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中药杏香兔耳风对大鼠宫颈粘膜EGF表达的影响



全 文 :中药杏香兔耳风对大鼠宫颈粘膜 EGF 表达的影响
★ 易剑峰 (宜春学院 宜春 33600)
★ 熊印华 (江西科技师范学院 南昌 330006)
★ 贾红伟 (中国中医科学院基础理论研究所 北京 100000)
摘要:目的:探讨中药杏香兔耳风治疗宫颈炎的作用机理。方法:建立大鼠宫颈炎动物模型 , 分别于给药 4 天 、10 天后观察杏
香兔耳风不同剂量组对大鼠宫颈粘膜表皮生长因子(EGF)表达的影响 ,并进行病理组织学检查。结果 杏香兔耳风高 、中剂量
组对苯酚胶浆造成的实验性大鼠宫颈炎模型 ,给药 4 天后 , 可明显升高宫颈粘膜 EGF表达 ,与模型对照组比较具有显著性差
异(其中高剂量组 P<0.01 ,中剂量组 P <0.05);给药 10 天后 ,各组宫颈粘膜 EGF 表达无明显差异;病理组织学检查结果也
表明 , 杏香兔耳风高 、中剂量组对大鼠宫颈炎有一定的治疗作用 ,以高剂量组最为明显。结论:杏香兔耳风对大鼠宫颈炎治疗
作用与其促进大鼠宫颈粘膜 EGF的早期表达有一定关系。
关键词:杏香兔耳风;宫颈炎;EGF
中图分类号:R 711.32  文献标识码:A
The Effect of Ainsliaea Fragrans Champ on EGF Levels of Cervix Mucosae of Rats
YI Jian-feng1 ,XIONG Yin-hua2 , JIA Hong-wei3
1.Y ichun University , Y ichun 336000;
2.J iangxi Science &Technology Normal University , Nanchang 330000;
3.Institute of Basic Medicine , China Academy of T raditional Chinese Medical sciences , Beijing 100700
Abstract:objectiv e:to study the mechanism of Ainsliaea frag rans Champ trea ted cervicitis.Method:Establish the model of cervicitis
by hydroxybenzene mucilage in rats.After 4 and 10 day s , observe the effect of Ainsliaea frag rans Champ on EGF expressed of cervix
mucosae o f rats o f different dose group , and analyzed its pathomorphology.Results:Comparing with model group , Ainsliaea frag rans
Champ high dose g roup and middle do se g roup can significantly heighten the EGF levels of rat cervix mucosae after 4 day s.after 10
day s , the EGF levels o f all groups have no significant difference.on the o ther hand , by histopathologic examination w e can find Ainsli-
aea frag rans Champ high dose g roup and middle dose group could improve rat cervicitis , and high dose group has mo re significant ther-
apeutic effect.Conclusion:Ainsliaea frag rans Champ s therapeutic effect has a relation w ith its raising EGF express of earlier period in
rat cervix mucosae.
Key words:Ainsliaea fragrans Champ;cervicitis;EGF
  杏香兔耳风为菊科植物杏香兔耳风(Ainsliaea f ragrans
Champ)的全草 , 主产于江西 、江苏 、浙江等地 , 其性甘 、寒 , 具
有清热 、利湿 、凉血 、解毒之功效 , 临床发现它对慢性宫颈炎
疗效确切 , 但机理尚不清楚。本研究通过观察杏香兔耳风对
大鼠宫颈粘膜组织表皮生长因子(EGF)的影响 , 以探讨它的
作用机理。
1 实验材料
1.1 动物
WISTAR大鼠 , 雌性 , 200~ 250 g , 由江西医学院动物实
验中心提供。
1.2 药品与试剂
EGF 免疫组化试剂盒(sigma公司产品);自配苯酚胶浆
(苯酚 25 mL 、西黄蓍胶 5 g 、甘油 20 mL , 加蒸馏水至 100
m L ,配成含 250 mg/g 苯酚胶浆);杏香兔耳风浸膏由江西天
施康中药股份有限公司提供(每 1g 浸膏中含生药量为 10
g),宫炎平片为广东罗浮山药业生产(国药准字 Z20013221 ,
规格 0.26 g/片)。
1.3 仪器
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江西中医学 院学报 2 0 0 7 年 4 月第 1 9 卷第 2期
JOURNAL OF JIANGXI UN IVERSITY OF TCM 2007 Vol.19 No.2
 
○实验研究○
LEICA 图像分析仪(Leica microsy stem Wetzlar Gmbh ,型
号:090-134。713-000)。
2 实验方法
2.1 动物分组及造模
正常组 20 只 ,苯酚胶浆造模后选症状明显者随机分为
以下 5 组:模型组 20 只 , 杏香兔耳风高剂量治疗组 20 只 ,杏
香兔耳风中剂量治疗组 20 只 , 杏香兔耳风低剂量治疗组 20
只。照文献方法[ 1]自配浓度为 250 mg/ g 的苯酚胶浆 , 正常
组给以赋形剂(1 m L/kg)阴道内注射 ,其他各组给以等容量
苯酚胶浆注射 , 每天 1 次 ,连续 3次。
2.2 给药
灌胃给药 , 每天 1 次 ,杏香兔耳风高剂量治疗组 0.45 g/
(kg·d)、中剂量治疗组 0.23g/(kg·d)、低剂量治疗组 0.11 g/
(kg·d)分别给予相应药量灌胃;宫炎平治疗组按 0.24 g/(kg
·d)给药;模型组及正常组给予同等体积的生理盐水。造模
第 3 天后开始灌胃 , 每天 1次 ,灌胃 4 天后处死一半动物 ,灌
胃 10 天后处死其余动物。
2.3 指标检测
2.3.1 大体观察 每天观察记录外阴变化。
2.3.2 病理观察 取大鼠子宫颈处组织 , 剪取一半放入装
有 10%甲醛的标本瓶中浸泡固定 , 24 小时后作病理组织学
检查 , 常规取材 ,脱水 , 石蜡包埋 , 制片(4 μm 厚), HE 染色 、
显微镜下阅片 , 观察子宫颈组织形态学变化。
2.3.3 EGF 测定(免疫组化法) 将低温冰箱中保存的组织
冰冻切片 , 按照免疫组化试剂盒说明书进行做免疫组化。经
免疫组织化学染色 , 观察大鼠宫颈粘膜 EGF 的表达 , 用图像
分析仪计数 , 每张切片取 6 个区域 , 基本保证所有被染上的
特异性点都收集在内 , 又避免重复计数。特异性点面积与所
取区域面积比值为我们所要的数值。
2.4 统计分析
试验结果以 x±s表示 ,组间比较采用单因素方差分析 ,
两两比较采用 q 检验。
3 实验结果
3.1 大体观察
造模第 1 天后 , 大鼠阴部发白;造模第 2 天及第 3 天 ,阴
部发白 ,部分大鼠阴道红肿 ,个别有分泌物流出;高 、中剂量
组给药后大鼠阴部颜色逐渐变为粉红色 , 高剂量组第 3 天 、
中剂量组第 5天开始不再有分泌物流出 , 低剂量给药组与模
型组比较未见明显改善;未给药组大鼠至第 6 天开始分泌物
减少。
3.2 病理观察
正常组:可见宫颈及阴道粘膜复层鳞状上皮表面光滑 ,
无坏死脱落 , 无炎细胞浸润 ,粘膜下组织正常。
模型组:4 天时 ,可见广泛的宫颈粘膜变性坏死 , 脱落 ,形
成溃疡 ,粘膜下有充血水肿 ,炎细胞浸润 , 肉芽组织增生 , 成
纤维细胞增生;10 天时 , 在上述基础上 , 炎细胞浸润有所减
少 , 成纤维细胞增生有所增加。
杏香兔耳风高剂量治疗组:4 天时可见宫颈粘膜变性脱
落坏死减少 , 鳞状上皮增生 ,炎细胞浸润减少 , 粘膜下充血水
肿减轻 , 肉芽组织玻璃样变性;10 天时宫颈病理损伤减轻 、炎
症充血水肿缓解 、鳞状上皮增生修复较 4 天时更为明显。
杏香兔耳风中剂量治疗组:4 天时可见炎细胞浸润减少 ,
粘膜下充血水肿减轻;10 天时宫颈病理损伤减轻 、炎症充血
水肿缓解 、鳞状上皮增生。
杏香兔耳风低剂量治疗组:与模型组比较无明显改变。
3.3 EGF 测定
见表 1。
表 1 大鼠宫颈 EGF表达变化
  n 第4 天
EGF 表达 n
第10天
EG F表达
正常组 10 978.7±525.64 10 902.4±368.02
模型组 10 1349.0±344.87 10 1376.6±617.24
高剂量治疗组 10 4405.9±2529.04**## 10 1616.6±1213.66
中剂量治疗组 10 2849.1±1103.9*# 10 1475.7±585.67
低剂量治疗组 10 1599.2±406.21 10 1873±795.46
  注:与模型组比较 , *P<0.05 , **P<0.01;与正常组比较 , #P<0.05;
##P<0.01。
本实验研究结果表明:给药 4 天后 , 杏香兔耳风高剂量
治疗组大鼠宫颈 EGF 表达高于正常组及模型组 , 有高度显
著性差异(P <0.01);杏香兔耳风高剂量治疗组与正常组和
模型组比较亦有显著性差异(P<0.05)。
给药 10 天后 ,各组大鼠宫颈 EGF 表达无显著性差异。
以上表明 , 高中剂量治疗组对于大鼠宫颈 EGF 的早期
表达有一定作用 , 对于后期则无明显影响;低剂量组对 EGF
的表达无明显影响。
4 讨论
慢性宫颈炎是妇科常见病 ,约占已婚妇女的 50% 左右 ,
而且是宫颈癌的高危因素 ,宫颈糜烂是慢性宫颈炎最常见的
病理改变 , 在临床上 , 宫颈炎患者阴道镜检查时可见宫颈粘
膜不同程度的充血水肿 、常见有粘膜溃疡。目前治疗宫颈糜
烂常以物理治疗和局部上药为主 ,如电灼 、激光 、冷冻等。物
理疗法大部分可治愈糜烂面 , 但受条件和技术限制 ,且治疗
后有阴道大量排液及渗血 ,给患者带来诸多不便而受到了一
定的限制[ 2] 。
中药杏香兔耳风对于苯酚胶浆所致宫颈炎的病理损伤
具有较好的修复作用 , 它能减轻宫颈粘膜坏死 、充血水肿 ,促
进粘膜鳞状上皮增生。从上面结果可以看出 , 杏香兔耳风的
治疗作用与其促进大鼠宫颈粘膜 EGF 的早期表达有一定关
系。
EGF 是一类与组织细胞生长发育 、组织修复有关的细胞
因子 , 可以在外界环境刺激下 , 在局部发挥旁分泌或自分泌
的作用 , 促进相关组织细胞的生长。所以 , 通过对 EGF 表达
的研究 , 可以初步显示局部组织的增生情况。杏香兔耳风可
以促进模型鼠宫颈粘膜早期 EGF的表达 , 进而促进其修复。
参考文献
[ 1] 龙子江 ,吕晓英 ,王桐生 ,等.阴道及宫颈炎大鼠动物模型的研究
[ J] .安徽中医学院学报 , 2005 , 4(24):35~ 36
[ 2] 潘翠金.复方杏香兔耳风治疗宫颈糜烂 150 例分析[ J] .柳州医
学 , 2000 , 4(12):253
(收稿日期:2006-12-26)
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易剑峰等:中药杏香兔耳风
对大鼠宫颈粘膜 EGF 表达的影响
 
○实验研究○