全 文 ：黄晓舞!等!#$ 法测定喜树果中喜树碱和羟基喜树碱的含量%&期
!#$法测定喜树果中喜树碱和羟基
喜树碱的含量
黄晓舞 白 林 张 莉 !
#中国人民解放军总医院药材处!北京 %’’()*$总参管理保障部西山门诊部 %!北京 %’’’+%%
摘 要 测定喜树果中喜树碱和 %’,羟基喜树碱的含量! 采用高效液相色谱法! 色谱柱为 -./0123.4 $%( #)!0!5’’ 00!&6)
00%!乙腈水 75)89):为流动相!检测波长 5)& 20!流速 %6’ 0#&0.2;%’ 结果喜树碱在 7’<’=& &*5<5:!>&0#;% (羟基喜树碱在
7’65)5):!>&0#;%范围内线性关系良好’说明方法分离效果好(专属性强(分析速度快(灵敏度高!可作为喜树果药材含量测定的
方法’
关键词 ?@$ 喜树碱 %’;羟基喜树碱
中图分类号 A+9)$ 文献标识码 B
5’’)年)月%*日收到
第一作者简介 黄晓舞 #%+95)%!女 !湖南长沙人 !药师 !研究方
向临床药学及药品质量控制’
第 ) 卷 第 %5 期 5’’) 年 = 月
%=9% ;%(%) #5’’)%%5 ;’(’+ ;’*
科 学 技 术 与 工 程
CD.E2DE FEDG2141>H /2I J2>.2EEK.2>
L14< ) M1< %5 NO2E 5’’)
5’’) CD.< FEDG< J2>2>
树 $/0PQ1QGED/ /DO0.2/Q/ -ED2E 的果实! 其主要活
性成分是喜树碱和 %’;羟基喜树碱! 临床上主要用
于治疗消化系统恶性肿瘤 *%+’ 目前喜树碱和 %’;羟
基喜树碱的原料及制剂含量测定方法采用紫外分
光光度法!但该法专属性不强!在实际工作中易产
生误差*5+’ 本实验研究采用 !@$ 法同时测定喜树
果中二者的含量!具有高效(快速(专属性强的优
点’
% 仪器与试药
%&% 仪器
R/QEK3 )%) ?@$ 系统 #美国 R/QEK3 公司 !
R/QEK35&(9 -O/4 %!CA5’’’ 色谱工作站 #上海三锐
科技有限公司%’
%&’ 试药
喜树碱对照品(%’;羟基喜树碱对照品 #美国
C.>0/ 公司!含量 +(#%$喜树果!产自湖南宁乡$乙
腈#上海化学试剂公司!?@$ 级%$水为超纯水!其
他试剂均为分析纯’
’ 方法与结果
’&% 色谱条件
色谱柱-./0123.4 $%( 柱 #) !0!5’’ 00!&<)
00%$流动相乙腈︰水#5)︰9)%$检测波长5)& 20$
流速%<’ 0@&0.2;%!进样量5’ !@$灵敏度BSTCU
%<’!柱温为室温’在此条件下!喜树碱(%’;羟基喜树
碱的保留时间分别为 5)<(& 0.2 和 %*<(+ 0.2’ 对照
品及样品的色谱图如下!见图 %图 *’
’&’ 标准曲线的制备
对照品溶液制备分别精密称取喜树碱(%’;羟
基喜树碱对照品 %<=% 0>(%<5) 0>!分别以甲醇定溶
于 )’ 04容量瓶中! 得 ’<’*55 0>&0@;%喜树碱对照
图 % 喜树碱对照品色谱图
科 学 技 术 与 工 程 !卷
图 样品色谱图!#喜树碱# $%&’羟基喜树碱$
图 $ %&’羟基喜树碱对照品色谱图
品溶液及 &(&$! )*%)+,# #&’羟基喜树碱对照品溶液&
将喜树碱’#&’羟基喜树碱对照品溶液分别稀
释成系列浓度(在相应色谱条件下进样(记录图谱
及色谱参数( 分别以峰面积对进样量回归分析(得
对照品的线性回归方程分别为)
!-# .!$ &/0 # 1 $2 ..3( $% - &(000 0#
!&’3& 2$$ $.(& , /% &($& - &(000 .&
喜树碱在!&(&3//!$($$ !*%)+,%’%&,羟基喜树
碱在!&($!!$!$ !*%)+,% 范围内呈现良好的线性关
系&
!# 精密度试验
取同一对照品溶液( 在色谱条件下连续进样 !
次( 喜树碱 ’%&,羟基喜树碱的 456 分别 &(!/7’
#(&!!)-!$&
!$ 重现性试验
取样品 ! 份(精密称定(按样品测定方法项方
法下测定并计算各成分的含量(喜树碱’#&,羟基喜
树碱的 456 分别 &(037’ #(328)-!9&
!% 稳定性试验
精密吸取对照品溶液( 在色谱条件下进样(每
隔 : ;测定一次( 连续测定 ! 次并计算各成分的含
量( 在 . ; 内喜树碱 ’%&’羟基喜树碱的 456 分别
为 &<$7’&!& 加样回收率试验
精密吸取已测定含量的 ! 个样品各 % )+(精密
加入 0<. !*%)=’% 喜树碱对照品溶液和 0<0 !*%)+’%
%&’羟基喜树碱对照品溶液各 %)+( 在色谱条件下
进样(计算平均回收率分别为 03<227’0.<3$7(456
分别为 %<$!7’%<8)-!9&
!’ 样品测定方法
供试品溶液的制备)将喜树果于 !&#烘干 /. ;(
研细(过 /& 目筛(备用& 精密称取喜树果粉末 % *(
置 !& )+ 锥形瓶中( 加 2&乙醇 $! )+ 在 !&$水
浴中分两次温浸(每次 & )>?& 定量转移置 !& )+
容量瓶中( 用甲醇稀释至刻度( 过滤得供试品溶
液&
测定方法)分别精密吸取对照品溶液和供试品
溶液各 :& !+( 注入液相色谱仪( 记录各组分峰面
积(代入线性回归方程(计算即得& 结果显示(喜树
果中喜树碱和 #&,羟基喜树碱含量分别为 &<#!7’
&<&23/7!)-!$&
# 讨论
#( 流动相的选择
曾试验甲醇,水’乙腈,水不同比例(最终选择
乙腈,水!:!︰2!$为流动相(在此条件下(样品中喜
树碱和 #&,羟基喜树碱分离度良好(出峰时间较短(
基本满足定量测定要求&
#! 供试品提取方法的选择
用甲醇’2&乙醇’!&乙醇为溶剂提取样品(
比较超声’热回流’温浸方法的得率(结果 2&乙醇
!&$温浸 :次’每次 &)>?提取最佳&
## 喜树碱和 )*+羟基喜树碱均有强的紫外吸收
以喜树碱的吸收更强& 在实际工作中以紫外分
光光度法测定 #&,羟基喜树碱含量时( 无论是采用
对照品比较法还是采用吸收系数法都常出现含量
超过 #&#<&的现象(其原因是 #&,羟基喜树碱中混
有部分喜树碱及其它高吸收系数物质的缘故(采用
@A+B 法测定则可较好的分离二者及其他干扰杂
质(准确测定 %&,羟基喜树碱的含量&
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科 学 技 术 与 工 程 !卷
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参考文献
> 李春杰 谷莹 韩应许#等K 喜树碱及其衍生物的研究进展K 中国药
物化学杂志#HIIM’>MV!W(MIX)M>I
H 湖北省卫生厅K 湖北省药品标准$>YYH年版%K 武汉(湖北出版社#
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参 考 文 献
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M 佘锐萍R刘环R宋俊霞R等K兔圆小囊组织发育及其肠道粘膜免疫关系
的研究K 中国学术期刊文摘$科技快报%R HIII’ X$>I%D >MHH*>MHM
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