全 文 ：第 14 卷 第 6 期
1 9 9 3 年 1 2月
吉首大学学报 ( 自然科学 )
J
o u r na l o f Ji
s ho u U i nv r es i ty ( N a tu r a l 反i e n e e )
Vo l
.
14
1 2
-
N o
.
6
1 9 93
Stu di s o e n th eR el a ti o n b e t w e e n t h eC ha ng es
o f E nd o g eo u s i PAa nd th e Gr o w t ho f C ell o f
Ar n ei ba eu c hr o m a d u r i ng th eC u l tu r e
X 艺 e Dy eu
(块p a r tm e n to f B io l o g y , Jis h o u U n iv e r s s i t y , H u n a n , 4 1 6 0 0 0 , C h i n a )
Y o H ec h
u n L i G u OI 云n g
( I n s t i t u t e o f 价 t a n y , cA a d e m i a S in ie a , eB j in g , 1 0 0 0 4 4 , Ch i n a )
A b s t r a c t : T h e
A r n e b i a e u e h r o m a
.
e o n t e n t s o f e n d o g e n o u s iP A VV e r e s t u d i e d d u r i n g t h e e a l l u s e u l t u r e o f
T h e r e s u l t s d e m o s t r a t e d t h a t t h e r e l a t i o n b e t w e e n t h e e h a n g e s o f e n
-
d o g e n o u s i P A a n d t h e 亡e l l d i v i s i o n w a s v e r y e l o s e ·
K e y w o r d s
: E n d o g e n o u s iP A
,
C e l l C u l t u r e
,
A r n e b ia e u e h r o m a
1 M a t e r i a l a n d M e t h o d
U s in g t h e h ig h一 y ie l d s h ik o n i n d e r i v i a t i v e s A I e e ll l in e ( r e d ) a n d t h e w h i t e
A s e e ll l in e a s m a t e r ia ls
, t h e b o t h e e ll l in e s w e r e e u l t u r e d o n t h e d if f e r e n t m e d i
-
a , A G 一 7 ( g r o w t h m e d i u m ) 〔1〕 , K ( b a s i e m e d i u m o f A G 一 7 ) , F ( K + 1 . o m g / 1
K T )
,
M ( K + 0
.
l m g / 1 G A 3 )
,
G ( K + 0
.
Zm g / 1 I A A )
,
L ( K + o
·
Zm g / 2
,
4一 D ) .
T h e w e ig h t o f i n o e u l a t io n w a s o
·
3 9 / p f
·
f w
, a n d t h e e u l t u r e e y e le o f e a l l u s w a s
2 5 d a y s a t 2 5℃ u n d e r d a r k n e s s . T h e e u l t u r e s w e r e e o l le e t e d a t t h e o , Zn d , 4 t h ,
s th
,
1 0 t h
,
1 5 th
,
2 0 t h
,
2 5 th d a y r e s p e e t iv e ly
, t h e n f r o z e n in li q u id n i t r ig e n a n d
s t o r e d a t 一 20℃ u n t i l r e q u i r e d .
D e t e r m i n a t i o n o f C e l l G r o w t h C u r v e
.
T h e e u l t u r e d e e ll s w e r e e o l le e t e d a t
t h e o
,
s t h
,
l o t h
,
15 t h
,
Zo t h
,
2 5 t h d a y r e s p e e t iv e l y
.
T h e s e e o l le e t io n s w e r e
w e i g h e d a n d b a k e d a t 6 0℃ , m o r e o v e r , t h e w e ig h t s o f t h e s e e o l l e e t i o n s w e r e d e -
t e r m in e d
.
T h e in e r e a s e s o f e a l lu s w e r e e a le u la t e d w i t h t h e f o l lo w in g f o r m u la e :
△W ( g / p f . fw ) = W Z一 W :
△w ` ( g / p f . dw ) = W Z ’ 一W l `
W
Z : t h e f r e s h w e i g h t s o f e a l lu s a t t h e s t h
,
l o t h
,
1 5 t h
,
Zo t h
,
2 5 th d a y r e
-
s p e e t i v e ly
.
w
, : t h e w e ig h t o f in o e u la t io n a t t h e b e g i n in g
.
W
Z’ : t h e d r y w e ig h t s
.
2 9
·
o f ea l l u s a t t h es t h
,
i o t h
,
15 t h
,
z o t h
,
z s t h d a y r e s p e e t iv e l y
.
W
, ` : t h e d r y w e ig h t
o f i n o e u l a t i o n a t t h e b e g in i n g
.
E x t r a e t io n o f E n d o g e n o u s iP A
. 〔2〕
eD
t e r m in a t io n o f E n d o g e n o u s i P A : E L I S A 〔2〕
2 R e s u l t S a n d D I S C u S S i o n
T h e G r o w t h C u r ve o f C e l l
.
T h e g r o w t h e 6 r v e s o f A
l e e ll l in e e u lt u r e d o n
t h e A G一 7 a n d K w e r e d if f e r e n t . T h e l a g p h r a s e o f A I e e l ls o n A G 一 7 w a s le s s
a b o u t 5 d a y s t h a n t h a t o f A l e e l ls o n K m e d i u m
.
T h e g r o w t h o f A : e e l ls f r o m
t h e la g p h r a s e t o 10 9 p h r a s e w a s l a t e r a b o u t 5 d a y s o n t h e K m e d iu m t h a n o n
t h e A G 一 7 m e d i u m . A n d , t h e s t a t io n a r y P h r a s e o f A l e e l ls o n t h e K m e d iu m
w a s d e l a y e d a b o u t 5 d a y s t o o
.
T h i s r e s u l t e a m e f r o m t h e d if f e r e n e e o f A G 一 7
a n d K
.
T h e K m e d i u m d id n o t e o n t a in a n y e x o g e n o u s g r o w t h r e g u l a t o r s u b
-
s t a n c e s
·
B u t t h e A G 一 7 e o n t a in e d e x o g e n o u s I A A ( 0 . Zm g / 1 ) a n d K T ( 1 . om g /
1 )
.
T h e e x o g e n o u s I A A a n d K T e o u ld p r o om
t e e e l l d iv i s i o n a n d g r o w t h
.
E n d o g e n o u s i P A C o n t e n t s
.
C o m p a r e d A 一 e e ll li n e w i t h A S e e l l li n e , t h e d y -
n a m i e s o f e n d o g e n o u s iP A o f t h e b o t h e e l l li n e s w e r e s im i la r n o t o n l y o n f h e
A G 一 7 b u t a ls o o n th e K m e d i u m . B u t t h e d if f e r e n e e o f t h e e h a n g e s o f e n d o g e -
n o u s i P A o n v a r io u s m e d ia w
a s o b v io u s
.
T h e s e e o n d p e a k v a l u e o f e n d o g e n o u s
iP A a P P e a r e d a t t h e s t h d a y o n t h e A G 一 7 , b u t a t t h e 1 0 th d a y o n t h e K m e d i -
u m ( i n e l u d in g b o t h A l a n d A S e e l l l in e s )
.
B u t t h e p e a k v a l u e s o f e n d o g e n o u s
iP A e o n t e n t s o f b o t h A l a n d A S e e ll l in e s h a d li t t l e d if f e r e n e e n o t o n l y o n t h e
A G 一 7 b u t a l s o o n th e K m e d iu m . T h e r e w a s o b v io u s d if f e r e n e e a b o u t e n d o g e -
n o u s iP A e o n t e n t s o f A , e e l l l in e a m o n g t h e F
,
M
,
L
,
G m e d i a
.
T h e e h a n g e s o f
e n d o g e n o u s i P A e o n t e n t s o f A l e e ll l in e o n t h e L a n d G m e d ia h a d n o d if f e r e n e e
d u r in g t h e e u lt u r e
,
b u t t h e Zn d p e a k v a l u e s w e r e le s s o n t h e b o t h m e d ia t h a n
o n t h e A G 一 7 ; K , F , M , m e d ia · A n d , t h e Zn d 即 a k v a l u e s o f A , e e lls o n t h e
A G 一 7 , K , F , M w e r e li t t l e d i f f e r e n e e . T h e r e w a s l i t t le e h a n g e o f th e e n d o g e -
n o u s iP A e o n t e n t s o n t h e M m e d iu m a t t h e s t h a n d th e l o t h d a y
.
T h e f i r s t
p e a k v a l u e s o n a l l a b o v e m e d i a we
r e a t t h e Zn d d a y a n d w e r e v a r i o u s
· 吞f t e r th e
l o t h d a y
, o n t h e a l l a b o v e m id ia
, t h e e h a n g e s o f e n d o g e n o u s i P A e o n t e n t s o f
A 1 e e l lo w e r e s im il a r a n d b e g a n t o d e e r e a s e r e p id l y
, a n d r e a e h e d t h e lo w e s t in
t h e s t a t io n a r y p h r a s e w h e n t h e e e l l g r o w t h b e g a n t o e e a s e
.
I t w a s e o n e l u d e d t h a t t h e Zn d p e a k v a l u e o f e n d o g e n o u s iP A e o n t e n t s d u r
-
i n g t h e e e ll e u l t u r e e lo s e ly r e la t e d t o e e ll d i v i s io n a n d g r o w t h
.
T h e e f f e e t io n o f
v a r io u s m e d ia o n e n d o g e n o u s iP A f o r m a t io n w a s g r e a t
.
T h e e x o g e n o u s IA A
a n d K T e o u l d p r o m o t e e e l l d iv i s io n a n d g r o w t h
, a n d s h o r t e n t h e l a g p h r a s e
.
。
3 0
.
R ef er e n es e
1 Y eH e一 e hu n, e t a l , 1 9 9 2 , S t u d ie s o n t h e P r o d u e t io n o f S h ik o n i n D e r i v a t i v e s
b y U s i n g L a r g e S e a le C e l l C u l t u r e o f A r n e b ia e u e h r o m a
.
I n : B o t a n i e a l R e
-
s e a r e h
,
N o
.
6
,
S e ie n e e P r e s s
,
P 1 6 3一 1 73 .
2 Z h a n g J
u n , e t a l
,
T h e S t r u e t io n o f D e t e r m in a t i o n o f P la n t H o r m o n e b y
E L IS A ( C h i n e s e
,
U n P u b l i s h e d )
,
1 9 9 0
,
B e ii n g A g r i e u l t u r e U n i v e r s i t y
.
新疆紫草 ( A r n e b ia e u C h r o m a )细胞培养
过程中内源异戊烯腺苔 ( iP A )
与细胞生长的相关性研究
谢德玉 叶和春 李国凤
(湖南吉首大 学生物系 , 41 60 0 ) (中国科院北京枝物研究所 , 10 04 4)
〔摘要〕通过 E LI S A 法测定内源 iP A ,在新廷紫草细胞大圣培养过程中 , 内源 iP A 的动态变化与细胞的
生长具有密切的相关性 。 在不 同的培养基中 , 培养过 程中细胞 的内源 iP A 含全 变化是明显 不 同的 。 基本培
养基 ( 不含 任何外源激紊 )中的激素自养型细胞其内源 iP A 的第二峰值在细胞生长的第 10 天 出现 ;生长培
养基中 (基本培养基中含外源 IA A 和 K T )的细胞其内源 iP A 的 第二峰值在 细胞生长的 第 5 天 出现 , 比前
者约提前 5 天时间 . 与之相对应 ,基本培养基中细胞生长延迟期比生长培养基中细胞生 长延迟期长大 约 5
天时间 , 不论基本培养基还是生长培养墓中 ,培养细胞的内源 iP A 变化的 第二峰值与细胞快速生长密切相
关 . 当细胞生长处于停止期时 , 细胞内源 iP A 含蚤均很低 。
关键词 : 内源 论 A 细胞培养 断睡紫革
3 l