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1 5 年 4 月 丨 第 4 0 卷第 7 期為 中 国 中 药杂 志Ｖ。Ｉ ． 4 0 ， Ｎｏ ． 7 ｜Ａｐｒｉ ｌ ，  2 0 1 5ＣＨ Ｉ Ｎ Ａ  ＪＯ Ｕ Ｒ Ｎ Ａ ＬＯ Ｆ ＣＨ Ｉ Ｎ ＥＳ Ｅ  ＭＡ Ｔ Ｅ Ｒ Ｉ ＡＷ Ｅ Ｄ ＇ Ｃ Ａ
离子液体辅助萃取山高粱 中 4 种黄酮类成分的研究
魏金凤 “ 2 ， 张志娟、 李冬冬、 刘薇 ‘ ， 康文艺 “
（ 1 ． 河南大学 中 药研究所 ， 河南 开封 4 7 5 0 0 4 ； 2 ． 河南大 学 民生 学院 ， 河 南 开封 4 7 5 0 0 4 ）
［摘要 ］ 建立离子液体 1 －己基－ 3 －甲 基咪唑六氟磷酸盐 （ ［ＨＭＩＭ ］ ＰＦ 6 ） ／ 甲醇溶液为萃取剂超声萃取 ，结合反相高效液相色谱
同时测定山 高粱中槲皮素 －3 － 0介／ ）－葡萄糖苷 、 山柰酚－ 3 Ｔ 0 －Ｄ－葡萄糖苷 、槲皮素 和山柰酚 4 种黄酮成分的方法 。 采用 Ｐｕｒｏｓｐｈｅｒ
ｓｔａｒＲＰ－Ｃ
， 8
色谱柱 （ 4 ． 6 ｍｍ ｘ 2 5 0 ｍｍ ， 5 ｜ｘｍ ）进行分离 ， 以 乙腈－甲 醇 4％磷酸水溶液梯度洗脱 ， 流速 0 ． 7 ｍＬ ， ｒａｉｎ 1， 紫外检
测波长 3 6 0  ｒｕｎ ，柱温室温 。 在优化条件下 ，槲皮素 － 3 － 0 －／ 3 －Ｄ－葡萄糖苷 、山柰酚 －3 ｔＳ －￡ ＞－葡萄糖苷 、槲皮素和山柰酚分别在 2 ．  5 4 ｘ
1 0
“
2￣
2 ．  5 4 ， 2 ．  5 0 ｘ ｌ 0
＂ 2￣ 2 ． 5 0
， 1
．  5 4 ｘ 1 0
＂ 3￣ 0 ． 1 5 4
，
1 ． 4 9 ｘ  1 0
＂ 3￣ 0 ． 1 4 9 ｜ｘｇ线性关系 良好 ，平均加样 回收率分别为 1 0 1 ． 1 ％ ，
9 8 ． 9 0％， 1 0 1 ． 0％， 1 0 1 ． 6％ 。 该方法绿色环保 、简单快速 ，结果准确可靠 ，为 山高粱中槲皮素 － 3 － 0 －）Ｓ－ｉ） －葡萄糖苷 、山 柰酚－ 3 ＾－ 1 ）－
葡萄糖昔 、槲皮素和山柰酚的分析提供 了有效的方法 。
［关键词 ］ 离子液体 ； 山高粱 ； 黄酮 ；高效液相色谱
ＡｎａｌｙｓｉｓｏｆｆｏｕｒｆｌａｖｏｎｏｉｄｓｉｎＬｙｓｉｍａｃｈｉａｃｌｅｔｈｒｏｉｄｅｓｕｓｉｎｇ
ｉｏｎｉｃｌｉｑｕ ｉｄ－ａｓｓｉｓｔｅｄｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ
ＷＥＩＪ ｉｎ－ｆｅｎｇ 1 ＇ 2 ，ＺＨＡＮＧＺｈ ｉ－ｊ ｕａｎ 1，ＬＩＤｏｎｇ－ｄｏｎｇ ＇ ， ＬＩＵ Ｗｅｉ 1，ＲＡＮＧＷｅｎ －ｙｉ ＇ ＇
（ 1 ， Ｉｎｓｔｉ ｔｕｔｅｏｆＣｈ ｉｎｅｓｅＭａ ｔｅ ｒｉａＭｅｄｉｃａ ，Ｈｅ ＇ ｎａｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ，Ｋａｉｆｅｎｇ 4 7 5 0 0 4 ，Ｃｈｉｎａ ＼
2 ．ＭｉｎｓｈｅｎｇＣｏｌ ｌｅｇｅ 、 Ｈｅ ＇ｎａｎＵｎｉｖｅｒｓ ｉｔｙ ，Ｋａ ｉｆｅｎｇ 4 7 5 0 0 4 ，Ｃｈ ｉｎａ ）
［ Ａｂｓｔｒａｃｔ ］Ｉｎｏｒｄｅｒ ｔｏｅｓ ｔａｂ ｌｉｓ ｈｅｄａｍｅｔｈｏｄｆｏｒｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓ ｄ ｅｔｅｒｍｉ ｎａｔｉ ｏｎｏｆｉｓ ｏｑｕｅｒｃ ｉｔｒｉｎ ，ａｓ ｔｒａｇａｌ ｉｎｅ ，ｑ ｕｅｒｃｅ ｔｉｎａｎｄｋａｅｍｐｆｅｒｏｌ ｉｎ
Ｌｙｓｉｍａｃｈ ｉａｃ ｌｅｔｈｒｏ ｉｄｅｓ ，ｔｈｅ ｉｏｎｉｃ ｌ ｉｑｕｉ ｄ 1 －ｈｅｘｙｌ － 3 －ｍｅｔｈｙｌｉｍｉ ｄａｚｏｌｉ ｕｍ ｈｅｘａｆｌｕｏｒｏｐｈｏｓｐｈａｔｅ （ ［ ＨＭＩＭ ］ＰＦ 6 ） －ｍｅ ｔｈａｎｏｌｗａｓｕｓｅｄａｓ ｔｈｅｕｌ－
ｔｒａｓｏｕｎｄ －ａｓｓｉ ｓｔｅｄｅｘｔｒａｃｔ ｉｏｎｓｏｌｖｅｎｔｃｏｍｂｉｎｇｗｉ ｔｈＲＰ－ＨＰＬＣ ．ＡＰｕ ｒｏｓｐｈｅｒｓｔａｒ ＲＰ－Ｃ ， ｇ ｃｏｌｕｍ ｎｗａｓ ｕｓｅｄｗｉｔｈｔｈｅｍｏｂｉ ｌｅｐ ｈａｓｅｏｆａｃｅｔｏ－
ｎｉｔｒｉｌｅ ，ｍ ｅｔｈａｎｏｌ ａｎｄ 0 ． 4％ｐｈｏｓｐｈａｔｅａｃ ｉｄｂｙｇｒａｄ ｉｅｎ ｔｅｌｕｔ ｉｏｎａｔｔｈｅｄｅｔｅｃ ｔｉｏｎ ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈｏｆ  3 6 0 ｎｍ．Ｔｈｅｆｌｏｗｒａｔｅｗａｓ 0 ．  7 ｍＬ？
ｍｉ ｎ
＂ ‘
1
，
ａｎｄｔｈｅｃｏｌｕｍｎ ｔｅｍｐ ｅ ｒａｔｕｒｅｗａｓｔｈｅｒｏｏｍｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ．Ｕｎｄ ｅｒｔｈｅｏｐ ｔｉｍ ｉｚｅｄｃｏｎｄ ｉｔ ｉｏｎｓ ， ｔｈｅｌ ｉｎｅａｒｒａｎｇｅｓｗｅｒｅ 2 ． 5 4 Ｘ
1 0
￣ 2
－
2 ． 5 4 ， 2 ．  5 0 ｘ  1 0 
＂ 2
－
2 ． 5 0 ， 1 ． 5 4ｘ 1 0
＂
3
－ 0 ． 1 5 4 ， 1 ．  4 9 ｘ 1 0
＂
3
－ 0 ．  1 4 9 ｜ｊｉｇｆｏｒｉｓ ｏｑｕｅｒｃ ｉｔｒｉｎ ， ａｓｔｒａｇａｌｉｎｅ ，ｑ ｕｅｒｃｅｔ ｉｎａｎｄｋａｅｍｐｆｅｒｏｌ ，
ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｔｈｅａｖｅｒａｇｅｒｅｃｏｖｅｒｉｅｓｏｆｔｈｅｆｏｕｒ ｃｏｎｓｔ ｉｔｕｅｎｔｓｗｅｒｅ1 0 1 ． 1 ％， 9 8 ． 9 0％， 1 0 1 ． 0％ ， 1 0 1 ．  6 ％ ， ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｔｈｅ ｍｅｔｈｏｄｗａｓ
ｇｒｅｅｎ ， ｓｉｍ ｐｌｅ ，ｒａｐｉｄａｎｄａｃｃｕｒａｔｅ ，ａｎｄｐｒｏｖｉｄｅｄａｖａｌｉｄ ｍｅ ｔｈｏｄｆｏｒ ａｎａｌｙｓｉ ｓｏｆ ｉｓｏｑｕ ｅｒｃｉ ｔｒｉｎ ， ａｓ ｔｒａｇａｌｉｎｅ ，ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ ａｎｄ ｋａｅｍｐｆｅｒｏｌｉｎ
Ｌｃｌｅｔｈｒｏｉｄｅｓ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ ］ｉｏｎｉｃｌ ｉｑｕ ｉｄｓ ；Ｌｙｓ ｉｍａｃｈ ｉａｃ ｌｅｔｈｒｏｉｄｅｓ ；ｆｌａｖｏｎｏｉｄ ；ＨＰＬＣ
ｄｏｉ ：  1 0 ． 4 2 6 8／ｃｊｃｍｍ 2 0 1 5 0 7 1 7
山高粱 Ｌｙｓｉｍａｃｈ ｉａｃｌｅｔｈｒｏ ｉｄｅｓＤｕｂｙ 为报春花科地均有分布 ，其性平 ， 味苦 、辛 ， 具清热利湿 、活血散
植物珍珠菜的根或全草 ，亦称珍珠菜 、矮桃 、狗尾 巴瘀 、解毒消痈之功效⑴ 。 山高粱主要化学成分为黄
草等 ，在我 国东北 、华北 、华东 、 中南 、西南及河北等酮类 ［ 2 ］ 、三萜类 ［ 3 4 ］ 、有机酸等 ，具有抗肿瘤 ［ 5 ］ 、抗氧
［收稿 日期 ］ 2 0 1 4 ＊ 0 9 － 3 0
［基金项 目 ］ 河南 省青年 骨干教 师计划项 目 （教高 ［ 2 0 1 2 ］ 7 0 4 号 ） ； 河南省科技厅基础 前沿 计划 项 目 （ 1 3 2 3 0 0 4 1 0 2 5 5 ， 1 4 2 3 0 0 4 1 0 1 2 3 ） ； 河南 省
教育斤 自 然科学研究项 目 计划项 目 （ 2 0 1 0Ａ 2 1 0 0 0 2 ） ；河南大学研究生教育综合改革项 目 （ Ｙ 1 4 Ｕ 0 0 8 ） ； 河南大学 大学生创新创业训练计 划 项 目
（ 1 4ＮＡ 0 1 6 ） ； 河南大学民生学院教育教学改革研究项 目 （ ＭＳＪＧ 2 0Ｍ 0 5 2 ） ； 河南省高 等学校重点科研项 目 （ 1 5 Ａ3 6 0 0 1 4 ）
［通信作者 ］ ＊康文艺 ， Ｔｅｌ ： （ 0 3 7 1 ） 2 3 8 8 0 6 8 0 ， Ｅ－ｍａ ｉｌ ：ｋａｎｇｗｅ ｎｙ＠ ｈｏｔｍａ ｉｌ．ｃ ｏｍ
？ 1 3 0 5 ．
2 0 1 5 年 4 月 ｜ 第 4 0 卷第 7 期為 中 国 中 药 杂 志Ｖｏ ｌ ． 4 0 ，Ｎ。 ． 7｜Ａｐｒｉ ｌ ， 2 0 1 5＆ Ｊ ＯＵＢＮＡ Ｉ Ｏ ＦＣＨ ＩＮＥ Ｓ Ｅ  ＵＡ Ｔ Ｅ Ｒ Ｉ Ａ Ｕ Ｅ ＤＣＡ
化等生物活性 ［ 6 ］ 。标本存于河南大学中药研究所 。
目 前 ， 中药中有效成分提取主要 以有机溶剂为 2 方法
主 ，结合热流提取或超声提取 ［ 7 ＿ 8 ］ ， 这些方法有机溶 2 ． 1 对照品溶液的制备
剂用量大 ，操作步骤繁琐 ，耗时较长 。 离子液体是近分别精密称取槲皮素 － 3 － 0 －／ 8 －Ｄ －葡 萄糖苷 3 ． 1 8
年来在绿色化学的框架下发展起来的全新的介质和ｍｇ ， 山 柰酚－ 3 ｔＳ－Ｄ－葡萄糖苷 3 ．1 2 ｍｇ ， 槲皮素 1 ． 9 2
软功能材料 ， 由 阴 、 阳离子组成的一类极性溶剂 ，具ｍｇ ， 山柰酚 1 ． 8 6 ｍｇ置于 5ｍＬ量瓶中 ，用甲醇溶解并
有色散力 、极性作用力 、氢键作用力 、共辄作用力 、离稀释至刻度 ， 摇匀 ， 即得槲皮素 － 3 － 0 －／ 3 －Ｄ－葡萄糖苷
子电荷作用力等 ［ 9 ］ 。 离子液体具有蒸气压低 、热稳 6 3 6 ｍｇ？Ｃ， 山柰酸－ 3 ｔ 8 －Ｄ－葡萄糖苷 6 2 4 ｍｇ？Ｌ ＂ 1 ，
定性好 、液程宽 、溶解强和可设计调节等特性 ［ 1° ］ 。槲皮素 3 8 4 ｍｇ？Ｌ Ｍ ， 山柰酚 3 7 2ｍｇ？Ｌ ． 1 的对照品
离子液体作为萃取剂的添加剂用于中药有效成分提贮备液 。 分别精密量取各贮备液 1 ， 1 ， 0 ． 1 ， 0 ． 1ｍＬ置
取 ，不仅环境友好 ，而且选择性高 ，兼具高效萃取和 5 ｍＬ 量瓶中 ，用甲醇稀释至刻度 ， 即得混合对照品溶
预富集的优点 ［ ＂ ］ 。液 ，置于冰箱 （ 4 ｔ ） 内避光保存备用 。
本课题组在前期的研究基础上 ［ 1 2 “ 5 ］ ，建立了离子 2 ． 2 供试品溶液的制备
液体 1 －己基－ 3 － 甲基咪唑六氟磷酸盐 （ ［ ＨＭ ＩＭ ］ ＰＦ 6 ） 甲取 山高粱样品粉末 1 ． 0 ｇ ，精密称定 ，加人适量
醇溶液为萃取剂 ，结合高效液相色谱同时分离测定山提取溶液 ，超声萃取后离心 5ｍｉｎ ， 吸取上层清液 ，经
高粱中槲皮素－ 3 － 0 －） 8 －Ｄ－葡萄糖苷 、山柰酚－ 3 ＾ 8 － 0 －葡萄 0 ．  2 2 ｊｊｕｎ 微孔滤膜过滤 ，取续滤液 ， 即得 。
糖苷 、槲皮素 、山柰酚 4 种黄酮成分的方法 ，为山高粱 2 ． 3 色谱条件与系统适用性试验
药材的质量控制提供科学依据 。Ｐｕｒｏ ｓｐｈｅｒｓ ｔａｒＲＰ－Ｃ Ｉ 8 色 谱柱 （ 4 ．  6ｍｍｘ 2 5 0
1 材料ｍｍ ， 5ｐｍ ） ；流动相乙腈 （ Ａ ） －甲醇 （ Ｂ ） ＂ 0 ． 4 ％磷酸水
岛津 ＬＣ－ 2 0ＡＴ 系列 高效液相色谱仪 （ 日 本岛溶液 （ Ｃ ） ； 梯度洗脱 （ 0 ￣ 3 5 ｍｉｎ ， 1 8％Ａ ， 8 2 ％Ｃ ；
津 ） ： ＬＣ － 2 0ＡＴ液相色谱输液泵 ， ＣＴＯ － Ｉ ＯＡＳ柱温箱 ， 3 5－ 4 0 ｍｉｎ ， 1 8 ％－ 0％Ａ ， 0％－ 6 4 ％Ｂ ， 8 2 ％－ 3 6 ％
ＳＰＤ－ 2 0 Ａ紫外检测器 ， ＬＣ－Ｓｏｌｕｔ ｉｏｎ色谱数据处理系Ｃ ； 4 0 ￣ 6 0ｍｉｎ ， 6 4 ％Ｂ ， 3 6 ％Ｃ ） ； 流速 0 ． 7ｍＬ ．
统 ； ＫＱ － 5 0 0 ＤＢ 型超声波清洗器 （ 江苏 昆山市超声仪ｎｉ ｉｎ Ｍ ；柱温室温 ；检测 波长 3 6 0 ｎｍ ；进样量 2 0 （ ｊｕＬ。
器有限公司 ） ； 分样筛 （ 浙江上虞市五 四 仪器筛具按上述色谱条件 ，精密吸取对照品溶液和供试品溶
厂 ） ； ＴＧＬ－ 1 6 型高速离心机 （ 江苏金坛市 中大仪器液各 2 0 ｐＸ ，分别进样 ，记录色谱图 ，见图 1 。 在此色
厂 ） ； ＡＢ 1 3 5 －Ｓ 型 1 ／ 1 0 万级电子天平 （ 梅特勒 －托利谱条件下 ， 样品 中槲皮素 －Ｓ －Ｏｆ－ Ｚ） －葡萄糖苷 、 山柰
多仪器有限公司 ） 。酚 葡萄糖苷 、槲皮素 、山柰酚色谱峰的保留时
槲皮素 － 3 － 0名 －／） －葡萄糖苷 （批号 1 3 0 4 0 4 ） ， 山柰间与对照品一致 ， 4 种成分的色谱峰能达到较好 的
酚－ 3 ｔ 8 －￡＞－葡萄糖苷 （ 批号 1 2 0 5 2 4 ） ’ 槲 皮素 （ 批号分离 ，样品其他成分对欲测成分的测定无干扰 ，理论
1 2 1 1 2 0 ） ， 山柰酚 （ 批号 1 2 0 7 1 8 ） 均购于成都普菲德塔板数均不低于 5  0 0 0 。
生物技术有限公司 ， 纯度均大于 9 8％ 。 乙 腈 ， 甲醇 2 ． 4 线性关系考察
（
ＨＰＬＣ 级 ） ；磷酸 （ 天津市福晨化学试剂厂 ） ；水为纯取上述混合对照品Ｃ备液分别加 甲 醇稀释成不
净水 （杭州娃哈哈百利食品有限公司 ） 。 1 －己基－ 3 －甲同浓度 的对照 品溶液 ，槲皮素 － 3 － 0 －＾ 8 － ／）－葡萄糖苷的
基咪唑六氟磷酸盐 （ ［ ＨＭＩＭ ］ ＰＦ 6 ，赛默飞世尔科技公质量浓度分别为 1 2 7 ， 6 3 ．  6 ， 2 5 ．  4 ， 5 ． 0 9 ， 2 ． 5 4 ， 1 ． 2 7
司 ，美国 ） ；溴化 1 －丁基－ 3 － 甲基咪唑 （ ［ ＢＭＩＭ ］ Ｂｒ ，默ｍｇ ？Ｌ— 1； 山 柰酚 － 3 － ） 8 －Ｚ） －葡萄糖苷的质量浓度分别
克股份两合公司 ，德 国 ） ； 1 －丁基－ 3 － 甲基咪唑四氟硼为 1 2 5  ， 6 2 ． 4 ， 2 5 ．  0 ， 4 ． 9 9 ， 2 ． 5 0 ， 1 ． 2 5 ｍ ｇ．Ｌ — 1 ； 槲皮
酸盐 （ ［ ＢＭＩＭ ］ ＢＦ 4 ，默克股份两合公司 ，德 国 ） ； 1 －丁素的 质 量浓 度分 别 为 7 ． 6 8 ， 3 ．  8 4 ， 1 ． 5 4 ， 0 ． 3 0 7 ，
基－ 3 －甲基咪唑六氟磷酸盐 （ ［ ＢＭＩＭ ］ ＰＦ 6 ，默克股份 0 ． 1 5 4 ， 0 ． 0 7 6  8ｍｇ ？Ｌ— 1 ；山柰酚的质量浓度分别为
两合公司 ，德国 ） 。 7 ． 4 4 ， 3 ． 7 2 ， 1 ． 4 9 ， 0 ． 2 9 8 ， 0 ． 1 4 9 ， 0 ． 0 7 4  4ｍｇ．ＩＴ 1 。
山高粱于 2 0 1 4 年 6 月采集于贵州省贵阳 市花精密吸取各混合对照品溶液 2 0 ｐＬ ，按上述色谱条
溪区 ， 由河南大学中药研究所生药教研室李昌勤教件测定 ，记录各组分峰面积。 以进样量 （Ｘ ，网 ） 为横
授鉴定为报春花科植物 山高粱 Ｌ ．ｄｅｔｈｒｏｎｅｓＤｕｂｙ ，坐标 ，色谱峰峰面积积分值 （ 1 0 为纵坐标进行线性
？ 1 3 0 6 ？
魏金凤等 ：离子液体辅助 萃取山 高粱 中 4 种黄酮类成分 的研究
ａ ，
回归 ， 回归方程及线性范围见表 1 。 结果表明上述 4
，4种化合物在线性范 围 内进样量与峰面积线性关系
良好 。
3 结果与分析
＼丨 丨 3 ． 1 萃取条件优化
ｏ

ｗ

Ｊｏ
一“Ｓ Ｓ Ｓ ＾ 3 ． 1 ． 1 萃取剂 的选择 萃取剂的不 同对 目标分析
物的萃取率有很大影响 ，本实验首先选取 0 ． 5ｍｏ ｌ＿
Ｌ — 的 ［ ＨＭ ＩＭ ］ＰＦ 6 ，［Ｂ ＭＩＭ］ＢＦ 4 ， ［ＢＭ ＩＭ ］ＰＦ 6 ，
［ ＢＭＩＭ ］ Ｂ ｒ 离子液体 甲醇溶液及纯 甲醇为萃取剂 ，
， 固液 比为 1 ： 1 0 （ ｇ？ｍＬ ＂ 1） ，超声 2 5 ｍ ｉｎ ， 5 0 0 0 ｒ．
Ｉ ＩＡ 3 Ｉ 4ｍｉｎ
—
 1 离心 ， 比较其对 目标分析物的萃取效果 ， 结果

1 ‘
 见图 2 。 4 种离子液体溶液对 目标分析物的萃取率
01 0 2 0ｊＯ 4 0 5 0 6 0
“ ｍ ｉ＂ 均明显高于 甲醇溶液 ，且 ［ ｈｍｉｍ ］ ＰＦ 6 甲醇溶液 为最
1 ．ｗ皮素－ 3 － 0分 0 －葡萄糖 ＃ ； 2 ． 山 棄 醉 － 3介》 －葡 萄 ｉｆ＃ ； 3 ，ｍ ｉｋ高 ，这与离子液体对有机物的强溶解性及各离子液素 ． 4山水 酌
图： 合＾对照品⑷ 和 山高粱供试品⑶ 的隱 ｍ体的结，有关。 故本 实验选择 ［ ＨＭｍ ］ ＰＦ 6 甲醇溶
Ｆ ｉｇ ． 1ＨＰＬＣｃｈ ｒｏｍａ ｔｏｇｒａｍｓｏｆｒｅｆｅｒｅｎ ｃｅ ｓｕｂｓ ｔａｎ ｃｅｓ （Ａ）ａｎ ｄ液作为卒取剂 。
Ｌｙｓｉｍｕｃｈ ｉａ ｃｌｅｔｈｒｏｉｄｅｓＳ ａｍｐ＼ ｅ （ Ｂ ） 3 ． 1 ． 2 分样筛 目 数的选择 按实验方法 ，其他实验
表 1 4 种化合物的 回归方程和线性范 围
Ｔａｂｌ ｅ 1Ｒ ｅｇｒｅｓ ｓｉ ｏｎｅｑ ｕａ ｔｉ ｏｎｓ ａｎｄ ｌ ｉｎ ｅａ ｒｒａｎｇｅｓｆｏｒ ｆｏｕｒ ｃｏｍｐｏｕ ｎｄｓ

化合 物

回归方程

ｒ

线性范 围／＾ｇ

槲皮 素－ 3 － 0介Ｄ －葡萄糖苷Ｙ＝ 3 ．  1 3ｘ ｌ Ｏ 6 尤 ＋ 1 ． 0 6ｘ 1 0 4 0 ． 9 9 9 9 2 ．  5 4 ｘ 1 0 ＂ 2－ 2 ． 5 4
山柰酚 － 3 － 0 － ／）－葡 萄糖苷 Ｆ＝ 2 ．  9 9ｘ 1 0 6 尤 ＋ 9 ． 2 8ｘ 1 0 3 0 ． 9 9 9 9 2 ．  5 0 ｘ 1 0 ＂ 2 ￣ 2 ． 5 0
槲皮素ｙ＝ 5 ． 5 6 ｘ ｌ 0 6 Ｘ － 2 ． 5 3 ｘ ｌ 0 3 0 ． 9 9 9 9 1 ． 5 4 ｘ 1 0 ＂ 3 ￣ 0 ． 1 5 4
山柰酌

Ｙ＝ 6 ．  9 6 ｘ ｌ 0 6 义 － 2 ． 9 3ｘ 1 0 3

0 ． 9 9 9  9

1 ． 4 9ｘ ｌＯ ＇ 3 ￣ 0 ． 1 4 9
。 8
丨
液体凝聚成团 ，从而阻碍有效成分的释放 ｎ 6 ］ 。
0  7
＇ｍｍｘ口＿
－ 0  6＿ ＿ ＿ 口 【 ＢＭ Ｉ Ｍ 】 Ｐ Ｆ
1
0 5 ｒ｜ ＪＦｉ Ｏ Ｓ ，Ｊ0  4ｈ ｉ■ 0  ［ ＢＭ ＩＭ Ｊ Ｐ Ｆ 0 7 ．＿Ｈ
ｐｌ ｉ Ｅ ：Ｉ［Ｉ Ｉ ！。
：
丨 丨 丨 丨 ＿ 丨 丨 1＿一一 ．一■— ．豪 ： ｒｔｌＬＪ ｉｎ ：槲 皮 糖 ｎ ＝ 山 念吩？ 3 －务／）－匍 妆糖 汗 槲皮 ｉＫ Ｉ Ｉ Ｉ  －ＩｔＷ
0  Ｉｒ「暴Ａ 、 囊
图 2 萃取剂种类对 4 种黄酮化合物萃取率的影响
Ｆｉｇ ．  2Ｅｆｆｅｃ ｔｏｆ ｄ ｉｆｅｒｅｎｔ ｔｙｐｅｓｏｆ ｅｘｔ ｒａｃｔ ｉｏｎ ｓｏｌ ｖｅｎｔｓｏｎｅｘｔｒａｃ －图 3分样筛 目 数对 4 种黄酮化合物萃取率的影响
ｔ ｉｏｎｅｆｆｉ ｃ ｉｅｎｃ ｉｅ ｓｏｆｆｏｕｒｆｌ ａｖｏｎｏｉｄｓＦ ｉｇ ． 3Ｅｆｆｅｃ ｔ ｏｆ ｍｅｓｈ ｎｕｍｂ ｅ ｒｏｆ ｓａｍｐ ｌｅ ｓｉ ｅｖ ｅｏｎ ｅｘｔ ｒａｃ ｔｉｏｎ ｅｆｆｉ？
ｃｉ ｅｎｃｉｅｓ ｏｆｆｏｕ ｒｆｌａｖｏｎｏｉｄ ｓ
条件相 同 ， 分别考察 了样品粉碎 目 数为 1 0 ， 2 4 ， 4 0 ，
5 0
，
7 0
，
9 0 目对 目标分析物萃取率的影响 ， 结果见图 3 ． 1 ． 3 萃取剂浓度的选择 在上述优化的基础上 ，
3 。 随着分样筛 目数的增大 ， 药材粉末的粒度越小 。 分别 以浓度为 0 ． 1 ， 0 ． 2 ， 0 ． 4 ， 0 ． 6 ， 0 ． 8 ， 1 ． 0 ｍ ｏ ｌ？Ｌ ＂ 1
从 图中可以看出 ， 5 0 目分样筛对 目标分析物的萃取的 ［ ＨＭ ＩＭ ］ ＰＦ＾子液体溶液为萃取剂 ， 比较浓度对
率最高 ， 这是因为粉末粒度越小 ，样品中含有 的有效目标分析物萃取率的影响 ，结果见 图 4 。 当 萃取剂
成分越易被提取 ，但当粉末粒度太小时 ，容易被离子浓度在 0 ． 1－ 0 ． 6 ｍｏ ｌ ？Ｌ ． 1 时 ，对 目标分析物的萃取
？ 1 3 0 7？
2 0 1 5 年 4 月
｜ 第 4 0 卷第 7 期裔 中 国 中 药杂志Ｖ 。 丨 ． 4 0 ， Ｎ ｏ．  7 ｜Ａｐ ｒｉｌ ， 2 0 1 5ＣＨ ＩＮＡ
 ＪＯ ＵＲＮＡ Ｌ  ＯＦ ＣＨ Ｉ Ｎ ＥＳＥ  ＭＡ ＴＥＲ ＩＡ  ＭＥ Ｏ Ｉ ＣＡ
率逐渐增加 ， 当继续增加时 ，萃取率趋于平稳或略有现增大 的趋势 ，且在 3 5ｍ ｉｎ 达到最大 ， 之后随着时
下降 。 这是因为随着离子液体浓度 的增加 ， 离子液间 的延长 ，萃取率却降低或基本保持恒定 。 这可能
体溶液的溶解能力增加 ， 但溶剂的扩散能力 随之降是因为超声时间过长 ，样品 中其他成分溶出量增多 ，
低 ， 溶 剂 则 较难进 人药材基质 内 ， 导致萃 取率下提取液黏度增大 ， 在后期操作中有所损耗 ，对 目标成
降… 1 。 因此实验选择 0 ． 6ｍｏ ｌ．Ｌ ． 1 为最佳萃取剂分的检测有一定的影响 ［ 1 8 1 9 ］ ， 其他因素还有待进一
浓度 。步研究。
ｏ ． ｌ－ 9ｍ0 2棚 ： ■ ．？ ！ 3 4 5
0 Ｌ丄 1 」＿丄Ｗｍ． ＾ 0 ． 1 ； ；
＞★／ ■ ）－ ｆ ｉ ｌ 丨 甸 Ｗｉ ｉ Ｖ山 ， 1： 抑 －／ｍ－ｆｉｉ Ｓ ｉ ｉ Ｗ ｉ （ 丨ｉ ｌ ｉ ．1 － （Ｖ）ｏ 1 ＿纖＿ ， 1 ． 1＿徽讀 ． ■
Ｋｉｎｉ ｔ ＾ － ．ｗ ； ．／ ／． ／ｊ－ ｆｒｉ ｉ ｓ ：ｊ Ｗｔ ｉｖ山 ？油 匁ｗｎ ＿ＷＩ ＩＪ￡ ＪＫｉ ｉ ｉ ．ｉ ： （Ｖ）
图 4 萃取剂浓度对 4 种黄酮化合物萃取率的影响
Ｆ ．．Ｆｆｒ ，ｒ， ， ？ ，ｔ ， 图 6 超声时间对 4 种黄酮化合物萃取率的影响ｒ ｉｇ．  4 Ｌ ｔ ｔｅｃ ｔ ｏｆｅｘ ｔｒａｃ ｔ ｉ ｏｎ ｓｏ ｌ ｖｅｎｔｃｏｎｃｅｎ ｔｒａ ｔｉ ｏｎｏｎｅｘ ｔ ｒａｃ ｔ ｉ ｏｎ
ｒ ｒ ．Ｆｉ ｇ．  6Ｅｆｆｅｃ ｔｏｆｕｌ ｔｒａｓｏｕ ｎｄｔ ｉｍｅ ｏｎｅｘ ｔｒａｃ ｔ ｉｏｎｅｆｆｉｃ ｉｅｎｃ ｉ ｅｓｏｆｆｏｕ ｒ
ｅ ｆｆ ｉｃ ｉｅｎｃ ｉ ｅｓ ｏｆ ｆｏｕｒ ｆｌ ａｖｏｎｏ ｉｄ ｓ
ｆｌａｖｏｎｏ ｉ ｄｓ
3 1 6 离心速度的选择 在上述优化出 的实验条
二，件下 ，选择 3 0 0 0 ， 4 0 0 0 ， 5 0 0 0 ， 6 0 0 0 ， 7  0 0 0 ， 8 0 0 0ｒ
1 ： 3 0 ， 1 ： 5 0 ， 1 ： 8 0（ ｇ ． ｍＬ） 吋 ’离子液体溶液对 Ｓ ．ｍ ｉ ｎ － 1 考察离心速度对 目标分析物萃取率的影响 ，标分析物萃取率 的影响 ’ 结果 见图
＞随着 同液 比 结果见图 7 ， 萃取率在 7  0 0 0 ｒ． 隱 丨 时达 到最大 ，＿ 力卩 ’ 貞― 目 ’ 故实验选择 7  0 0 0 ｒ？ｍ ｉｎ  ‘ 1 作为离（、速度进行方法并在 1 ： 3 0 时达到最大值 ，说明此时样品 中 的 目标分
析物 已经基本被萃取完全 ， 当继续加 大萃取剂 比例
时 ， 萃 取率 反而 下 降 ， 这 可能 与 离 子液 体 的 黏度 。
有关 。0 7 ＾ 1國
ｏ， 論ｉｌ趕0 8园 雄 0 3 「＿圓 「 0 7 0 0 0： Ｌ 1ｏ ： ；：－ ［＿ ［ 画 一｜ 0 ． 5 ？ｐ｜＾Ｏ Ｉ 1 0 0— 沒纖 ，
5
Ｉ ；ｒ｜ ＿ 「ｏ Ｉ ｓＳ图 7 离心速度对 4 种黄酮化合物萃取率的影响
ｏ
．
ｌ ｒ
＇
ｍ． Ｆ ｉｅ ． 7Ｅｆｆｅｃ ｔｏｆｃｅｎｔｒｉｆｕｅａｔｉ ｏｎｓｐ ｅｅｄｏｎ ｅｘｔ ｒａｃ ｔ ｉｏｎｅｆｆ ｉｃ ｉ ｅｎ ｃ ｉｅｓｏｆ
ｐ ｉ 1 1 1ｍｍ ． 1 1 1＼ｍｍ ，— ． 6 6
槲皮 粲－ ．ｗ入 片－ ／ ）？油萄櫬 丨 丨 ： 槲皮杀 ｉ ｉ ｉ ．ｉ； （Ｖ） ｆｏｕｒｆｌａｖｏｎｏ ｉ ｄｓ
图 5 固液比对 4 种黄酮化合物萃取率的影 响
Ｆｉ ｇ ． 5Ｅｆｆｅｃ ｔｏｆ ｉｏｎｉ ｃｌ ｉｑ ｕ ｉ ｄｔｏｓａｍｐ ｌｅｒａｔｉ ｏ ｏｎｅｘ ｔｒａｃ ｔｉ ｏｎｅｆｆｉ － 3 ． 2方法学验证
ｃ ｉｅｎｃ ｉ ｅｓｏｆ ｆｏｕ ｒｆｌａｖｏ ｎｏ ｉｄｓ 3 ． 2 ． 1精密度试验 精密吸取 2 ． 1 项下 的混合对
照品溶液 ，按上述色谱条件 ， 连续进样 6 次 ，测定槲
3 ． 1 ． 5 超声时 间 的选择 分别选择 5 ， 1 0 ， 1 5 ， 2 5 ，皮素 － 3 － 0 －ｙＳ －Ｄ －葡 萄糖苷 、 山 柰 酚－ 3 －ｙ 3 － Ｚ） － 葡萄糖苷 、
3 5
，
4 5ｍｉｎ 为超声时间 ， 浓度为 0 ． 6ｍｏ ｌ？Ｌ ＿ 、 固液槲皮素 、 山 柰酚 的 峰 面积 ， 经计算得其峰 面积的
比为 1 ： 3 0 ， 进行超声辅助萃取 ， 比较不 同超声时间ＲＳＤ 分别为 0 ．  7 0 ％ ， 0 ． 7 0 ％ ， 0 ．  7 0 ％ ， 0 ． 6 0 ％， 表 明
对 目标分析物萃取率的影 响 ， 结果见 图 6 。 随着超仪器的精密度 良好 。
声时间的延长 ，溶剂对 目标分析物的萃取率基本呈 3 ． 2 ． 2 稳定性试验 精密吸取最佳条件下制备的
？ 1 3 0 8．
．魏金凤等 ：离子液体辅助萃取山 高粱中 4 种黄酮类成分的研究
同一供试品溶液 2 0  ｜ｘＬ ，避光条件下室温放置 ，分别丁基－ 3 －甲基咪唑呈结晶状 ，故需用合适的溶剂来溶
在 0 ， 3 ， 6 ， 9 ， 1 2 ， 2 4 ｈ 进样测定 ， 槲皮素 － 3 － 0 － 0 － 0 －葡解离子液体 。 本实验 比较 了水 、 甲醇 、 乙腈 3 种溶
萄糖苷 、山柰酚－ 3 ｔ8 －Ｚ ）－葡萄糖苷 、槲皮素 、山柰酚峰剂 ，发现 1 －己基－ 3 － 甲 基咪唑六氟磷酸盐 、 1 －丁基－ 3 －
面积的 ＲＳＤ 分别为 3 ． 2 ％ ， 2 ． 9 ％， 2 ． 8 ％， 2 ．  8％ ， 表甲基咪唑六氟憐酸盐与水不互溶 ，且离子液体乙腈
明供试品溶液在 2 4 ｈ 内基本稳定 。溶液对 目标分析物的提取率不如离子液体甲醇溶液
3 ． 2 ． 3 重复性试验 精密称取同一批 山高粱样品好 ，故实验选择 甲醇作为溶剂 。
6 份 ，在最佳条件下制备供试品溶液 ，按上述色谱条从实验中可以得出添加有离子液体的 甲醇溶液
件分别进样测定 ，样品 中Ｗ皮素 葡萄糖苷 、 比纯 甲醇对 目标分析物的萃取率更高 ，这是因为离
山柰酚 － 3升／）－葡萄糖苷 、槲皮素 、 山柰酚峰面积的子液体作为一种新型溶剂 ，对纤维素具有较高 的溶
ＲＳＤ 分别为 1 ． 3 ％ ， 1 ． 3 ％ ，1 ． 5 ％ ， 1 ．  4 ％ ， 表 明方法解能力 ，而中药材植物 的初生细胞壁 主要 由纤维
重复性 良好 。素组成 ，是溶剂提取生物活性成分的主要障碍 ，纤维
3 ． 2 ． 4 检测限与定量限 取 2 ． 4 项下线性范围最素的溶解促进了有效成分的溶 出 ，继而提高 了提取
低点 的混合对照品溶液 ，逐步稀释后 ，按 2 ． 3 项下色效率 ［ ｜ 6 ］ 。
谱条件进行测定 ，信噪比为 3 和 1 0 左右时的相应浓本实 验 比较 了［ＨＭ ＩＭ ］ＰＦ 6 ，［ＢＭ ＩＭ］ＢＦ 4 ，
度或注入仪器的量 即分别为检测限和定量 限 。 ［ＢＭ ＩＭ ］ ＰＦ 6 ，［ＢＭ ＩＭ ］Ｂｒ 4 种离子液体甲醇溶液对
测得槲皮素 － 3 － 0 －； 8 －Ｄ－葡萄糖苷 、 山柰酚 － 3 － 0 － 7 ） －葡萄目标分析物萃取率的影响 ，发现 ［ ＨＭ ＩＭ ］ ＰＦ 6 比另 外
糖苦 、槲皮素 、 山柰酚 的检测 限分别 为 0 ． 4 6 ， 0 ． 7 4 ， 3 种离子液体更有优势 。 由此可 以看 出 ，离子液体
0 ． 1 4 ， 0 ． 1 6ｎｇ ， 定量 限 分别 为 1 ． 5 3 ， 2 ． 4 7 ， 0 ． 4 6 ，的 阴阳离子对提取效率均有影响 。 但不同类型离子
0 － 5 5 ｎｇ 。 液体对不同类型活性成分的提取尚未发现明显的特
3 ． 2 ． 5 加样回收率试验 取山高粱粉末 9 份 ，每份异性和规律性 ，有待更深人的开展研究 。
约 0 ． 5ｇ ，分为 3 组 ，按优化条件制备供试品溶液 ，进本文首次 以离子液体 1 － 己基－ 3 － 甲基咪唑六氟
行测定 ，得出样品 中槲皮素 － 3 － 0 ＂ｖ 8 －Ｚ）－葡萄糖苷 、山柰硼酸盐 （ ［ ＨＭ ＩＭ ］ ＰＦ 6 ） 甲醇溶液为萃取剂超声萃取 ，
酚 － 3 Ｔ8 －Ｄ －葡萄糖苷 、槲皮素 、山柰 酚的含量 ，再分别利用高效液相色谱法 同 时分离测定 山高粱 中槲皮
加人相当于样品 中槲皮素－ 3 －Ｏ－ｙＳ－Ｄ －葡萄糖苷 、 山柰素－ 3 －Ｃ＾－Ｄ －葡萄糖苷 、 山柰酚－ 3 －＾ 6 －／）－葡萄糖苷 、槲
酚 － 3 Ｔ 8 －Ｚ）－葡萄 糖苷 、 槲皮素 、 山 柰酚质量分数 的皮素和山柰酚 。 在优化的实验条件下 ， 4 种化合物
8 0％ ， 1 0 0 ％， 1 2 0 ％ 的对照 品 ， 进行测定 ，计算加样萃取率高 ，分离完全 。 该法绿色环保 ，操作简单快
回 收 率 ， 四 者 的 加 样 回 收 率 分 别 为 1 0 1 ． 1 ％ ，速 、定量结果可靠 ， 为 山高粱中槲皮素 － 3 － 0 － ｙ8 －Ｚ） －葡萄
9 8 ． 9 0％ ， 1 0 1 ． 0 ％ ， 1 0 1 ． 6％ ；ＲＳＤ 分 别 为 1 ． 9％ ，糖苷 、 山柰酚－ 3介 0 －葡萄糖苷 、槲皮素和山柰酚的提
1 ． 5 ％， 2 ．1 ％， 2 ． 7％ 。取检测提供了一种新的方法。
3 ． 3 样品含量测定 ［参考文献 ］
精密称定山高粱粉末 1 ． 0 ｇ ，按优化条件制备供 ［ 1］ 中华本草编委会 ． 中华本草 ． 第 6 卷 ［ Ｍ ］ ． 上海 ： 上海科学
试品溶液 ，依法进行测定 ， 按外标法计算 ，槲皮素 － 3 －Ｓ＾ａ ｉ Ｊｌｇｔ ， 1 9 9 9 ．
ｏ－科－葡萄糖苷 、 山柰酸邻－／）－葡萄糖苷 、槲皮素 、 ［ 2 ］直物 高梁保肝 、降血糖作
，
． ？ ， Ｖ ＡＩ6 Ｌ．／。 、 ／ 、 ｒｔｈ ，ｒ Ｍ 。用及化学成分研究 ［ Ｄ ］ ． 幵封 ：河南大学 ， 2 0 1 2 ＊山亦酔的质＿分数 （ ｎ ＝ 3 ） 分别为 8 ｌ 5 ’ 7 4 ｌ ’ 4 5 ． 3 ， ⑴ 岳淑梅 ， 陈百泉 ，苑鹏 飞 ，等 ． 矮桃化学成分研究 ［ ｊ ］ ． 中 国药
2 6 ． 5？ｇ＇ 0学杂志
，
2 0 ｌ ｌ ， 4 6 （ 5 ） ： 3 4 ｌ ．
4讨 与结论 ［ 4 ］ＬｉａｎｇＤ ， Ｈａ ｏＺ Ｙ ， Ｚｈａｎｇ ＧＪ ， ｅｔ ａｌ．Ｃ ｙｔｏ ｔｏｘ ｉｃ ｔｒｉ ｔｅ ｒｐｅ ｎｏｉｄ ｓ ｓａｐｏ －
本实验先后试用了 甲醇－水 、 甲醇＂ 0 ． 4 ％磷酸水ｎ ｉｎｓ ｆｒｏｍＬｙｓｉｍａｃｈ ｉａｃｌｅ ｔｈｒｏｉｄｅｓ ［Ｊ ］ － ＪＮａ ｔＰｒｏｄ ， 2 0 ｌ ｌ ， 7 4 （ 1 0 ） ：
溶液 、乙腈 －水 、 乙腈 ＂ 0 ． 4 ％ 磷酸水溶液 、 乙 腈－甲醇－ 2 1 2 8 －
0 ． 4 ％ 磷酸水溶液 ，从峰形 、 分离情况和 出峰时间等 ［ 5 ］Ｘｕ ＱＭ ， Ｌｉｕ ＹＬ ． ＦｅｎｇＹＬ ． ｅ，ａｌ ．ＡｎｅｗＥ － ｒｉ ｎ ｇ＾ ．ａｃ ｔｏｎｅ ｐｅ ｎ，ａ －
ｃ ｙｃｌ ｉ ｃｔｒｉ ｔｅｒｐｅ ｎｅｆｒ ｏｍＬｙｓ ｉｍａｃｈ ｉａｃｌｅｔｈｒｏｉｄｅｓａｎｄｉ ｔｓｃｙ ｔｏ ｔｏｘｉｃ ａｃ －综合分析 ， 选择乙腈－ 甲醇 4 ％ 碟酸水溶 液梯度 ｔｉ ｖｉｔｙ⑴ ｃ ｈ ｅｍＮ ａ ｔＣｏｍｐｄ ＞ 2 0 1 2 ） 4 8 （ 4 ） ： 5 9 7 ．洗脱 。 ［ 6 ］ 李彩芳 ，宋艳丽 ， 刘瑜新 ， 等 ． 珍珠菜 的抗氧化活性 ［ Ｊ ］ ． 精细
由于离子液体大多为较黏稠 的液体 ，且溴化 1 －化工 ， 2 0 0 8 ， 2 5  （ 1 2 ） ：  1 1 9 1 ．
？ 1 3 0 9 ？
2 0 1 5 年 4 月 ｜ 第 4 0 卷第 7 期急 中 国 中 药 杂志Ｖ。 1． 4 0 ， Ｎ。 ． 7 ｜Ａｐｒ ｉ ｌ ，  2 0 1 5ＣＨ Ｉ ＮＡＪ ＯＵ ＲＮ Ａ Ｌ ＯＦ ＣＨ ＩＮＥＳＥ  ＭＡ Ｔ ＥＲ Ｉ Ａ Ｍ Ｅ ＩＸＣ＊
［ 7 ］ＫｏｈＥ ， Ｗ ｉｍａｌａｓｉｒ ｉＫＭＳ ，Ｃ ｈａｓｓｙＡ Ｗ ， ｅｔ ａｌ．Ｃｏｎ ｔｅ ｎ ｔｏｆ ａ ｓｃ ｏｒ－ｉｎｄｕｃｅｄａｃｕｔｅ ｌ ｉ ｖｅｒ ｉｎｊ ｕｒｙ ｉ ｎｍｉｃ ｅ［ Ｊ ］ ．ＡｆｒＪＰｈａｒｍ Ｐｈａｒｍａｃｏ ｌ ，
ｂ ｉｃａｃ ｉｄ ， ｑｕｅｒｃｅ ｔｉｎ ， ｋａｅｎｐｆｅｒｏｌａｎｄｔｏ ｔａｌ ｐｈｅｎｏ ｌ ｉｃｓｉ ｎｃｏｍｍｅ ｒｃ ｉａｌ 2 0 1 2 ， 6 （ 1 0 ） ： 7 4 3 ．
ｂ ｒｏｃ ｃｏ ｌ ｉ ［Ｊ ］ ．ＪＦｏｏｄ ＣｏｍｐｒｏＡ ｎａ ｌ ， 2 0 0 9 ， 2 2 （ 7 ／8 ） ： 6 3 7 ． ［ 1 5 ］ＷｅｉＪＦ ， ＬｉＹＹ ，ＹｉｎＺＨ ， ｅ ｔａ ｌ．Ｈｅｐａｔｏｐｒｏｔｅｃｔ ｉｖｅｅ ｆｆｅｃｔｏ ｆＬｙｓ ｉ－
［
8 ］ＯｌｓｚｅｗｓｋａＭ ．Ｓｅｐ ａｒａｔ ｉｏｎｏｆｑｕｅｒｃｅ ｔｉｎ ，ｓｅｘａｎｇｕｌａｒｅｔｉ ｎ ，ｋａｅｍｐｆｅｒ－ｍａｃｈｉａｐａｒｉｄｉｆｏｒｍｉｓＦｒａ ｎｃ ｈ ｖａｒ．ｓｔｅｎｏｐｈｙｌｌａＦｒａｎｃ ｈｏｎＣＣ 1 4 － ｉｎ －
ｏｌａｎｄ ｉｓｏｒｈａｍｎｅ ｔｉｎｆｏｒ ｓｉ ｍｕｌ ｔａｎｅｏｕｓＨＰＬＣ ｄｅ ｔｅｒｍ ｉｎａ ｔｉ ｏｎ ｏｆｆｌａ － ｄｕｃｅｄａ ｃｕｔｅ ｌｉ ｖｅｒｉｎ ｊｕ ｒｙ ｉｎｍ ｉｃｅ ［Ｊ ］ ．Ａｆｒ ＪＰｈ ａｒｍＰｈａｒｍａｃｏ ｌ ，
ｖｏｎｏ ｉｄａｇｌｙｃｏｎｅｓ ｉｎｉｎｆｌｏ ｒｅｓｃ ｅｍｅｓ ｒ ｌ ｅａｖ ｅｓａｎｄｆｒｕ ｉｔｓ ｏｆｔｈｒｅｅ Ｓｏ ｒ－ 2 0 1 2 ， 6 （ 1 3 ） ： 9 5 6 ．
ｂｕｓ ｓｐｅｃｉｅｓ ［ ｝ ］ ． ＪＰｈａｒｍＢｉｏｍｅｄＡｎａｌ ， 2 0 0 8 ， 4 8 （ 3 ） ： 6 2 9 ． ［ 1 6 ］ ＪｉｎＲＨ ， ＦａｎＬ ， ＡｎＸＮ ．Ｉｏｎ ｉｃＬｉ ｑｕ ｉ ｄ－ａｓｓｉｓｔｅｄｅｘｔｒａｃｔ ｉｏｎｏｆｐａｅ －
［ 9 ］Ａｒｔ ｅｍＡＡ ， ＡｌｅｘｅｉＰＫ ， Ｉｇｏｒ ＩＰ． Ｗｈｙ ｉｏｎｉｃ ｌ ｉｑｕ ｉｄｓｃ ａｎｐｏｓｓｅ ｓｓ ｏｎｏ ｌｆｒｏｍＣｙｎａｎｃｈ ｕｍｐａｎｉｃｕｌ ａｔ ｕｍ ［Ｊ］ ．Ｃｈ ｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉａ ？ 2 0 1 1 ，
ｅｘ ｔｒａ ｓｏｌ ｖｅ ｎｔ ｐｏｗｅｒ ［ Ｊ ］ ．ＪＰｈｙｓＣ ｈｅｍＢ ， 2 0 0 6 ， 1 1 0 （ 3 3 ）  ： 1 6 2 0 5 ． 7 3 ： 7 8 7 ．
［ 1
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［ Ｍ］ ． 北京 ：科学 出版社 ， 2 0 0 6 ： 2 6 5 ．相色谱法同时测定土壤中 5 种微量有机氧农药 ［ Ｊ ］ ． 分析试
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ｂａｓｅｄｍｉｃ ｒｏｗａｖｅ －ａｓｓ ｉｓｔｅｄｅｘ ｔｒａｃｔ ｉｏｎｏｆｔｈｒｅｅ ａｌｋａｌｏ ｉｄｓ／Ｖ－ ｎｏｒ－［ 1 8 ］常靖 ，马雪梅 ，胡 志勇 ． 均匀设计法优化超声波辅助提取甘
ｎｕｃｉｆｅｒｉｎｅ ，Ｏ －ｎｏ ｒｎｕｃｉｆｅｒｉｎｅ ，ａｎｄ ｎｕｃｉ ｆｅｒｉ ｎｅｆｒｏｍ ｌｏｔｕｓｌｅａｆ 草总黄酮 ［ Ｊ ］ ． 广东化工 ， 2 0 1 4 ， 4 （ 4 1 ） ： 7 ．
［ Ｊ ］ ． ＴａＩａｎｔａ ， 2 0 1 0 ， 8 0 （ 3 ） ： 1 2 9 2 ． ［ 1 9 ］ 宣寒 ，谢发之 ． 响应面法优化金银花中绿原酸 的超声提取工
［ 1 2 ］Ｗｅ ｉＪＦ ， ＹｉｎＺＨ ， ＳｈａｎｇＦＤ．Ｖｏ ｉａｔ ｉ ｌｅ ｓ ｉｎｔｈｅＬｙｓ ｉｍａｃｈｉａｃｌｅ －艺 ［ Ｊ ］ ， 应用化工 ， 2 0 1 0 ， 3 9 （ 1 0 ）  ： 1 4 7 4 ．
ｔｈｒｏ ｉｄｅｓＤｕｂｙｂｙｈｅ ａｄｓ ｐａｃｅｓｏ ｌｉｄｐｈａｃｅｍｉｃ ｒｏ ｅｘｔｒａ ｃｔｉｏｎｃ ｏｕｐ ｌｅｄ［ 2 0 ］ 何建明 ，孙楠 ，吴文丹 ，等 ． ＨＰＬＣ测定覆盆子中媒花酸 、黄酮
ｗｉｔｈｇａｓｃ ｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ
－ｍａ ｓｓｓｐｅ ｃｔｒｏｍｅ ｔｒｙ （ＨＳ－ＳＰＭＥ－ＧＣ －ＭＳ ） 和覆盆子苷 －Ｆ5 的 含量 ［ Ｊ ］ ． 中国 中药杂志 ， 2 0 1 3 ， 3 8 （ 2 4 ） ：
［ Ｊ ］ ．ＡｆｒＪ Ｐｈａ ｒｍＰｈａｒｍａｃｏｌ ， 2 0 1 2 ， 6 （ 3 3 ）  ： 2 4 8 4 ． 4 3 5 1 ．
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ｈｅｐａ ｔｏｐｒｏ ｔｅｃ ｔｉｖｅ ｅｆｅ ｃｔｓｏ ｆＬｙｓ ｉｍａｃｈｉａｃｌｅ ｔｈｒｏ ｉｄｅｓＤｕ ｂｙ ｏｎＣＣ 1 4 －
［ 责任编辑 马超一 ］
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