑
制率,%
66.47**
68.10**
86.74**
与模型组比较:**P<0.01
vs.model group:**P<0.01
4 讨论
X1、X2对人乳腺癌细胞MCF-7、MDA-MB-231以及荷瘤小
鼠移植瘤有较强的抑制作用,与其主要成分为木质素和黄酮
有关。而X3对人乳腺癌细胞MCF-7、MDA-MB-231以及荷瘤
小鼠移植瘤的抑制作用均较弱,可能因为X3虽然含有黄酮苷
和木脂素苷类化合物,但同时含有大量大分子物质,掩盖了其
活性,因此抗肿瘤作用不明显。
黄酮类化合物被认为具有植物雌激素作用以及线粒体毒
性[7-8],具有较好的抗肿瘤活性[9]。S1对人乳腺癌细胞MCF-7的
抑制作用强于S2,可能是因为异戊烯基取代所致[10]。而S2为S1
的黄酮母核,对于多种细胞株在体内、外均有较好的抑制作用[11],
从而证明研究S1的体内、外抗肿瘤活性有一定意义。
乳腺癌为女性常见肿瘤之一,目前运用类雌激素替代治
疗越来越受到重视。而黄酮类化合物具有类雌激素的生物活
性,并且对乳腺癌有抑制作用。通过比较S1和S2对激素依赖
型人乳腺癌细胞株体外细胞增殖抑制作用以及对裸小鼠移植
瘤的抑制作用,初步得出结论:具有异戊烯基取代的黄酮类化
表6 S1、S2对荷瘤小鼠MCF-7移植瘤体积的抑制作用(x±s,n=6)
Tab 6 Inhibitory effect of S1 and S2 on tumor volume of MCF-7 transplantable tumor(x±s,n=6)
组别
模型组
S1组
S2组
CTX组
n
6
6
6
6
第3天
瘤体积,mm3
52.27±12.65
15.69±2.81**
28.36±6.47**
19.48±5.99**
瘤体积抑制率,%
69.97±5.37
45.71±12.40
62.71±11.46
第6天
瘤体积,mm3
70.75±18.60
30.54±6.54**
34.65±5.39*
30.32±10.05**
瘤体积抑制率,%
57.12±14.20
51.01±7.62
56.83±9.24
第9天
瘤体积,mm3
96.45±14.58
29.31±9.33*
31.34±10.94**
11.99±3.95**
瘤体积抑制率,%
67.58±9.68**
65.34±11.35*
86.74±4.10**
与模型组比较:*P<0.05,**P<0.01
vs.model group :*P<0.05,**P<0.01
合物不仅在离体实验中活性较好,同时在体内实验中也有较
好的活性,推测与异戊烯基黄酮的类雌激素作用相关。
从传统医药中寻找具有活性的天然产物作为先导化合物
是创新药物的研究方向之一。本研究结果可为小叶莲的开发
和利用提供依据。
(致谢:感谢北京大学医学部实验动物部张云凤老师对实验的支持!)
参考文献
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(收稿日期:2013-05-25 修回日期:2013-06-31)
Δ基金项目:国家自然科学基金资助项目(No. 81072687);上海
市第六人民医院院级科研基金
*博士研究生。研究方向:分子药理。E-mail:lijieliqing@163.
com
# 通信作者:主任药师,教授,博士研究生导师。研究方向:中药
学。电话:021-24058098。E-mail:gboss@126.com
木犀草素对肝星状细胞迁移和增殖的影响Δ
李 婕 1,2*,李星霞 1,霍 炎 1,杨全军 1,郭 澄 1,2 #(1.上海交通大学附属第六人民医院药剂科,上海 200233;2.
上海交通大学药学院,上海 200240)
中图分类号 R965;R979.1 文献标志码 A 文章编号 1001-0408(2014)07-0580-03
DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2014.07.02
摘 要 目的:研究木犀草素对肝星状细胞迁移的影响。方法:体外培养肝星状T6(HSC-T6)细胞,细胞计数Kit8(CCK-8)法检测
0、10、20、40 μmol/L木犀草素对HSC-T6细胞增殖的影响;通过划痕实验、Transwell实验观察 0、10、20、40 μmol/L木犀草素对
HSC-T6细胞迁移能力的影响;蛋白印迹法检测木犀草素对细胞外信号调节激酶(ERK)5蛋白磷酸化水平的影响。结果:
20、40 μmol/L木犀草素能明显抑制HSC-T6细胞的增殖(P<0.05);10、20、40 μmol/L木犀草素能明显抑制HSC-T6细胞划痕的修
复(P<0.05);10、20、40 μmol/L木犀草素能明显抑制HSC-T6细胞穿膜(P<0.05);10、20、40 μmol/L木犀草素能明显抑制细胞中
由血清诱导的去磷酸化(p)-ERK5表达(P<0.05)。结论:木犀草素呈浓度依赖性抑制HSC-T6细胞的增殖和迁移,其机制可能与
抑制ERK5蛋白磷酸化水平有关。
关键词 木犀草素;肝星状细胞;迁移;细胞外信号调节激酶5
Effects of Luteloin on the Migration and Proliferation of Hepatic Stellate Cells
LI Jie1,2,LI Xing-xia1,HUO Yan1,YANG Quan-jun1,GUO Cheng1,2(1.Dept. of Pharmacy,Shanghai Sixth People’s
Hospital,Shanghai Jiaotong University,Shanghai 200233,China;2.School of Pharmacy,Shanghai Jiaotong Uni-
versity,Shanghai 200240,China)
ABSTRACT OBJECTIVE:To study the effects of luteolin on the migration of hepatic stellate cells cell line(HSC-T6 cells).
METHODS:HSC-T6 cells were cultured in vitro. CCK-8 assay was used to measure the effects of 0,10,20,40 μmol/L luteolin
on the proliferation of HSC-T6 cells;Scratch test and Transwell metastasis experiment were applied to observe the effects of 0,
10,20,40 μmol/L luteolin on the migration ability of HSC-T6 cells;phosphorylation level of ERK5 was detected by Western blot.
RESULTS:20,40 μmol/L luteolin could significantly inhibit the proliferation of HSC-T6 cells(P<0.05);10,20,40 μmol/L lute-
olin inhibited scratch repair of HSC-T6 cells significantly and decreased the number of HSC-T6 cells passing through cell membrane
(P<0.05);the expression of p-ERK5 in HSC-T6 cells was inhibited by 10,20,40μmol/L luteolin significantly(P<0.05). CON-
CLUSIONS:Luteolin inhibit the proliferation and migration of HSC-T6 cells in dose-dependent manner,which may be associated
with the inhibition of ERK5 phosphorylation in HSC-T6 cells.
KEYWORDS Luteolin;Hepatic stellate cells;Migration;ERK5
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