全 文 ：8《中国海洋药物 》杂志 20 0 3年第 4期 (总第 9 4期 )
褐藻铁钉菜化学成分的研究 (n )
汤海峰` , 易杨华 ’ 价 ,姚新 生 2 , 张淑瑜 ’ , 许 强 芝 1 , 毛士龙 1
( 1
. 第二军 医大学 药学院 海洋药物研究中心 ,上海 2 0 0 4 3 3 ; 2 . 沈阳药科大学 , 辽宁 沈阳 1 1 001 5)
摘 要 : 采用 稻瘟霉模型生物 活性追踪 方法 , 应 用 多种层 析手段 , 从采 自浙江 南鹿岛的褐 藻铁打莱 ( I s h i ge
ok
a m u ar i) 中分 离得到 6 个化合物 , 应用 多种 波谱技术 , 分别 确 定为 : 3日, 2 8e一二 舟基一 2 4 一乙基 一 5 , 23 子胆街二烯
( 1 )
,
13 “ -S 狂基脱镁叶绿素 a( l ) , 脱镁叶绿素 a ( 班 ) , 1一 0 一二 十六烷酞基甘 油 醋 ( W ) , 1一 O 一十六烷酞基甘油 酣
( 丫 ) 和 1一 0 一 ( 8 2 一十 四碳烯酞基 )甘 油 醋 ( VI ) 。 6 个化合物均为首次从该种海 藻中得到 , 工和 VI 分别 为新化合
物和新 天 然产物 , 工~ m 具有诱导稻 瘟霉菌丝 变形 活性 和肿瘤 细胞毒性 。
关键词 : 褐 藻 ; 铁打菜 ;化 学成分 ;稻瘟霉 ; 生物活性
中图 分类号 : R 9 3 1 . 7 1 1 文献标识码 : A 文章编号 : 20 0 2 一 3 4 6 2 ( 2 0 0 3 ) 0 4一 0 0 0 5 一 0 5
S t u d i e s o n e h e m i e a l e o n s t i t u e n t s f r o m
I s h i g e o k a n , u r a e ( 1 )
1l l a r l n e b r o w n a l g a
T A N ( } H
a i
一
f e n g
,
Y l Y a n g
一
h u a
,
Y A O X i n
一 s h e n g
, e t a l
.
( R e 、 e o r 〔火 C e n , e r fo r M “ r i n e D r u g s , S c h o o l o f P h a r , n a c 夕 , S e e o , Zd M i l i t a r 夕 M c d i c a l 肠 ,艺-
刃召 , , 、 , z夕 , S h a , Zg h a i 2 0 0 4 3 3 , C h i n a )
A b s t r a e t : S i x e o m p o u n d s w e r e i s o l a t e d f o r t h e f i
r s t t im e f
r o m t h e m a r i n e b r o w n a l g a I s h i g
e
o k o z , z? u r “ e b y P y r i e u l a r i a o r y z a e b i o a s s a y
一
g u i d e d f
r a e t i o n a t i o n m e t h o d w i t h a e o m b i n a t i o n o f
e x t r a e t l o n a n d p a r t i t i o n a s w e l l a s m u l t i
一 e h r o m a t o g r a p h y
.
T h e i r s t r u e t u r e s w e r e e l u e id a t e d a s
3日, 2 8冬一 d ; h y d r o x y 一 2 4一 e t h y l e h o l e s t a 一5 , 2 3 2 一 d i e n ( 工 ) , 13 2 5一 h y d r o x y p h e o p h y t i n a ( 1 ) , p h e o -
p h y t l : l a ( 1 )
,
l
一 e e r o t o y l g l y e e r o l ( W )
,
1
一
O
一
p a l l n i t o y l g l y e e
r o l ( V ) a n d l
一
O
一
( 8 2
一
t e t r a d e
-
e e n o y l ) g l y e e
r o l ( W )
.
S t e r o l 1 1
5 a n e w e o m p o u n d w h i l e g l y e e r i d e Vl 1
5 a n e w n a t u
r a l p r o d
-
u e l
. 丁一 1 s h o w e d a e t i v i t y e a u s i n g m o r p h o l o g i e a l a b n o r m a l i t v o f P y r i e u l a r i a o r y z a e m y e e l i a .
K e y w o r d s : b r o w n a l g a e ; I s h i g e o k a m u
r a e 乞; e h e m i e a l e o n s t i t u e n t s ; P 夕 r i c u l a r i a o r夕 z a e ; b i o -
a C l l V l t y
铁钉菜科褐藻铁钉菜 ( I s hi g 。 。 ka m u ar 。
Y e n d 。 )在我 国东海 、 南 海分 布广泛 , 民间用
于喉炎 、 淋 巴结炎 、 甲状腺肿的治疗 , 具有清
热解毒 、 软坚散结 的作用13[ 。 我们采用稻瘟
霉模型生物活性追踪方法图 , 对采 自浙 江南
鹿岛的铁钉菜进行化学和生物活性研究 , 前
文已报道 了 5 个 街醇类化合物3j[ ,本 文继续
报道 6 个化合物 的分离鉴定 和活性筛选结
果 , 即 3俘, 2 8是一二轻基 一 2 4一乙基一 5 , 2 3 2 一胆幽二
烯 ( I ) , 1 3 2 5 一经基脱镁叶绿素 a ( 1 ) ,脱镁叶
绿素 a( m ) , 1一O 一二十六烷酞基甘油醋 ( W ) ,
1
一
O
一十六烷酞基甘油醋 ( V )和 1一O 一 ( 8 2 一十四
碳烯酞基 )甘油酷 ( vI ) , 均为首次从该种海藻
中得到 , 工和 VI 分别为新化合物和新天然产
物 , 工一 m 具有诱导稻瘟霉菌丝变形活性和
肿瘤细胞毒性 。
1 实验部分
1
.
1 样品
通讯联 系人
《中国海洋药物》杂志 2 0 0 3 年第 4 期 (总第 94 期 )
铁钉 菜 ( I s h i g e o k a m u r a e Y e n d o ) 于
1 9 9 9 年 10 月 采 自浙 江南鹿岛 中潮 带岩石
上 , 经上海 自然博物馆杭金欣副研究员鉴定 ,
标 本 存 于 第 二 军 医 大 学 药 学 院 ( N .o
N J0 0 1 )
。
1
.
2 仪器与试剂
天津分析仪器 厂 R Y 一 2 熔 点仪 ( 温度未
校正 ) ; X 一 z o o m C u r s o r 红外 光谱仪 ; V a r i a n
In o v a
一
4 0 0 核磁共振仪 ; V a r i a n M A T 2 1 2 质
谱仪 ; S e p h a d e x L H 一 2 0 为 P h a r m a e i a 公 司产
品 ;反相柱层析 O D S 为 F u j i 公 司产品 ; 烟 台
芝果黄务硅胶开发试验厂层析用硅胶和 H S -
G F 25 4 硅胶 预制板 ;试剂均为分析纯 , 购 自
上海化学试剂公司 。
1
.
3 提取与分 离
按已报道团 方法制 备获得 C I` 萃取物
24 9
, 经 快 速 硅 胶 柱 层 析 ( 石 油 醚 一丙 酮 和
C H
:
1C
2 一
M e O H 梯度洗脱 ) ,得到 30 个流分 ,采
用稻 瘟 霉 模 型 进 行 活性 追 踪 , 第 四 流 分
(2
.
9 9 )
、 第六流分 (1 . 19 )和第七流分 (0 . 5 9 )分
别 经 S e p h a d e x L H一 2 0 凝 胶 过 滤 ( C H Z C 12 -
M e 0 H 一 1 : 1) 和反复硅胶柱层析 (石油醚一丙
酮洗脱 )分别得 到化合物 1 28 m g ,工38 m g 和 n
35 m g ; 第 13 流分 (0 . 39 ) 经快速硅 胶柱 层析
( C H
:
C 1
2 一
M e O H 洗脱 )和 O D S 柱 M P L C ( 8 3%
M e O H ) 得 到 3 个 部 分 ( A , B , C ) , C 部 分
10 o m g 和 B 部 分 1 20 m g 再 分 别 经 O sD 柱
M p CL (分别用 83 %和 80 % M e O H 洗脱 ) 各得
到化合物 Vl 58 n l g 和V 、 VI 的混合物 1 10 m g 。
1
.
4 物理常数与光谱数据
化合物 工 : 白色粉末 , m p 14 0 ~ 142 ’ C 。
I R ,公数C-m ` : 3 3 2 5 , 1 6 7 0 , 1 4 6 0 , 1 3 7 5 , 10 6 0 ,
8 3 8
。
E l
一
M S ( m / z )
: 4 2 8 [ M ]
+ ( 1 )
,
4 1 1仁M 一 O H ] + ( 1 7 ) , 4 1 0 仁M 一 H Z O 〕十 ( 18 ) ,
3 9 5「M 一 H 。 O 一 C H 3 〕+ ( 2 ) , 3 8 5 [ M 一 C 3 H 7〕+
( 6 )
,
3 6 7仁M 一 H Z O 一C 3 H 7 ] + ( 6 ) , 3 1 5 ( C 2 2 一 C 2 3
键断裂 ) ( 9 ) , 3 0 1 ( C Z。 一 C 2 2键断裂 ) ( 2 4 ) , 2 8 3
仁3 0 1一 H : O ] + ( 4 9 ) , 2 7 1〔M 一 S C (侧链卜 Z H 〕+
( 10 0 )
,
2 5 5仁M 一 S C 一 H Z O ] + ( 1 6 ) , 2 1 5 ( 2 5 5一D
环 ) ( 3 ) 。 H R E I一M S ( m / z ) : 4 2 8 . 3 6 7 0 ( e a -
e ld
.
f o r C
2 9
H
4 s
0
2 , 4 2 8
.
3 6 5 4 )
。 `
H
一
N M R
( C D C 1
3
)
:
a s
.
3 7 a n d 5
.
2 6 ( t o t a l I H
, a l l d d
,
J = 8
,
6 H
z , 2 3
一
H )
,
5
.
3 6 ( I H
,
b r d
,
J = 5
.
2
H z
,
6
一
H )
,
4
.
7 7 a n d 4
.
3 4 ( t o t a l I H
,
q
,
J = 6
.
4 H z
,
2 8
一
H )
,
3
.
5 3 ( I H
,
m
,
3
一
H )
,
2
.
7 8
a n d 2
.
5 2 ( t o t a l I H
,
m
,
2 5
一
H )
,
2
.
1 7
,
1
.
8 4
( m
,
2 2
一
H )
,
2
.
0 2 ( m
,
12日一 H ) , 1 . 4 5 ( m , 2 0 -
H )
,
1
.
2 7 ( 3 H
,
d
,
J 一 6 . 4 H : , 2 9一 C H 3 ) ,
1
.
1 7 ( m
,
1 2 a
一
H )
,
1
.
0 8 a n d 1
.
0 5 ( e a e h 3 H
,
d
,
J 一 6 . S H z , 2 6一 a n d 2 7一 C H 3 ) , 1 . 0 1 ( 3 H ,
s , 19
一
C H
,
)
,
0
.
9 2 ( 3 H
,
d
,
J = 6
.
4 H z
,
2 1
-
C H
3
)
,
0
.
7 1 ( 3 H
, s , 18
一
C H
3
)
。 “ C一 N M R
( C D C I
:
)己: 3 7 . 3 ( -C 1 ) , 3 1
.
7 ( -C 2 )
,
7 1
.
8 ( C
-
3 )
,
4 2
.
3 ( C
一
4 )
,
1 4 0
.
7 ( C
一
5 )
,
12 1
.
7 ( C
一
6 )
,
3 1
.
9 ( C
一
7 )
,
3 1
.
9 ( C
一
8 )
,
5 0
.
1 ( C
一
9 )
,
3 6
.
5
( C
一
10 )
,
2 1
.
0 ( C
一
1 1 )
,
3 9
.
7 ( C
一
12 )
,
4 2
.
4
( C
一
1 3 )
,
5 6
.
7 ( C
一
1 4 )
,
2 4
.
3 ( C
一
1 5 )
,
2 8
.
4
( C
一
1 6 )
,
5 6
.
2 ( C
一
17 )
,
1 1
.
9 ( C
一
1 8 )
,
1 9
.
4
( C
一
1 9 )
,
3 6
.
5 ( C
一
2 0 )
,
18
.
7 ( C
一
2 1 )
,
3 3
.
5
( C
一
2 2 )
,
1 2 3
.
0
,
12 3
.
3 ( C
一
2 3 )
,
1 4 9
.
1
,
14 9
.
5
( C
一
2 4 )
,
2 7
.
9 ( C
一
2 5 )
,
2 4
.
3 ( -C 2 6
, 一
2 7 )
,
6 6
.
7
,
6 7
.
6 ( C
一
2 8 )
,
2 1
.
5
,
2 1
.
7 ( C
一
2 9 )
。
化 合 物 fl : 黑 绿 色 胶 状 物 。 E l 一M S
( m /
z
)
: 8 8 6
,
8 2 7
,
6 0 8
,
5 4 9
,
2 7 8
。 ` H 一 N M R
( C D C I
:
)
: 己9 . 6 3 ( I H , s , 1 0一 H ) , 9 . 4 9 ( I H ,
s , 5
一
H )
,
8
.
6 6 ( I H
, s , 2 0
一
H )
,
7
.
9 7 ( I H
,
d d
,
J = 17
.
6
,
1 1
.
6 H z
,
3 1
一
H )
,
6
.
2 9 ( I H
,
d
,
J = 1 7
.
6 H z
,
3 2
一
H )
,
6
.
18 ( I H
,
d
,
J = 1 1
.
6 H 2
,
3 2
一
H
’
)
,
5
.
5 5 ( I H
,
b r s
,
O 于王) ,
5
.
2 4 ( I H
, z ,
J = 4
.
4 H
z ,
p h y t y l Z
一
H )
,
4
.
5 6
( Z H
,
d
,
J = 4
.
4玉12 , p h y t y l l 一 H ) , 4 . 5 0
( I H
,
b r d
,
J ~ 7
,
ZH
z , 1 8
一
H )
,
4
.
1 6 ( I H
,
b r d
,
J一 6 . 4 H z , 1 7一 H ) , 3 . 7 2 ( 3 H , s , 1 3` -
C H
3
)
,
3
.
6 4 ( Z H
,
q
,
J = 7
.
6 H
z , 8` 一 H ) ,
3
.
6 3 ( 3 H
, s , 7 ` 一C H 3 )
,
3
.
4 1 ( 3 H
, s , 2 ` -
C H 3 )
,
3
.
2 4 ( 3 H
, s , 1 2 ,
一
C H
3
)
,
2
.
9 6 ( I H
,
m
,
1 7 ` 一 H )
,
2
.
6 0 ( I H
,
m
,
1 7 2
一
H )
,
2
.
3 2
( Z H
,
m
,
17 ’ 一 H ` a n d 1 7 2
一
H
`
)
, 1
.
8 9 ( 2壬{ ,
t ,
J 一 7 . 6 H z , P h y t y 1 4一 H ) , 0 . 8 4 ( 6 H , d ,
J = 6
.
4 H
z ,
p h y t y l 1 5 a
一 a 丁: d 1 6
一
C H
3
)
,
0
.
8 0
( 3 H
,
d
,
J = 5
.
6 H
z ,
p h y t y l 7 a
一 o r l l a
-
C H
3
)
,
0
.
7 8 ( 3 H
,
d
,
J 一 6 . OH : , p lz y i y l 7 a -
o r 1 l a
一
C H
3
)
。 ` 3
C
一
N M R ( C D C 1
3
) 台: 1 4 2 . 9
( C
一
1 )
,
1 3 1
.
8 ( C
一
2 )
,
1 3 6
.
6 ( C
一
3 )
,
1 3 6
.
4
10 《中国海洋药物》杂志 2 0 0 3 年第 4 期 (总第 94 期 )
( C- 4 )
,
9 8
.
0 ( -C 5 )
,
15 5
.
3 ( C
一
6 )
,
1 3 6
.
2 9 2
.
7 ( C
一
2 0 )
,
12
.
2 ( C
一
2
`
)
,
1 2 9
.
0 ( C
一
3 , )
,
( C
一
7 )
,
14 5
.
0 ( C
一
8 )
,
1 5 0
.
3 ( C
一
9 )
,
1 0 4
.
3 1 2 2
.
8 ( -C 3
2
)
,
1 1
.
3 ( G 7
`
)
,
1 9
.
7 ( G S
`
)
,
( C
一
1 0 )
,
1 3 7
.
9 ( C
一
1 1 )
,
1 2 9
.
0 ( C
一
1 2 )
,
12 9
.
0 1 7
.
4 ( -C 8
2
)
,
1 2
.
2 ( C
一
1 2` )
,
1 8 9
.
5 ( C
一
1 3` )
,
( C
一
1 3 )
,
1 4 9
.
8 ( C
一
14 )
,
1 0 8
.
2 ( C
一
1 5 )
,
16 2
.
5 6 5
.
2 ( C
一
1 3 2 )
,
16 8
.
2 ( C
一
1 3 3 )
,
5 3
.
8 ( C
一
1 3 4 )
,
( C
一
16 )
,
5 2
.
0 ( -C 17 )
,
5 0
.
5 ( C
一
1 8 )
,
1 7 2
.
8 3 1
.
9 ( -C 1 7
1
)
,
2 9
.
6 ( C
一
1 7 2 )
,
1 7 2
.
9 (G 1 7
3
)
,
( -C 1 9 )
,
9 3
.
2 ( C
一
2 0 )
,
12
.
2 (G Z
`
)
,
1 2 9
.
0 2 2
.
6 ( C
一
1 8
,
) ; p h y t y l
:
6 1
.
3 ( -C 1 )
,
1 1 7
.
7
( C
一
3 ` )
,
12 3
.
5 ( C
一
3 2 )
,
1 1
.
3 ( C
一
7 ` )
,
1 9
.
7 ( C
一
2 )
,
1 4 2
.
7 ( C
一
3 )
, 1 6
.
4 ( C
一
3 a )
,
3 9
.
7 ( C
-
( C
一
8
`
)
,
1 7
.
3 ( C
一
8
2
)
,
1 2
.
4 ( C
一
1 2
`
)
,
19 1
.
9 4 )
,
2 4
.
8 ( C
一
5 )
,
3 6
.
6 ( -C 6 )
,
3 2
.
7 ( C
一
7 )
,
( C
一
13 ` )
,
8 9
.
0 ( C
一
13 2 )
,
1 7 3
.
4 ( C
一
13 3 )
,
5 3
.
5 19
.
7 ( C
一
7 a )
,
3 7
.
3 ( G S )
,
2 4
.
4 ( C
一
9 )
,
3 7
.
3
( -C 13
`
)
,
3 1
.
1 ( C
一
1 7 ` )
,
2 9
.
7 ( C
一
1 7 2 )
,
( C
一
1 0 )
,
3 2
.
7 ( C
一
1 1 )
,
1 9
.
7 ( C
一
1 1 a )
,
3 7
.
3
1 7 3
.
6 ( C
一
1 7 3 )
,
2 2
.
6 ( C
一
18 ` ) ; p h y t y l : 6 1
.
4 ( C
一
1 2 )
,
2 4
.
8 ( C
一
1 3 )
,
3 9
.
3 ( -C 14 )
,
2 7
.
9
( C
一
1 )
,
1 1 7
.
8 ( -C 2 )
,
1 4 2
.
9 ( C
一
3 )
,
1 6
.
3 ( C
一
1 5 )
,
2 2
.
6 ( C
一
1 5 a )
,
2 2
.
6 ( C
一
1 6 )
。
( G 3
a )
,
3 9
.
8 ( C
一
4 )
,
2 5
.
0 ( C
一
5 )
,
3 6
.
6 化合物 VI : 白色粉末 。 I R礁烹c m 一 ` : 3 3 1 5
( C
一
6 )
,
3 2
.
7 ( C
一
7 )
,
1 9
.
7 ( C
一
7 a )
,
3 7
.
4 ( O H )
,
1 7 3 1 ( C O O R )
,
1 4 7 2
。
E l
一
M S ( rn /
( C
一
8 )
,
2 4
.
4 ( C
一
9 )
,
3 7
,
3 ( C
一
1 0 )
,
3 2
.
7 2 )
: 4 7 0 ( 2 )
,
4 5 2 [ M
一
H Z O ]
+ ( 3 )
,
4 3 9巨M -
( C
一
1 1 )
,
1 9
.
7 ( G l l a )
,
3 7
.
3 ( C
一
12 )
,
2 4
.
8 C H
Z
O H ]
+ ( 9 )
,
3 9 7 [ C H
3
( C H
Z
)
2 4
C ( = O H )
( C
一
1 3 )
,
3 9
.
3 ( C
一
14 )
,
2 7
.
9 ( C
一
1 5 )
,
O H ]
+ ( 1 1 )
,
3 9 6 ( 1 2 )
,
3 7 9 ( 2 7 )
,
3 5 1 [ C H
3
2 2
.
7 ( C
一
1 5 a )
,
2 2
.
7 ( C
一
1 6 )
。
( C H
Z
) 2 4 ]
+ ( 1 7 )
,
3 3 7
,
3 2 3
,
3 0 9
,
2 9 5
,
2 8 1
,
化合物 1 : 黑绿 色胶状物 。 E l 一 M S ( m / 2 6 7 , 2 5 3 , 2 5 2 , 2 3 8 , 2 2 4 , 2 10 , 1 9 6 , 2 8 2 ,
z
)
: 8 7 0
,
8 4 2
,
5 9 2
,
4 2 8
,
2 7 9
。 ` I江一N M R 1 6 8 , 1 5 4 , 13 4「C H : = C ( 一O H ) 一O 一 C H Z一 C H
( C D C 1
3
)
: 己9 . 5 0 ( I H , S , 1 0一 H ) , 9 . 3 6 ( I H , ( 一 O H ) 一 C H Z O H ] + ( 7 2 ) 。 ` H 一 N M R ( D M S O -
s , 5
一
H )
,
8
.
5 6 ( I H
, s , 20
一
H )
,
7
.
9 5 ( I H
,
d 。 ) a : 4
.
5 8 ( I H
,
b
r
d
,
J = 5
.
Z H
z , 2
一
O H )
,
d d
,
J = 1 7
.
6
,
1 1
.
6 H z
,
3 ` 一 H )
,
6
.
2 8 ( I H
,
4
.
3 5 ( I H
,
b r t
,
3
一
O H )
,
4
.
0 5 ( I H
,
d d
,
J =
d
,
J = 1 8
.
4 H
z , 3 2
一
H )
,
6
.
2 6 ( I H
, s , 1 3 2
一
1 1
,
4
.
S H z
,
1
一
H a )
,
3
.
9 3 ( I H
,
d d
,
J ~ 1 1
,
H )
,
6
.
1 6 ( I H
,
d
,
J 一 1 1 . 6 H z , 3 2 一 H ` ) , 6 . 4 H z , 1一 H b ) , 3 . 6 5 ( I H , m , 2一 H ) , 3 . 3 7
5
.
1 5 ( I H
, t ,
J = 6
.
S H
z ,
p h y t y 1 2
一
H )
,
4
.
4 9 ( Z H
,
m
,
3
一
H )
,
2
.
2 8 ( Z H
, t ,
J = 7
.
Z H z
,
( 3 H
,
m
,
1 8
一
H
,
p h y t y l l
一
H )
,
4
.
2 4 ( I H
,
2
` 一
H )
,
1
.
5 4 ( ZH
,
b r t
,
J = 7
.
Z H
z , 3 `
一
H )
,
m
,
1 7
一
H )
,
3
.
8 8 ( 3 H
, s , 1 3` 一C H 3 )
,
3
.
6 8 1
.
2 6 ( 4 4 H
,
b r s
,
4 `一 2 5 `一 H ) , 0 . 8 7 ( 3 H , t ,
( 3 H
, s , 7 ` 一 C H 3 )
,
3
.
6 4 ( Z H
,
q
,
J = 7
.
Z J = 6
.
S H
z , 2 6
` 一
C H
3
)
。 ’ 3
C
一
N M R ( D M S O
一
d
6
)
H
z , 8 ` 一 H )
,
3
.
3 9 ( 3 H
, s , 2` 一 C H 、 )
,
3二 Z o a : 1 7 2 . 7 ( -C 1 ’ )
,
6 9
.
3 ( C
一
2 )
,
6 5
.
4 ( C
一
1 )
,
( 3 H
, s , 1 7 ` 一 H )
,
2
.
6 1 ( z H
,
m
,
17 ` 一 H )
,
6 2
.
7 ( C
一
3 )
,
3 3
.
4 ( C
一
2 , )
,
3 1
.
1 ( C
一
2 4 ` )
,
2
.
4 7 ( I H
,
m
,
17 2
一
H )
,
2
.
2 6
,
2
.
2 0 ( e a e h 2 8
.
7
,
2 8
.
4
,
2 8
.
3 ( G 4
`一 2 3 ` ) , 2 4 . 3 ( C -
I H
,
m
,
1 7 ` 一 a n d 1 7 ,
一
H
`
)
,
1
.
8 6 ( 3 H
,
d
,
J 3
`
)
,
2 1
.
5 ( C
一
2 5
`
)
, 一3 . 6 ( C 一 2 6 ` ) 。
= 7
.
Z H z
,
1 8` 一 C H 3 )
,
1
.
6 9 ( 3H
,
t
,
J = 7
.
6 化合物 V 和 VI : 白色粉末 。 I R礁乳e m ` :
H z
,
8 2
一
C H
3
)
,
1
.
6 1 ( 3 H
, s , p h y t y l 3 a
一
3 2 4 0 ( O H )
,
1 7 3 1 ( C O O R )
,
1 4 6 9
口
E l
一
M S
C H
3
)
。 ` 3
C
一
N M R ( C D C I
:
) a
: 1 4 2
.
7 ( C
一
1 )
,
( m / z )
: 3 3 0 ( 2 6 )
,
3 12 ( 4 )
,
3 0 0 ( 1 5 )
,
2 8 3
1 3 2
.
2 ( C
一
2 )
,
13 6
.
8 ( C
: 3 )
,
1 3 6
.
6 ( C
一
4 )
,
( l )
,
2 6 9 ( 9 )
,
2 6 4 ( 1 5 )
,
2 5 7 ( 2 6 )
,
2 5 6 ( 10 )
,
9 8
.
1 ( C
一
5 )
,
1 5 5
.
6 ( C
一
6 )
,
1 3 6
.
4 ( C
一
7 )
,
2 3 9 ( 5 6 )
,
2 2 7 ( 3 )
,
2 1 1 ( 4 )
,
2 0 9 ( 1 9 )
,
1 8 1
14 4
.
9 ( C
一
8 )
,
1 5 0
.
9 ( C
一
9 )
,
1 0 5
.
6 ( C
一
10 )
,
( 4 )
,
13 4 ( 4 7 )
,
1 13 ( 7 )
,
1 1 1 ( 3 2 )
,
9 9 ( 5 )
,
9 7
1 3 7
.
7 ( C
一
1 1 )
,
1 2 9
.
0 ( C
一
1 2 )
,
1 2 9
.
0 ( C
一
1 3 )
,
( 3 7 )
,
9 1 ( 3 )
,
8 5 ( 6 )
,
7 1 ( 1 9 )
,
5 7 ( 1 0 0 )
。
14 9
.
8 ( C
一
1 4 )
,
1 0 5
.
0 ( C
一
1 5 )
,
1 6 1
.
4 ( C
一
1 6 )
, ’
H
一
N M R ( C D C 1
3
)己: 5 . 3 4 ( m , 8 ’ 一 , 9 `一 H ,
5 1
.
0 ( C
一
1 7 )
,
5 0
.
3 ( C
一
18 )
,
17 1
.
3 ( C
一
19 )
, 砚 ) , 4 . 1 9 ( d d , J = 1 1 . 6 , 5 . Z H z , 1一 H a ) ,
《中国海洋药物 》杂志2 0 03 年第4 期( 总第9 4 期 )
4
.
4 1(d d
,
J “ 1 1 . 6 , 6 . 4H z , l 一 H b ) , 3 . 9 3
( m
,
2
一
H )
,
3
.
6 9 ( d d
,
J 一 1 1 . 6 , 4 . OH z ,
3
一
H a )
,
3
.
5 9 ( d d
,
J = 1 1
.
6
,
6
.
4 H z
,
3
一
H b )
,
2
.
3 2 ( t
,
J = 8
.
OH z
,
2
` 一
H )
,
2
.
0 1 ( m
,
7 `一 ,
1 0
` 一
H
,
VI )
,
1
.
6 3 ( m
,
3
` 一
H )
,
1
.
3 0 ( m
,
4 `一
1 5
` 一
H
,
V ; 4
`一 6 ` 一 H , 1 1`一 1 3 ` 一 H , VI ) ,
0
.
8 8 ( t
,
J = 6
.
S H z
,
1 6
一
C H
3 ,
V
; 1 4
一
C H
3 ,
VI )
。 ` 3
C
一
N M R ( C D C 1
3
) 6
: 6 5
.
0 ( C
一
1 )
,
7 0
.
2
( C
一
2 )
,
6 3
.
3 ( C
一
3 )
,
1 7 4
.
4 ( -C 1
`
)
,
3 4
.
1
( C
一
2
`
)
,
2 4
.
9 ( C
一
3 ` )
,
2 7
.
2
,
2 7
.
1 (G 7
` , 1 0
’ ,
VI )
,
1 3 0
.
0
,
1 2 9
.
7 ( -C 8
` , 9 ` , VI )
,
3 1
.
9
( C
一
14 ,
,
V ; -C 12
’ ,
VI )
,
2 2
,
6 ( C
一
1 5 `
,
V ;
G 13
` ,
VI )
,
2 4
.
1 ( C
一
1 6
, ,
V ; C
一
1 4 `
, 班 ) ,
2 9
.
1一 2 9 . 7 ( n C ) 。
2 结果与讨论
2
.
1 结构鉴定
化合物 I : 白色粉 末 , H R E I一M S 推 出分
子式为 C 2 9 H 4 8 O : 。 ` H 一N M R 中可观察到 1个
烯质子 a s . 3 6 ( b r d , J 一 5 . Z H z , 6一 H ) , 1 个多
重峰 6 3 . 5 3 ( I H , 3一 H )和 2 个角 甲基 6 0 . 7 1 ,
1
.
0 1 ( 1 8
一
C H
3 a n d 1 9
一
C H
3
) 信 号 , 与岩藻 街
醇 〔习相似 , 而侧链部分质子信号则有显 著差
别 , 推测 I 也具 有 5一烯一 3一醇 结构 的街体母
核 。 借 助 D E P T 和 H M Q C 谱 , 对 工 的
`
H
一
N M R 和 ` 3 -C N M R谱进行仔细分析 , 表明
有 6 个 甲基 , 9 个亚甲基 , 10 个次甲基和 4 个
季碳的存在 。 1个烯质子信号 [肠 . 37 和 5 . 26
( t o t a l I H
, e a e h d d
,
J = 8
,
6 H
z , 2 3
一
H ) ]和
2 组烯碳 信 号 [ ( 己1 2 3 . 0 和 1 2 3 . 3 , C 一 2 3 ) ,
帖 1 4 9 . 1 和 1 4 9 . 5 , C 一 2 4 )〕表 明了 1 个 三取
代双键的存在 。 在 斜 . 7 和 4 . 34 处 2 个四
重峰 ( t o t a l I H , J = 6 . 4 H z , 2 8一 H ) , 己1 . 2 7
处 1 个双重峰 (3 H , 29 一 C H 3 ) 及 2 组碳信号
[ ( a6 6
.
7 和 6 7 . 6 , C 一 2 8 ) , ( a 2 1 . 5 和 2 1 . 7 ,
-C 2 9 )〕 , 提示可能存在 1 个与甲基和季碳相
连的连氧次甲基 。 此外 ,侧链上 尚存在其它
3 个 甲基 , 其碳 和质 子 信 号 分 别 出现 在 a
1 8
.
7
,
2 4
.
3
,
2 4
.
3 和 ao . 9 2 ( d , J = 6 , 4 H z ) ,
1
.
0 5 ( d
,
J = 6
.
S H z )
,
1
.
0 8 ( d
,
J = 6
.
S H z )
。
考虑以上 信息 , 并结合分 子式 , 推测在侧链
28 位连有 1 个经基 ,且 I 为 28 位异构体的
混合物 。 这一推测得到了 H M B C 谱的验证 。
在 H M B C 谱 中 , 可 观察到 2 9一 H : 与 C 一 2 4 ,
一
2 8
,
2 8
一
H 与 C一 2 5 , 2 7一 H 3 与 C 一2 4 , 一2 5 ,
一
2 6
,
2 6
一
H
3 与 C 一 2 4 , 一 2 5 , 一 2 7 , 2 5一 H 与 C -
2 3
, 一
2 4
, 一
2 6
, 一
2 7
, 一
2 8
,
2 3
一
H 与 C一 2 5 , 一 2 8 ,
2 2
一
H 与 C一 2 0 , 一2 3 , 一 2 4 以及 2 1一 H 3 与 C 一 2 0 ,
一
2 之间均存在远程相关信号 , 由此确定 了
街体母核上连接的侧链结构 ,从而 I 的平面
结构可推定 为 3 , 2 8舟一二经基 一 24 一乙 基一 5 , 2 3 -
胆 幽 二 烯 。 23 位 双 键 的 立 体 构 型 根 据
N O E S Y 谱确定 : 可观察 到 23 一 H 与 26 或 27
位甲基 的 N O E 信号 , 而 2 3一 H 与 29 位 甲基
则没有 N O E 效应 , 因此 , 23 位双键应为顺式
构型 。 N O E S Y 谱 中尚观察到 1 2 p一 H / 2 1一 H 3
和 18一 H / 2 0一 H 的相关峰 ,从而进一步确证 了
侧链的 17 日构型 。 根据以上分析 ,推定化合
物 工为 3日, 2 8芝一二经基 一 24 一乙基 一 5 , 2 3 2 一胆 街
二烯 。
化合物 n : 黑绿色胶状物 。 IE 一 M S 推出
相对分子质量为 8 6 , 另有 6 0 8 [ M 一 p h y t y l十
H犷 和 2 7 8仁P h y t y l一 H〕+ 的碎片离子 。 N M R
谱显示为叶绿素类叶琳化合物 。 与 1 3 2 一经基
脱镁 叶绿素 a 的光谱数据对 照比 5二 , 基本 一
致 , ` H 一N M R 中 古5 . 5 5 ( 1 3 2 一 O H ) 和 4 . 1 6
( 17
一
H )信号表明 C 一 13 2 为 S 构型 63[ 。 因此确
定 1为 1 3“ S 轻基脱镁叶绿素 a 。
化合物 1 : 黑绿色胶 状物 。 1E 一 M S 推 出
相对分子质量为 8 7 。 。 光谱数据与脱镁叶绿
素 a 一致以 5 , ,从而确定了其结构 。
化合 物 W : 白色粉末 。 I R , ’ H 一N M R 和
, 3
C
一
N M R谱显示 典型的长链脂肪 酸甘油 酷
特征 。 ’ 3 C 一N M R 中 a 6 . 9 3 ( C 一2 ) , 6 5 . 4 ( C一 1 )
和 6 2 . 7 ( C 一 3 )及 1 7 2 . 7 ( C O )表明为 1一长链梭
酸甘油醋阅 。 酞基部分其它碳的信号出现在
己3 3 . 4 , 3 1 . 1 , 2 8 . 7一 2 8 . 3 , 2 4 . 3 , 2 1 . 8 ( 均
为 C H Z ) 和 13 . 6 ( C H 3 ) 。 ` H一 N M R 谱中 ,甘油
部分 5 个 H 分 别 出现 在 叔 . 05 ( 1一 H a) ,
3
.
9 3 ( 1
一
H b )
,
3
.
6 5 ( 2
一
H )
,
3
.
3 7 ( 3
一
H ) ; 而
己4 . 5 8 和 4 . 3 5 的氢信号分别可归属为 2一 O H
和 3一O H 。 酞基部分的氢信号 出现在 韶 . 28 ,
1
.
54
,
1
.
26 和 0 . 87 。 以 上 N M R 数据与 文
献「7〕中一直链饱和梭酸甘油醋的基本一致 。
IE
一
M S 中分子离子峰 m z/ 4 70 和碎片峰 3 9 6
《中国海洋药物》杂志 20 0 3年第 4期 (总第 9 4期 )
〔 C H 3 ( C H。 ) 24 C O O H〕 +, 3 7 9 [ C H 3 ( C H : ) 2 4
CO〕+ 表明W中的酞基为二十六烷酞基 。 其
它一系列碎片离子信号均佐证 了上述推测 。
从而确定该化合物为 1一0 二十六烷酞基甘油
醋 (即 1一 0 蜡酞基甘油醋 ) 。 生物学上 ,单甘油
酷是许多磷脂类反应的重要产物或中间体 。
化合物 V 和 VI : 白色粉末 。 I R 显示经基
和醋 拨基吸 收 。 ` H 一 N M R 和’ 3 C一 N M R 显示
典型的长链脂肪酸甘油醋特征 。 与 V1 相似 ,
, 3
C N M R中 台7 0 . 2 ( C H ) , 6 5 . 0 ( C H : ) , 6 3 . 3
( C H
Z
) 和 ` H 一 N M R 中 占4 . 1 9 ( 1一 H a ) , 4 . 1 4
( 1
一
H b )
,
3
.
9 3 ( 2
一
H )
,
3
.
6 9 ( 3
一
H a )
,
3
.
5 9
( 3
一
H b) 表明该组 分 为 1一长链 梭酸 甘油 醋 。
碳谱 中出现烯碳信号 阻 30 . 。 , 12 9 . 7 及其相
邻碳信号 a 2 7 . 2 , 27 . 1 , 氢谱中亦相应 出现烯
氢信号 台5 . 3 4 ( m ) 及 其 相邻 氢 信号 台2 . 0 1
( m )
,提示酞基部分可能含有双键 , 且双键为
顺式 构型 〔 8二 。 参考 文献 [ 7 一 9〕并经 ’ H 一 , H
C O S Y
,
H M Q C 和 H M B C 分析 ( 见图 1 ) , 可
归属其它碳和氢 的信号 。 IE M S 中 , 非常明
显地 出现两个系列 的碎片离子峰 。 a 系列 中
m /
2 3 3 0 [ M
a 〕+ , 3 12 [ M a 一 H ZO ] + , 2 5 7二C H :
( C H Z ) z 4 C ( = O H ) O H 〕` , 2 3 9 [ C H : ( C H : )
1 4 C O 〕+ , 2 1 1「C H : ( C H : ) 、 ` 〕十 , 及 1 1 3 , 9 9 ,
8 5
,
7 1
,
5 7 等一系列相差 C H : 的烷基碎片
离子表明 . a 为 l 一 O一十六烷酞基甘油酷 , 即棕
搁精 ,与文献报道光谱数据一致川 。 b 系列
中 m / 2 3 0 0「M b〕+ , 2 0 9 (十 四碳烯酞离子 ) ,
1 8 1 ( 十三 烷基 离 子 ) 及 相应 碎 片离 子 2 83
「M b一O H ] + , 2 6 9 仁M b 一C H Z O H 〕+ , 2 6 4
[ M b
一
Z H
Z
O ]
+ , 2 2 7( 十四碳烯酸麦氏重排离
57 [ C
4
H
。 〕+ 确定为位于 8 `位 。 综上所述 , 推
定该组分为 1一 0 一十六烷酞基 甘油酷 ( V ) 和
1
一
O
一
( 8 2
一十四碳烯酞基 ) 甘油醋 ( VI ) 的混合
物 , 其 中 VI 为一 新 天 然 产 物 。 曾 试 图 用
H P L C 将 2个成分分离 ,但未获成功 ,有待改
进条件做进一步拆分 。
2
.
2 生物活性筛选结果
稻瘟霉模型活性测试 ,化合物 I 一 1 具
有诱导稻瘟霉菌丝 变形活性 , 最小菌丝变形
浓 度 ( M M D C ) 分 别 为 1 4 7 , 2 8 2 和
28 7拼m ol · L ` 。 采用 M T T 法测定化合物 工
对人早幼粒细胞白血病 H -L 60 的 I C : 。 为 7 . 8
m g
·
L
, 。 采用硫氰酸胺 B 微板筛选法 [`。二测
定化合物 1 和 1 在 20 m g · L 一 , 浓度时对人乳
腺癌细胞 M C F 一 7 的抑制百分率分 别为 45 %
和 15 % ,对人肺癌细胞 A 5 49 的抑制百分率
分别为 26 %和 n % 。
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参考文献
「1〕 张金鼎 . 海洋药物与效方 [ M口. 北 京 中医 古籍 出版
社 , 19 98 : 9 0 .
〔2」 K o b a y a s h i H , N a rn i k o s h i M , Y o s h l m o t o T · e r o l . A
s e r e e n i n g m e t h o d fo
r a n t im i t o t i e a n d a n t i f u n g
a
l
: 口b 、 t a n e c s
u s i n g e o n id i a o f P 〕 , r i c u l a r艺a o , , , , : a e , m o d 一f一e a t 一o n a n d a p -
p l i e a t i o n t o t r o p : e a l m a r i n e f u n g i〔J口. J A , , t : b Z〔, r ; ` 、 , 2 9 9 6 ,
4 9 ( 9 )
:
8 7 3
.
仁3」 汤海峰 . 易杨华 , 姚新生 , 等 . 褐藻铁钉 菜中的 当醇
成分仁月 . 中国海洋药物 , 2。。 2 , 2 1 ( I ) : 1 .
[ 4〕 D a , R , S h o e m a k e r R , F a r r e n s D , ` · , 、 之 2 . C h a : a e t e r , z a -
t l o n o f s i lk w o r m e h l o r o p h y l l m e t a b o l l t e
、 、 , a n a e t l 、 、 、 p h o t o
-
s e n , i t i z e r f o r ph o t o d y n a m i。 t h e r a p y 仁J门. 了 N “ : P r o d ,
1 9 9 2
,
55 ( 9 )
:
1 2 4 1
.
[ 5三 M a t s u o A , O n o K , H a m a s a k i K , 。 r 0 1 . P h a e o p h y t i n s
f
r o m a e e ll s u s p e n s i o n e u l t u r e o f t h e 11
v e r w o
r , P l a g zo e h l l a
o v a li f o l i a 「J〕 . P h夕 t o e h e 沉 i s t r 。 , , 1 9 9 6 , 4 2 ( 2 ) : 4 2 7 .
〔6 〕 N a k a t a n i Y , O u r i s s o n G , B e e k J P . C h o m , s t : y a n d
b i o e h e m i s r r y o f Ch i n e s e d r u g s W
.
C y t o s t a t
, e ph e o p h y t i n s
f r o m s i lk w o r m e xc r e t a
,
a n d d e r i
v e d p h o t o e y t o t o x 一e p h e o -
p h o r b id e s仁J」. hC e m P 人a r m B u l l , 2 9 8 1 , 2 9 ( 8 ) : 2 2 6 1 .
「7」 袁瑾 , 胡 旺云 . 3 仁长直链 饱 和 梭 酸 甘油 酷 的 1“ C ,
I H N M R 的研究〔J〕. 波谱学杂志 , 1 9 9 3 , 10 ( 2 ) : 18 5 .
仁8〕 J u n g J H , L e e H , K a n g 5 5 . D ia e y lg ly e e r y lg a l a e t o s , d e s
f r o m A
r i s a e m a
a
m u er n :
。
[ J〕. P人夕 t o o h 。 , n i s t ,一。夕 , 19 9 6 , 4 2
( 2 )
: 4 4 7
.
仁9 ] 傅宏征 , 蔡少青 , 冯锐 , 等 毛梗稀签化学 成分的研
究 ( 1 )仁J ] . 中国药学杂 志 , 1 9 9 8 , 3 3 ( 5 ) : 2 7 6 .
[ 2 0 ] S k
e h a n P
,
S t o r e n g R
,
S e u d i e r o D
, 。 2 u z
.
N e w c o l
-
o r lm e r r i e e y t o t o x i e i r y a s s a y f o r a n t z e a n e e r
一
d r u g s e
r e e n i n g
仁J〕二 I N a t l aC n c e r l n 、 t , 19 90 , 8 2 : 1 10 7 .
(收稿 日期 : 2 0 0 2 一 1 0一 1 2 )
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图 1 化合物 V 和 研的 H M B C 和
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H C ( ) S Y 示意 图
子 )提示 b 为 1一O 一十 四碳烯酞基甘油酷 。 双
键位置主要根据较明显的烷基碎片离子 m / z
1 1 1 [ C
。
H
1 5 〕+ , 9 7 [ C 7 H 13 〕+ , 7 1 [ C S H , , ] + ,