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超声波协同提取新疆紫草化学成分研究



全 文 :250 • 实验研究 • October 2011, Vol.9, No.28 Guide of China Medicine
唐映雪[9]在研究中发现湿热体质是现代2型糖尿病的重要体质背景
和内在发病基础的新观点。由此确立了2型糖尿病湿热蕴结,变生痰
浊、瘀血,化毒伤阴的病机假说,进而对祛痰活血解毒治法和方药进
行了深入探讨。并且该说法并不是空穴来风的,她和他的研究组通过
动物实验观察了祛痰活血解毒方对2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗作用的
影响。实验结果表明:祛痰活血解毒方能明显提高胰岛素敏感指数,
改善胰岛素抵抗;改善血液高粘、高凝、高聚状态;调节脂质代谢;
对2型糖尿病胰岛素抵抗在受体和受体后环节有显著的治疗作用。证
明该方对2型糖尿病有多靶点、多环节的综合治疗作用,是治疗2型糖
尿病的有效方药。深化了中医对2型糖尿病病机的认识,为临床治疗2
型糖尿病提供了新思路,创新和丰富了2型糖尿病的病机学说和治疗
学说。易伟[10]的研究则更加独辟蹊径,不但提出了中医治疗,而且还
提出了针刺治疗,在当时令人耳目一新,他认为针灸作为一种自然疗
法,因其简、便、验、廉等优势在几千年的中医传统诊疗中起着十分
重要的作用,且众多的研究也证实针灸具有良好的调节内分泌代谢的
作用,在治疗诸多现代疾病中已逐渐显示出优势。虽然目前针刺治疗
胰岛素抵抗等研究工作开展得较少,但针刺对糖尿病、肥胖、脑梗塞
等相关疾病的疗效早已得到了国内外同行的公认。因此选择从胰岛素
抵抗的病理生理学机制入手,着重探讨针刺对胰岛素抵抗的干预作
用,为临床针灸治疗胰岛素抵抗及其相关疾病奠定坚实的理论基础。
针刺对异常HTC 功能及其有关神经递质具有良性调节作用,这种作用
是参与纠正IR 调整异常内分泌代谢的一个重要环节[11]。胡骋[12]、刘晓
峰[13]以肺俞、胰俞、脾俞、胃俞、肾俞为主穴,随证加减,发现能有
效的降低2型糖尿病患者的空腹血糖。
这些研究都充分表明,中药针灸治疗,能有效的降低患者血糖,
减少胰岛素抵抗,缩小脑缺血梗死灶的范围,为患者术后恢复奠定基
础,获得良好的临床及社会效应。因此本文决定在常规西医治疗的基
础上,加入中药针灸治疗。
参考文献
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超声波协同提取新疆紫草化学成分研究
崔晓秋
(济宁医学院药学院,山东 日照 276826)
【摘要】目的  以新疆紫草为原料,超声波协同提取紫草化学成分。方法  采用正交试验结合单因素实验,考察超声温度、时间、功率及液
固比 ( 氯仿 / 紫草,mL/g) 对提取效果的影响。结果  新疆紫草化学成分提取最佳工艺条件为液固比 12mL/g 氯仿 / 紫草,超声功率 450W,
50℃水浴中超声处理 25min。结论  本项研究所得紫草最佳提取工艺方法简单,稳定,可行,且容易掌握,可为紫草化学成分提取提供一
定参考。
【关键词】超声波提取;新疆紫草;正交试验法
中图分类号:R914.1 文献标识码:B 文章编号:1671-8194(2011)28-0250-02
紫草为常用中药,具有凉血活血、解毒透疹之功,用于血热毒
盛、斑疹紫黑、麻疹不透、水火烫伤等[1]。《中华人民共和国药典》[2]
收载的紫草为紫草科植物新疆紫草Arnebia euchroma (Royle) Johnst或内
蒙紫草Arnebia guttata Bunge的干燥根,其化学成分主要是紫草素等萘醌
类色素[3]。目前对紫草化学成分研究主要采用乙醇回流提取法,超声波
协同氯仿提取新疆紫草化学成分少有报道。本文考察在超声波强化提取
中各因素对提取效果的影响,并优化了提取工艺参数。现报道如下。
1 材料与仪器
1.1 实验材料及试剂
 新疆紫草干燥根购买于市零售药店,经鉴定为新疆软紫草Arnebia 
euchroma (Royle) Johnst.。左旋紫草素对照品由中国药品生物制品检定
所提供。所用试剂均为分析纯。
DOI:10.15912/j.cnki.gocm.2011.28.039
• 实验研究 • 2512011 年 10 月第 9 卷 第 28 期 中 国 医 药 指 南
1.2 仪  器
TB-114电子天平(北京赛多利斯仪器系统有限公司);KQ-500DB
型数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司);RE-52AA型旋转
蒸发仪(上海亚荣生化仪器);SHB-Ⅲ型循环水式多用真空泵(郑州
长城科工贸有限公司);TU-1901双光束紫外可见分光光度计(北京
普析通用仪器有限公司)。
2 正交试验方法与结果
2.1 标准曲线的制备
精密称取对照品0.0060g,置于100mL容量瓶中,氯仿溶解,定容,即
得浓度为0.06mg/mL的对照品溶液。精密吸取左旋紫草素对照品溶液1、
2、3、4、5mL,分别置于10mL的容量瓶中,用氯仿稀释至刻度,摇匀。
以试剂空白作参比,522nm测定吸光度,以吸光度与左旋紫草素浓度回归, 
得回归方程A=-0.0087+ 25.70C,r = 0.9992,线性范围6~30mg/L。
2.2 样品测定方法
精密称取新疆紫草粉末100mg于具塞锥形瓶中,加入适量氯仿,
浸泡30min,按正交表设计实验,因素水平见表1。提取液冷却,过
滤,补足损失溶剂。精密吸取续滤液2mL于10mL容量瓶中,氯仿定
容,摇匀,即得供试品溶液。按标准曲线项下方法进行测定,根据回
归方程计算新疆紫草样品中总萘醌的含量。
2.3 正交试验结果与分析
采用正交试验方法,按照“2.1”项及“2.2”项下测定方法,对
新疆紫草中总萘醌含量进行研究。利用L9(34)正交试验设计表进行
实验,结果见表2。
通过R值比较可知,影响紫草素提取率大小的因素为D>B>A>
C,即功率>温度>液固比>时间。其最佳提取条件为A2B3C2D2,即
液固比10mL/g氯仿/紫草,功率450W,在水浴温度50℃条件下,超声
提取25min。
3 单因素实验
根据正交试验结果,依据各因素对提取效果的影响大小,在其他
因素不变的情况下,依次进行单因素实验,并以吸光度大小表示提取
率高低。 
3.1 功率对紫草提取率的影响
考察功率在200~500W范围内变化时,对紫草提取率的影响,结
果见图1。随着超声功率的增加,提取率效果明显增大。当超声功率
在450~500W时,提取率变化不大。考虑到节能因素,我们在提取时
选择450W为宜。
3.2 温度对紫草提取率的影响
考察温度在20~60℃变化时,对紫草提取率的影响。结果见图2。
由图2我们看出,随着温度的升高,提取率逐渐增大,温度达到50℃
时,提取率达最大,但继续升温时,提取率反而下降。
3.3 液固比对紫草提取率的影响
选择5、7、9、10、12、15mL/g的氯仿/紫草进行试验,考察液固
比对提取的影响,结果见图3。从图中我们看出,液固比15mL/g时提
取率最大,但和12mL/g相比差距不大。综合考虑,我们决定选择液固
比为12mL/g氯仿/紫草。
3.4 时间对紫草提取率的影响
考察超声时间在10~60min内变化时对提取的影响,结果见图4。
由图4我们看出,随着超声时间的延长,提取率逐渐增大,30min达最
大值。但提取时间再继续延长时,提取率反而下降,当超声时间达到
55min时,提取率又在升高,但升高幅度很小。这可能是长时间加热,
使紫草中化学成分发生了变化的缘故。从正交试验分析我们得知,时
间对提取的影响较小,因此我们最后确定超声时间为25min为宜。
3.5 最佳工艺验证试验
精密称量紫草粉末100mg三份,采用液固比12mL/g氯仿/紫草,
50℃水浴,功率450W条件下,超声提取25min,所得紫草总萘醌色素
含量为7.037、7.042、7.040mg/g,平均值为7.040 mg/g,优于或等于正
交试验中的任何一组。
4 结果与讨论
结合单因素实验及正交试验结果分析,最终确定提取的最佳工艺
为:液固比12mL/g氯仿/紫草,在50℃水浴中,以450W的功率超声提
取25min。
根据萘醌类成分的极性,本实验考察以氯仿为提取溶剂时紫草化
学成分,旨在进一步提高紫草萘醌的收率。本项研究所得紫草最佳提
取工艺方法简单,稳定,可行,且容易掌握,可为紫草化学成分提取
提供一定参考。
参考文献
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表1  正交试验因素水平表
因素水平 液固比(mg/L) 温度(℃) 时间(min) 功率(W)
1 5 30 20 400
2 10 40 25 450
3 15 50 30 500
表2  L9(34)正交试验设计与结果
编号 A B C D 紫草总萘醌含量mg/g
1 1 1 1 1 5.305
2 1 2 2 2 6.706
3 1 3 3 3 5.656
4 2 1 2 3 5.325
5 2 2 3 1 6.278
6 2 3 1 2 7.037
7 3 1 3 2 6.356
8 3 2 1 3 5.247
9 3 3 2 1 6.512
K1 17.667 16.986 17.589 18.095
K2 18.640 18.231 18.543 20.099
K3 18.115 19.205 18.290 17.228
k1 5.889 5.662 5.863 6.032
k2 6.213 6.077 6.181 6.699
k3 6.038 6.402 6.097 5.743
R 0.324 0.740 0.318 0.956
图1 超声功率对提取的影响            图2 温度对提取的影响
图3 液固比对提取的影响            图4 超声时间对提取的影响