全 文 ：第 25 卷 第 10 期
2 0 0 8 年 1 0 月
沈　阳　药　科　大　学　学　报
Journal of Shenyang Pharmaceutical University
Vol.25 　No.10　
Oct.2008 p.810　
收稿日期:2007-12-21
作者简介:张艳(1983-), 女(汉族),辽宁沈阳人 , 硕士研究生 , E-mail zhangy929@yahoo.com.cn;宋少江(1970-), 男
(汉族), 辽宁沈阳人 ,教授 ,博士 , 主要从事天然产物化学成分及质量标准研究 , Tel.024-23986510 , E-mail songsj99
@yahoo.com.cn。
文章编号:1006-2858(2008)10-0810-03
HPLC法测定辽东 木叶中 木芽皂苷 A的含量
张　艳1 , 宋少江1 , 马志强2
(1.沈阳药科大学 中药学院 ,辽宁 沈阳 110016 ;　2.哈药集团中药二厂 , 黑龙江 哈尔滨 150078)
摘要:目的 建立辽东 木叶中 木芽皂苷 A 的含量测定方法 ,为辽东 木叶的质量评价提供依
据。方法 采用 HPLC 法。色谱柱为 ODS 柱(150 mm×4.6 mm , 5 μm), 流动相为乙腈-水-磷酸(体
积比 35∶65∶0.2), 流速为 0.8 m L·min-1 , 检测波长为 206 nm , 柱温为 28 ℃。结果 木芽皂苷 A
质量在 0.6～ 4.0 μg 内与峰面积呈良好的线性关系 , 其回归方程为 A =3.941×105 m +4.142×
102 , r=0.999 7(n=5), 平均回收率为 99.6%, RSD为 2.9%(n =9)。结论 采用 HPLC 法测定辽
东 木叶中 木芽皂苷 A的含量 , 结果准确 、可靠;该法可用于辽东 木叶的质量控制。
关键词:辽东 木叶; 木芽皂苷 A;高效液相色谱法
中图分类号:R 917　　　文献标志码:A
　　辽东 木(Aralia elata(M iq.)Seem)是五加
科(Araliaceae) 木属(Aralia)植物 ,其味苦 、辛 ,
性平 ,具有补气安神 、强精滋肾 、祛风活血 、除湿止
痛 、健胃利水的功效 ,用以治疗神经衰弱 、糖尿病 、
风湿性关节炎 、肝炎 、胃痉挛 、阳气虚弱等症。我
国从唐代就开始以 木的根 、根皮和叶入药 , 木
中主要活性成分为皂苷[ 1] 。作者建立了辽东
木叶中 木芽皂苷 A含量测定的 HPLC法 ,力求
为辽东 木叶的质量评价提供可靠的依据。
1　仪器与材料
LC-10AT 高效液相色谱仪(日本岛津公司),
UV检测仪(美国 Spectra-Physics公司), DK-98-1
水浴锅(天津泰斯特仪器有限公司), N-1000 旋转
蒸发仪(上海爱郎仪器有限公司),超声仪(中船七
院七二六所超声仪器厂)。
木芽皂苷 A 对照品(自制 ,纯度质量分数
为98.4%),乙腈(色谱纯 ,美国 Tedia公司),二次
蒸馏水 、磷酸(分析纯 ,沈阳化学试剂厂)。
辽东 木叶药材分别采自长白山及辽宁新
宾 、清原 ,由沈阳药科大学中药学院路金才副教授
鉴定为辽东 木(Aral ia elata(M iq.)Seem)的叶 。
2　方法与结果
2.1　色谱条件选择
色谱柱:ODS 柱(150 mm×4.6 mm , 5 μm);
流动相:乙腈-水-磷酸(体积比 35∶65∶0.2);流速:
0.8 mL·min-1;检测波长:206 nm;柱温:28 ℃;
进样量:10μL[ 2-3] 。
2.2　溶液的制备
2.2.1　对照品溶液
称取 木芽皂苷 A 对照品约 50 mg ,精密称
定 ,置 25 mL 量瓶中 ,用甲醇溶解并稀释至刻度 ,
摇匀 ,经 0.45 μm 微孔滤膜过滤 ,取续滤液作为
对照品溶液 ,备用。
2.2.2　供试品溶液
称取 木叶粉末约 3 g ,精密称定 ,用 100 mL
体积分数为 80%的甲醇水溶液回流提取 3次 ,每
次1 h ,合并滤液 ,减压蒸干 ,残渣用甲醇定容至
50 mL ,经 0.45 μm 微孔滤膜过滤 ,取续滤液作为
供试品溶液 ,备用[ 4] 。
2.3　标准曲线的绘制
分别精密量取对照品溶液 0.3 、0.5 、1.0 、
1.5 、2.0 mL 置 10 mL 量瓶中 ,加甲醇稀释至刻
度 ,摇 匀 ,得 0.06 、0.1 、0.2 、0.3 、0.4 g·L-1的系
列质量浓度的对照品溶液 ,分别精密进样测定。
以峰面积(A)为纵坐标 ,质量(m)为横坐标绘制
标准曲线 。结果表明 , 木芽皂苷 A 质量在
0.6 ～ 4.0 μg 内与峰面积呈良好的线性关系 ,回
归方程为 A =3.941×105 m +4.142×102 , r =
DOI :10.14066/j.cnki.cn21-1349/r.2008.10.010
0.999 7(n=5)。
2.4　精密度试验
精密吸取同一份供试品溶液 ,重复进样 5次 ,
测定 ,记录 木芽皂苷 A 的峰面积 ,按峰面积计
算 RSD为 2.4%(n=5),表明仪器精密度良好 。
2.5　重复性试验
平行制备 5份供试品 ,分别精密进样测定 ,按
含量计算 木芽皂苷A的 RSD为0.7%(n=5),
表明此方法的重复性良好 。
2.6　稳定性试验
取同一供试品溶液 ,分别于 0 、4 、6、8 、12 h精密
进样测定 ,按峰面积计算 木芽皂苷 A的 RSD为
1.0%(n=5),表明供试品溶液在 12 h内较稳定。
2.7　回收率试验
取已知含量(w =0.162%)的供试品适量 ,精
密加入对照品适量 ,测定 ,结果见表 1 。
2.8　供试品含量测定
按“2.2.2”条方法制备不同产地的 3批供试
品 ,每批 3份 ,分别精密进样测定 ,记录 木芽皂
苷A 的峰面积 ,对照品及供试品色谱图见图 1。
用外标一点法分别计算含量 ,结果见表 2。
Table 1　Recovery of congmuyanoside A(n=9)
Sample m added/μg m measured/μg Recovery/ % Average recovery/ % RSD/ %
1 0.844 1.892 101.7
2 0.852 1.896 101.4
3 0.848 1.924 104.5
4 1.060 2.064 97.48 99.6 2.9
5 1.052 2.084 100.2
6 1.048 2.060 98.26
7 1.244 2.228 95.53
8 1.252 2.292 101.0
9 1.240 2.232 96.31
1—Sample;2—Congmuyanoside A
Fig.1　HPLC chromatogram of sample(a)and congmuyanoside A(b)
Table 2　Content(w)of congmuyanoside A in leaves of Aralia elata
Batch No. w/ % Average recovery/ % RSD/ %
0.143
1 0.143 0.142 0.81
0.141
0.161
2 0.163 0.162 0.71
0.163
0.123
3 0.120 0.122 1.26
0.122
811第 10 期 张　艳等:HPLC 法测定辽东 木叶中 木芽皂苷 A 的含量　　　
3　讨论
a.流动相的选择。分别以甲醇-水 、甲醇-水-
磷酸 、乙腈-水 、乙腈-水-磷酸为流动相比较分离效
果。其中乙腈-水-磷酸为流动相时可以达到最佳
分离效果 ,故采用乙腈-水-磷酸为流动相。
b.提取溶剂甲醇体积分数的确定。实验选
择甲醇-水系统作为提取溶剂 ,分别考察了甲醇 、
体积分数为 50%的甲醇 、体积分数为 80%的甲醇
对提取效率的影响。结果表明 , 用体积分数为
80%的甲醇水溶液提取 ,峰面积最大 ,含量最高 ,杂
质对分离度干扰小 ,供试品峰的分离效果好 ,故选
择体积分数为80%的甲醇水溶液为提取溶剂 。
c.提取方法的选择 。分别考察了超声提取
和回流提取两种方法。结果表明 ,回流提取的效
果较好 ,峰面积较大 ,含量较高 ,故选择回流提取
方法 。
d.提取时间的选择 。试验了同一批供试品
用体积分数 80%的甲醇提取不同时间 ,分别回流
1次 1 h;回流 2次 、每次 1 h;回流 3次 、每次 1 h ,
回流 4次 、每次 1 h 。结果表明 ,回流 3 次 、每次
1 h与回流 4次 、每次 1 h测得的峰面积大 、含量
高 ,且两者峰面积相当 ,故选择回流 3次 、每次 1 h
的提取方法。
4　结论
建立了辽东 木叶中 木芽皂苷 A 含量测
定的 HPLC 法 。 木芽皂苷 A 质量在 0.6 ～
4.0 μg内与峰面积呈良好的线性关系 ,平均回收
率为 99.6%, RSD 为 2.9%(n =9)。本实验中
所建立的方法可用于辽东 木叶的质量控制 。
参考文献:
[ 1] 宋少江 ,李丽 , 马志强 , 等.HPLC 法测定辽东 木根
皮中 木皂苷 C 的含量[ J] .沈阳药科大学学报 ,
2006 , 23(3):162-164.
[ 2] CHEN Jia , SONG Shao-jiang , SONG Ning.Simultane-
ous determination of 2″-O-rhamnosyl vitexin and vitex-
in in Chinese haw tho rn leaf and its ex tract by RP-
HPLC [ J] .Journal of Chinese Pharmaceutical Sciences ,
2006 , 15(1):51-54.
[ 3] 彭缨 ,张梅 , 宋少江.抱茎苦卖菜药材中木犀草素-7-O
-β-D-吡喃葡萄糖苷的分离与含量测定[ J] .沈阳药科
大学学报 , 2006 , 23(8):518-520.
[ 4] 李娜 , 宋少江 , 李仁.不同采收期朝鲜淫羊藿中淫羊
藿苷及总黄酮的含量测定[ J] .中药研究与信息 ,
2005 , 7(2):9-11.
Content determination of congmuyanoside A in
leaves of Aralia elata(Miq.)Seem.by HPLC
ZHANG Yan
1 , SONG Shao-jiang1 , MA Zhi-qiang2
(1.School of Tradit ional Chinese Materia Medica , Shenyang Pharmaceut ical Universi ty , Shenyang
110016 , China;2.Harbin Pharm .Group Co., Ltd .Second Chinese Medicine Factory , Harbin 150078 ,
China)
Abstract:Objective To develop an HPLC method for determination of congmuyanoside A in leaves of Ar-
alia elata (Miq.)Seem., and provide the basis for quality specification of leaves of Aralia elata(Miq.)
Seem.Methods Chromatog raphy w as carried out on ODS column(150 mm×4.6 mm , 5μm),using acetoni-
trile-H2O-H3PO4(V∶V∶V =35∶65∶0.2)as the mobile phase at a flow rate of 0.8 mL·min-1.The UV
detection wavelength was set at 206 nm.The temperature of the column w as 28 ℃.Results The linear
range of congmuyanoside A w as 0.6-4.0 μg(r=0.999 7)and the standard curve was:A=3.941×105m +
4.142×102.The average recovery of congmuyanoside A w as 99.6%(RSD=2.9%, n =9).Conclusions
This method can be used to determinate congmuyanoside A in leaves of Aral ia elata(Miq.)Seem.and pro-
vides the basis for quali ty specification of leaves of Aralia elata(Miq.)Seem.
Key words:Aralia elata(M iq.)Seem leaf;congmuyenoside A;HPLC
812 　　　沈　阳　药　科　大　学　学　报 第 25卷