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第 31 卷 第 5 期 玉林师范学院学报(自然科学) Vol.31 No.5
2010 年 JOURNAL OF YULIN NORMAL UNIVERSITY (Natural Science)
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瑶药五指毛桃对受辐射小鼠
肺组织病理形态学的影响*
□王晓平1,黄 翔2,陈晓白3,蒙 丽4,李丽梅5,陆奇丰6
(1,3. 玉林师范学院 化学与生物系 副教授,广西 玉林 537000)
(2. 玉林师范学院 体育系 副教授,广西 玉林 537000)
(4,5,6. 玉林师范学院 化学与生物系 本科生,广西 玉林 537000)
【摘 要】目的:探讨瑶药五指毛桃对受辐射小鼠肺组织病理形态学的影响. 方法:6Gy 60Coγ射线
单次全肺照射建立肺损伤模型,30只SPF级雄性小鼠随机分阴性对照组、单纯照射组及五指毛桃水提
液低、中、高剂量给药组,灌胃给药连续15天. 对各组小鼠的肺外观、肺组织进行观察和比较. 结果:
照射给药组小鼠较单纯照射组肺表面光滑、弹性好、充血水肿表现轻,组织炎性渗出少. 结论:瑶药五
指毛桃能够改善小鼠肺组织的炎性渗出,减少肺细胞损伤,对放射性肺损伤具有一定的防治作用.
【关键词】瑶药、五指毛桃;60Coγ射线;放射性肺损伤;防治作用
【中图分类号】Q274【文献标识码】 A 【文章编号】1004-4671(2010)05-0080-04
Histopathomorphologic Effect of
Yao Medicine Ficus simplicissima Lour on Mice’s
Radiation-induced Lung Injury
WANG Xiao-ping1,HUANG Xiang2,CHEN Xiao-bai1,
MENG Li3,LI Li-mei3,LU Qi-feng3
(1,3. Associate Professor, Dept. of Chemistry & Biology, Yulin Normal University,
Yulin, Guangxi 537000)
(2. Associate Professor, Dept. of Physical Education, Yulin Normal University, Yulin,
Guangxi 537000)
(4,5,6. Undergraduate, Dept. of Chemistry & Biology, Yulin Normal University,
Yulin, Guangxi 537000)
Abstract: Obiective:To investigate the histopathomorphologic effect of Yao medicine
Ficus simplicissima Lour on mice’s radiation-induced lung injury. Methods: To establish
injury model, mice were exposed to 6Gy 60Coγ-ray for one time. Thirty SPF mice were
divided into five groups:Negative control group, model group, high Ficus simplicissima
Lour extract dosage group,middle dosage group, and low dosage groups. The surfaces and
tissues of mice’s lung were observed and compared after controlling for 15 days. Results:
Compared to the model group, the lung’s surfaces of mice in Ficus simplicissima Lour extract
groups were smoother and more elastic, less congestive edema and inflammatory exudation.
Conclusion: Ficus simplicissima Lour extract decreases the inflammatory exudation and cells’
injury of lung tissues, and provides prevention and treatment on radiation-induced injury.
Key words: Yao medicine;Ficus simplicissima Lour;60Coγ-ray;radiation-
induced lung injury;prevention & treatment effect
基金项目:广西教育厅科研基金资助项目(No.200809MS124; 200911MS195)*
DOI:10.13792/j.cnki.cn45-1300/z.2010.05.013
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着放射治疗在胸部肿瘤综合治疗中的广泛
应用,放射线对正常肺组织的损伤也日益
明显的表现出来,严重时甚至加速患者的
死亡[1]. 目前,对放射性肺损伤的临床治疗主要是使
用肾上腺皮质激素联合抗生素,但疗效不理想,而
且激素治疗易引起肿瘤复发和转移[2]. 应用中医药防
治放射性肺损伤在临床及实验研究中越来越得到重
视,多种理法方药亦见于放射性肺损伤的防治报道[3].
中药毒性低,来源广泛,药理效果明显,在防治放
射性损伤的研究中显示出巨大的优势和潜力.
五指毛桃(Radix Fici Hirtae)作为瑶医常用药
材,在民间素有“土黄芪”之称,具健脾益气,化湿
行气,益肺止咳之功效[4],用治风湿、跌打损伤、
肝硬化腹水、病后体弱、劳伤咳嗽等. 近年来的研
究表明,五指毛桃还具有一定的抗肿瘤作用[5],但未
见其作用于放射性肺损伤的报道. 本实验以60Coγ
射线照射小鼠建立放射性肺损伤模型,应用五指毛
桃进行干预,观察小鼠肺标本肺损伤组织病理学的
变化,探讨五指毛桃对小鼠放射性肺损伤的防治作
用,为五指毛桃成为临床抗辐射药物提供证据.
1 材料和方法
. 主要仪器
FYC-50H60Coγ治疗机:上海医用核子仪器
厂;BX51·R-32FB3F01正置荧光相差生物显微
镜:日本Olympus公司;150万相素CCD:日本
Nikon公司;TS-12F型生物组织自动脱水机:科迪
仪器设备有限公司;YL3-A型回转式切片机:上海
仪表厂.
. 五指毛桃水提液的制备
五指毛桃购自玉林市中药材公司. 五指毛桃水
提液的制备参照周添浓等[6]的方法略加改良:取五
指毛桃干燥药材,用10倍体积的蒸馏水浸泡1h,
加热煮沸3h,趁热滤取药液;再加8倍量体积蒸馏
水,煮沸30 min,合并两次滤液,浓缩至相当于生
药2g/mL. 4℃冰箱保存,用时稀释至所需浓度.
. 照射条件
参照韩光等[7]建立的放射性肺损伤模型方法进
行,以60Co机产生γ线照射小鼠全肺,照射量率为
182.28 cGy/min,照射野18cm×18cm,源皮距为75
cm,照射剂量为6 Gy.
. 动物分组和处理
SPF级昆明种雄性小鼠30只,6周龄,体质量
为20g左右,购自广西医科大学医学实验动物中心
(动物生产许可证号:SCXK桂2009-0002). 小
鼠适应性饲养7 d后,随机分为5组,即阴性对照
组(Control组)、单纯照射组(IR组)、辐射+
低剂量给药组(IR+LD组)、辐射+中剂量给药
组(IR+MD组)、辐射+高剂量给药组(IR+HD
组),每组6只. 除阴性对照组外,给予各组小鼠
60Coγ射线6 Gy单次全肺照射. 照射后当日,五指毛
桃水提液低、中、高剂量按0.2 g/10g、 0.6 g/10g、
1.0g/10g给予灌胃,1次/d,连续15 d. 阴性对照组、
单纯辐射组给予等量生理氯化钠溶液.
. 标本制备
各组均于实验结束次日处死小鼠,取部分肺组
织置于10%中性甲醛溶液中固定24 h,常规脱水、
浸蜡、包埋、切片(厚度4μm)后,进行苏木精-
伊红染色(H-E染色),光镜下观察肺组织形态.
. 肺泡炎程度判定
根据戴夕超等[8]提供的方法确定肺泡炎程度:
0级为无肺泡炎;1级为轻度肺泡炎,肺泡间隔因细
胞浸润增宽,病变范围小于全肺的20%;2级为中
度肺泡炎,病变范围占全肺的20%~50%;3级为
弥漫性肺泡炎,病变范围超过全肺的50%.
2 结果
. 实验动物一般情况
单纯照射组小鼠自照射后开始精神萎靡,食量
下降,活动减少,对刺激反应迟钝,并随着时间的
推移其反应呈下降趋势;胸部照射野毛发明显脱
落,全身毛发光泽晦暗. 照射用药组小鼠照射后也
出现摄食减少,毛发黯淡现象,但精神明显好于单
纯照射组. 阴性对照组小鼠皮毛细密、润泽,整个
实验过程精神、活动及食量均正常.
. 大体标本
正常小鼠肺呈均质粉红色,表面光滑,弹性
好,无充血水肿;单纯照射组可见鼠肺呈充血水
肿,花斑状,不均质;照射用药组比单纯照射组充
血水肿表现轻,颜色深浅、淤斑数量均好于单纯照
射组,并呈一定的量效关系.
. 肺组织形态学表现
结果见图1~5图及表1. Control组:肺泡未见收
缩,肺泡结构清晰,周围没有水肿液及红细胞,终
末细支气管完整,管壁未见增生(图1). IR组:肺
泡结构被破坏,肺泡不完整且收缩,充血、出血明
随
王晓平 等 瑶药五指毛桃对受辐射小鼠肺组织病理形态学的影响
玉林师范学院学报2010 年 第 5 期
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显,周围有水肿液及红细胞,细胞增多且增大,间
质增厚,肺泡腔变形,有浸润的炎症细胞,多为3
级肺泡炎(图2). IR+LD组:肺泡收缩,结构不完
整,细胞增多,周围有水肿液及红细胞,但较单纯
辐射组少,多为1级到2级肺泡炎(图3). IR+MD
组:肺泡部分收缩,细胞增多,周围有水肿液及
红细胞,较低剂量组少,多为1级肺泡炎(图4).
IR+HD组:肺泡未见收缩,周围有少量水肿液及
红细胞,炎性渗出及充血水肿情况均大为减轻,多
为0级到1级肺泡炎(图5).
图1 Control组肺组织(×200)
图2 IR组肺组织(×200)
图3 IR+LD组肺组织(×200)
图4 IR+MD组肺组织(×200)
图5 IR+HD组肺组织(×200)
3 讨论
放射治疗是恶性肿瘤的主要治疗手段之一,但
在胸部肿瘤的放射治疗中,部分肺组织不可避免地
受到一定剂量的射线照射而损伤. 肺泡是放射性肺
损伤的主要部位,基本病变为肺充血、水肿、肺间
质增厚,后期逐渐出现肺泡萎缩. 本实验用60Coγ
射线复制了放射性肺损伤的模型,病理学检查示肺
间质增厚,炎性细胞渗出明显,主要为肥大细胞、
中性粒细胞、浆细胞和红细胞,肺水肿明显,结果
与戴夕超等[8]的报道相一致. 为进行下一步的实验奠
定了良好的模型基础.
祖国医学认为,射线是热毒之邪,可损伤人体
正气和阴血,放射性肺损伤的病机为肺热血瘀、气
阴两伤、宣肃失司,而补气养阴、益肺活血为治疗
大法[9]. 临床与实验研究表明,一些具有清热解毒、
养阴益气、活血化瘀功效的中药具有不同程度的预
防和治疗放射性肺损伤的作用[10,11]. 五指毛桃具有益
气补虚、行气解郁、健脾化湿、止咳化痰的功效[12],
在临床上广泛使用. 本研究结果显示,照射给药组
炎性细胞渗出较单纯照射组减少,水肿减轻,说明
五指毛桃能有效地减轻辐射引起的小鼠肺组织的充
血水肿、上皮细胞及间质细胞增生、炎细胞浸润等
炎性反应,从而对60Coγ射线造成的小鼠肺组织损
伤有一定的保护和修复作用. 五指毛桃含有丰富的
生物碱、补骨脂素和多糖等活性成分,这些物质具
抗氧化作用,能提高机体的免疫力,对辐射损伤有
一定的防治作用.
表1 各组小鼠肺泡炎分级(H-E染色)
分组 n 0级 1级 2级 3级
Control组 6 6 0 0 0
IR组 6 0 0 1 5
IR+LD组 6 0 3 2 1
IR+MD组 6 1 4 1 0
IR+HD组 6 2 4 0 0
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五指毛桃对辐射肺损伤有一定的疗效,其抗辐
射损伤机制有待于进一步研究. ■
【收稿日期 2010-08-01】
【责任编辑 谢文海】
王晓平 等 瑶药五指毛桃对受辐射小鼠肺组织病理形态学的影响
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【收稿日期 2010-07-25】
【责任编辑 谢文海】
(上接第 79 页)
CP引起的骨髓、胸腺细胞增值抑制和脾细胞凋亡.
沈建伟等[12]的研究表明,桂枝甘草汤和益胃汤对CP
所致骨髓细胞微核率的增高有明显的拮抗作用,
且有一定的剂量依赖性. 本课题研究的中药五指毛
桃,有健脾化湿、益气补虚之功效,正是一类补益
中药. 本实验选用环磷酰胺从体细胞和生殖细胞两
方面评价五指毛桃水提液的抗突变作用,结果表
明,环磷酰胺可诱发小鼠体内骨髓嗜多染红细胞和
睾丸生精细胞微核率显著增加,当预先给予五指毛
桃水提液后再腹腔注射环磷酰胺,可拮抗环磷酰胺
诱发微核率的增加,并呈剂量依赖性下降. 说明五
指毛桃水提液的有些成分具有抗突变作用,能够减
轻细胞染色体的损伤,提示五指毛桃在肿瘤的预防
及临床肿瘤化学疗法上有一定的应用价值,其抗突
变作用机制值得深入研究. ■