全 文 ：·资源·
香叶天竺葵精油及单体抗氧化能力比较
孙　伟 1　徐志敏2　王淳凯2　瞿伟菁 2　林承杰 3
(1.上海应用技术学院生物与食品工程系 ,上海 200235;2.华东师范大学生命科学学院 ,上海 200062;
3.昆明艾谐香料有限公司 ,昆明 650028)
　　摘要　根据试样对二苯代苦味肼基自由基(DPPH· )的清除作用 , 评价了香叶天竺葵茎和叶精油及其单体 ,以
及蒸馏后的残渣和废水的抗自由基活性。所试样品中几乎都有一定的抗氧化作用 , 以中午采集的叶片提取物的
DPPH· 清除率最高 ,达 99.70%。废水和残渣的清除率分别达 97.56%和 90.24%。提示天然香料工业所弃的废水
和残渣可提取到具有较强的抗自由基活性的物质 ,为种植香叶天竺葵综合利用提供了可能。
关键词　香叶天竺葵;精油;抗氧化能力;综合利用
　　生物的抗氧化能力与其抗病性 、抗逆性及延缓
衰老密切相关。从天然植物中寻找有效的抗氧化剂
应用于医药 、食品 、保健品 、饮料 、化妆品等 ,或从氧
化与抗氧化代谢的平衡来探讨生物对变化环境条件
的适应性机理 ,是当前的研究特点。目前香叶天竺
葵的药理研究正在受到人们的重视 〔1〕。
迄今用于评价植物抗氧化能力的方法有诸如硫
氰酸盐 (thiocyanate)法 〔2〕、硫代巴比妥酸 (TBA)
法 〔3〕 、ORAC法(automatedoxygenradicalabsorbance
capacityassay)等 〔4〕。这些方法或因手续相当繁琐
费时 ,或因所需试剂和大型仪器的费用昂贵。 1, 1-
二苯基苦基苯肼(DPPH· )是一种稳定的有机自由
基 ,通过检测生物试剂对 DPPH·自由基的清除能
力可以表示其抗氧化性的强弱 。然而对自由基信号
的直接检测需要使用顺磁共振仪 ,而使其难以普及 。
近年来 ,国外有人利用 DPPH·溶液的紫红色吸光
度变化作为清除自由基能力的测定 〔5〕。T.Yokozawa
等人用此方法研究了茶提取物 〔6〕。本研究用 DPPH
·分光光度法评价香叶天竺葵抗氧化能力 ,以期为
筛选新型纯天然抗氧化剂及天然香料的综合利用提
供方法和依据。
1 　材料与方法
1.1 　仪器和试剂　721分光光度计 (上海分析仪
器厂),二苯代苦味肼基自由基(DPPH· ,日本东京
化成工业株式会社),以分析纯无水乙醇配制。
1.2 　供试材料　香叶天竺葵 Pelargoniumgraveo-
lens, 10月在云南大理取得扦插苗 ,先在云南昆明郊
区培养 ,次年 3月移至上海种植。精油由 8月收取
的香叶天竺葵蒸馏所得 ,精油单体和香叶天竺葵组
培苗由上海应用技术学院天然香料研究室提供 。
2 g样品研磨后 ,直接用 20 ml密封室温无水乙
醇或水浸提 ,离心(5000×g, 15 min),取上清液。
1.3　有机自由基(DPPH· )消除能力测定　参照
文献 〔7, 8〕方法 ,向 2.5 ml65 μmol/LDPPH·溶液中
加入 0.5ml试样(空白对照用等量无水乙醇代替),
用力摇匀 ,于室温下放置 30 min后于光径 1 cm比
色皿中 ,测定 DPPH·混合溶液在 517 nm处有光值
(A517)的降低 ,用 2.5 ml乙醇与 0.5 ml试样混合
液调仪器零点 ,以扣除试样本身颜色的影响。抑制
率(%)=(A0 -A)/A0 ×100%。
1.4　数据处理　经 MicrosoftExcel软件方差分析。
2　测试结果
2.1　不同部位对 DPPH·的清除作用　从盆栽苗
上采集芽 、茎 、叶 、叶柄 , 结果见表 1, 以叶片的
DPPH·清除率最高 ,达到 93.60%。
　表 1　　植株不同部位对 DPPH·的清除作用(n=4)
部位 OD值 清除率%
芽 0.050±0.015 87.80
茎 0.041±0.017 89.94
叶片 0.026±0.016 93.60
叶柄 0.035±0.023 91.46
　　P>0.05,无显著性差异
2.2　不同采集时间对 DPPH·的清除作用　在同
一天不同时间采的叶片 , 检测结果见表 2。其中
　表 2　　　　　不同时间采收的叶片对
DPPH·的清除作用(n=4)
时间 OD值 清除率%
8∶00 0.004±0.015 99.09
10∶00 0.006±0.016 98.48
12∶00 0.001±0.009 99.70
14∶00 0.033±0.013 92.07
16∶00 0.042±0.018 88.41
18∶00 0.038±0.017 90.85
　　P<0.01,有特别显著差异
·87·中药材第 28卷第 2期 2005年 2月
12∶00采集的叶片对 DPPH·清除率最高 , 达到
99.70%。
2.3 　不同叶位对 DPPH·的清除作用　从盆栽扦
插苗和组培苗上采集展开后的第一至第四片叶 ,用
上述方法检测结果见表 3和表 4。扦插苗和组培苗
第四片叶对 DPPH·清除率最高 ,前者清除率高达
98.48%。
　表 3　扦插苗不同叶位对 DPPH·的清除作用(n=4)
叶位 OD值 清除率%
第 1片叶 0.015±0.005 96.40
第 2片叶 0.018±0.003 95.73
第 3片叶 0.022±0.006 94.76
第 4片叶 0.006±0.005 98.48
　　P<0.01,有特别显著差异
　表 4　组培苗不同叶位对 DPPH·的清除作用(n=4)
叶位 OD值 清除率%
第 1片叶 0.033±0.016 92.01
第 2片叶 0.074±0.002 81.95
第 3片叶 0.022±0.018 94.21
第 4片叶 0.006±0.005 96.34
　　P<0.01,有特别显著差异
2.4 　不同提取物及废料对 DPPH·的清除作用　
从盆栽苗上采叶用同法得到的精油及残渣废水 ,检
测结果见表 5,以蒸馏后的废水对 DPPH·清除率最
高 ,达 97.56%。
　表 5　 叶片提取物及废料对 DPPH·的清除作用(n=4)
OD值 清除率%
废水 0.010±0.008 97.56
精油 0.191±0.004 59.40
残渣 0.040±0.014 90.24
叶片(对照) 0.026±0.016 93.60
　　P<0.01,有特别显著差异
　表 6　　香叶油及单体对 DPPH·的清除作用(n=4)
精油成分 OD值 清除率%
香叶油 0.191±0.004 59.40
乙酸香茅酯 0.215±0.015 44.87
松油醇 0.293±0.012 25.00
乙酸香叶酯 0.239±0.013 38.78
芳樟醇 0.366±0.012 6.09
丁二酮 0.046±0.005 88.14
香叶醇 0.353±0.005 9.62
二甲基硫醚 0.325±0.010 3.85
香茅醇 0.176±0.005 54.81
　　P<0.01,有特别显著差异
2.5　香叶油单体成分对 DPPH·的清除作用　香
叶油主要单体 ,对 DPPH·的清除作用检测 ,结果见
表 6。其中丁二酮的清除率最高 ,达到 88.14%,其
次为香茅醇 、乙酸香茅酯 、乙酸香叶酯 、松油醇等在
25.00% ～ 54.81%之间 ,香叶醇 、芳樟醇 、二甲基硫
醚等低于 10%。
3　讨论
香叶天竺葵的叶片 、芽 、茎和叶柄等的抗氧化性
在 90%左右 ,它们之间无显著性差异 ,以叶片的 DP-
PH·清除率最高 ,达到 93.60%。
每隔 2 h从盆栽苗上采的叶 ,以上午采集比下
午采集的叶抗氧化能力要强 ,尤其中午 12时采得的
叶最强。
对不同叶位的抗氧化能力 ,以叶位越高抗氧化
能力越强 ,可能与细胞内积累物质成分浓度有关 。
香叶天竺葵蒸馏精油后所剩的废水及残渣 ,一
般都弃掉 ,造成环境的污染和资源的浪费。这两部
分对 DPPH·清除率都在 90%以上 ,比精油的抗氧
化能力强的多(59.40%)。为香叶天竺葵种植效益
提供了综合利用的可能 。如果重视天然香料加工后
的废弃物的研究和开发 ,对经济环境保护和资源的
再利用都是有益的 。
对精油及其单体化合物的抗氧化作用的比较研
究表明 ,相差很大 。其中丁二酮对 DPPH·清除率
最高 ,达到 88.14%,其次为香茅醇 、乙酸香茅酯 、乙
酸香叶酯 、松油醇 。说明香叶油的抗氧化能力是各
单体化合物的综合表达 ,可以从更多的精油中寻找
到抗氧化能力更强的化合物 。
天然香料及其精油目前大量用于各类食品 、日
化产品 ,仅作为香精的一部分。人们对它的功能性
尚未有系统研究。本研究结果将有助于现有产品功
能的提升或拓展 ,指导芳香保健 、芳香开窍 、芳香防
腐等新产品的开发 ,为天然香料提供广阔的经济市
场。
参 考 文 献
1　孙伟 ,等 .香叶天竺葵的药理研究进展 .中药材 , 2002,
25(8)∶600
2　OsawaT, etal.Noveltypeofantioxidantisolatedfromleaf
waxofEucalyptusleaves.AgricBiolChem, 1981, 45(3)∶
735
3　OtolenghiA.Interactionofascorbicacidandmitochondrial
lipids.ArchBiochcm.Biophys, 1959, 79∶355
4　CaoG, etal.Oxygenradicalabsorbancecapacityasasyfor
antioxidants.FreeRadicalBiol, Med.1993, 14(3)∶303
5　LarrauriJA, etal.Efentoftemperatureonthefreeradical
·88· 中药材第 28卷第 2期 2005年 2月
scavengingcapacityofextractsfromredandwhitegrape
pomacepeels.J.Agric.FoodChem, 1998, 46(7)∶2694
6　YokzawaT, etal.Invitroandinvivostudiesontheradical
scavengingactivityoftea.J.Agric.FoodChem, 1998, 46
(6)∶2143
7　NicoleCotelle, etal.Antioxidantpropertiesofhydroxyfla-
vones.FreeRadicalBiology＆Medicine.1998, 20(1)∶35
8　MelorsA, etal.TheInhibitionofMitochonadirialPeroxi-
dationbyUbiquinoneandUbiquinol.J.ofBiol.Chem.
1966, 24(19)∶4353
(2004-10-08收稿)
StudyonAntioxidantActivityofEssentialOilsandItsMonomerfromPelargoniumgraveolens
SunWei1 , XuZhimin2 , WangChunkai2 , QuWeijing2 , LinChengjie3
(1.ShanghaiInstituteofTechnology, Shanghai200235;2.EastChinaNormalUniversity, Shanghai200062;3.KunmingAixieFra-
grancesCo.Ltd., Kunming650028)
Abstract　Theantioxidantefectsofessentialoilandmonomeraswelasresidueandwastewaterafterdistillationfrombuds,
stemsandleavesofPelargoniumgraveolenswerestudiedbythemethodof1, 1-diphenyl-2-picrylhydrazylfreeredical(DPPH· ).It
showedthateachsampleinthetesthadtheantioxidantefect.Theextractionoftheleafcolectedinnoonhadthestrongestantioxidant
effect, theresidueandwastewaterhadalsostrongantioxidantefect.Itshowsthatsomeantioxidantchemicalaboundsintheresidueof
naturalessentialindustry, anditalsoshowsfeasibilityofintegrateduseofPelargoniumgraveolens.
Keywords　Pelargoniumgraveolens;Essentialoil;Antioxidantion;Integrateduse
·鉴别·
贝母类中药及其伪品的红外光谱聚类分析
叶晓镭 1　余　华1, 2　李　萍 1
(1.中国药科大学 ,南京 210038;2.澳门大学中华医药研究所 ,澳门)
　　摘要　采用傅立叶变换红外光谱技术及聚类分析方法对贝母类中药材及其伪品进行鉴定分析。结果表明 ,本
方法可准确区分不同种类的贝母及其伪品。
关键词　贝母;傅立叶变换红外光谱;聚类分析
　　贝母为百合科贝母属多种植物的鳞茎 ,是常用
中药。 2000年版 《中国药典 》一部收载的贝母有川
贝母 FritilariacirrhosaD.Don、暗紫贝母 F.uni-
bracteataHsiaoetK.C.Hsia、甘肃贝母 F.przewalski
Maxim.、梭砂贝母 F.delavayiFranch.、浙贝母 F.
thunbergiMiq.、平贝母 F.ussuriensisMaxim.、伊犁
贝母 F.palidifloraSchrenk、新疆贝母 F.walujewi
Regel和湖北贝母 F.hupehensisHsiaoetK.C.Hsia
9个植物种 〔1〕。实际上我国贝母属植物已超过 50
种(变种)〔2〕。根据中医传统用药习惯 ,临床处方一
般只分川贝母和浙贝母两大类 。由于贝母原植物种
类较多 ,商品贝母来源复杂 ,常有伪品混杂 ,影响了
临床用药的功效 。本文采用红外光谱技术结合聚类
分析法对不同种类的贝母及其伪品山慈姑进行鉴
别 ,为保证临床用药的有效性及证实传统贝母分类
的合理性提供方法和依据 。
1　仪器和材料
SHIMADZUFTIR-8400S傅立叶变换红外光谱
仪 , IRsolution1.04版操作软件 。 KBr为光谱纯
(Merck公司)。 25个贝母类药材及其伪品见表 1,
均经笔者鉴定 ,并由中国药科大学生药学教研室李
萍教授复核。
2　测定条件及方法
光谱分辨率 4 cm-1 ,光谱范围 1800 ～ 400 cm-1 ,
扫描次数:32。
取各种来源贝母粉末 , 80℃干燥 4 h。精密称取
干燥样品细粉约 6mg,与 400mg干燥 KBr共研匀 ,
过 200目筛 ,精密称取 100 mg,放入样品槽内供压
片;测定。相同条件下 ,每个样品各压 3片。用 IR
solution1.04版操作软件对谱图进行基线校正后取
平均光谱 。结果见图 1。
3　聚类方法
·89·中药材第 28卷第 2期 2005年 2月