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不同采收期、初加工方法和药用部位南板蓝根中腺苷含量对比研究



全 文 :76
第 1 5卷 第 1 1 期
2013 年 11 月
辽 宁 中 医 药 大 学 学 报
JOURNAL OF LIAONING UNIVERSITY OF TCM
Vol. 15 No. 11
Nov .,2013
南板蓝根为2010版《中华人民共和国药典》
收载品种,为爵床科Acanthaceae马蓝属植物马蓝
Baphicacan thus cusia(Nees)Bremek.的干燥根茎及
根[1]。主产于两广地区、贵州及云南等地[2],为黔产
道地药材,其性寒、味苦,归心、胃经,具有清热解毒、
凉血的功效,用于温病发斑、丹毒、流感、流脑等疾
病。南板蓝根中的核苷类成分通过参与并干扰细菌
和病毒的基因表达过程,从而起到一定的抗病毒作
用[3],因此,对南板蓝根中腺苷的含量进行研究就显
得尤为重要。目前,尚未见采用 HPLC法对不同采
收期、不同初加工方法和不同药用部位南板蓝根中
腺苷含量进行研究的报道。为进一步阐明南板蓝根
最佳采收期、最佳加工方法、最好药用部位,本文对
其进行了系统研究,其结果将为最佳采收期等的确
定提供依据,并将有利于南板蓝根药材的标准化种
植与质量控制。
1 仪器与试药
岛津LC-20AT高效液相色谱仪(日本),超声
波清洗器为天津恒奥科技公司,型号 :HS10260D。
甲醇为色谱纯(天津市科密欧化化学试剂有限公
司),水为纯净水,其他试剂均为分析纯。腺苷对
照品(批号 :879-200001),购于中国药品生物制品
检定所。
南板蓝根药材均自采集,经贵阳中医学院魏
升华副教授鉴定为爵床科植物马蓝Baphicacant
huscusia(Nees)Bremek的干燥根茎及根。药材初
加工方法 :烘干(60 ℃)、阴干、晒干均根据《中华人
民共和国药典》2010版项下所加工。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱为Agilent ZORBAX EclipseXDB-C18(250
mm×4.6 mm,5 μm);流动相甲醇-水(8∶92);流
速1 mL·min-1 ;柱温30 ℃ ;检测波长260 nm ;进样
体积10 μL。色谱图见图1。
2.2 对照品溶液的制备
精密称取腺苷对照品适量,置25 mL量瓶中,
用10%甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,即得每毫升
含0.2892 mg的溶液,精密吸取1.0 mL置50 mL量
瓶中,用10%甲醇定容至刻度,即得每毫升含腺苷
0.005784 mg的溶液。
2.3 供试品溶液的制备
取南板蓝根粉末(过80目筛)0.5 g,精密称定,
不同采收期、初加工方法和药用部位南板蓝根中腺苷含量对比研究
聂浩鸿1,张丽艳2,杨丹2,杨玉琴2,李健2,刘桂华2
(1.贵州省人民医院,贵州 贵阳 550002 ;2.贵阳中医学院,贵州 贵阳 550002)
摘 要:目的:考察不同采收期、不同初加工方法、不同药用部位南板蓝根中腺苷的含量,为最佳采收期、最佳
初加工方法和最佳药用部位的确定提供依据。方法:采用HPLC法对南板蓝根中腺苷的含量进行测定。结果:南板
蓝根于7月采收,加工方法为烘干(60 ℃),以根中腺苷含量最高。结论:不同采收期、不同初加工方法、不同药用部
位南板蓝根中腺苷的含量存在较大差异。
关键词:HPLC;南板蓝根;腺苷
中图分类号:R284 文献标志码:A 文章编号:1673-842X (2013) 11- 0076- 02
收稿日期:2013-03-13
基金项目:贵州省中药现代化科技产业研究开发专项项目(黔科合社字[2009]5024号);贵州省科技厅基金项目(黔科合J字[2011]2298号)
作者简介:聂浩鸿(1963-),女,四川崇州人,主管药师,研究方向 :医院药事管理。
通讯作者:张丽艳(1964-),女,贵州贵阳人,教授,硕士研究生导师,学士,研究方向 :中药、民族药质量控制与新药研究。
Contrast Research of Adenosine Content in Baphicacanthus of Different Harvest
Periods,Different Preliminary Working Methods and Different Officinal Parts
NIE Haohong1,ZHANG Liyan2,YANG Dan2,YANG Yuqin2,LI Jian2,LIU Guihua2
(1.Guizhou Provincial Peoples Hospital,Guiyang 550002,Guizhou,China ;2.Guiyang
College of Traditional Chinese Medicine,Guiyang 550002,Guizhou,China)
Abstract :Objective :To investiqate the Adenosine content in Baphicacanthus of different harvest
periods,different preliminary working methods and different officinal parts.It can provide the basis for the
determination of the best harvest time,preliminary working methods and the best officinal parts. Methods :
Adenosine content was determined in Baphicacanthus by HPLC. Result :Baphicacanthus harvested in July,
the processing method for drying(60 ℃)and its root had the highest Adenosine content. Conclusion :
Adenosine content in Baphicacanthus of different harvest periods,different preliminary working methods
and different officinal parts has a big difference.
Key words :HPLC ;Baphicacanthus ;Adenosine
DOI:10.13194/j.issn.1673-842x.2013.11.077
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1 5 卷 辽 宁 中 医 药 大 学 学 报
置25 mL容量瓶中,精密加入30%甲醇20 mL,超声
提取30 min,取出,放冷,用30%甲醇定容至刻度,
摇匀,滤过,精密量取续滤液15 mL,置蒸发皿中,挥
去溶剂,用30%甲醇定容至2 mL容量瓶中,滤过,即
得。
A
A :腺苷对照品
B
B :样品
图1 对照品及南板蓝根药材样品的HPLC图
2.4 线性关系考察
分别精密吸取腺苷对照品溶液(浓度 :0.005784
mg·mL-1)1、2、4、6、8、10 mL,分别置10 mL的量瓶
中,用10%甲醇稀释至刻度,分别精密吸取10 μL
注入液相色谱仪,记录峰面积。以腺苷峰面积(Y)
为纵坐标,进样浓度(X)为横坐标绘制标准曲线,并
计算得回归方程 :
Y=171177X-9939.4,r=0.9996,结果表明,腺
苷含量在0.578~5.784 μg范围内呈良好的线性关
系。
2.5 精密度试验
精密吸取腺苷对照品溶液10 μL,注入液相色
谱仪,重复进样6次,记录峰面积,RSD为1.14%,说
明方法的精密度良好。
2.6 稳定性试验
取同一南板蓝根制备供试品溶液,分别于0、
1、2、4、6、12 h进行,记录峰面积,计算腺苷的含量,
其RSD分别为1.44%,说明供试品溶液在12 h内稳
定。
2.7 重复性试验
精密称取同一南板蓝根样品共6份,照2.3项
下方法制备溶液,分别进样,记录峰面积,计算腺
苷的含量,其RSD为1.50%,说明方法重复性良
好。
2.8 加样回收率试验
取已知含量的南板蓝根约0.25 g,共9份,精密
称定,精密加入腺苷对照品溶液,按2.3项下方法
制备溶液,各吸取10 μL,注入液相色谱仪,记录
峰面积,计算腺苷的含量,结果腺苷平均回收率为
99.92%,RSD为1.81%。结果见表1。
表1 腺苷的加样回收率(n=9)
编号 样品中含量(μg)
加入量
(μg)
测出量
(μg)
回收率
(%)
平均回收
率(%)
RSD
(%)
1 24.76
19.67
44.89 101.86
99.90 1.69
2 24.76 44.08 98.59
3 24.77 44.66 100.89
4 24.79
24.87
49.44 99.11
5 24.78 49.02 97.47
6 24.79 49.15 97.94
7 24.78
29.50
54.58 101.02
8 24.78 54.88 102.03
9 24.78 54.33 100.17
2.9 含量测定
取黔产不同产地、不同采收期、取7月份药材不
同初加工方法及不同药用部位的南板蓝根药材粉
末,按2.3项下方法制备供试品溶液,进行色谱分析,
记录腺苷的峰面积,计算含量,结果见表2。
表2 南板蓝根不同采收期、加工方法、
药用部位腺苷的含量(n=3)
编号 采收期 含量(μg·g-1)
RSD
(%)
加工
方法
含量
(μg·g-1)
RSD
(%) 部位
含量
(μg·g-1)
RSD
(%)
1 6月 39.9 2.7 阴干 33.3 2.4 根 50.8 1.0
2 7月 50.8 1.3 烘干 50.8 1.0 茎 24.4 2.2
3 8月 48.8 0.2 晒干 28.7 1.6 叶 10.2 1.2
4 9月 39.6 1.0
5 10月 31.3 1.6
3 讨 论
6~10月采集的不同采收期的南板蓝根药材进
行了对比研究,发现7月份的腺苷含量最高,腺苷含
量由7月向前后月份逐渐递减。
三种初加工方法中,腺苷含量 :烘干>阴干>晒
干。烘干采取的是低于60 ℃的温度进行,从表2中
明显可以看出,烘干的含量比晒干的含量差不多高
出1倍。而阴干的含量略高于晒干的含量与之十分
接近,因此,得出温度是影响其加工方法的因素之
一。由于烘干的时间较其他两种方法干燥的时间短,
可说明烘干更适合作为南板蓝根的加工方法,其方
法可行性高,不用考虑天气的变化,时间简短,操作
更方便。
本研究同时考察了南板蓝根不同药用部位的
腺苷的含量,其根的含量高于茎、叶的含量的2倍以
上,这也说明了南板蓝根的药用价值所在。
高效液相色谱法检测腺苷,专属性及重现性
好,结果准确可靠,可用于南板蓝根药材的质量控制
和分析。色谱条件的选择通过参考其他文献[4-5],
对本研究的流动相及其比例的选择、柱温等进行摸
索、优化,得出最佳色谱条件。◆
参考文献
[ 1 ] 国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[ S ] .北京 :化
学工业出版社,2010.
[ 2 ] 苗明三,李振国.现代实用中药质量控制技术[ M ] .北京 :人
民卫生出版社,2000 :882.
[ 3 ] 窦希波,于晓蕾,王颖.RP—HPLC法测定板蓝根中腺苷的含
量[ J ] .齐鲁药事,2004,23 ( 7 ) :28.
[ 4 ] 丁越,张彤,陶建生.板蓝根药材中有效成分的含量测定研究
[ J ] .中成药,2008,30 ( 11 ) :1697- 1701.
[ 5 ] 周成惠,李春雪,张镓小,等.HPLC测定不同产地掌叶半夏中
腺苷的含量[ J ] .中国实验方剂学杂志,2011,17 ( 3 ) :77-79.