全 文 ：山沉香和沉香两种溶剂提取物的
HPLC、TLC和UV鉴别研究
娜仁高娃1，海 红2，苏布德3，王青虎3
（1.锡林郭勒热电公司卫生所，内蒙古 锡林浩特 026000；2.乌海节能监察检测中心，内蒙古 乌海 016000；
3.内蒙古民族大学 蒙医药学院，内蒙古通辽 028000）
〔摘 要〕目的：通过对山沉香和沉香两种溶剂提取物的HPLC、TLC色谱特征和UV光谱特征的分析，建立山
沉香和沉香的鉴别方法.方法：采用UV、HPLC和TLC法对山沉香和沉香的两种溶剂提取物进行了鉴别研究.
结果：根据TLC和HPLC鉴别结果可知，山沉香和沉香的两种溶剂提取物没有共同的特征斑点和共有峰，这
说明两种药材中化学成分有明显的差异；山沉香和沉香的UV扫描图可知，两种药材的UV图完全不一致.结
论：本实验所建立的HPLC、TLC和UV法，可用于鉴别山沉香和沉香，结果可靠、准确.
〔关键词〕山沉香；提取物；HPLC；TLC；UV
〔中图分类号〕R282.5 〔文献标识码〕A 〔文章编号〕1671-0185（2015）01-0061-05
HPLC, TLC and UV Identification of Two Kinds of Solvent
Extracts From Shanchenxiang and Chenxiang
Narengaowa1, HAI Hong2，Subude3, WANG Qing-hu3
（1.Health Center of Xilinguole Thermo-electron Corporation, Xilinhaote 026000, China;
2.The Energy Saving Supervision Center of Wuhai , Wuhai 016000, China; 3.College of Mongolian Medicine and
Pharmacy, Inner Mongolia University for Nationalities, Tongliao 028000, China）
Abstract: Objective: To establish the method of identifying Shanchenxiang and Chenxiang by analyzing HPLC, TLC
chromatographic characteristics and UV characteristics of two kinds of solvent extracts from Shanchenxiang and
Chenxiang. Methods: The identification study of two kinds of solvent extracts from Shanchenxiang and Chenxiang
were performed by HPLC, TLC and UV. Results: According to TLC and HPLC identification results, there were no
common spots and peaks, and UV spectrograms were completely inconsistent in two kinds of solvent extracts from
Shanchenxiang and Chenxiang, which indicated the difference of chemical constituents in two kinds of medicinal ma-
terials. Conclusion: The HPLC, TLC and UV method is reliable and accurate, which can be used to identify
Shanchenxiang and Chenxiang.
Key words: Shanchenxiang; Extracts; HPLC; TLC; UV
山沉香系木犀科植物贺兰山丁香（Syringa pinnatifolia flemsl.var. alashanensis Maet S. Q. Zhou）除去皮
的干燥根和枝干，主要分布于我国的内蒙古阿拉善盟贺兰山水源涵养林保护区，具有镇“赫依”、清热、止
痛、平喘等功效,主治心“赫依”热、气喘、失眠、心跳、心绞痛等症〔1〕.沉香是瑞香科植物沉香Aquilaria agal⁃
locha Roxb.、白木香Aquilaria sinensis（Lour.）Gilg的含有树脂的干燥木材，主要分布于广东省东南部、西南
部、中部以南地区和海南〔2〕.沉香除含有挥发油〔3-5〕以外，主要含有色酮类化合物〔6-13〕、黄酮类化合物〔14〕和三
基金项目：国家973前期计划项目（2011CB5120011）
作者简介：娜仁高娃，锡林郭勒热电公司卫生所主管药师.
第30卷 第1期 内蒙古民族大学学报（自然科学版） Vol.30 No.1
2015年1月 Journal of Inner Mongolia University for Nationalities Jan.2015
DOI:10.14045/j.cnki.15-1220.2015.01.015
萜类化合物〔10,12〕，但关于山沉香的研究报道除挥发油成分〔15〕外较少，而且目前在蒙医临床制剂中只凭山
沉香历年蒙医临床用药经验和药材横断面的花纹与沉香十分相近而替代沉香入药，还没有一个有效鉴别
山沉香和沉香的方法.本实验基于山沉香和沉香的化学成分，采用UV、HPLC和TLC法对其不同有效部位
进行了全面和系统的鉴别分析研究.
1 仪器与材料
KQ-100型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；AW120型电子天平（日本岛津）；高效液相色谱仪
（LC10-Atvp输液泵，SPD-M10Avp检测器，SCL-10Avp工作站，DGU-12A脱气机）；UV-2501PC型分光光度
计（日本岛津）；乙腈和甲醇为色谱纯（天津市光复精细化工研究所）；水为超纯水；氯仿、无水甲醇、无水乙醇、
磷酸、无水硫酸钠等均为分析纯；硅胶G（上海海洋化工厂）.山沉香（No.HUS0809）2008年7月收集于中国内
蒙古自治区贺兰山，经由内蒙古民族大学蒙医药学院布和巴特尔教授鉴定；对照品guai-9-en-4β-ol、14,
15-dinorguai-1,11-dien-9,10-dion、Syripinnalignans A 和Syripinnalignans B为笔者〔16,17〕从山沉香中分离得
到，高效液相色谱法分别测定其纯度均高于98.0%，可作为对照品使用.
2 方法与结果
2.1 供试液的制备 分别称取干燥山沉香和沉香约1.0 g，粉碎，精密称定，加氯仿20 mL，回流提取6 h，
过滤，滤液回收氯仿至干，用氯仿溶解并定容至25 mL；药渣加甲醇20 mL，回流提取6 h，过滤，滤液回收
甲醇至干，用甲醇溶解并定容至25 mL，备鉴别用.
2.2 对照液的制备 分别精密称取guai-9-en-4β-ol 和 14,15-dinorguai-1,11-dien-9,10-dione对照品适
量，用氯仿配成浓度为1 mg.mL-1的对照品溶液，得到对照品溶液1和2；另精密称取Syripinnalignans A 和
Syripinnalignans B适量，用甲醇配成浓度为1 mg.mL-1的对照品溶液，得到对照品溶液3和4.
2.3 TLC鉴别
2.3.1 氯仿提取物的TLC鉴别：吸取上述山沉香和沉香供试液4 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以
氯仿：丙酮（10:1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸乙醇溶液显色，在红外灯下加热至斑点
显色清晰，见图1.
2.3.2 甲醇提取物的TLC鉴别：吸取上述山沉香和沉香供试液4 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以
氯仿：甲醇（7:1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸乙醇溶液显色，在红外灯下加热至斑点
显色清晰，见图2.
2.4 UV吸收特征
2.4.1 氯仿提取物的UV吸收特征：山沉香和沉香供试液1 mL，加氯仿稀释至20 mL.精密吸取溶液40
μL，置20 mL容量瓶中，加氯仿稀释至刻度.以氯仿参比溶剂，在200~400 nm范围进行扫描，结果见图3.
图1 氯仿层色谱图
Figure 1 Chromatogram of CHCl3 extracts
（1.沉香；2.山沉香；3.对照品溶液1；4.对照品溶液2）
图2 甲醇层色谱图
Figure 2 Chromatogram of CH3OH extracts
（1.沉香；2.山沉香；3.对照品溶液3；4.对照品溶液4）
内 蒙 古 民 族 大 学 学 报 2015年
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2.4.2 甲醇提取物的UV吸收特征：分别吸取山沉香和沉香供试液1 mL，加甲醇稀释至20 mL.精密吸取
溶液20 μL，置20 mL容量瓶中，加甲醇稀释至刻度.以甲醇参比溶剂，在200~400 nm范围进行扫描，结果
见图3.
氯仿提取物 甲醇提取物
图3 提取物的UV吸收光谱（1.沉香；2.山沉香）
Figure 3 UV spectra of extracts
2.4.3 山沉香和沉香的紫外吸收特征：利用紫外吸收光谱进行鉴别山沉香和沉香，紫外吸收特征见表1.
表1 山沉香和沉香的紫外吸收特征
Table 1 UV spectra characteristics of Shanchenxiang and Chenxiang
样 品
山沉香
沉 香
山沉香
沉 香
溶剂
氯仿
氯仿
甲醇
甲醇
浓度（mg/ml）
0.1
0.1
0.05
0.05
λmax(nm)
275
─
281
─
吸光度
0.550
0.701
2.5 HPLC鉴别
2.5.1 色谱条件：色谱柱：大连依利特hypersil ODS2柱（300mm×4.6mm，5μm）；检测波长为238 nm、281
nm，流动相：甲醇-水溶液，梯度洗脱程序见表2；流速1.0 ml/min，记录色谱图时间50min；进样量：20μl .
表2 梯度洗脱程序表
Table 2 Procedure of gradient elution
时间（min）
0.01
10
20
30
40
甲醇（%）
25
45
55
65
65
水（%）
75
55
45
35
35
2.5.2 精密度试验：分别取对照品液1、2、3和4，在上述色谱条件下，连续进样6次，计算对照品液1、2、3
和4的保留时间RSD，分别为0.57%、0.37%、0.40%和0.44%.
2.5.3 重复性试验：取山沉香6份，制备供试品溶液，进行测定，计算其中对照品液1、2、3和4的保留时间
第1期 娜仁高娃等：山沉香和沉香两种溶剂提取物的HPLC、TLC和UV鉴别研究 63
RSD，分别为0.51%、0.41%、0.97%和0.45%.
2.5.4 氯仿提取物的HPLC鉴别：精密称取氯仿层供试液0.5ml，置于100ml容量瓶中，氯仿挥发后，加色
谱甲醇至刻度.溶液用0.45μm有机膜过滤后，吸取20μl注入高效液相色谱仪，在上述色谱条件下，进行
扫描分析，结果见图4.
图4 氯仿提取物的色谱图
Figure 4 Chromatograms of CH3Cl extracts
（A.沉香；B.山沉香；1.对照品1；2.对照品2；3.对照品3；4.对照品4）
2.5.5 甲醇提取物的HPLC鉴别：精密称取乙酸乙酯层供试液1.0ml，置于100ml容量瓶中，乙酸乙酯挥发
后，加色谱甲醇至刻度.溶液用0.45μm有机膜过滤后，吸取20μl注入高效液相色谱仪，在上述色谱条件
下，进行扫描分析，结果见图5.
图5 甲醇提取物的色谱图
Figure 5 Chromatograms of CH3OH extracts
（A.沉香；B.山沉香；1.对照品1；2.对照品2；3.对照品3；4.对照品4）
内 蒙 古 民 族 大 学 学 报 2015年64
2.5.6 HPLC鉴别结果比较：对山沉香和沉香的供试液进行HPLC检测，得到不同提取物238、281 nm波长
处的HPLC色谱图.从图4、图5可知，笔者〔16,17〕在山沉香化学成分前期工作中，从山沉香中分离得到的新化
合物guai-9-en-4β-ol、14,15-dinorguai-1,11-dien-9,10-dion、Syripinnalignans A 和 Syripinnalignans B在
沉香中没检测到.另外，除山沉香和沉香氯仿提取物中保留时间15.02 min处有1个共有峰外，其他吸收峰
的保留时间不一致，这说明两种药材的化学成分有明显的差异.
3 讨论
3.1 根据TLC鉴别结果可知，在选定的色谱条件下，山沉香和沉香的氯仿和甲醇提取物没有共同的特征
斑点.两种药材的UV图也完全不一致，HPLC检测中除山沉香和沉香氯仿提取物中保留时间15.02 min处
有1个共有峰外，其他吸收峰的保留时间也不一致，这说明两种药材中化学成分有明显的差异，建立的方
法可作为鉴别山沉香和沉香的依据.
3.2 在HPLC检测过程中以238 nm和281 nm为检测波长，是因为对照品guai-9-en-4β-ol、14,15-dinor-
guai-1,11-dien-9,10-dion在 238 nm处有最大吸收，而对照品Syripinnalignans A 和 Syripinnalignans B在
281 nm处有最大吸收.
3.3 从山沉香和沉香的TLC、UV和HPLC分析可知，两种药材中化学成分有明显的差异.然而，现代蒙医
临床上，山沉香直接替代沉香用药是否合理，有待于对这两种药材的药理作用进一步研究.这项工作课题
组正在进行中.
参 考 文 献
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〔责任编辑 赵贤芳〕
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