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AB-8树脂对蓝靛果花色苷的吸附性能研究



全 文 :收稿日期:2016-03-01 接受日期:2016-05-05
基金项目:国家科技计划(2011FU125X07) ;黑龙江省教育厅项目
(12541600) ;
* 通讯作者 E-mail:zlp77@ 163. com
天然产物研究与开发 Nat Prod Res Dev 2016,28:1289-1295
文章编号:1001-6880(2016)8-1289-07
AB-8 树脂对蓝靛果花色苷的吸附性能研究
李良玉1,2,宋大巍3,刁静静1,贾鹏禹1,张丽萍1,3*
1黑龙江八一农垦大学国家杂粮工程技术研究中心,大庆 163319;
2东北林业大学林学院,哈尔滨 150040;3 黑龙江八一农垦大学食品学院,大庆 163319
摘 要:以 AB-8 树脂分离蓝靛果花色苷的吸附性能为研究内容,具体研究了 AB-8 树脂的吸附等温线、吸附热
力学性质和动态吸附参数。结果表明,在静态吸附实验条件下,AB-8 树脂对蓝靛果花色苷的吸附是放热过程,
吸附能力较强,吸附参数能用 Freundlich方程较好拟合,相关系数大于 0. 98;动态吸附研究表明,AB-8 树脂纯化
蓝靛果花色苷的最佳上样浓度为 280 ± 5 mg /mL、洗脱流速 2. 5 mL /min,通过对乙醇梯度洗脱浓度进行液质分
析,确定了各洗脱液中的花色苷种类,为模拟移动床色谱纯化蓝靛果花色苷奠定了理论基础。
关键词:AB-8 树脂;蓝靛果;花色苷;吸附热力学;吸附等温线
中图分类号:S713 文献标识码:A DOI:10. 16333 / j. 1001-6880. 2016. 8. 021
Adsorption Characteristics of AB-8 Resin for
Anthocyanins from Lonicera edulis Turcz
LI Liang-yu1,2,SONG Da-wei3,DIAO Jing-jing1,JIA Peng-yu1,ZHANG Li-ping1,3*
1 Heilongjiang Bayi Agricultural University,National Coarse Cereals Engineering Research Center,Daqing 163319,China;
2College of Forestry,Northeast Forestry University,Harbin 150040,China;
3 The Food Science of Heilongjiang Bayi Agricultural Universitiy,Daqing 163319,China
Abstract:In this study,the adsorption properties of AB-8 resin for anthocyanins from Lonicera edulis Turcz were investi-
gated. The adsorption isotherm,thermodynamic properties and dynamic parameters of AB-8 resin were analyzed. The re-
sults indicated that under experimental conditions of static adsorption,the adsorption of AB-8 resin for anthocyanins from
L. edulis was an exothermic process,and the adsorption capacity was strong,the adsorption parameters fit Freundlich e-
quation well with correlation coefficient greater than 0. 98. The results of dynamic adsorption showed that the optimal
feed concentration was 280 ± 20 mg /mL,elution speed was 2. 5 mL /min. The eluting liquid of anthocyanin varieties were
analyzed and identified using LC-MS. The results of this study provided a theoretical foundation for the purification an-
thocyanins from L. edulis using simulated moving bed chromatography.
Key words:AB-8 resin;Lonicera edulis Turcz;anthocyanins;adsorption thermodynamics;adsorption isotherm
蓝靛果又称山茄子、羊奶子等,为忍冬科、忍冬
属落叶灌木,主要分布在长白山、大小兴安岭以及内
蒙古、华北、西北和四川等山区[1],具有抗肿瘤、抗
氧化、抗疲劳、调节免疫、保护视力、降血脂、抗炎以
及促进肝损伤修复等多种生物活性[2],经研究发现
其主要功能物质为花色苷类物质。花色苷是花青素
与糖以糖苷键结合形成的一类化合物,具有抗氧化、
清除自由基、降血脂、抗变异及抗肿瘤等多种生理活
性[3]。目前,我国对蓝靛果花色苷纯化工艺研究较
多,多采用制备色谱的纯化方法,制备色谱纯化的花
色苷纯度低、收率低、溶剂消耗大,间歇式生产不能
实现产业化生产。模拟移动床色谱是一种先进的分
离手段,可以实现自动化、连续化的生产,其纯化的
花色苷纯度高、收率高、溶剂消耗小,适宜进行产业
化生产。目前,模拟移动床色谱在我国已经应用 20
年左右,但大多用于糖醇生产上,在天然产物活性成
分的提纯方面很少涉及,在蓝靛果花色苷的纯化方
面未见报道。为实现模拟移动床色谱纯化蓝靛果花
色苷的产业化生产,首先要了解蓝靛果花色苷纯化
的分离基础理论。在此背景下,本文研究 AB-8 树
脂对蓝靛果花色苷的吸附等温线、吸附热力学性质
和动态吸附等吸附性能参数,分析不同洗脱溶剂对
花色苷成分的影响,为模拟移动床色谱纯化蓝靛果
花色苷奠定了理论基础。
1 材料与设备
AB-8 树脂由天津南开大学树脂有限公司提供;
蓝靛果市购;制备色谱系统(10 × 1200 mm 带夹层)
国家杂粮工程技术研究中心制造;AR2140 分析天
平(精确至 0. 0001 g) ,奥豪斯中国;Pharo300 紫外
可见光分光光度计,默克密理博;恒温摇床 HZQ-
QX,哈尔滨东联电子技术开发有限公司;液质联用
仪 HPLC 1100 SERIES,美国 Agilent。
2 实验方法
2. 1 AB-8 树脂的预处理
先用 95%乙醇浸泡 AB-8 树脂 24 h,后用去离
子水溶液冲洗,洗至无醇味备用。
2. 2 AB-8 树脂对蓝靛果花色苷的静态吸附动力学
研究
准确称取处理好的 AB-8 树脂(滤纸吸干表面
水分)10. 000 g,加入提取的已知浓度蓝靛果花色苷
溶液 100. 00 mL,前 1 h 每 20 min 测定 1 次,1 h 后
每 1 h一次测定吸附液中花色苷含量,直至吸附平
衡。
2. 3 AB-8 树脂分离蓝靛果花色苷的静态吸附等温
线
称取处理好的 AB-8 树脂各 10. 000 g 共 12 份
分别置于具塞三角瓶中(平均分为 3 组) ,向每组瓶
中依次加入 40、60、80、10 g /L四种不同浓度蓝靛果
花色苷溶液 100. 00 mL,盖塞后分别将 3 组样品置
于恒温摇床中在 25、30、35 ℃条件下振荡吸附 4 h,
过滤后测定滤液中花色苷的含量,计算吸附量并绘
制静态吸附等温线;并用经验吸附方程 Freundlich
模型对实验数据进行拟和分析。
lnQe = 1 /n lnCe + lnKf
式中 Qe、Ce 分别为平衡吸附量(mg /g resin)与
平衡浓度(mg /mL) ,Kf 为平衡吸附常数,n 为特征
常数。
2. 4 AB-8 树脂分离蓝靛果花色苷的吸附热力学性
质研究
分别根据 Clausius-Clapeyron 方程、Garcia-Del-
gado公式、Gibbs-Helmholz方程计算△H、△G 和△S
并对结果进行分析[4]。
2. 4. 1 AB-8 树脂吸附焓变△H的计算
焓是状态函数,通过计算△H 的大小可以推知
吸附是吸热过程还是放热过程。△H 可根据 Clau-
sius-Clapeyron(克劳修斯-克拉贝龙)方程进行计算:
lnCe =△H/RT + K
Ce 是吸附量为 Qe 时的平衡浓度,T 为热力学
温度(K) ,R 为理想气体常数(8. 314 J /mol·K) ,
△H为等量吸附焓(kJ /mol) ,K为常数。
2. 4. 2 AB-8 树脂吸附自由能△G的计算
△G的计算可按 Garcia-Delgado 等[5]提出的方
程并结合适用于本吸附体系的弗伦德利希(Freun-
dlich)吸附等温方程式所导出的相关参数进行:
△G = -nRT
式中:n 为 Freundlich 方程指数,T 为热力学温
度(K) ,R为理想气体常数(8. 314 J /mol·K)。
2. 4. 3 AB-8 树脂吸附熵变△S的计算
△S按 Gibbs-Helmholtz(吉布斯-亥姆霍兹)方
程计算。
△S =(△H-△G)/T
2. 5 分离条件对蓝靛果花色苷纯度的影响
2. 5. 1 上样浓度对 AB-8 树脂纯化蓝靛果花色苷
效果的影响
用去离子水将装有 AB-8 树脂的制备色谱柱冲
洗干净,饱和进料,流速 2. 0 mL /min,柱温 25 ℃,以
80% 乙醇为解吸剂,上样浓度分别在 117. 34、
146. 28、195. 93、277. 42、373. 73 mg /mL 五个水平进
行试验。合并洗脱液浓缩冷冻干燥,称重并计算经
纯化后花色苷的纯度和收率,研究上样浓度对 AB-8
树脂纯化蓝靛果花色苷效果的影响。
2. 5. 2 洗脱速度对 AB-8 树脂纯化蓝靛果花色苷
效果的影响
用去离子水将装有 AB-8 树脂的制备色谱柱冲
洗干净,饱和进料,上样浓度为 195. 93 mg /mL,柱温
25 ℃,以 80%乙醇为解吸剂,洗脱流速分别为 1. 0、
1. 5、2、2. 5、3. 0 mL /min 五个水平进行试验。合并
洗脱液浓缩冷冻干燥,称重并计算经纯化后花色苷
的纯度和收率,研究洗脱流速对 AB-8 树脂纯化蓝
靛果花色苷效果的影响。
2. 5. 3 不同浓度乙醇洗脱液中蓝靛果花色苷的组
成成分分析
用去离子水将装有 AB-8 树脂的制备色谱柱冲
洗干净,流速 2. 0 mL /min,柱温 25 ℃,饱和吸附后
用去离子水进行冲洗,去除杂质,冲洗流速 2. 0 mL /
0921 天然产物研究与开发 Vol. 28
min,冲洗 2 ~ 3 倍柱体积。然后依次用 40%、60%、
80%、100%乙醇进行梯度洗脱,洗脱流速 2. 0 mL /
min,分别洗脱 2 ~ 3 倍柱体积收集洗脱液进行液质
检测,分析蓝靛果花色苷的组成。
2. 6 检测方法
2. 6. 1 蓝靛果花色苷的测定方法
取两份花色苷溶液,按照 1∶ 15 的比例,分别用
pH 1. 0 的氯化钾缓冲液或 pH 4. 5 的乙酸钠缓冲液
稀释;以蒸馏水为空白,分别测定两组稀释液在 515
nm和 700 nm波长处的吸光度。以矢车菊素-3-葡萄糖
苷(C3G)为标准,花色苷的含量按下式计算[6]。
花色苷含量(mg /mL)= ΔA × Mw × DF ×
103 /ε × 1
式中:ΔA-吸光度的差值,ΔA = (A510nm-
A700nm)pH1. 0-(A510nm-A700nm)pH 4. 5;Mw-
C3G 的分子量 449. 2 g /mol;DF-稀释倍数;ε =
26900 矢车菊素-3-葡萄糖苷的摩尔消光系数;比色
皿光程(1 cm)。
2. 6. 2 液质测定方法
液相色谱条件:色谱柱 Kromasil-C18(250 × 4
mm,5 μm) ;流动相 A:2. 0%甲酸溶液,流动相 B:
含 2%甲酸的 54%(v /v)乙腈溶液;洗脱程序:0 ~ 1
min:10% B,1 ~ 17 min:10% ~ 25% B;流速:1. 0
mL /min,进样量 30 μL,柱温度 30 ℃,检测波长 525
nm。
质谱条件:电喷雾电离源,正离子模式监测,电
喷雾压力 35 psi,干燥气流量为 10 L /min,干燥气温
度 325 ℃,m/z 设置范围 100 ~ 1000[7]。
3 结果与分析
3. 1 AB-8 树脂对花色苷类物质的静态吸附动力学
特性
AB-8 树脂对花色苷类物质的静态吸附动力学
100
90
80
70
60
50
40
30
20
10
00 20% 40% 60 120%180%240%300
时间
Time(min)
图 1 AB-8 树脂吸附蓝靛果花色苷的静态吸附规律
Fig. 1 Static adsorption characteristic of AB-8 for anthocya-
nins from L. edulis
特性,见图 1。
活性物质在树脂上的吸附行为一般可分为 4 个
连续的步骤:溶液中进行外扩散、树脂表面的液膜中
进行液膜扩散、树脂内部孔径中进行颗粒扩散以及
在树脂上进行吸附和解吸。由图 1 可见,树脂在最
初 1 h内的吸附量增长均很快,在吸附进行的前 1 h
内,蓝靛果花色苷在树脂上的吸附量增长较快,前 1
h可视为快速吸附阶段,但其吸附速率明显低于吸
附进行的最初阶段且逐渐减慢,当吸附时间介于 1
~ 3 h 之间时,吸附量变化很小;超过 3 h 后吸附量
基本不再随时间变化,吸附解析体系达到平衡。
3. 2 静态吸附等温线分析
AB-8 树脂分离蓝靛果花色苷的静态吸附等温
线见图 2。
25
20
15
10
5
10% 15% 20% 25% 30% 35% 40
Ce
(mg/L)
Qc
(m
g/
g)
25%℃ 30%℃ 35%℃
图 2 AB-8 树脂对蓝靛果花色苷的吸附等温线
Fig. 2 Adsorption isotherm of AB-8 resin for anthocyanins
from L. edulis
由图 2 可以看出,在相同的平衡浓度下,随着温
度的升高吸附量下降,表明 AB-8 树脂对蓝靛果花
色苷的吸附是一个放热过程。
2.5% 2.7% 2.9% 3.1% 3.3% 3.5% 3.7
lnce
In
Qe
25%℃ 30%℃ 35%℃3.02.8
2.6
2.4
2.2
2.0
图 3 lnQe与 lnCe的线性关系图
Fig. 3 Linear relationship between lnQe and lnCe
由表 1 看到,回归方程相关系数均大于 0. 98,
表明可以应用 Freundlich 方程对相关数据进行拟
和,结果是可靠的。AB-8 树脂对蓝靛果花色苷吸附
中的 Kf 较小,说明其吸附能力较弱,但是可以看出
Kf具有随着温度的升高而下降的趋势,说明升温更
不利于树脂对蓝靛果花色苷的吸附,在不同温度下,
n均大于 1 表明在所研究范围内 AB-8 树脂对蓝靛
果花色苷的吸附能力较强。
1921Vol. 28 李良玉等:AB-8 树脂对蓝靛果花色苷的吸附性能研究
表 1 Freundlich 拟合方程及参数
Table 1 Fitted Freundlich equations and parameters
T /K Fitted equation lnKf n R2
298 lnQe = 0. 9287 lnCe + 0. 0643 0. 0643 1. 077 0. 9809
303 lnQe = 0. 8459 lnCe + 0. 1984 0. 1984 1. 182 0. 9979
308 lnQe = 0. 9729 lnCe-0. 3258 -0. 3258 1. 028 0. 9993
3. 3 AB-8 树脂对蓝靛果花色苷的吸附热力学性质
分析
根据图 3 中不同温度下的吸附等温线做不同吸
附量时的吸附等量线(lnCe-1 /T 关系图) ,结果见图
4,并根据 1. 2. 3. 1 所述公式计算焓变△H、1. 2. 3. 2
所述公式计算自由能△G、1. 2. 3. 3 所述公式计算熵
变△S,结果见表 2 所示。
3. 3. 1 焓变△H
由表 2 数据可以看出,△H >0,表明 AB-8 树脂
对蓝靛果花色苷的吸附过程为吸热反应,从热力学
3.24%3.26%3.28%3.30%3.32%3.34%3.36
1000/T(1/k)
In
ce
3.2
3.0
2.8
2.6
2.4
195.93 146.28 117.34
图 4 lnCe与 1 /T的线性关系图
Fig. 4 Linear relationship between lnCe and 1 /T
表 2 AB-8 树脂对蓝靛果花色苷的吸附热力学参数
Table 2 The thermodynamics parameters of AB-8 resin for anthocyanins from L. edulis
C0(g /L) △H (kJ /mol)
△G (kJ /mol) △S (J /mol·K)
298K 303K 308K 298K 303K 308K
195. 93 -19. 25 -2. 67 -2. 98 -2. 63 -55. 63 -53. 7 -53. 96
146. 28 -11. 12 -2. 67 -2. 98 -2. 63 -28. 36 -26. 86 -27. 56
117. 34 -5. 05 -2. 67 -2. 98 -2. 63 -7. 98 -6. 83 -7. 88
角度反映了提高温度有利于花色苷的吸附,同时吸
附焓随着吸附量的增加逐渐降低,这可能与已吸附
分子偶极矩的存在以及 AB-8 树脂吸附中心的能量
不同有关。从本质上讲,树脂的吸附是一个放热过
程,但由于 AB-8 树脂要吸附花色苷就必须先解吸
很多结构远比自己小的分子,因此导致吸附过程所
放出的热量小于解吸过程所需要的热,从而使整个
过程表现为吸热[8]。从数值上来看,随着浓度的增
加△H逐渐变小,说明低浓度有利于树脂的吸附,而
且吸附焓(1 ~ 3 kJ /mol)远小于氢键的键能范围(10
~ 40 kJ /mol)之内,因此可以判断 AB-8 树脂对蓝靛
果花色苷的吸附不是通过氢键作用进行的,可能是
通过范德华力进行的。
3. 3. 2 自由能△G
由表 2 结果可知各个温度下的吸附自由能变都
为负值,说明吸附过程是自发进行的不可逆过程,而
且随着温度的升高,△G的绝对值越大、吸附过程的
自发趋势也越大。从数值上来看,随着温度的升高
△G的绝对值越大,这与 AB-8 树脂吸附花色苷为吸
热的结论吻合。
3. 3. 3 熵变△S
由表 2 结果可知△S < 0,说明吸附过程固相 /液
相界面上分子运动更为混乱,可能原因是吸附花色
苷的同时又有大量紧密有序排列的水分子被解吸下
来,从而造成体系整体混乱导致熵增[9]。从表中数据
可以看出,浓度对△S的影响显著大于温度对△S的影
响,这体现了树脂吸附位点分布可能具有不均匀性。
3. 4 分离条件蓝靛果花色苷纯度的影响
3. 4. 1 上样浓度对 AB-8 树脂纯化蓝靛果花色苷
效果的影响
上样浓度对 AB-8 树脂纯化蓝靛果花色苷效果
的影响试验结果,见图 5。
由图 5 可看出,上样浓度对 AB-8 树脂纯化蓝靛
果花色苷的效果影响显著,在浓度较低时(117. 34
~ 277. 42 mg /mL)蓝靛果花色苷的纯度与收率相差
不大,当浓度大于 277. 42 mg /mL 后蓝靛果花色苷
的纯度与收率急剧下降。这可能是由于浓度过高蓝
靛果花色苷分子与树脂接触不充分,导致吸附能力
2921 天然产物研究与开发 Vol. 28
23
22
21
20
75
70
65
117.34%146.28%195.93%277.42%373.73
浓度
Feed%concentration(mg/mL)


Pu
rif
ic
at
io
n(
%
)


Yi
el
d(
%
)
收率 Yield
纯度 Purification
图 5 上样浓度对蓝靛果花色苷纯度的影响
Fig. 5 Effect of feed concentration on purification of antho-
cyanins from L. edulis
下降,最终影响 AB-8 树脂纯化蓝靛果花色苷的效
果。综合考虑纯化效率与纯化效果,确定最佳的上
样浓度为 280 ± 5 mg /mL。
3. 4. 2 洗脱速度对 AB-8 树脂纯化蓝靛果花色苷
效果的影响
洗脱流速对 AB-8 树脂纯化蓝靛果花色苷效果
的影响试验结果,见图 6。
由图 6 可看出,洗脱流速对 AB-8 树脂纯化蓝靛
果花色苷的效果影响显著,在洗脱流速较低时(1. 0
~ 2. 5 mL /min)蓝靛果花色苷的纯度与收率相差不
大,当洗脱流速大于 2. 5 mL /min后蓝靛果花色苷的
纯度与收率急剧下降。这可能是由于洗脱流速过快
蓝靛果花色苷分子与树脂接触不充分,未完全吸附
导致吸附效果下降,最终影响 AB-8 树脂纯化蓝靛
24
23
22
21
75
70
65
1.0% 1.5% 2.0% 2.5% 3.0% 3.5
流速
Elution%speed(mL/min)


Pu
rif
ic
at
io
n(
%
)


Yi
el
d(
%
)
纯度 Purification
收率 Yield
图 6 洗脱流速对蓝靛果花色苷纯度的影响
Fig. 6 Effect of elution speed on purification of anthocyanins
from L. edulis
果花色苷的效果。综合考虑纯化效率与纯化效果,
确定最佳的洗脱流速为 2. 5 mL /min。
3. 4. 3 洗脱液浓度对蓝靛果花色苷纯度及组成的
影响
洗脱液浓度对蓝靛果花色苷纯度及组成的影响
结果,见表 3 ~ 6。
由表 3 ~ 6 可以看出,蓝靛果花色苷中花色苷的
主要成分大约有 8 种,其分子量分别为 433. 11、
449. 11、463. 12、595. 17、609. 18、611. 16、625. 16、
773. 2[10-12]。结合文献[7,10-12]确定 8 种花色苷分别
为天竺葵素-3-葡萄糖苷 C21 H20 O10、矢车菊素-3-葡
萄糖苷 C21H20O10、芍药素-3-葡萄糖苷 C22H22O11、矢
车菊素-3-芸香苷 C27H30O15、芍药素-3-芸香糖苷 C28
H33O15、矢车菊素-3,5-二葡萄糖苷 C21H21O11、矢车
表 3 40%乙醇洗脱液的液质检测分析结果
Table 3 Results of HPLC analysis for 40% ethanol eluent
序号
No.
分子式
Molecular formula
[M + H]+ m/z
检测值
Detection value
理论值
Theoretical value
偏差
Error (ppm)
1 C33H40O21 773. 2138 773. 2140 -0. 26
2 C21H21O11 611. 1611 611. 1615 -0. 65
表 4 60%乙醇洗脱液的液质检测分析结果
Table 4 Results of HPLC analysis for 60% ethanol eluent
序号
No.
分子式
Molecular formula
[M + H]+ m/z
检测值
Detection value
理论值
Theoretical value
偏差
Error (ppm)
1 C21H21O11 611. 1611 611. 1615 -0. 65
2 C21H20O10 449. 1078 449. 1084 -1. 34
3 C27H30O15 595. 1669 595. 1663 + 1. 01
4 C21H20O10 433. 1141 433. 1135 + 1. 39
5 C31H28O14 625. 1553 625. 1557 -0. 64
6 C28H33O15 609. 1826 609. 1822 + 0. 66
3921Vol. 28 李良玉等:AB-8 树脂对蓝靛果花色苷的吸附性能研究
表 5 80%乙醇洗脱液的液质检测分析结果
Table 5 Results of HPLC analysis for 80% ethanol eluent
序号
No.
分子式
Molecular formula
[M + H]+ m /z
检测值
Detection value
理论值
Theoretical value
偏差
Error (ppm)
1 C21H21O11 611. 1611 611. 1615 -0. 65
2 C22H22O11 463. 1235 463. 1242 -1. 51
3 C21H20O10 449. 1078 449. 1084 -1. 34
表 6 100%乙醇洗脱液的液质检测分析结果
Table 6 Results of HPLC analysis for 100% ethanol eluent
序号
No.
分子式
Molecular formula
[M + H]+ m /z
检测值
Detection value
理论值
Theoretical value
偏差
Error (ppm)
1 C21H21O11 611. 1611 611. 1615 -0. 65
2 C22H22O11 463. 1235 463. 1242 -1. 51
菊素-3(阿魏酰)-葡萄糖苷 C31 H28 O14、矢车菊素-3-
槐糖-5-葡萄糖苷 C33H41O21。同时可以看出,40%乙
醇浓度洗脱时矢车菊素-3-槐糖-5-葡萄糖苷被洗脱
出来;当乙醇浓度达到 60%后,天竺葵素-3-葡萄糖
苷、矢车菊素-3-葡萄糖苷、矢车菊素-3-芸香苷、芍药
素-3-芸香糖苷、矢车菊素-3(阿魏酰)-葡萄糖苷被洗
脱出来;当乙醇浓度达到 80%后,芍药素-3-葡萄糖
苷才能够被洗脱出来;这可能于各种花色苷的极性
有关,极性强的物质可被强极性的 40% ~ 60%乙醇
洗脱下来,弱极性的物质可被极性相对较弱的 80%
乙醇洗脱下来。在 40%、60%、80%、100%三种洗
脱液中均含有矢车菊素-3,5-二葡萄糖苷,这可能是
由于矢车菊素-3,5-二葡萄糖苷结合的情况比较复
杂,极性范围较广,洗脱不集中。而蓝靛果花色苷的
主要成分矢车菊素-3-葡萄糖苷主要集中在 60% ~
80%乙醇洗脱之间,为模拟移动床色谱纯化蓝靛果
花色苷奠定了理论基础。
4 讨论与结论
通过对 AB-8 树脂的吸附等温线、吸附热力学
性质和动态吸附参数的研究,结果表明:静态吸附研
究表明,AB-8 树脂对蓝靛果花色苷的吸附是吸热过
程,吸附过程中△H > 0,△G < 0,△S > 0,吸附能力
较弱,吸附参数能用 Freundlich 方程较好拟合,相关
系数均大于 0. 95;动态吸附研究表明,AB-8 树脂纯
化蓝靛果花色苷的最佳上样浓度为 277. 42 mg /mL、
洗脱流速 2. 5 mL /min,经过液质分析 40%乙醇洗脱
的主要物质为矢车菊素-3,5-二葡萄糖苷、矢车菊素-
3-槐糖-5-葡萄糖苷;60%乙醇洗脱的主要物质为天
竺葵素-3-葡萄糖苷、矢车菊素-3-葡萄糖苷、矢车菊
素-3-芸香苷、芍药素-3-芸香糖苷、矢车菊素-3,5-二
葡萄糖苷、矢车菊素-3(阿魏酰)-葡萄糖苷;80%乙
醇洗脱的主要物质为矢车菊素-3-葡萄糖苷、矢车菊
素-3,5-二葡萄糖苷、芍药素-3-葡萄糖苷;100%乙醇
洗脱的主要物质为矢车菊素-3,5-二葡萄糖苷、芍药
素-3-葡萄糖苷,通过研究发现蓝靛果花色苷的主要
成分矢车菊素-3-葡萄糖苷主要集中在 60% ~ 80%
乙醇洗脱之间,为模拟移动床色谱纯化蓝靛果花色
苷奠定了理论基础。
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