全 文 ：第 28 卷第 4 期(第 5 页)
2011 年
湖北民族学院学报·医学版
Journal of Hubei University for Nationalities·Medical Edition
Vol． 28 No． 4 P． 5
2011
基金项目 湖北省自然科学基金项目(2008CDA068) ;湖北省卫生厅青年科技人才项目(QJX2010 － 26) ;湖北民族学院博
士启动基金项目(MY2010B003)。
作者简介 杨瑾(1981 － ) ，女，湖北恩施人，博士，主要研究方向:民族医药。
天山堇菜挥发油提取时间及抗炎作用研究
杨 瑾，阳 辉，陈龙全，沈正龙
湖北民族学院医学院(湖北 恩施，445000)
【摘要】目的 探讨天山堇菜挥发油的提取和抗炎作用。方法 考察蒸馏时间对挥发油提取率的影响，采用二甲苯
引起小鼠的炎性水肿考察其挥发油的抗炎作用。结果 水蒸气蒸馏 6 h，挥发油提取量最大，可达 0． 76%;挥发油
能显著抑制小鼠耳肿胀。结论 天山堇菜挥发油具显著的抗炎作用。
【关键词】天山堇菜;挥发油;提取;抗炎作用
【中图分类号】R284． 2 【文献标识码】A 【文章编号】1008 － 8164(2011)04 － 0005 － 03
A Study on Extraction Technology and Anti － inflammatory Effect
of Essential Oil of Viola tianshanica
YANG Jin，YANG Hui，CHEN Long － quan* ，et al．
(School of Medicine，Hubei University for Nationalities，Enshi 445000，China)
【Abstract】Objective To investigate the extraction technology and anti － inflammatory effect of
essential oil of Viola tianshanica． Methods Extraction technology was researched with different
distillation time and anti － inflammatory effect was tested with swelling of mice induced by xy-
lene．Results Steam was distilled for 6 h，with the largest amount extraction being 0．76%．The
essential oil can significantly inhibit the ear swelling in mice．Conclusion The essential oil has
significant anti － inflammatory effects．
【Key words】Viola tianshanica;essential oil;extraction;anti － inflammatory effect
天山堇菜 Viola tianshanica Maxim．为堇菜科 Vi-
olaceae 堇菜属植物，多年生草本，以全草入药［1］。
Binafuxi为天山堇菜的维吾尔医习用名称，有调理、
软化、发汗的作用，主要用于各种发烧、受寒、感冒、
咽炎、疔疮肿痈等症，在新疆和田地区民间广泛应
用。《维吾尔药志》记载，天山堇菜“微苦，辛，凉”，
“清热解毒，主要用于感冒发热、疔疮中毒、淋巴肿
大”［2］。天山堇菜的化学成分以及药理活性都少有
文献报道，作者立足对天山堇菜乙醇提取物的体外
抗肿瘤实验筛选，跟踪发现活性成分主要集中在低
极性部分［3，4］。天山堇菜挥发油成分的 GC － MS 分
析与抗菌活性之前有过报道，其提取工艺、抗炎作用
目前还未见报道。作者对天山堇菜挥发油的提取时
间进行了考察，并设计急性炎症模型对其抗炎作用
进行初步探讨。
1 材料与方法
1． 1 仪器与试剂 FZ － 102 微型植物样品粉碎机
(上海安锐自动化仪表有限公司) ;SK3200HP 超声
仪(上海科导超声仪器有限公司) ;Sartorius 电子分
析天平;标准检验筛(20 目，浙江省上虞市五四纱筛
厂) ;挥发油提取器(北京玻璃仪器厂) ;DZTW 电子
调温电热套(北京市永光明医疗仪器厂) ;耳冲打耳
器(8 mm)。所有试剂均为分析纯。
1． 2 实验动物 SPF 级 BALB /c 雄性小白鼠，体重
20． 0 ± 2． 0 g，由武汉大学动物实验中心提供。小白
鼠喂养一周，观察有无异常反应或其它情况，健康正
常的小鼠用于实验。
1． 3 实验药材 天山堇菜(Viola tianshanica Max-
im．) ，新疆医科大学药学院热娜·卡斯木教授鉴
定、提供。
1． 4 实验方法
1． 4． 1 蒸馏时间对挥发油提取率的影响 按中国
药典［5］2010 版一部附录 X D的方法(中华人民共和
国卫生部药典委员会，2010)提取天山堇菜挥发油。
称取天山堇菜粉末 50 g，粉碎，过 20 目筛，预实验结
果表明［6，7］，天山堇菜粉末与蒸馏水比例为 1 ∶ 7
时，药材粉末可被完全浸没，考虑到药材粉末浸泡膨
胀以及提取中水蒸气的损耗，因此将天山堇菜粉末
与蒸馏水的比例调整为 1∶ 10。
将天山堇粉末置于 1000 ml 圆底烧瓶中，加入
500 ml水和少许玻璃珠，摇匀，电热套缓慢加热，分
别考察提取时间为 1 h、2 h、3 h、4 h、5 h、6 h、7 h 等时
点挥发油的得率。用乙醚萃取 3 次油状液体，减压
回收乙醚，无水硫酸钠干燥后过滤，得淡黄色油液。
天山堇菜挥发油在干燥至恒重后，称重计算出
油率。其出油率按下式计算:
Y(%)= W1W2 × 100%
其中，Y:出油率;W1:提取天山堇菜挥发油质量(g) ;
W2:天山堇菜粉末质量(g)。
1． 4． 2 抗炎作用实验 根据炎症发展过程中不同
时期的病理特点，实验炎症模型主要分为三类:以血
管通透性增强，白细胞游走和炎症介质释放为主要
改变的各种早期炎症模型;以免疫活性细胞激活为
主要特征的中期炎症模型;以血管及组织增生为主
要特征的各种晚期炎症模型。天山堇菜挥发油抗炎
作用的考察选用了急性炎症模型，即二甲苯致小鼠
耳肿胀［8，9］。该实验以局部血管扩张和毛细血管通
透性增加为特征，反应药物对炎症早期血管通透性
增加的影响程度。
取预实验合格的小鼠 40 只，体重 18 ～ 22 g，随
机分成 4 组，每组 10 只，空白对照组(生理盐水)、
低剂量组(0． 1 ml /kg)、高剂量组(0． 2 ml /kg)、阳性
对照组(阿司匹林 10 mg)。空白对照组、低剂量组
和高剂量组的小鼠进行灌胃(ig) ，每日 1 次，连续 3
d;阳性对照组于实验当天腹腔注射(ip)。末次给药
30 min后，于小鼠右耳两面均匀涂抹 20 μl二甲苯致
炎，左耳作为对照，致炎后 30 min 处死动物，剪下两
耳用 8mm打孔器分别在同一位置打下圆耳片，电子
天平精密称重，以左右耳片重量之差为肿胀度，计算
肿胀抑制百分率:
抑制率(%)=
空白对照组
平均肿胀度(mg)
－ 给药组平均
肿胀率(mg)
空白对照组平均肿胀度(mg)
× 100%
挥发油提取法有有机溶剂提取法、水蒸馏法、超
临界萃取法等。水蒸馏法节省溶剂，无污染、成本
低，便于操作，故实验采用此方法作为天山堇菜中挥
发油的提取方法。实验证明，其蒸馏时间确定为 6
h，挥发油得率可达 0. 76%。
2 结果
2． 1 天山堇菜挥发油提取的最佳时间 蒸馏初始
时，天山堇菜挥发油快速与水蒸气形成共沸，快速蒸
发出来，持续到 4 h。此后挥发速度有所减慢，90%
左右的天山堇菜挥发油 5 h 以内已经提取出来，药
渣中挥发油类成分减少，油水比例相应减低，共沸点
升高，挥发油馏出的量迅速减少。水蒸气蒸馏 6 h，
95%左右的挥发油被提取出来，继续蒸馏，挥发油的
量增加逐渐呈负数。考虑到长时间加热，可能会使
已经提取出来的挥发油再次挥发损耗，因此天山堇
菜挥发油的蒸馏时间确定为 6 h，天山堇菜挥发油得
率为 0． 76%(以天山堇菜药材干品重量计)。见图
1。
图 1 天山堇菜挥发油水蒸气提取率测定
2． 2 天山堇菜挥发油对小鼠耳肿胀度的抑制 从
表 1 可见，挥发油剂量为 0． 1ml /kg、0． 2ml /kg时，肿
胀抑制率为 24． 62%、37． 13%，与生理盐水的空白
对照组比较有显著性差异，表明天山堇菜挥发油对
炎症具有一定的抵抗作用，呈现剂量相关性。
表 1 天山堇菜挥发油对二甲苯
所致小鼠耳肿胀度的影响(n = 10)
剂量 耳片肿胀度(mg)抑制率(%)
空白对照组 — 7． 11 ± 1． 52 —
低剂量组 0． 1 ml /kg 5． 35 ± 1． 06* 24． 62
高剂量组 0． 2 ml /kg 4． 47 ± 1． 28＊＊ 37． 13
阿司匹林组 10 mg 3． 90 ± 1． 17＊＊ 45． 08
注:与空白对照组比较，* P ＜ 0． 05，＊＊P ＜ 0． 01。
3 讨论
挥发油提取法有有机溶剂法、蒸馏法、萃取法
等。蒸馏法节省溶剂，无污染，成本低，便于操作，故
我们采用此方法提取天山堇菜中的挥发油。实验结
果证明，其最适蒸馏的时间为 6 h，挥发油得率可达
6 湖北民族学院学报·医学版 第 4 期
0. 76%。炎症是由炎症细胞及其释放的炎症介质参
与引起的一系列病理生理过程。炎症反应可引起毛
细血管扩张，通透性增加，中性粒细胞趋化、游走至
炎症反应灶，释放炎症介质，并产生 O·－2 等活性氧
自由基。由于炎性渗出引起组织水肿，会导致炎症
局部形态膨胀、体积增大，还会使发炎器官的重量增
加［10 ～ 13］。
给小鼠的耳廓涂抹二甲苯引起耳廓肿胀，采用
重量法测定耳廓肿胀程度，结果灌服天山堇菜挥发
油的小鼠耳片的增重值显著小于空白组，可见天山
堇菜挥发油对早期、急性炎症具有确切的抑制作用。
这也许是天山堇菜能治疗发烧、受寒、感冒、咽炎、疔
疮肿痈的物质基础之一。中草药的抗炎作用机制十
分复杂，难以具体分类。一种中草药的不同活性成
分往往具有不同的作用机制;有时即使是同一成分，
其作用机制也可因机体的免疫状态的不同而不同。
中草药是天然产物，一种中草药包含多种活性成分，
并且存在一种中草药中的多种活性成分均有抗炎作
用的现象。对于这些活性成分是否在抗炎过程中起
协同作用，相互之间的作用是如何进行的并不十分
清楚，尚需进一步采用新技术、新方法进行深入研
究。下一步我们将对天山堇菜挥发油的化学成分进
一步分离和纯化，为其抗炎作用的物质基础和作用
机理提供科学依据。在以后的工作中我们将在其进
行活性指导下，对天山堇菜挥发油的化学成分进一
步分离和纯化，为抗炎作用的物质基础和作用机理
提供科学依据。而天山堇菜非挥发性化学成分及其
药理活性还有待进一步的研究。
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［收稿日期 2011 － 09 － 05］
7第 4 期 湖北民族学院学报·医学版