全 文 ：新疆紫草乙酸乙酯提取物对血液凝集参数的影响＊
努尔艾买提江·阿布来提1＊＊ , 买尔旦·马合木提2＊＊＊ , 古丽仙·胡加1 , 吾买尔江·奥布力3
(新疆医科大学1药学院 , 2附属肿瘤医院 , 3临床药学 06-1班 , 新疆　乌鲁木齐　830011)
摘要:目的　研究新疆紫草对大鼠血液凝集参数的影响。方法　新疆紫草乙酸乙酯提取物分别以高 、中 、低
剂量给大鼠连续灌胃给药 7 、14 、21 d 后 、剥离腹主动脉 , 测定大鼠活化部分凝血活酶时间(APT T)、凝血酶原时间
(PT)、凝血酶时间(TT)、纤维蛋白原(F IB)含量 ,观察大鼠各项血液凝集参数的变化情况。结果　新疆紫草乙酸
乙酯提取物能缩短 T T 、提高 F IB 含量 ,对 T T 值和 F IB 值的影响呈剂量相关性 , 对 APTT 和 PT 的影响不显著。
结论　新疆紫草乙酸乙酯提取物具有较好的促凝血作用 , 其机理可能与增加纤维蛋白原含量 , 促进纤维蛋白原转
变为纤维蛋白的过程有关。
关键词:新疆紫草;血液凝集参数;乙酸乙酯提取物
中图分类号:R96　　文献标识码:A　　文章编号:1009-5551(2010)05-0507-03
Effects of arnebia euchroma ethylacetate extract on blood coagulatione parameters
Nueraimaitijiang·Abulaiti , Maierdan·Mahemuti , Gulishan·Hujia , et al
(Aff i liated Tumor Hospi tal , X inj iang Medical Universi ty , Urumqi 830011 , China)
Abstract:Objective　To study the ef fect of arnebia euchroma(A E)ethyl acetate ex t ract on ra t blood coag-
ulatione parameters.Methods　T he ext ract w ere given to rat w ith high , middle and low dosage by intragas-
t ric administ rat ion consecutively fo r 7 , 14 and 21 day s , respectiv ely .The blood samples w ere co llected
f rom abdominal artery , and the paramete rs:activ ated partial thromboplastin t ime(APT T), thromboplas-
tin time (PT), thrombin time (TT)and contents of fibrinogen (FIB)were tested.Results　Compared
wi th no rmal contro l g roup the ex t ract significantly sho rtened the TT , increased the content of FIB.T here
were no significant ef fect on APTT and PT .Conclusion　The ethy l acetate ex t ract of AE show ed better
hemostatic effects , the mechanism we re considered that i t w ere elated w ith the rising of FIB content w hich
impel the process of fibrinogen transfe r to f ibrin.
Key words:arnebia euchroma(Roy le)Johnst ;hemostatic parameter;ethy l acetate ex t ract
　　新疆紫草(Arnebia euchroma(Royle)Johns-
to n., AE)为常用中药 ,广泛用于治疗疮疡 、湿疹 、水
火烫伤 、烧伤 、创伤和放射性皮肤损伤等各种皮肤疾
病[ 1-2] 。杨荣等[ 3]研究了不同产地 6种紫草的水提
液和醇提液对小鼠断尾出血的止血作用 ,发现不同
品种的止血作用程度有所不同 。紫草在新疆分布广
泛 ,品质最佳。为进一步深入研究新疆紫草的止血
作用和有效部位 ,我们初步考察了新疆紫草的正己
烷 、乙酸乙酯 、95%乙醇和水提取物对小鼠出血时间
(BT)的影响 ,发现这些提取物连续给药 7 d时 ,均可
缩短断尾小鼠 BT ,其中乙酸乙酯提取物的作用优于
其它提取物。乙酸乙酯提取物连续给药 14 d时 、可
明显缩短小鼠凝血时间(CT)、出血时间(BT)、升高血
小鼠小板数量 、缩短凝血酶时间(TT)、提高大鼠纤维
蛋白原含量(FIB)。为阐明新疆紫草乙酸乙酯提取物
对血液出凝血系统的影响 ,本课题研究了乙酸乙酯提
取物在不同给药时间时对大鼠凝血酶原时间(PT)、
活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)和
纤维蛋白原(FIB)的含量等血液凝集参数的影响 ,以
探讨其可能的作用机理 ,为进一步开发利用新疆紫草
507新疆医科大学学报　JOURNAL OF XINJIANG MEDICAL UNIVERSITY　2010 May., 33(5)
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基金项目:新疆维吾尔自治区地方病分子生物学重点实验室开放课题(XJDX0208-2006-01)
作者简介:努尔艾买提江·阿布来提(1979-),男(维吾尔族),硕士研究生 ,研究方向:中药民族药。
通讯作者:买尔旦·马合木提(1960-),男(维吾尔族),教授 ,硕士生导师 ,研究方向:中药民族药。 E-m ail:m aierdan 60@sina.com。
奠定基础研究资料。
1　实验材料与方法
1.1　实验药材　新疆紫草(新疆参茸药业有限责任
公司 ,批号 07112701 ,由新疆医科大学药学院生药
教研室进行生药品种鉴定),新疆紫草乙酸乙酯提取
物为本实验室自制 ,使用时加 0.5%羧甲基纤维素
钠配制成所需浓度的混悬液备用 ,药物量以按原药
材计算。
1.2　仪器与试剂　一次性真空采血管(含 0.3 ml ,
0.109 mol/ L 的枸椽酸钠抗凝剂);SYSMEX CA-
7000全自动血凝仪(日本);SPINCHROMTMTM-
DXL 离心机中(法国);BS224s 电子分析天平(Sar-
to rins公司);FINN PIPETTE 微量移液器(上海雷
勃分析仪器公司)。云南白药(云南白药集团股份
有限公司 , 批号 20081208);戊巴比妥钠(化学纯 ,
北京通县育才精细化工厂 ,批号 950427);正己烷 、
乙酸乙酯 、95%乙醇等均为分析纯 、水为纯净水 。
APTT 、 TT 、PT 、FIB 试剂盒 Dianstatica Stag o;内
灌胃管 , 注射器 , 手术刀。
1.3　动物分组与给药　Wistar 大鼠 ,雌性 , 120只 ,
体重(200±20)g ,由新疆医科大学实验动物中心提
供。(许可证号 SYXK-新 2003-0001)。分 3批 ,每
批共 40 只 ,每批动物再随机分成 4 组 ,每组 10只 ,
分别为阴性空白对照组(0.5%CMC-Na)、高剂量
(14 g/kg)、中剂量(7 g/kg)和低剂量(3.5 g/kg)
给药组 ,所有动物自由摄食进水 ,统一饲料喂养 ,室
温控制在 18 ～ 25℃。每天灌胃给药一次 ,分别连续
给药 7 、14 、21 d 。
1.4　方法
1.4.1　大鼠血样的采集　各组大鼠分别灌胃给药 ,
每组给药时间相隔 40 min ,给药后 1 h依次腹腔注
射 3%戊巴比妥钠生理盐水溶液 0.6 m l 麻醉 , 固
定 ,迅速剥离腹主动脉 ,一次性注射器采血 ,立即注
入真空采血管中 ,轻轻颠倒摇匀后 ,置离心机中 ,
3 000 r/min离心 10 min ,取血清 400 μl ,用凝固法
按试剂盒说明依次测定 PT 、APT T 、TT 、 FIB 。
1.5　统计学处理　应用 SPSS12.0 软件对数据进
行统计分析 ,采用 t检验 ,检验水准α=0.05。
2　结果
2.1　不同时间给药后对 PT 的影响　与阴性空白
组相比 ,分别给药 7 、14 、 21 d 时 ,各剂量给药组的
PT 值变化无统计学差异(P >0.05),说明对大鼠
PT 基本无影响 ,结果见表 1 。
2.2　不同时间给药后对 APT T 的影响　与阴性空
白组相比 ,分别给药 7 、14 、 21 d 时 ,各剂量给药组
的 APTT 值变化无统计学差异(P >0.05),说明对
大鼠 APTT 基本无影响 ,结果见表 2。
表 1　新疆紫草对大鼠血液凝集参数 PT的影响
( x±s , n=10)
组别 第 7天 PT(s) 第 14天 PT(s) 第 21天 PT(s)
阴性空白组 11.03±0.80 13.16±1.99 12.38±1.67
紫草高剂量组 10.77±1.03 12.68±1.57 11.91±1.32
紫草中剂量组 10.64±0.76 12.64±1.92 11.88±1.26
紫草低剂量组 10.48±0.48 12.98±1.62 11.82±1.13
表 2　新疆紫草对大鼠血液凝集参数 APTT的影响
( x±s , n=10)
组别 第 7天 APTT(s) 第14天 APTT(s) 第 21天 APTT(s)
阴性空白组 26.25±2.14 26.37±2.57 26.58±3.29
紫草高剂量组 25.92±3.06 25.62±3.15 26.30±1.62
紫草中剂量组 25.98±2.84 25.80±2.15 26.01±1.79
紫草低剂量组 25.99±1.52 26.00±2.35 26.19±1.82
2.3　不同时间给药后对 TT 的影响　与空白组相
比 ,给药第 7 、14 、21 d 时 ,各剂量组 T T 值明显缩短
(P <0.05或 P <0.01)。其中第 7天时 ,高剂量组
变化显著 ,第 21天时 ,低剂量组变化显著。各组可能
存在剂量相关性 。第 7 、14、 21天的 TT 值之间可能
无明显变化。提示 ,提取物对 TT 值的影响可能存在
剂量相关性 ,而可能无时间相关性 ,结果见表 3。
表 3　新疆紫草对大鼠血液凝集参数 TT的影响
( x±s , n=10)
组别 第 7天 TT(s) 第 14天 TT(s) 第 21 天 TT(s)
阴性空白组 44.81±5.41 43.10±3.67 40.95±3.47
紫草高剂量组 41.46±1.33＊＊ 39.74±1.75＊■ 39.02±1.37＊■■
紫草中剂量组 39.25±2.86＊ 38.20±1.41＊ 38.37±1.28＊
紫草低剂量组 37.97±2.32＊ 37.91±1.10＊ 37.24±1.09＊＊
　　注:与空白对照组比较 , ＊P <0.05 , ＊＊P <0.01;与紫草高剂量组比 ,
■P <0.05 , ■■P <0.01
2.4　不同时间给药后对 FIB的影响　与空白组相
比 ,给药第 7 、14 、 21 d 时 ,各剂量组 FIB 值明显增
高(P <0.05或 P <0.01)。其中第 7 天时 ,各剂
量组变化最显著(P <0.01),各组可能存在剂量相
关性。7 、14 、21 d 的 FIB值之间可能无明显变化。
提示 ,提取物对 FIB 值的影响可能存在剂量相关
性 ,而可能无时间相关性 ,结果见表 4。
表 4　新疆紫草对大鼠血液凝集参数 FIB的影响
( x±s , n=10)
组别 第 7天 FIB(g/ L) 第 14天 FIB(g/L) 第 21天 FIB(g/L)
阴性空白组 1.043±0.48 0.979±0.31 1.086±0.32
紫草高剂量组 1.245±0.27＊＊ 1.206±0.11＊ 1.217±0.13＊
紫草中剂量组 1.310±0.17＊＊ 1.302±0.09＊ 1.248±0.14＊
紫草低剂量组 1.380±0.15＊＊ 1.443±0.06＊ 1.302±0.13＊■
　　注:与阴性空白组比较 , ＊P <0.05 , ＊＊P <0.01;与紫草低剂量组比 ,
■P <0.05
(下转 511 页)
508 新疆医科大学学报　JOURNAL OF XINJIANG MEDICAL UNIVERSITY　2010 May., 33(5)
化试剂 ,因此大蒜指纹图谱的共有峰为 6个 ,其中包
括作为参照物的蒜氨酸色谱峰(S 峰)。指纹图谱相
似度见表 2。
3.2.2　指纹图谱的技术参数　共有峰的峰号(相对
保留时间):1(0.235), 2(0.266), 3(0.511),
4(0.565),5(0.608),6(0.757), 7S(1.000)。
表 2　10个不同产地大蒜指纹图谱相似度
S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8 S9 S10 对照指纹图谱
S1 1.000 0.959 0.944 0.999 0.965 0.999 0.980 0.992 0.975 0.976 0.997
S2 0.959 1.000 0.998 0.949 0.959 0.958 0.978 0.919 0.992 0.990 0.978
S3 0.944 0.998 1.000 0.934 0.934 0.943 0.968 0.998 0.986 0.983 0.966
S4 0.999 0.949 0.934 1.000 0.975 0.998 0.970 0.994 0.966 0.967 0.993
S5 0.965 0.959 0.934 0.975 1.000 0.964 0.902 0.984 0.986 0.990 0.943
S6 0.999 0.958 0.943 0.998 0.964 1.000 0.983 0.993 0.976 0.978 0.997
S7 0.980 0.978 0.968 0.970 0.902 0.983 1.000 0.961 0.993 0.997 0.990
S8 0.992 0.919 0.998 0.994 0.984 0.993 0.961 1.000 0.946 0.950 0.981
S9 0.975 0.992 0.986 0.966 0.986 0.976 0.993 0.946 1.000 0.998 0.989
S10 0.976 0.990 0.983 0.967 0.990 0.978 0.997 0.950 0.998 1.000 0.990
对照指纹图谱 0.997 0.978 0.966 0.993 0.943 0.997 0.990 0.981 0.989 0.990 1.000
图 1　大蒜样品指纹图谱
4　结论
4.1　参照美国药典 ,采用高效液相衍生化法 ,以邻
苯二甲醛(OPA)为衍生化试剂。该法优点是衍生
反应迅速 ,衍生化后检测波长可以避开末端吸收波
长 ,同时可提高蒜氨酸及其同系物的检测限。
4.2　本在样品前处理中 ,大蒜抑制酶活方法上采用
微波杀酶法 ,此法简单经济。
4.3　由于蒜氨酸为大蒜的有效成分 ,其色谱峰在图
谱中所占比例较大 ,且较稳定 ,因此选择蒜氨酸峰为
参照峰 。
4.4　本实验采用高效液相衍生化法 ,建立了大蒜的
指纹图谱分析方法 ,结果表明:本方法稳定 ,可靠 ,重
现性好 ,可用于大蒜指纹图谱的建立 ,并可为其质量
的全面控制提供参考。
参考文献:
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[ 5] 　USP28-NF23(2005),美国药典[ S] .
[ 收稿日期:2010-01-11]
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3　讨论
凝血过程是一系列的酶促反应 ,其中包括内源
性 、外源性途径和共同通路 ,最后使纤维蛋白原变为
纤维蛋白 ,血液由溶胶状态转为凝胶状态。PT 值
反映外源性凝血因子是否异常 ,A PTT 值反映内源
性凝血因子是否异常 , T T 值则主要反映凝血共同
途径纤维蛋白原转变为纤维蛋白的过程中 ,是否存
在异常的抗凝现象。血小板在血液凝固过程中发挥
着重要作用 ,它的黏附 、聚集 、释放起到止血作用 ,同
时它还为各种凝血酶原的活化提供必需的膜磷脂 。
本研究结果显示 ,乙酸乙酯提取物分别连续给药 7 、
14和 21天时 ,能明显缩短 TT ,增加纤维蛋白原含
量;其作用强度与剂量可能存在相关 ,而对 PT 和
APT T 基本无影响。提示紫草乙酸乙酯提取物的
止血作用可能是通过增加纤维蛋白原含量 ,促进纤
维蛋白原转变为纤维蛋白的过程 ,而对外源和内源
性凝血因子无影响 。
参考文献:
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性皮肤损伤的疗效观察[ J] .肿瘤防治杂志, 2002 , 9(4):438-
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[ 收稿日期:2010-03-11]
511新疆医科大学学报　JOURNAL OF XINJIANG MEDICAL UNIVERSITY　2010 May., 33(5)