全 文 ：应用核-壳色谱柱优化参须中人参
皂苷含量测定方法研究
李 耿1，任杰麟2，戴 洁1，张榕文2，赵 亚1，赖小平1*
(1. 广州中医药大学，广东 广州 510006;2. 霸王(广州)有限公司，广东 广州 510440)
摘要 目的:应用核-壳色谱柱优化人参须药材中人参皂苷 Rg1、人参皂苷 Re、及人参皂苷 Rb1 的高效液相色
谱含量测定方法。方法:采用 Kinetex核-壳色谱柱(4. 6 mm × 150 mm，2. 6 μm) ;流动相:乙腈(A)-水(B)梯度洗脱
(0 ～ 6 min:19%A;6 ～ 13 min:19% ～ 29% A;13 ～ 18 min:29% ～ 40% A;18 ～ 25 min:40% ～ 19% A) ;流速为 1. 8
mL /min，检测波长 203 nm，柱温 30 ℃，进样量 10 μL。结果:人参皂苷 Rg1、人参皂苷 Re及人参皂苷 Rb1 的线性范
围分别为 0. 4242 ～ 3. 3936 μg (r1 = 0. 9992)、0. 6504 ～ 5. 2032 μg (r2 = 0. 9992)和 1. 3442 ～ 10. 7536 μg (r3 =
0. 9992) ，平均加样回收率分别为 99. 91%(RSD = 0. 9%)、100. 59%(RSD = 1. 6%)和 102. 64%(RSD = 1. 8%)。结
论:该测定方法简便可行，准确可靠，重现性好，结果稳定，可用于人参及参须的含量测定。
关键词 HPLC;参须;人参皂苷 Rg1;人参皂苷 Re;人参皂苷 Rb1
中图分类号:R284. 1 /R284. 2 文献标识码:A 文章编号:1001-4454(2013)01-0073-03
收稿日期:2012-08-20
基金项目:广州市白云区科技计划(2009-SZ-44) ;广东省高等学校珠江学者岗位计划资助项目 (2011 年度) ;广东省科技项目
(2012A030100003)
作者简介:李耿(1983-) ，男，博士，讲师，研究方向:中药药效物质基础研究;Tel:020-39358550，E-mail:lg@ gzhtcm. edu. cn。
* 通讯作者:赖小平，E-mail:lxp88@ gzhtcm. edu. cn。
人参(Radix Ginseng)为五加科植物人参 Panax
ginseng C. A. Mey. 的干燥根。人参的药用部位主
要为其主根，参须即是人参的细支根及须根〔1〕。中
国药典〔2〕记载，人参性温，味甘、微苦。归脾、肺、
心、肾经。具有大补元气、复脉固脱、补脾益肺、生津
养血、安神益智的功效。用于体虚欲脱、肢冷脉微、
脾虚食少、肺虚喘咳、津伤口渴、内热消渴、久病虚
羸、惊悸失眠、气血亏虚、阳痿宫冷。其所含成分人
参皂苷 Rg1、人参皂苷 Re及人参皂苷 Rb1 为主要活
性成分。
核-壳色谱柱可显著改善高效液相色谱的柱效、
速度、分离度和灵敏度。本研究引入核-壳色谱柱，
优化参须中人参皂苷 Rg1、人参皂苷 Re 及人参皂苷
Rb1 的高效液相含量测定方法。
1 仪器与试药
1. 1 仪器 岛津 LC-20AT 高效液相色谱仪，UV
Blustar紫外检测器，Sartoriusag BS110S 电子分析天
平，色谱柱:Kinetex 核-壳色谱柱(4. 6 mm × 150
mm，2. 6 μm)。
1. 2 试药 人参皂苷 Rg1、人参皂苷 Re 及人参皂
苷 Rb1(中国食品药品检定研究院，批号分别为:
110703、110754、110704) ;参 须 药 材 (批 号:
20100111、20100823、20100824)购买于广州市清平
药材批发市场，由广州中医药大学中药学院赖小平
教授鉴定为参须药材;甲醇、乙腈为色谱纯，水为超
纯水，其余试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2. 1 色谱条件 Kinetex 核-壳色谱柱(4. 6 mm ×
150 mm，2. 6 μm) ;流动相:乙腈(A)-水(B)梯度洗
脱(0 ～ 6 min:19% A;6 ～ 13 min:19% ～ 29% A;13
～ 18 min:29% ～ 40% A;18 ～ 25 min:40% ～ 19%
A) ;流速 1. 8 mL /min，检测波长 203 nm，柱温30 ℃，
进样量 10 μL。在此色谱条件下，色谱柱的理论塔板
数按人参皂苷 Rg1 峰计应不低于6 000，人参皂苷 Rg1
和人参皂苷 Re的分离度大于 1. 5。色谱图见图 1。
图 1 人参皂苷对照品(A)与参须药材
供试品(B)HPLC色谱图
1. 人参皂苷 Rg1 2. 人参皂苷 Re 3. 人参皂苷 Rb1
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DOI:10.13863/j.issn1001-4454.2013.01.027
2. 2 对照品溶液的制备 分别精密称取人参皂苷
Rg1、人参皂苷 Re 及人参皂苷 Rb1 适量，加甲醇制
成每 1 mL 各 0. 2121、0. 3252、0. 6721 mg 的混合对
照品溶液。
2. 3 供试品溶液的制备 取参须粉末(过四号筛)
约 1. 0 g，精密称定，置索氏提取器中，加三氯甲烷
25 mL，加热回流 3 h，弃去三氯甲烷液，药渣挥尽三
氯甲烷，连同滤纸一同移入 100 mL 具塞锥形瓶中，
精密加入水饱和的正丁醇 50 mL，称定重量，密塞，
放置过夜，超声提取(功率 250 W，频率 50 kHz)30
min，放冷，再称定重量，加水饱和的正丁醇补足减失
的重量，滤过，精密量取续滤液 25 mL，蒸干，残渣加
甲醇溶解并转移至 5 mL 量瓶中，加甲醇稀释至刻
度，摇匀，用 0. 22 μm 微孔滤膜滤过，作为供试品溶
液。
2. 4 线性关系考察 精密吸取“2. 2”项下对照品
溶液 2、4、8、10、12、14、16 μL注入液相色谱仪，在上
述色谱条件下测定峰面积，以对照品进样量 X(μg)
对峰面积的积分值 Y 进行线性回归。各组分回归
方程、相关系数及线性范围见表 1。
2. 5 精密度试验 取对照品溶液 10 μL，连续进样
6 次，测定峰面积，结果人参皂苷 Rg1、人参皂苷 Re
及人参皂苷 Rb1 峰面积的 RSD分别为 1. 8%、1. 5%
和 1. 1%，表明仪器精密度良好。
表 1 人参皂苷对照品回归方程及线性范围
人参
皂苷 线性范围 /μg 回归方程 r
Rg1 0. 4242 ～ 3. 3936 y1 = 469272x1 － 100416 0. 9992
Re 0. 6504 ～ 5. 2032 y1 = 398868x1 － 91503 0. 9992
Rb1 1. 3442 ～ 10. 7536 y1 = 275624x1 － 48622 0. 9992
2. 6 稳定性试验 取供试品溶液，在 0、2、4、6、8、
10 h 进样，每次进样 10 μL，测定总峰面积，得人参
皂苷 Rg1、人参皂苷 Re及人参皂苷 Rb1的 RSD分别
为 1. 1%、2. 3%及 1. 2%，结果表明供试品在 10 h
内稳定。
2. 7 重复性试验 取批号为 20100111 的参须药
材 6 份，按供试品的制备方法平行操作，进样测定，
结果参须中人参皂苷 Rg1、人参皂苷 Re 和人参皂苷
Rb1 的平均含量分别为 0. 2253、0. 3259 和 0. 7944
mg /g;RSD为 1. 3%、1. 0%和 1. 1%。
2. 8 加样回收率试验 取批号为 20100111 的参
须药材细粉 6 份，每份约 0. 5 g，精密称定，分别精密
加入人参皂苷 Rg1、人参皂苷 Re、人参皂苷 Rb1 的
对照品储备溶液各 0. 5 mL，按供试品溶液的制备方
法制备，依法测定并计算回收率与 RSD值。结果人
参皂苷 Rg1、人参皂苷 Re及人参皂苷 Rb1 的平均回
表 2 加样回收率试验结果
皂苷类型 样品编号 取样量 /g 加入量 /mg 测得量 /mg 加样回收率 /% 平均值 /(% ± SD) RSD /%
Rg1 1 0. 5003 0. 1061 0. 2184 99. 63
2 0. 5004 0. 1061 0. 2200 101. 03
3 0. 5002 0. 1061 0. 2183 99. 57
4 0. 5001 0. 1061 0. 2197 100. 79
5 0. 5005 0. 1061 0. 2191 100. 23
6 0. 5006 0. 1061 0. 2174 98. 70
99. 91 ± 0. 01 0. 9
Re 1 0. 5006 0. 1626 0. 3289 101. 9
2 0. 5003 0. 1626 0. 3238 98. 84
3 0. 5004 0. 1626 0. 3287 101. 86
4 0. 5003 0. 1626 0. 3235 98. 70
5 0. 5004 0. 1626 0. 3263 100. 36
6 0. 5005 0. 1626 0. 3287 101. 85
100. 59 ± 0. 02 1. 6
Rb1 1 0. 5005 0. 3361 0. 7471 103. 99
2 0. 5003 0. 3361 0. 7316 99. 44
3 0. 5006 0. 3361 0. 7472 104. 00
4 0. 5005 0. 3361 0. 7469 103. 95
5 0. 5004 0. 3361 0. 7427 102. 73
6 0. 5003 0. 3361 0. 7392 101. 69
102. 64 ± 0. 02 1. 8
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收率分别为 99. 91%、100. 59%和 102. 64%;RSD为
0. 9 %、1. 6%和 1. 8%，表明回收率高，此方法准确
性良好。见表 2。
2. 9 样品测定 取三批样品(批号:20100823、
20100111、20100824) ，按照“2. 3”项的供试品制备
方法制备，分别精密吸取对照溶液和供试品溶液各
10 μL，注入高效液相色谱仪，测定。结果见表 3。
表 3 三批参须药材中人参皂苷 Rg1、人参皂苷 Re、
人参皂苷 Rb1 的测定结果(n =3)
批号 人参皂苷 含量 /(mg /g)
20100823 Rg1 0. 2272 ± 0. 01
Re 0. 3533 ± 0. 03
Rb1 0. 8540 ± 0. 04
20100111 Rg1 0. 2283 ± 0. 01
Re 0. 3648 ± 0. 02
Rb1 1. 0257 ± 0. 01
20100824 Rg1 0. 2271 ± 0. 01
Re 0. 3440 ± 0. 03
Rb1 0. 9696 ± 0. 02
3 讨论
3. 1 人参为名贵中药，主要含有人参皂苷、人参多
糖、人参多肽及挥发油、多种氨基酸、脂肪酸及微量
元素等有效成分〔3〕。人参皂苷是人参中主要的天
然活性成分之一，建立含量测定方法对控制其质量
具有重要意义。
3. 2 按照 2010 版中国药典的人参皂苷液相分析
条件所得出的实验结果，分析时间在 100 min 以上。
本实验应用核-壳色谱柱建立高效液相色谱法测定
参须中人参皂苷含量的方法，分析时间缩短为 25
min，方法学考察结果显示，改进后的方法快速、灵
敏、准确、重现性好，并显著缩短了人参皂苷分析时
间，减少了仪器占用率，实际应用可减少溶剂等的消
耗，符合节约型社会的发展需求。
本研究采用高效液相色谱法测定参须中人参皂
苷的含量，此法快速、灵敏、准确、重现性好，可同时
对人参皂苷 Rg1、人参皂苷 Re、人参皂苷 Rb1 三种不
同的皂苷成分进行含量测定。
参 考 文 献
［1］文志勇，易湘伏 . 参须的市场状况与质量控制的建议
［J］.中国药事，1996，6(10) :377-378.
［2］国家药典委员会 . 中华人民共和国药典［S］. 一部 . 北
京:中国医药科技出版社，2010:8.
［3］徐静，贾力，赵余庆 . 人参的化学成分与人参产品的质
量评价［J］.药物评价研究，2011，3(34) :199-201.
高效液相色谱串联质谱分析五指柑水煎液的化学成分
马斌1，宋伟峰2，何秋毅1，李瑞明1* ，梁耀荣1
(1. 中山大学附属第一医院药学部，广东 广州 510080 ;2. 中山大学附属第三医院药学部，广东 广州
510630)
摘要 目的:采用高效液相色谱串联质谱对五指柑水煎液的化学成分进行分离鉴别。方法:采用 ZORBAX SB-
C18高效液相色谱柱(250 mm × 4. 6 mm，5 μm) ，乙腈和 0. 1%甲酸溶液梯度洗脱，流速 0. 5 mL /min，检测器为串联
四极杆质谱，ESI负离子模式扫描分析。结果:根据负离子模式下获得的各色谱峰的质谱数据，共检测到 19 个主要
的化学成分，其中 9 个通过与文献对照或根据质谱裂解规律得到了确认，并且通过对照品得到确证。结论:该方法
灵敏、准确，可有效的用于五指柑药材的化学成分鉴定。
关键词 五指柑;化学成分;水煎液;高效液相色谱串联质谱法
中图分类号:R284. 2 文献标识码:A 文章编号:1001-4454(2013)01-0075-03
收稿日期:2012-08-20
基金项目:广东省重大科技专项项目(2011A080300004) ;广东省中医药局科研项目(20121145) ;广州市生物产业示范工程发展专项项目
(2012-243)
作者简介:马䶮斌(1977-) ，女，主管药师，主要从事中药和医院药学研究;E-mail:mayanbin_ph@ yahoo. com. cn。
* 通讯作者:李瑞明，E-mail:liruiming321@ 163. com。
五指柑为马鞭草科植物黄荆 Vitex negundo L.
的全草，味微苦，性辛、平，具有解表清热、利湿除痰、
止咳平喘、理气止痛、截疟杀虫的功效。常用于治疗
感冒咳喘、肝病、脘满腹痛、泄泻痢疾、疟疾、蛲虫，外
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