全 文 ：产业与科技论坛 2014年第 13卷第 5期
2014.（13）.5Industrial & Science Tribune
HPLC法测定并比较喜树果、
马比木中 10 －羟基喜树碱含量
□苏爱雪 周 翔 罗娅君 边清泉
【内容摘要】目的:建立喜树果、马比木中 10 －羟基喜树碱的高效液相色谱法分析方法，并对两者 10 －羟基喜树碱含量进行比
较分析。方法:采用岛津 LC － 20A高效液相色谱系统对样品进行定量分析，色谱柱为 ODS;甲醇:水(5． 5:4． 5)为
流动相;检测波长为 254nm;柱温 35℃;流速 0． 9mL·min －1。结果:该条件下目标组分与其他组分有效分离(Ｒ ＞
1． 5)，喜树碱进样量在 0． 01 ～ 0． 09μg 线性范围关系良好，相关系数 r = 0． 9996，平均回收率:100． 4%，ＲSD:0．
23%。结论:该方法专属性强、分离效果好、分析速度快、灵敏度高、操作简便易行、结果准确可靠。分析结果可为
喜树果和马比木的深度开发提供参考依据。
【关键词】HPLC;喜树果;马比木;10 －羟基喜树碱
【基金项目】本文为绵阳市科技局项目(编号:13G002 － 2)和四川省教育厅科研项目(编号:12ZA079;12ZA081)研究成果。
【作者简介】苏爱雪(1993 ～)，女，绵阳师范学院化学与化学工程学院应用化学专业学生
周翔，罗娅君，边清泉(通讯作者);绵阳师范学院化学与化学工程学院
喜树果是中国珙桐科植物(Camptotheca acuminate
Decne)的果实，喜树又称旱莲、水桐树、千张树，主要生长
于云南、广西等地;马比木为茶茱萸科植物海桐假柴龙树
(Nothapodytes Pittosporoides Oliv． sleum)的根皮，又称为公
黄珠子、追风伞，分布于贵州、湖北、四川、湖南等地。2 种
植物的共同特点是均含有活性成分喜树碱及其衍生物 10
－羟基喜树碱(10 － hydroxycamptothecin，简称 HCPT)，喜
树碱及 10 －羟基喜树碱临床用于治疗膀胱癌、胃癌、直肠
癌等消化系统恶性肿瘤，10 －羟基喜树碱作为 S期的特异
性抗癌物质，其毒性较喜树碱低，用于直肠癌、原发性肝
癌、胃癌、慢性粒细胞白血病、膀胱癌的治疗更为安全有
效。因此，深入研究 10 － 羟基喜树碱的分布、存在形式、
分离提取、药理药效等对新的抗癌药物研究具有重要价
值。喜树碱的研究已有大量文献报道，10 －羟基喜树碱的
研究起步相对稍晚，文献报道较少，对喜树果、马比木中
10 －羟基喜树碱含量的比较研究更是鲜有报道。本实验
通过喜树果和马比木中 10 － 羟基喜树碱含量的分析检
测，对 2 种植物中 10 －羟基喜树碱的含量进行比较，为喜
树果、马比木的深度研究开发及 10 － 羟基喜树碱提取物
生产原料的选择提供科学依据。
下，将 BP网络模型应用于预测小区同时系数的预测精度和
可靠性足以满足工程实际应用中对误差精度的要求。
表 1 误差结果对比
组别 BP模型
1 0． 0819
2 0． 2009
3 0． 0551
4 0． 0212
5 0． 0085
6 0． 0090
7 0． 0658
8 0． 0527
9 0． 0230
10 0． 0624
平均误差 0． 0581
四、结语
本文提出了一种基于 BP神经网络模型的小区同时系数
选取方法。通过分析城市小区同时系数的主要影响因素，建
立包括负荷因素、环境因素、住户因素和建筑特征因素的指
标体系，然后针对大容量的复杂样本集，搭建 BP 神经网络模
型，实现更加精确的同时系数选取工作。算例结果表明，BP
神经网络模型预测的平均绝对误差较小，同时系数的预测结
果也更加接近于实际指标。这表明，应用本文所提的 BP 网
络模型进行小区同时系数的选取具有较高的准确性和可靠
性，能够有效指导和完善实际电网的规划工程。
【参考文献】
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预测方法研究［J］．中国电机工程学报，2006
2．于之虹，郭志忠．数据挖掘与电力系统［J］．电网技术，2006
3．马飞．数据挖掘中的聚类算法研究［D］． 南京理工大学，
2008
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2014年第 13卷第 5期产业与科技论坛
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一、实验部分
(一)仪器与试验材料。仪器:高效液相色谱仪系统(日
本岛津)，包括 LC － 20AT 型输液泵，二极管阵列检测器，
CLASS － vp5． 0 色谱数据处理工作站及 CTD － 6A 色谱柱温
箱;AY120 电子天平(SHIMADZU)，Fw － 80 型粉碎机，KQ
250DE型医用超声波清洗器，101—2A 型电热鼓风恒温干燥
箱，Sz － 93 型自动双重纯水蒸馏器。试验材料:水为高纯水;
喜树果、马比木购于成都中药材市场，10 －羟基喜树碱标准
品(本实验室分离纯化，面积归一法测定含量 ＞ 99%);甲醇
为色谱纯(成都化学试剂厂)，其他化学试剂均为 AＲ 级，试
验用水为二次重蒸水。
(二)色谱条件。色谱柱:Kromasil C18 色谱柱(250mm ×
4． 6mm，5μm);流动相:甲醇:水(5． 5:4． 5);流速:0． 8 mL·
min －1;柱温:30℃;检测波长:254nm;进样量:10μL。10 －羟
基喜树碱的保留时间为 7． 06min(见图 1)。理论塔板数按 10
－羟基喜树碱计算大于 4，000。10 －羟基喜树碱与相邻组分
分离良好(Ｒ ＞ 1． 5)。
(三)标准品与供试品溶液的制备。精确称取 10 －羟基
喜树碱标准品 5． 4 mg，置于 50 mL 容量瓶，加甲醇定容，摇
匀，得 10 －羟基喜树碱储备液。取储备液 1 mL 置于 10 mL
容量瓶中，甲醇稀释至刻度，振荡均匀，即得标准品溶液，备
用。10 －羟基喜树碱的浓度为 10． 8μg·mL －1。
将供试样品喜树果、马比木于 65℃干燥至恒重(12h)，粉
碎，过 0． 30 mm筛，备用。精密称取喜树果样品 0． 2046 g、马
比木样品 0． 3024 g，分别置 50 mL 三角烧瓶，分 2 次加入约
45 mL甲醇，每次避光超声(250 W，30 kHz)萃取 20 min，合并
萃取液，0． 45 μm滤膜过滤，转入 100 mL棕色容量瓶，甲醇定
容至刻度，得喜树果、马比木供试品溶液。
二、方法与结果
(一)检测波长与流动性的选择。在实验流动相系统条件
下，通过二极管阵列检测器(DAD)对 10 －羟基喜树碱标准品
全波段紫外吸收扫描，10 －羟基喜树碱的 λmax为 254 nm。254
nm处待测定组分 10 －羟基喜树碱与相邻不明物组分分离度 ＞
1． 5，满足分析要求，故确定 10 －羟基喜树碱检测波长为 254 nm。
HPLC测定 10 －羟基喜树碱含量的流动相文献已有报
道。分别对文献中各流动相进行对比试验。结果发现，甲醇
与水体积比为 5． 5:4． 5 流动相体系时，峰形对称性良好，喜
树果和马比木中的 10 －羟基喜树碱与相邻组分色谱峰分离
度良好，出峰时间适宜，满足分析方法需求。故选择流动相
为甲醇与水体积比 5． 5∶ 4． 5。
(二)标准曲线的制备。分别精密吸取 10 －羟基喜树碱
的标准溶液 1，3，6，9，12 μL，注入高效液相色谱仪，测定其峰
面积，记录图谱及色谱参数，以进样量(X)对峰面积(Y)回归
分析，得到线性回归方程为 y = 21022x － 880． 8，相关系数 r =
0． 9996，线性范围 0． 011 ～ 0． 13 μg。
(三)精密度与稳定性试验。精密吸取 10 －羟基喜树碱
标准品溶液，在实验条件下连续进样 5 次，测定 10 －羟基喜
树碱的峰面积，ＲSD = 0． 6 %。结果表明仪器精密度良好;分
别取喜树果、马比木供试品溶液在 0，3，6，9，12 h 进样分析，
测定目标组分含量，喜树果 ＲSD = 0． 7 %，马比木溶液 ＲSD =
0． 5 %。表明喜树果和马比木供试品溶液在 12 h内稳定。
(四)供试品加标回收试验。精密称取约 0． 20 ～ 0． 35 g
已知含量的马比木 6 份，1 份为测定本底值，另 5 份准确添加
与样品中含量相近量的 10 －羟基喜树碱标准品，按上文实验
制备供试品溶液，按实验要求测定含量，每样重复测定 3 次，
求均值，计算回收率。结果见表 1。
表 1 加标回收率测定结果(n = 5)
组分
名称
本底值
/μg
加标量
/μg
测定值
/μg
回收率
/%
X
/%
ＲSD
/%
10 －羟
基喜
树碱
16． 78 15． 77 32． 25 98． 1
16． 62 15． 77 32． 22 98． 9
16． 52 15． 77 32． 17 99． 2
16． 48 15． 77 32． 18 99． 6
17． 56 15． 77 33． 10 98． 5
98． 9 0． 6
(五)含量测定。分别精密吸取标准品和供试品待测液
10μL，重复进样 5 次，求峰面积值均值，外标法一点法计算含
量，喜树果和马比木中 10 －羟基喜树碱含量分别为 1． 94 mg
·g －1和 0． 76 mg·g －1。标准品与供试品色谱图见图 1。
图 1 标准品与样品 HPLC色谱图
注:A10 －羟基喜树碱标准品;B 喜树果样品;C 马比木
样品;a10 －羟基喜树碱。
三、结论
供试样品喜树果、马比木测定结果表明:喜树果中 10 －
羟基喜树碱含量为马比木的 2． 6 倍。在不考虑原料是否易
得(两植物我国多省份均有分布)及原料成本(喜树果价格为
马比木的 2 倍)的前提下，生产 10 －羟基喜树碱提取物选择
喜树果为原料更为经济合理。本实验结果将为喜树果、马比
木的深度开发提供科学依据。
【参考文献】
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喜树碱的含量［J］．科学技术与工程，2005
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