全 文 ：药物分析杂志 C h i n J Ph a r m A n a l 2 0 0 8, 2 8 ( 10 ) 一 1 65 1 一
三叶青块根乙醚提取物成分研究
霍听 ,杨迈嘉 , 刘文炜 , 高玉琼 , 刘建华
(贵州省生物技术研究开发基地 , 贵阳 5 5000 2)
摘要 目的 :研究三叶青块根中的乙醚提取物成分 。 方法 : 利用有机溶剂萃取法提取三汗卜青块根 , 用 G C 一 M S 进行测定 , 色谱
柱为 H p 一 I N n o w a x oP l y e t h y le n e C I卯 0 1弹性石英毛细管柱 ( 3 0 . 0 m X 3 20 卜m x o . 2 5 协m ) , 柱温 50 ℃ , 保持 2 m i n , 然后以 4 ℃ ·
m in
一 ’ 升温至 2 30 ℃ ,保持 20 m in ;载气为高纯度氦气 ( 9 . 99 % ) ;载气流量 2 . o m L · m in 一 ’ ; 分流比 4 0 : 1 。 质谱条件 :离子源
为 EI 源 ;离子源温度 230 ℃ ;四极杆温度 巧 0 ℃ ; 电子能量 70 e ;V 发射电流 34 . 6 林A ;倍增器电压 1. 9 36 kV ;接口温度 280 ℃ ;
质量范围 10 一 550 a m u 。 结合计算机检索技术对分离的化合物进行结构鉴定 , 应用色谱峰面积归一化法计算各成分的相对百
分含量 。 结果 : 分离出 21 个组分 , 鉴定出 18 个化学成分 , 检出率为 98 . 45 % 。 其中相对百分含量大于 1% 的分别确定为亚油
酸 35 . 28 % 、棕搁酸 26 . 93 % 、 油酸 巧 . 56 % 、 二苯胺 7 . 40 % 、 亚麻酸甲醋 7 . 巧 % 、硬脂酸 2 . 14 % 。 结论 : 对三叶青乙醚提取物成
分的研究 , 为有效控制三叶青药材质量 、深人研究开发该药物提供有用的试验数据 。
关键词 :三叶青块根 ;有机溶剂萃取 ; 乙醚提取物 ;气相色谱 一 质谱联用
中图分类号 : gR l 7 文献标识码 : A 文章编号 : 0 2 5 4 一 17 9 3 (2 00 5 ) 一。 一 165 1 一 03
D e t e r m i n a t i o n o f c h e m i c a l c o n s t i t u e n t s o f e t h e r e x t r a C t o f
R a d i x T e t r a s it g m a e H e m s l e y a n i
H U O X i n
,
Y A N G N
a i 一 j i a
,
L IU W
e n 一 w e i , GA O Y u 一 q i o n g , L IU Ji a n 一 h u a
G u i
z
h
o u In
s l i t u t e
一) f B i o t e c h n o l () g y R e s e a r e h a n d l ) e v e l (l r、m e n l , G u iy a n g 5 5 0 00 2
,
Ch i n a
A b s t r a e t O bj e e t i
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r a s t i g m a e H e m s l e y a n i
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M
e t h
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o d : T h e e h e m i e a l e o m p o s i t io n s o f th e e t h e
r e x t r a e t o f th e p l a n t w
e r e a n a l y
z e d b y G C 一 M S e q u i p p e d w i t h a n e l a s t i e
q u a r tz e a p i l l a可 e o l u m n 一 H P 一 I N n o w a x P o l y e rh y l e n e G l y e o l ( 3 0 . 0 , n x 32 0 协m x 0 . 2 5 卜, n ) . T h e o v e n t e m p e r a -
t u er p r o g r a m w a s 5 0 ℃ fo r 2 m i n , i n e r e a s e d a t 4 ℃ · m i n 一 ] to 2 3 0 ℃ a n d k e p t 长) r 2 0 m i n . T h e e a r i e r g a s w a s h e -
1i u m ( 9 9
.
9 9 9% ) w i t h
a fl o w
r a t e o f 2
.
0 m L
·
m i n
一 ’ . T h e s p l i t r a t i o w a s 4 0 : 1
.
M S e o n d i t io n s : io n s o u
r e e , E T
s o u r e e ; i o n s o u r e e t e m p e r a t u r e
,
2 3 0 ℃ ; q u a d r u p o l e p o l e t e m p e r a t u r e , 15 0 ℃ : M a s s s p e e t r a w e r e ta k e n a t 7 0 e V ; e -
m i s s io n e u脱n t , 3 4 . 6 协A ; m u l t i p li e r v o l t a g e , 1 . 9 3 6 kV ; i B t e afr ( : e t e m p e r a t u r e , 2 8 0 ℃ 。 M a s s r a n g w a s fr o m 10 t o
5 50 a m u
.
T h e e o n s t i tu e n t s w e r e id e r l ti if e d b y t h e i r m a s s s p e e r r a
.
T h e
r e l a t i
v e p e r e e n t a g e o f th e 0 11 e o n s r it u e n t s w a s
e a l e u l a t e d fr o m th e G C p e a k a r e a s
.
R e s u l t : WT
e n t y 一 o n e k i n d s o f e h e m ie a l e o n s t i t u e n ts w e r e d e t e e t e d i n th e e t he r
e x t r a e t o f R a d i x T e t r a s t ig m a e H e m s l e y a n i ; o f w h i e h e i g h te e n e o m p o u n d s r e P比 s e n ti n g 9 8 . 4 5% o f t h e e x tm e t w e r e
c h a r a e te r i z e d
.
R e la ti v e e o n t e n t s m o r e t h a n l % w e r e d e * e r m i n e d a s l in o l e ie a e id 3 5
.
2 8%
,
p a lm i t ie a e id 2 6
.
9 3%
, o -
l e i e a e i d a e id l s
.
5 6%
,
d ip h e n y la
l n i n e 7
.
4 0%
,
m e t h y l l i n o l e n
a * e 7
.
15%
, s te a r i e a e id 2
.
14%
.
C o n e l u s i o n
: T h e d e
-
te r m i n a ti o n o f e h e m i e a l e o
n s ti t u t e s o f e th e l
·
e x t r a e t fr o m R a d i x T e t r a s ti g m a e H e m s l e y a n i 1
5
h e l p fu l fo r e o n 一r o l li n g r h e
q u a li ry a n (l fo rt h e r er s e a cr h i
n g o f Ra (1 i
x T e txu s t ig l u a e H e ; x l s l e y a n i
.
K e y w o r d s : R a ( l ix
『
Fe t r a s ti g m a e H e n l s le y a n i ; e
x t r a e t w i th o r g a n i e s o lv e n t ; e th e
r e x t r a e r : G C 一 M S
三叶青 ( R a d i x T e t r a s ti g m a e H e m s l e y a n i ) ,又名 :
有角乌敛葛 、 石老鼠 , 为葡萄科崖爬藤属植物三叶崖
爬藤 ( eT t r a s z嘴m a h e o 1ear o u m D ie l s e r c i l g
.
) [
’ 〕 。
其块根称为蛇附子 , 异名 : 石猴子 、 石抱子 、 拦山虎
第一作者 1’ e l : ( 0 8 5 1 ) 57 13 6 2 6 ; E 一 n l a i l : Il x s 、 2 0 00 @ y a 生1 ` , ( , 、 〔、 。〕 rl l . 、 n
等 ,为民间常用的中草药 , 主要分布于长江 以南各
地 ,生于阴湿山坡 、 山沟或溪 谷旁林下 , 以块根或全
草人药 , 具有清热解毒 、 祛风化痰 、 活 血祛风的功
效 [ ’ 〕 。 近年国内外对其非挥发性 成分的研究有报
DOI : 10. 16155 /j . 0254 -1793. 2008. 10. 015
一 1 65 2 一 药物分析杂志 e h in J p h a r m A n a l 2 00 8 , 28 ( 10 )
道 L3 一 6 二 ,但挥发性成分的研究未见报道 。 本文采用
有机溶剂萃取法 ,从三叶青植物块根中提取出乙醚
提取物 ,并用气相色谱 一 质谱 一 计算机联用系统对
三叶青块根乙醚提取物化学组分进行定性定量研
究 。 分析鉴定了 18 个化学成分 ,为深度研究开发该
民间药材提供必要的基础数据 。
1 仪器 、试剂与材料
三叶青块根药材产 自广西 , 由浙江大学现代农
业研究示 范 中心 周建华 老师鉴定为 eT t ar st ig m a
h e lns l叮a n u m D i e l s e t G i l g . 的干燥块根 。
乙醚为国产分析纯试剂 , 美国惠普公司 ( H c -
w l e t t P a e k a r d ) H P 一 6 8 9 0 / H 5P 9 7 3 G C 一 M S 气质联用
仪 。 H p 一 IN n o w a x p o l y e t h y le n e G ly e o l 弹性石英毛细
管柱 ( 3 0 . 0 m x 3 20 林m x 0 . 2 5 林m )
2 实验方法
2
.
1 样品供试液 的制备 取三叶青块根 30 9 , 粉
碎 ,过 80 目筛 ,加人乙醚 30 m L ,密塞 ,充分摇匀 , 放
置 24 h ,时时振摇 , 过滤 。 残渣再加入 乙醚 30 m L ,
重复处理 1 次 ,合并滤液 。 常温挥去乙醚 ,得油状物
与乙醚 的混合液 0 . 5 m L ,即得 。
2
.
2 三叶青块根 乙醚提取物定性定量分析 取三
叶青块根 乙醚提取物 l 协L , 进样 , 用 G C 一 M S进行
测定 。
2
.
2
.
1 气相色谱条件 色谱柱为 H P 一 IN n o w a x p o -
ly e t h y le n e G l y e o l 弹性石英毛细管柱 ( 30 . 0 m x 3 2 0
林m x 0 . 2 5 卜m ) 。 柱温 5 0 ℃ ,保持 Z m i n ,然后 以 4
℃ · m in 一 ’ 升温至 2 30 ℃ ,保持 20 m in ;气化室温度
25 0 ℃ ; 载气 为高 纯度氦气 ( 9 . 99 % ) ; 柱前压
10 3
.
9 7 M P a
, 载气流量 2 . 0 m L ` m i。 一 ’ ;进样量 l 林I J :
分流比 4 0 : l 。
2
.
2
.
2 质谱条件 离子源 : EI 源 ;离子源温度 2 30
℃ ; 四极杆温度 巧 0 ℃ ; 电子能量 70 e V ; 发射电流
3 4
.
6 林A ;倍增器电压 1 . 9 3 6 kV :接 口温度 2 8 0 ℃ ;
质量范围 10 一 5 5 0 a m u 。
2
.
2
.
3 定性分析 通过 H P M s D 化学工作站检索
iN st 98 标准质谱图库和 W IL E Y27 5 质谱图库 , 同时
结合有关质谱图文献 [ 7〕解析 , 以确认三叶青块根乙
醚提取物的化学成分 。
2
.
2
.
4 定量分析 通过 H P M s D 化学工作站数据
处理系统 ,按峰面积归一化法进行计算 ,求出各化学
成分的相对百分含量 。
3 结果
三 叶青块根各化学成分的相对 百分含量见表
1
,图谱见图 1 。
表 1 三叶青块根乙醚提取物的化学成分和相对百分含量
T a b 1 C o m P o s i t io n a n d r e la ti v e o f th e e ht e r e
x t ar e t c o n s tit u e n t s o f R a d i
x T e t r as it gm ae H e m s le y
a n i
峰号
( p
e a k N . ,
.
)
化合物
e o ln p o u , 1 01)
分子式
(
. n o ]e ( u la : fo r m u l a )
相对分子质量
(
r e l a t i v e 一n 。) l e e u l盯 n一as 。 )
相对含量
( er l
a t i v e e o n te n l ) / %
7
.
78
9
.
6 2
1 5
.
36
] 5
.
69
樟脑 ( ` a ,。 p 卜`〕r )
2
,
3 一 丁二醇 ( 2 , 3 一 b u ra l ,。 d i u l )
己酸 ( 11 e x a : lu s。 a oj o l )
苯甲醇 ( IJ e : l z y l日e o 十1 0一)
苯乙醇 ( Io e , ,z e ,、 e e t } l a n o l )
苯酚 ( r ,h e n ` , l )
6
,
10 14
一 三甲基 一 2 一 于五烷酮 ( 6 , 10 , 14
一 t ,i m e * }l y l 一 2 一 p e , 1一a `l e e a n ` , r, e )
异丙苯 ( 吸 u : n e n e )
二苯胺 ( 〔王i p h e n y l a , ,11, le )
喊范酸 ( : , l y r i、 11“ : ,。 101 )
十五酸 ( r ,。 ,1一a 。{e 、 y l i c 二 i、 l )
棕桐酸 ( P a l l l l sl i ( 、 a o i o l )
补骨脂内醋 ( P so 耐el l e )
十七酸 ( , , l a雄 a r io a o i d )
硬脂酸 ( , 一。 ar i。 。 c i d )
油酸 ( o l e i、 a o sd )
亚油酸 ( l j , l o l e i` 。` i ; ] )
业麻酸甲醋 ( 川 e l hy l 11, 1〔,l e n a le )
C 一o H 16 0
C 4 H lo 0 2
C 6 H 12 O Z
C 7 H s o
C s H一0 0
C 6 H 6 0
C IS H〕 6 ( )
1 52
90
1 16
] 08
2 25
1 5 7
1 22
94
0
.
1 1 2
0
.
3 83
12 0
16 9
0
.
105
7
.
396
284561709
13
! 4
33
.
83
34
.
7 3
C g H 一2
C 12 H 一IN
e 一4 H 2 s0 2
C 15 H 30 ( ) 2
(二一6 H 3 20 2
C 一IH 6 o 3
C 17 H 3 4 0 2
C 一8 H 3 6 0 2
(二一s H 3 4 0 2
C 一8 H 3 2 ( ) 2
C 一, H 32 0 2
92 9
69 8
l 5
l 6
1 7
I 8
3 8
.
5 6
40
.
1 1
0
.
5 65
2
.
14 1
15
.
56 1
35
.
2 8 】
7
.
15 3
药物分析杂志 h Ci n J ph ar mA n2 l 0 0 8 a, 2 8 ( 10 ) 一 1 65 3 一
5 0 t /
m i n
图 1
F ig l
T
e t al
s t i
二叶青块根乙醚提取物 G C 一 M S 图谱
T o t a l io n e h or m a t o gr
a m o f t h e e t h e r e x t ar
e t e o n s r i一u e n t s o f R a d i x
娜 a e H e m s l e y a n i by C C 一 M S
4 讨论
在三叶青块根 乙醚提取物成分研究中 , 共分离
提取出 21 个化合物 ,检测出 18 个组分 , 占挥发油总
量的 98 . 45 % 。 其中 , 相对百分含量较高的是亚油
酸 35 . 28 % 、棕搁酸 26 . 93 % 、 油酸 1 5 . 56 % 、 二苯胺
7
.
4 0%
、亚麻酸 甲醋 7 . 巧% 、 硬脂酸 2 . 14 % 。 据报
道 ,亚油酸具有多种生物功能 , 并具有抗癌 、 抗动脉
粥样硬化 、增强免疫 、 抑制脂肪沉积 、 建造骨骼 、 防止
高血糖和糖尿病 、 促进生长发育等生理功能〔8〕 ;棕
搁酸对胰岛素有保护作用 , 并且可用于合成棕搁酸
衍生物 〔” , `。 〕 。 对本品乙醚提取物成分分析研究 , 为
合理利用三叶青植物资源及其深度研究开发提供试
验依据 。
致谢 :感谢贵州省 、 中国科学院天然产物重点实验室王
道平老师在研究中给予的帮助 !
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(本文 于 20 07 年 6 月 7 日收到 )