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中外医疗
中外医疗 CHINA FOREIGN MEDICAL TREATMENT
2009 NO.03
CHINA FOREIGN MEDICAL TREATMENT 论 著
午时茶是由厚朴、川芎、苍术、陈皮、枳实、柴胡、羌活、
防风、白芷、广藿香、连翘、前胡、紫苏叶、山楂、麦芽、甘草、六
神曲、桔梗等组成的中药复方制剂，具有解表和中的作用。临床上主
要用于感受风寒，内伤食积，寒热吐泻的治疗。本文采用薄层色谱法
和高效液相法对午时茶进行更好的质量监控。
1 仪器、试药与药品
Agilent1200高效液相色谱仪;ZORBAX C18(250mm×4.6mm，
5m)HPLC 色谱柱;TU－1901型紫外可见分光光度计;METTLER
AE240电子天秤;KQ-500DE型超声波清洗器;CMAG REPROSTAR
Ⅱ型号成像系统;硅胶G板(青岛海洋化工研究所);甲醇:色谱纯，
Merck KGaA；水为超纯水；其余试剂均为分析纯；橙皮苷(中
国药品生物制品检定所，批号：110721-200211)、川芎对照药材(中
国药品生物制品检定所，批号：120918-200505)、厚朴对照药材(中
国药品生物制品检定所，批号：121285-200501);大孔吸附树脂
D101；午时茶及阴性对照（广州王老吉药业股份有限公司提供）。
2 实验方法与结果
2.1 川芎薄层色谱鉴别
2.1.1 供试品溶液的制备 取本品20g,加石油醚(30～60℃)
80mL，加热回流30min，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯1mL使溶
解，作为供试品溶液。
午时茶质量标准研究
邵燕虹 宋丽莉
（广州王老吉药业股份有限公司 广东广州 510450）
【摘要】目的 为控制午时茶的质量,建立川芎、厚朴的薄层色谱鉴别和枳实与陈皮的高效液相含量测定。方法 采用薄层色谱
法,鉴别午时茶中的川芎药材、厚朴药材;用高效液相法测定枳实和陈皮药材中的橙皮苷总含量。结果 鉴别方法：操作简单，专属
性强，重复性好，阴性对照无干扰;含量测定方法:操作简单，准确，橙皮苷在12.36～197.75ug之间呈良好的线性关系，橙皮苷的回
收率为96.86%。结论 本质量标准能有效地控制午时茶的质量。
【关键词】午时茶 川芎 厚朴 橙皮苷 高效液相色谱法 薄层色谱
【中图分类号】R22 【文献标识码】A 【文章编号】1674-0742(2009)01(c)-0024-03
Study on the Quality Standard for Wushi Cha
SHAO Yan hong SONG Li li
Guangzhou Wanglaoji Pharmaceutical Company Limited,Guangzhou 510450 China
【Abstract】Objective In order to control the quality of Wushi Cha, we establish TLC method for identification
of rhizoma chuanxiong, cortex magnoliae officinalis; and establish determination method the content of
fructus aurantii immaturus and pericarpium citri reticulatae in Wushi Cha.by HPLC.Methods Using the TLC method
for identification of rhizoma chuanxiong, cortex magnoliae officinalis; Using the HPLC methods for determi-
nation the contents of Hesperidin in Wushi Cha. Results The result show that TLC method is simply, specific
reproducible,and it can be use for determining three substances in Wushi Cha; HPLC method established is
simply, accurate and has a good linearity in the rang of 12.36～197.75μg with a m an rec very of Hesperid
in as high as 96.86%. ConclusionThis quality standard can control the quality of Wushi Cha effectively.
【Key Words】Wushi Cha;Rhizoma chuanxiong;Cortex magnoliae officinalis;Hesperidin;HPLC;TLC
图1 川芎薄层色谱图
注：1、2、3：午时茶样品(批号:080301、080902、 80903）;
4:川芎对照药材;5:阴性对照溶液
图2 厚朴薄层色谱图
注:1、2、3:午时茶样品(批号：080901、 80902、 80903)
4:厚朴对照药材，5:阴性对照溶液
DOI:10.16662/j.cnki.1674-0742.2009.03.022
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2.1.2 对照品溶液的制备 取川芎对照药材0.1g,同法制成对
照药材溶液。
2.1.3 阴性溶液的制备 取缺川芎的样品，同供试品溶液制
法制成川芎阴性溶液。
2.1.4 色谱条件 照薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部
附录VIB)试验，供试品溶液和阴性供试品溶液各10μL，对照品溶
液2μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷－乙酸乙酯(9:1)
为展开剂，展开、取出、晾干、置紫外光灯(365nm)下检视。供
试品色谱中，在与川芎对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的
荧光斑点。阴性无干扰。结果见附图1。
2.2 厚朴薄层色谱鉴别
2.2.1 供试品溶液的制备 取本品10g，加石油醚(60～90℃)
50mL,密塞,超声30min,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇1mL使溶解，
作为供试品溶液。
2.2.2 对照品溶液的制备 取厚朴对照药材0.5g，同法制成
对照药材溶液。
2.2.3 阴性溶液的制备 取缺厚朴的样品，同供试品溶液制
法制成厚朴阴性溶液。
2.2.4 色谱条件 照薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部
附录VIB)试验，吸取上述2种溶液各10μL,分别点于同一硅胶G薄
层板上，以甲苯－甲醇(27:1)为展开剂,取出,晾干,置紫外光灯
(365nm)下检视。供试品色谱中，在与厚朴对照药材色谱相应的位置
上，显相同颜色的荧光斑点。阴性无干扰。结果见附图2。
2.3 含量测定
2.3.1 测定波长选择 采用紫外分光光度计，对橙皮苷对照品
溶液在200～400nm波长范围内进行扫描，在283nm波长处有较强的
吸收，结合《中国药典》(2005年版一部)陈皮质量标准，选定283nm
表1 午时茶加样回收率试验测定结果
表2 午时茶不同提取方法试验测定结果
表3 午时茶不同色谱柱试验测定结果
图3 峰283.00nm1.1017橙皮苷光谱图
表4 样品测定结果
图4 从上至下分别为：橙皮苷对照品、供试品、缺陈皮和枳实的阴性对照HPLC图
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为检测波长。结果见附图3。
2.3.2 色谱条件 乙腈-0.2%磷酸(17:83)为流动相;ZORBAX
SB-C18(250mm×4.6mm×5μm)HPLC 色谱柱;检测波长:283nm;
柱温30℃;进样量为10μL;理论板数按橙皮苷峰计算应不低于2000。
2.3.3 溶液配制 (1)供试品溶液的配制:取本品3g,精密称
定，置锥形瓶中,加乙醇50mL,加热回流60min,放冷，滤过，滤渣再
加乙醇50mL，加热回流30min,放冷，滤过,用少量乙醇洗涤容器及
滤渣，合并滤液，蒸干，残渣加水15mL使溶解，置分液漏斗中，用
乙醚提取3次(20mL，15mL,15mL)，弃去乙醚液。水液浓缩至近5mL，
加到预先处理好的大孔吸附树脂D101柱(内径1.5cm，柱高15cm)上，
用水50mL洗脱，弃去水液，再用20%乙醇50mL洗脱，弃去20%乙
醇洗脱液，继用50%乙醇100mL洗脱，收集洗液，蒸干，残渣加甲
醇适量使溶解，转移至25mL量瓶中，加甲醇至刻度摇匀，即得。(2)
对照品溶液的配制:精密称取橙皮苷对照品适量，加甲醇制成每1ml
含45μg的溶液，摇匀，即得。(3)阴性对照品溶液的配制:按午时茶
处方配制缺陈皮和枳实药材的样品，按供试品溶液的制备方法，取同
样比例的量，制备缺陈皮和枳实的阴性对照溶液。
2.3.4 专属性考察 在上述色谱条件下，按2.3.2项下操作，
将橙皮苷对照品溶液、供试品溶液、缺化橘红的阴性对照溶液，注入
液相色谱仪中，得HPLC图，结果阴性对照无干扰。结果见附图4。
2.3.5 线性关系考察 取橙皮苷对照品。分别为每毫升各含
12.36μg、24.72μg、49.44μg、98.75μg、118.65μg、197.75μg,进样量
为10μL，样按上述色谱条件测定各峰面积。以峰面积积分值为纵坐
标，各对照品的浓度为横坐标，绘制标准曲线，计算得回归方程:橙皮
苷:Y=18.803X-2.156，r=0.9999;表明橙皮苷在12.36～197.75μg
之间呈良好的线性关系。
2.3.6 精密度试验 取对照品溶液10μL,连续进样5次，测
定峰面积值，计算得橙皮苷的峰面积分值RSD为0.79%。结果说明所
建立方法的精密度良好。
2.3.7 稳定性试验 取同一供试品溶液,在0、2、4、6、
8、10、12h内,分别进样10μL,测定峰面积值,计算得橙皮苷峰面积
分值RSD为0.88%。结果说明制备的供试品溶液在12h内稳定。
2.3.8 重复性试验 精密称取同一批号样品，按供试品溶液制
备方法平行制备6份，依法测定，计算，橙皮苷含量的RSD为1.36%。
结果说明该方法重复性良好。
2.3.9 加样回收率试验 精密称定已知含量的午时茶样品3.0g，
分别精密加入橙皮苷对照品溶液，按2.3.2项下方法测定，计算回收率，
结果见表1。
2.3.10 不同提取方法试验 精密称定同一批号的样品4份各
3.0g，分别置锥形瓶中，加乙醇50mL，二份加热回流60min，放冷，
滤过，滤渣再加乙醇50mL，加热回流30min,放冷 滤过,用少量乙醇
洗涤容器及滤渣，合并滤液，蒸干;另2份超声提取2次，每次40min，
滤过,用少量乙醇洗涤容器及滤渣，合并滤液，蒸干；再分别将残渣
加水15mL使溶解，置分液漏斗中，用乙醚提取3次（20mL,15mL,
15mL）,弃去乙醚液。水液浓缩至近5mL,加到预先处理好的大孔
吸附树脂D101柱(内径1.5cm，柱高15cm)上，用水50mL洗脱，
弃去水液，再用20%乙醇50mL洗脱，弃去20%乙醇洗脱液，继用50%
乙醇100mL洗脱,收集洗液,蒸干，残渣加甲醇适量使溶解，转移至
25mL量瓶中，加甲醇至刻度摇匀，即得，进样。结果见表2。
2.3.11 不同色谱柱试验 精密称取本品三批次，按2.3.2项
下的测定方法，分别用A.Diamonsil(钻石)C18(250mm×4.6 m，5 )、
B.依利特Hypersil ODS(250mm×4.6mm,5 )二根柱子测定，计算
含量。样品在不同色谱柱下测定，皆能得到满意的结果，结果显示不
同色谱柱对测定的影响不大。见表3。
2.3.12 样品测定 分别精密称定不同批号的午时茶，按2.3.3
项下操作，在上述色谱条件下对3批午时茶进行HPLC分析，结果见
表4。
3 讨论
3.1 因本品含色素、粘液等杂质比较多，故对橙皮苷峰造成干扰，
同时也为了保护色谱柱，故采用大孔吸附树脂D101过柱处理样品。
3.2 分别采用超声提取和加热回流提取方法提取，结果加热回流
提取方法提取比较完全，故采用加热回流提取方法提取作为本文含量
测定的方法。
参考文献
[1] 国家药典委员会.中国药典(2005年版)一部[S].北京:化学工业出
版社,2005:176,附录ⅥD.
[2] 中华人民共和国卫生部药品标准－中药成方制剂(第13册)[S].1997:
36.
[3] 刘卫红.HPLC法测定橙皮苷含量[J].中国实验方剂学杂志,2006,
12(6):70～71.
【收稿日期】2008-11-06