全 文 ：喜树果和马比木中喜树碱含量的比较
周翔，林森，罗娅君，边清泉*
（绵阳师范学院化学与化学工程学院，四川绵阳 621000）
摘 要：建立喜树果和马比木中喜树碱的 HPLC 分析方法，并对喜树碱的含量进行比较。采用岛津 LC-20A 高效液
相色谱系统对样品进行定量分析，色谱柱为 ODS；甲醇 ∶水（5.5∶4.5）为流动相；检测波长为 254nm；柱温 35℃；流速
0.8mL·min-1。该条件下目标组分与其他组分有效分离（R＞1.5），喜树碱进样量在 0.01-0.09μg 线性范围关系良好，
相关系数 r=0.9998,平均回收率：99.98%，RSD：0.56%。该方法分离效果好、灵敏度高、分析速度快、操作简便、结果
准确可靠。分析结果可为喜树果和马比木的深度开发提供参考依据。
关键词：喜树果；马比木；喜树碱；HPLC
中图分类号：TS255.7 文献标识码：A 文章编号：1674-506X（2014）02-0089-0003
Comparison of Camptothecin Content in Camptotheca Acuminata
Fruit and Mappia Foetida
ZHOU Xiang， LIN Seng， LUO Ya-juen， BIAN Qing-quan*
（School of Chemisty and Chemical Engineering，Mianyang Normal University，Mianyang Sichuan 621000，China）
Abstract： Analysis method to establish the CPT fruit and mappia foetida HPLC， and the content of camptothecin
were compared. Quantitative analysis was performed on the sample using the SHIMADZU LC -20A high
performance liquid chromatography， Take PLA_TISILTM ODS （4．6×150mm， 5txm） as the column，methanol and
water （55∶45）as the mobile phase．The inspect wavelengh isn 254nm；the column temperature is 30 and the velocity
offlow is 0.8 mL omin-1；Under this condition， the target component and other components of effective separation
（R＞1.5） the lineal range is 0.01-0.09. The coefficient of correlation， r =0.9998， recovery rate：99.98% ， RSD：
0.56%. This method， with the advantages of good separation effect， specificity， high sensibility，rapid analysis，
The analytic result would provide reference for deep development of camptothecine and mappia foetida.
Key words： fruit of camptothecine acuminata decne； appia foetida； campthothecin； HPLC
doi：10.3969/j.issn.1674-506X.2014.02-022
喜树别名为水例子、千丈树或天樟树。喜树果为
珙桐科植物喜树 Campotheca acuminate Decne.的果
实。生于海拔一千米以下相对潮湿地带。分布于湖
北、湖南、江西、浙江、江苏；马比木别名追风伞或公
黄珠子。 茶茱萸科植物海桐假柴龙树（Nothapodytes
Pittosporoides（Oliv.） sleum）的根皮 。主产广西 、四
川、湖北、湖南、甘肃、贵州、海南、广东等地 ［1］。据文
献记载，喜树果与马比木中主要含生物碱类成分 ［1］，
其中喜树碱（camptothecin）及其衍生物为主要活性
成分。喜树碱（camptothecin）具有抗癌、散结、破血化
瘀之功效，临床上主要用于治疗消化系统恶性肿瘤。
目前， 针对喜树果和马比木中活性成分喜树碱含量
收稿日期：2014-01-24
基金项目：绵阳市科技局项目（13G002-2；12C003-3）；四川省教育厅科研项目（12ZA079；12ZA081）。
作者简介：周翔（1993-），女，本科。分析化学专业。
* 通讯作者：E-mail：bian-55@sohu.com
Food and Fermentation Technology
第 50卷（第 2期） Vol.50，No.2
2014 年第 2 期
的检测报道较多， 但对喜树果和马比木中活性成分
喜树碱含量的检测与比较文献报道鲜见。
本试验则采用 HPLC法分别测定喜树果和马比木
的喜树碱含量，并对两者喜树碱含量进行比较 ［2-3］，
研究结果将为喜树碱类提取物生产原料的选择与确
认提供科学依据。
1 实验部分
1.1 材料和仪器
1.1.1 实验材料
喜树果、马比木购于成都中药材市场，喜树碱标
准品成都天然产物研究所提供 （面积归一法测定含
量＞99％）。甲醇为色谱纯（成都化学试剂厂），水为高
纯水。
1.1.2 实验仪器
LC-20AT 型高效液相色谱仪系统（日本岛津），
包括 DAD 检测器，CLASS-vp5.0 色谱数据处理工作
站及 CTD-6A 色谱柱温箱；AY120 电子天平（SHI-
MADZU），Fw-80 型粉碎机，KQ 250DE 型医用超声
波清洗器，101-2A 型电热鼓风恒温干燥箱，Sz-93
型自动双重纯水蒸馏器。
1.2 色谱条件
色谱柱：Kromasil C18 色谱柱（250mm×4.6mm，
5μm）；流动相：甲醇∶水（5.5∶4.5）；流速：0.85mL·min-1；
柱温：30℃；检测波长：254nm；进样量：10μL。喜树
碱的保留时间为 13.78min，理论塔板数按喜树碱计
算大于 3500。目标组分与相邻组分达基线分离（R>
1.5）。
1.3 对照品溶液的制备
精密称取喜树碱对照品 5.0mg，置 50mL 容量瓶
中，甲醇定容，得喜树碱储备液。取储备液 1mL 置于
10mL容量瓶中，甲醇稀释至刻度，振荡均匀，即得对
照品溶液，备用。喜树碱的浓度为 10.0μg·mL-1。
1.4 供品溶液的制备
将供试样品喜树果、马比木于 65℃下干燥至恒
重（12h）［4］，粉碎，过 0.30mm 筛，精密称取喜树果样
品 0.1023g、 马比木样品 0.2024g， 置 25mL 三角烧
瓶，各加入约 14mL 甲醇，超声（250W，30kHz）处理
20min，过滤，滤渣再加入约 14mL 甲醇超声 15min。
合并两次提取液，转至 25mL 容量瓶，甲醇定容至刻
度，0.45μm微孔滤膜过滤，取续滤液待测［5］。
2 方法与结果
2.1 检测波长的选择
在该实验流动相系统条件下，利用 DAD检测器
对喜树碱对照品在 200-400nm 处进行紫外吸收全
波段扫描 ， 最大吸收波长分别为 218nm、254nm。
218nm 处待测定组分与不明物组分分离度＜1.5，不
能满足分析要求，254nm 处目标组分与相邻组分有
效分离，符合分析方法的要求 ［6-9］，故确定最佳检测
波长为 254nm。
2.2 流动相的选择
喜树碱含量 HPLC测定流动相文献已有报道［7-10］。
分别对文献中各流动相进行对比试验。 结果发现，
甲醇与水体积比为 5.5∶4.5 流动相体系时， 峰形对
称性良好， 待测目标组分与其他不明物组分之间基
线分离（R＞1.5）。故选择流动相为甲醇与水体积比
5.5∶4.5。
2.3 供试品制备条件优化
供试品的制备采用了超声提取、 微波提取、索
氏提取、加热回流提取等方法的对比试验。其结果
超声提取法速度快、效率高、成本低、简便易行，超
声提取提取目标组分后其残渣经 HPLC 检测无喜
树碱特征峰，目标组分喜树碱组分提取完全；分别
以甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、氯仿、二氯甲烷为溶
剂超声提取喜树碱，试验对比结果，甲醇为提取液
提取时间短，提取完全，相对经济成本及环境影响
成本较低。
2.4 线性范围考察
分别精密吸取喜树碱对照品标准溶液 1，3，5，7，
9μL，注入高效液相色谱仪，测定其峰面积（n=5），
以对照品溶液进样量 X（g）为横坐标，以峰面积均
值Y（μv．s）为纵坐标作图，得到线性回归方程为 y=
10569x-1861.1， 相关系数 R2=0.9998。 线性范围
0.01-0.09μg。
2.5 精密度试验与稳定性试验
精密吸取喜树果供试品溶液 10μL，重复进样 6
次，测定喜树碱峰面积，RSD=1.2%。结果表明仪器具
有较好的精密度，符合分析方法要求。
分别精密吸取喜树果与马比木供试品溶液
10μL，分别于 0，4，8，12 和 16h 进样测定，计算 2 种
供试品各次喜树碱含量及相对标准偏差。结果表明：
24h 内各次测得的喜树碱含量相近， 喜树果供试品
测定结果的 RSD=0.6%， 马比木供试品测定结果的
RSD=0.8%。表明喜树果与马比木供试品溶液在 26h
内稳定。
2.6 加标回收试验
对喜树果和马比木样品进行加标回收率试验，
精密称取已知含量的喜树果与马比木样品各 6 份，
约0.1-0.2g，每一种待测样品的 1份作为测定本底值
90
第 50 卷（总第 180 期）
!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!
!
!
!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!
!
!

欢迎订阅《食品与发酵科技》 邮发代号：62-247
图1 对照品与样品HPLC
Fig.1 The HPLC chromatogram of control ample and sample
a
A
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20
t/min
a
B
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20
t/min
a
C
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20
t/min
A.喜树碱对照品 B.喜树碱样品 C.马比木样品 a.喜树碱
用，另 5 份分别准确添加与样品中含量相近量的喜
树碱对照品，按供试品溶液制备相制备供试品溶液，
按 1.2 色谱条件测定方法操作，测定含量，每样重复
测定 3次，求均值，计算回收率。结果见表 1。
2.7 供试品含量测定
精密吸取对照品溶液和供试品待测定溶液
10μL，在 1.2 所述色谱条件下分别行色谱，连续进
样 5 次，求峰面积均值，按外标法以峰面积计算喜
树果中喜树碱的含量为 0.76mg·g-1。马比木中喜树
碱的含量为 0.97mg·g-1。对照品及供试品色谱图见
图 1。
3 结论
本实验采用高效液相色谱法，通过对供试品制
备条件、分析测定条件的优化，检测分析了喜树果和
马比木中喜树碱的含量。 结果表明马比木喜树碱
含量高于喜树果喜树碱含量， 相对而言马比木更
适合用来作为喜树碱提取物生产的原料， 该实验
结果可为喜树碱提取物生产企业选择原料提供参
考依据。
本底值
/μg
加标量
/μg
测定值
/μg
回收率
/%
X/% RSD/%
喜树果
7.15 8.00 15.10 99.3
99.9 0.6
7.16 8.00 15.15 99.9
7.16 8.00 15.22 100.8
7.15 8.00 15.16 100.2
7.16 8.00 15.14 99.7
马比木
9.81 9.00 18.86 97.7
97.9 1.3
9.11 9.00 17.82 96.8
9.74 9.00 18.60 98.4
9.03 9.00 18.02 99.9
9.15 9.00 17.84 96.6
表 1 加标回收率测定结果（n=5）
Tab.1 Results of recovery about sample（n=5）
参考文献
［1］ 苏青，黄瑞松，周芳礼，等 .HPLC 对广西不同采收期喜
树果中喜树碱成分动态积累的研究［J］.广西医科大学
学报，2011，28（5）：28-30.
［2］ 黄瑞松，叶云锋，梁启成，等 .HPLC 法测定不同产地喜
树果中喜树碱［J］.中草药，2009，40（1）：143-146.
［3］ 邓仕明，王发松，周大寨，等 .HPLC 法测定马比木根中
喜树碱的含量［J］.安徽农业科学，2010，38（9）：559-560.
［4］ 李嘉，黄瑞松，黄建猷，等.不同干燥方法对喜树果中喜
树碱含量的影响［J］.广西医学，2006，28（11）：23-25.
［5］ 李猛 ，黄意涵 ，李沁媛 ，等 .HPLC 法测定马比木中喜
树碱的含量［J］.绵阳师范学院学报 ，2010，29（2）：68-
70.
［6］ 边清泉.喜树碱标样制备方法的研究［J］.绵阳师范学院
学报，2004，23（2）：59-61.
［7］ 黄晓舞，白林，张莉.HPLC 法测定喜树果中喜树碱和十
羟基喜树碱的含量［J］.科学技术与工程，2005，5（12）：
58-59.
［8］ 赵东亮，郁建平.从喜树果中分离提纯喜树碱的工艺条
件［J］.山西农业生物学报，2004，23（6）：25-28.
［9］ 蒲尚饶 ，杨朗生 ，蹇凯 ，等 .马比木根中喜树碱含量的
HPLC 测定方法 ［J］.安徽农业科学 ，2010，38（6）:184-
185.
［10］ 刘文哲，秦海燕，索志荣.喜树果中喜树碱和十羟基喜树
碱的 HPLC 分析 ［J］.药物分析杂志 ，2005，25（2）：44-
46.
周翔等：喜树果和马比木中喜树碱含量的比较 91